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细胞色素C对循环动力学的ala81hisMet80ISO-1的诱变效应ABSTRACT用一个序列数为a81h的酵母细胞色素C证明酵母细胞中ala进化到哺乳动物中的lie在序列数为81的细胞色素C作用下可以减缓血红素缝隙的张开度的假设。A81h的突变往往是作用于增加空间大小和通过测量a81h在His81介导下碱性构象转变的细胞色素c的热力学和动力学，从而进行对血红素缝隙动力学的探讨。热力学的测量表明天然构象比碱性药物His81作用下的细胞色素ca81h更稳定。大约需要1.9kcal/molAGu。(H20)用于His81血红素碱性构象的形成。相比之下,对于k79h细胞色素c,天然构象比His79血红素碱性构象不稳定。血红素的His79碱性构象的形成大约需要0.34kcal/molAGu°(H20)opH的跳跃和门控电子转移动力学表明，由于His81血红素碱性构象的恒定速率的下降导致的细胞色素c在a81h天然构象的稳定。相对于KF,His79His79碱性的血红素构象更倾向于His81血红素碱性构象的形成。其引起在高等真核细胞凋亡的早期阶段蛋白质的稳定性对蛋白质动力学和对细胞色素C的序列优化其作为过氧化物酶的作用的讨论。\nINTRODUCTION细胞色素C（复合体III介导的电子之间的复杂cytflcow）是一个长期研究四电子传递链的蛋白质。其也被称作为与Apaf-12,3发生相互反应的形成凋亡体和caspase级联反应的引发剂。近来的研究显示增加磷脂（CL）的膜，与细胞色素C作为过氧化物酶可以氧化脂肪酸链的CLO氧化氯被认为是最早的细胞凋亡信号，从而导致线粒体在细胞质中间隙中释放CytCoMet80的捆绑性的损失和细胞色素C的血红素的协调对于过氧化氢酶活性的本质是至关重要的。在这工作中，我们检验这一假设：在位置81与Q环的残基上,提供Met80配体与亚铁血红素（Q-环D,9,10残留70-85）来调制Q环的动态,D代表此功能（图1）。Q环D是来自不同物种具有高度间保守序列的细胞色素线粒体C（图1）,这表明对于CYTC而言是功能的重要部分。由于Q■闭环D和结构上相邻的d回路B和C（残基37-61）在Cytc13-15中可能参与在相关的动力学功能色素C从而致使它是线粒体最不稳定的部分。而细胞色素C,16,17的碱性构象转变和赖氨酸在Met80置换位置72,73，和79,18-20作为一个方便的代理动态Q环。实验表明,Lys73或Lys79组氨酸突变的研究为对碱性转变动力学详细分析提供了一种方便的手段。相对于较早的在一个单一的可电离触发方面进行的碱性过渡的动态研究而言，这些研究表明碱性转变取决于序列中的位置配体的机制。当his73为碱性状态提供配体时,his73可以控制它内部的电离。然而，有两个可离子化基团与邻近的pKa值分别在5.5和9.0提升碱性转变的动力。当His79提供碱性状态的配体,电离His79需要填充His79血红素的构象。然而，只有一个\n附加的可电离基团（pKa值〜9）调制它在动态His79介导的碱性转变。CONCLUSION我们结合的a81h中变种iso・1・cytc的热力学和动力学的分析与在His81血红素碱性药物作用下本地的isZ・cytc（Met80血红素）构象完全稳定一致。这种稳定导致的血红素缝隙动力学放缓的情况,也符合蛋白质减缓其动力学稳定性的结论。更具体表现在细胞色素C的过氧化物酶功能在细胞凋亡的早期阶段。我们最近对于tmK72A异亠Cytc33结构研究表明：在Met80变少情况下,Ala81在必需的过氧化物酶活性的配位点显著移动。线粒体细胞色素C序列表明，ALA在高等真核生物的绷氨酸和异亮氨酸酵母演变为位置81的残基。这分别研究证明了最初的假说，更多的空间和庞大的氨基支持酸在高等真核生物缓慢观测位置81需要Met80结扎损失的血红素的缝隙血红素，致使提供更严格的控制过氧化物酶细胞色素C的活性的细胞凋亡。我们需要更多的突变研究去在81位置上进行更仔细的审查去证明这个假设。