发育生物学性别鉴定 72页

第八章性别决定Sexdetermination\n性别表现型的决定公元前335年，Aristotle指出性别决定于热(heat)，当母亲子宫的冷超过父亲的精热时子代发育为female，female是发育不健全的men。1600s/1700s，已认识到female可以产生能够传递亲本性状的卵子。19世纪末之前，人们认为温度、营养、年龄等环境因素决定了性别。有利于能量和营养储存的因子将使一个人生产女婴，而有利于能量和营养利用的因子则使人有男婴。20世纪初，Mendel定律重新发现(1900)、McClung发现性染色体(1902)、Stevens和Wilson在昆虫上发现了性染色体组成与性别的关系(male=XYorXO,female=XX)(1905)，从而认识到遗传物质在性别决定中起重要作用。20世纪50年代，确立了哺乳动物性别决定的两条规律：性腺的分化决定了性别的分化；Y染色体决定雄性。\n1.Primarysexdetermination:指生殖腺发育为睾丸或卵巢的选择。胚胎生殖腺(gonad)的发育命运决定于其染色体组成，Y染色体的存在使生殖腺的体细胞发育为testis而非ovary。e.g.,基因型为XXY的Klinefelter综合症患者的表型为male，但不具生殖力；基因型为XO的Turner综合症患者为不能产卵的female。2.secondarysexdetermination:指睾丸或卵巢形成后，由它们分泌的激素来影响性器官的发育。在出现睾丸的胚胎中，中肾旁管(Mullerianduct)退化，而中肾管(Wolffianduct)分化为输精管、附睾、精囊。在出现卵巢的胚胎中，中肾管退化，中肾旁管分化为输卵管、子宫等。\n一、性别决定的复杂性我们知道，人类的性别决定是XY型，即正常女性的性染色体是XX，正常男性是XY，这种表现在染色体上的性别决定对于大多数正常人来说是非常明确的。男性与女性从外观上就能区别，简单得连幼儿园小朋友一般根据他们自己的判断，基本上也能准确无误地区别称呼“叔叔”和“阿姨”，这似乎是泾渭分明之事。然而，事实上并不那么简单。人类的性别决定是一个十分复杂的问题，特别是对于其发生的机制问题至今仍未彻底弄清楚。下面我们就从几个方面来探讨一下性别决定的复杂现象。\n1.性别决定的分化发育过程通常所讲的XX、XY的性别决定，严格来讲只是在染色体水平上的遗传性别决定，这是在受精阶段所确定的性别决定基础，所以有的人类遗传学书上干脆称XX者为“染色体女人”，XY者为“染色体男人”。按照老的学术观点认为，在这个遗传性别决定中，卵子是呈中性的，而精子中究竟是带X染色体，还是带Y染色体，则是起关键主导作用的；同时还认为，在性染色体之间，X染色体的功能是中性的，而Y染色体是起关键作用的。即凡是有1个Y染色体存在的就可形成睾丸，而无Y染色体存在的则形成卵巢。这种学术观点是以若干种出现性染色体数目异常的性染色体病例为依据的。\n例如：单体型45，X表现为女性；三体型47，XXX表现为女性；47,XXY表现为男性；而多体型48，XXXX表现为女性；48，XXXY则表现为男性。遗传性别决定在受精阶段形成之后，还需要经过相当长一段时期的性别分化发育。首先在胚胎发育阶段要通过初级性别分化。无论是XX还是XY,受精卵在起初的6-7周之前的早期胚胎阶段，从形态和生理上都是中性的，其原始性腺是由两部分组成的：即一个具有原始卵巢特征的外层组织和一个具有原始睾丸特征的内部质块，此外还有两对与性器官发育有关的原始导管一对是将在女性中才可能发育的缪勒氏管，另一对是将在男性中才可能发育的乌夫氏管。此阶段的胚胎仍然有可能向任何一种性别方向分化发育。而到6-7周以后，才是正式通过初级性别分化，即正常XX胚胎中，原始性腺的皮质部分开始发育逐渐形成胚胎性卵巢，缪勒氏管逐渐发育成输卵管、子宫等女性生殖器官，与其同时，髓质部分和乌夫氏管则逐渐退化消失；而在正常的XY胚胎中，则发育情况正好相反，原始性腺的髓质部分逐渐分化发育为胚胎性睾丸，午非氏管逐渐发育为男性生殖器官，其皮质部分和缪勒氏管则逐渐消失。这是性别决定的初级分化阶段，是形成第一性征的重要时期。\n生殖嵴原基有两种发育方向：Testis－Ovary\n图8-1人类胚胎性器官外观发育\n哺乳动物性腺及其生殖管道发育的概况\n\n\n在这个初级性别分化中有一条规律值得注意，那就是说女性第一性征的形成看来并不是以胚胎性卵巢的发育为主导条件的，而似乎是由于胚胎性睾丸未能形成而引起的。换句话说，就是初级性别决定的分化是以胚胎性睾丸能否形成作为分水岭的。关于这一规律是通过对兔和小鼠胚胎的外科手术实验得到证实的。如果人为损伤实验动物早期胚胎的原始性腺，其结果是这个胚胎最终只能出现雌性的第一性征分化。人类胚胎病例中也反映出类似现象。再到青春期，则性别决定的分化发育进入次级性别分化阶段，这也就是形成第二性征的重要时期。第二性征除表现在外部形态和性生理之外，还包括骨骼、肌肉和血液等内部构造特征以及新陈代谢速率等方面的性别差异。从原始的遗传性别决定到初级性别分化，再到次级性别分化，这是性别决定的分化发育全过程，无论在其中哪个阶段出现任何遗传上或发育上的误差，都可能引起性别分化的异常。例如在初级性别分化上的发育误差，会造成出生后的第一性征模糊，形成似是而非、模糊不清的内部生殖系统和外部生殖器官。再则，如果在次级性别分化中出现发育误差，也会造成青春期的第二性征的模糊不清。当然对于这些现象我们不能笼统称之“性别异常”，这是因为按照生理学研究资料表明，人类第二性征发育是由一系列激素所调控的。\n实际上，无论男性或女性体内是既分泌有雌性的又分泌有雄性的若干类型的激素，其体内是哪种性激素占优势则决定了第二性征分化的方向和强度。按照人类遗传学的观点，激素仅仅是控制第二性征的工具，而真正起主导决定因素的依然是遗传基础。在人类群体中，从典型的女性到典型的男性之间实际上存在着各种不同表现程度的中间类型。譬如说，有的女性个体的第二性征不明显，声调低哑，甚至长有小胡须，有些像男性；而另有的男性个体却喉节不明显，不长胡须，声调尖细，举止形态有些像女性，这种第二性征的模糊，有时真是达到了扑朔迷离、雌雄难辨的程度。其实，上述的这些中间类型的男、女绝大多数还是纯正的“染色体女人”和“染色体男人”，只不过是由于发育过程中出现了激素分泌不平衡的缘故，还不能称之为性别异常，只有极少数人才是属于真正的性别异常。2.性别异常性别异常是指性腺发育不全和两性畸形，它既包括由于性染色体畸变所引起的性染色体病，例如：Turner综合症45，X女性；Klinefelter综合症47，XXY男性。通常把这两种性腺发育不全的性染色体病称为性别异常。其次，还有各种类型的两性畸形。\n两性畸形的共同症状是：患者体内性腺结构和外部第二性征在不同程度上均具有两性的特征，故又被称之为“间性者”，其皆无正常生育能力。两性畸形又可分为假两性畸形和真两性畸形两种类别，其区别在于前者的遗传性别是正常的XX或XY，但第一和第二性征与遗传性别恰巧相反，而后者则往往是不同遗传性别细胞系的嵌合体，所以第一和第二性征是呈混合状态。下面举例说明：（1）男性假两性畸形核型为46，XY；X染色质检查为阴性，Y染色质检查为阳性，但呈女性表型。①XY性腺退化症46，XY；社会性别为女性，在胚胎早期具有胚胎性卵巢，但其卵母细胞和滤泡细胞过早退化，以致从出生到青春期始终表现类似Turner综合征的症状，体内只有退化的条索状雌性性腺。这种病是散发性发生，有些系谱表明它是属于X连锁隐性遗传。②睾丸女性化综合征46，XY；社会性别为女性，也是X连锁的隐性遗传，其外表建至二性征呈现典型的女性特征，像发育健全的女性，但其内部缺乏女性生殖系统，无子宫，无卵巢和无输卵管，只具有盲袋状的阴道，\n但是具有睾丸，并能分泌一定量的雄性激素，然而其性靶组织（前列腺、精囊、包皮腺等）却无雄性激素的受体，因此其雄性激素根本不能行使正常生理功能。这种体内有睾丸，外表则女性化的假两性畸形患者往往是与男性结婚，但由于其表现为原发性闭经，根本不可能受孕生育，所以“她”通常是因不能生育去求医才被发觉是男性假两性畸形的。（2）女性假两性畸形核型为46，XX；X染色质检查是阳性，Y染色质检查为阴性，但接近男性的表型。①肾上腺皮质过度发育综合症46，XX；社会性别男性，它是由涉及类固醇代谢的某种酶缺陷所引起的，这种缺陷是由常染色体隐性基因纯合造成的，具有输卵管和子宫，但外生殖器和外部第二性征却接近男性化。②较罕见的45，X男性也是属于女性假两性畸形。（3）真两性畸形①雌雄嵌合体（chimaera）如46，XX/46，XY；46，XX/47，XXY；46，XY/45，X。X、Y染色质检查都是阳性，其第一和第二性征都是两性的混合型，但在不同个体的身体表型则视那种细胞系占优势，而外表倾\n倾向于男性或倾向于女性。其内部生殖腺则往往是一侧是睾丸，另一侧是卵巢，或者是以卵睾与卵巢（或睾丸）所并存。这种雌雄嵌合往往是由于两个合子同时受精后又并合成一体的结果。②XX真两性畸形46，XX；X染色质检查是阳性，Y染色质检查为阴性，体内既有睾丸又有卵巢，外表特征也是男女表型的混合状态。这种真两性畸形比较罕见。对于真两性畸形患者的治疗一般采用手术摘除一种性腺，而注射另一种性激素，促进强化某一种性征的发育，对于外部畸形的生殖器官可通过手术改造，这样的治疗可以使患者的表型接近正常人，以使其能像正常人一样生活。有关各种性别异常发生机制的讨论，将在后面介绍。\n3.性比值在人类大群体之中，男女人数的比例总的来说基本上接近1:1的，但在不同年龄区段范围内，男女之间的性比值则常有不同的差异，一般可大致分为如下三种类型：（1）受精时的性比值（第一性比值）对于人类受精时的性比值目前无法直接测量，但可以根据不同性别的胚胎死亡率结合第二性比值来反向推算，一般估计是120:100。这也就是说，尽管减数分裂中所产生的“X精子”和“Y精子”的数目大致是相等的，但在实际受精过程中这两种精子的受精机会并不是均等的。Y精子比X精子的受精概率可能要大一些。推测其原因可能有以下几个方面：①Y精子比X精子小而轻，运动速度快，与卵子先接触的机会大些；②Y精子比X精子存活力稍强；③卵子表面更容易接受Y精子。这些推测目前还缺乏确凿的实验证据，但受精阶段男胎多于女胎这是肯定的事实。\n（2）出生时的性比值（第二性比值）新生婴儿中的男女比例并不如常人所想的均等，而是男婴稍多于女婴。根据大量统计结果，出生时的性比值是103:100－105:100（性比值的表达是以女性定为100来比较的）。这里存在一个问题，为什么第二性比值会比第一性比值低些呢？这主要是因为妊娠期间，男胎的死亡率显著大于女胎的缘故。据统计，不论在妊娠期哪个月份，出现死产的男胎总比女胎高得多。例如有人统计妊娠第二个月中，死产的男胎与女胎的比例竟高达437:100。（3）产后的性比值（第三性比值）通常是指成年人的性比值。从出生后算起每一个年龄组中，男性的死亡率都比女性偏高，这样到成年后男女之间比例就逐渐趋近基本相等，但这个第三性比值达到100:100的年龄期限在不同人类群体中可能有所不同。有些国家中是在20－40岁时期，而美国白人群体中大约是在55岁时期。到60岁以后，性比值持续下降，男性总数显著少于女性总数，在80岁阶段，性比值仅为62:100，到85岁以后，男性总数约只有女性总数的一半。因此越是高龄的人类群体中，孤寡老太太的比例就越大。\n4.莱昂假说正常女性的每个体细胞中有两条X染色体，男性只有一条，但是女性的X染色体基因表达产物数量并未比男性多一倍。这种在男女之间X连锁基因表达水平相等的现象，人类遗传学上称为剂量补偿效应。对于这一现象的理论解释是，女性细胞中有两条X染色体，但其中有一条在遗传功能上是失活的，因而实质上女性细胞中与男性的是相同的，也只有一条X染色体上的所有基因具表达功能。那条失活的X染色体在分裂间期的细胞核中呈现固缩状态，在细胞核内集结成一个染色较深的小团，被称为X染色质或巴氏小体。这种巴氏小体的数目是该细胞中X染色体数目减1，所以正常女性细胞中是1个，正常男性细胞和XO患者细胞中皆无巴氏小体，而XXY患者细胞中也是1个，XXX患者细胞中为2个，XXXX患者则是3个。也就是说，一个细胞中无论有几条X，都只有一条保持表达活性，其余的X染色体在间期细胞核里都固缩为巴氏小体，但是到分裂期那些固缩的X染色体依然可以形成正常的染色体形态，只不过复制时间比那条有活性的X染色体稍迟一些。这种X染色染色体的失活是随机发生的。也就是说开始出现失活的，被称为莱昂假说。\n无巴氏小体1巴氏小体2巴氏小体4巴氏小体3巴氏小体图8-2巴氏小体与染色体组成的关系\n莱昂假说虽然以X染色体失活的剂量补偿效应原理解释了人类及哺乳类中许多生理现象，得到了学术界的公认，但是随着研究的深入，特别是对性别异常种种现象的研究，也发现了许多不好解释的问题。例如1967年，美国著名遗传学家Ohno对此提出了45，X≠46，XX；47，XXY≠46，XY这两个不等式是否成立的质疑，我们知道，Turner综合症（45，X）是卵巢发育不全的染色体病患者，Klinefelter综合症（47，XXY）则是睾丸发育不全的染色体病患者，但是如果按照莱昂假说所说，两条X染色体中必有一条失活，位于其上的X染色体基因均失去功能作用，那么45，X的女性患者岂不是就应当与正常可育的46，XX女性完全相同，而47，XXY男性患者也应当与正常可育的46，XY男性完全相同了吗？但为什么实际上却是Turner综合症和Klinefelter综合症呢？Ohno这个问题对于当时的莱昂假说是一个很难回答的问题，其实类似的问题还存在于对X伴性隐性遗传病的解释之中，例如关于红绿色盲和甲型血友病这两种遗传病，其女患者数量虽然远远少于男患者，但毕竟是存在有女患者的，如果女性细胞中有一条X染色体失活了，又怎么可能出现X连锁隐性基因的纯合呢？或者说如果两条X染色体必有一条失活，那么这种病的男女发病机会岂不是应当完全相等吗？\n现在根据大量研究资料分析已证明，莱昂假说基本上是正确的，只不过需要修正，即失活的X染色体上并非全部基因都呈莱昂化失活。虽然其上有许多基因（被称为莱昂化基因），例如G6PD（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶）和AHF（抗溶血VIII因子）都的确是出现了完全失活，因为已测知它们在纯合子的女性中的表达水平与在半合子男性中的相同（XGXG=XGY）。但是也发现失活X染色体上还有另外一种类型的基因（被称为非莱昂化基因），例如Xg血型基因，类固醇硫酸酯酶基因和MIC2抗原基因等，它们无论在有活性的，还是在无活性的X染色体上都能表达。然而，这些非莱昂化的基因在纯合子女性和半合子男性的细胞中，其产物活性前者只是后者的1.3倍，并未达到2倍的剂量（XSY＜XSXS＜2·XSY）。这说明失活X染色体上有部分基因是非莱昂化而不失活的，但这种非莱昂化是不完全的。被称之为不完全的剂量补偿效应。这些修正的观点现在被称为新莱昂假说。现在我们再根据性别决定的分化发育阶段结合新莱昂假说来分析一下由Ohno提出的质疑。正常XX型胎儿的初级分化决定显然是受两条X染色体共同作用的结果，即在受精后16天之前，是两条都有表达活性的X染色体在共同发挥功能作用。而从16天后到6－7周这个阶段，则是一条有完全活性的和\n另一条具不完全活性X染色体在共同作用，从而确定了胚胎性卵巢的正常分化发育。6－7周以后一直到青春期，那条失活X染色体上部分基因的非莱昂化，对常染色体基因的表达以及对性分化和身体各器官系统的发育都仍然是有一定控制影响作用的，这种不完全剂量补偿效应在保证女性生殖器官形成以及第二性征的正常发育上是必不可少的，而Turner综合症患者的45，X核型中正因为缺失了这一条具不完全活性的X染色体，所以该患者的第一性征发育不全，第二性征不表现，并且体内许多器官系统的发育都出现了不完善的异常。这充分说明了那条失活的X染色体对于女性的分化发育是丝毫不可缺少的，也说明了45，X患者与46，XX正常女性是有本质区别的。其次，我们再分析一下Klinefelter综合症，在其47，XXY核型中，尽管在早期胚胎阶段，Y染色体对决定睾丸分化方面起到了主导作用，然而与其并存有一条具完全活性的和另一条具不完全活性的X染色体，由于过多的X染色体基因的干扰制约，就引起了雄性生殖系统的发育不全，导致男患者不育。此外，过多的非莱昂化基因控制的酶及激素等表达产物数量增多，也可能会以特定方式影响到神经系统发育，引起了患者的智力发育下降，所以说，47，XXY患者与46，XY正常男性也同样是有本质区别的。\n新莱昂假说虽然能用来解释有关Tumer综合症和Klinefelter综合症等方面的问题，但对如何解释假两性畸形等性别异常却是无能为力。特别是对Y染色体在性别决定分化中所起的机理作用没有涉及，因此下面将介绍另外几个有关性别决定机制的理论性探讨。\n二、性别决定的机制1.H－Y抗原决定假说（1）H－Y抗原的发现1955年，Eichvald等人以高度自交的纯系小鼠——B6小鼠做个体之间的皮肤移植实验，纯系小鼠个体之间的基因型是基本相同的。按理说它们的细胞表面的抗原物质应该是相同的，那么个体之间的相互皮肤移植不应出现排斥反应，但是实验结果却出乎预料，凡是雄鼠皮肤移植到雌鼠体上都发生了排斥反应，而在同性别个体之间皮肤移植以及将雌体皮肤移植到雄体上，则皆不出现排斥现象（图8-3）。这个实验结果表明，雄鼠的细胞表面具有一种在雌鼠中没有的抗原，由于雄鼠性染色体是XY，雌鼠是XX，人们自然联想推测，雄鼠所特有的这种抗原应当是受Y染色体上某种基因所决定的，因此称这种抗原为组织相容性Y抗原，简称H－Y抗原。与小鼠的其他的组织相容性抗原相比，H－Y抗原是属于比较弱的抗原物质。（2）H－Y抗原的特性20世纪70年代末期H—Y抗原被分离纯化，证明是一种糖蛋白。它具有如下的生物学特性：\n♂♀♀♂++++++--图8-3纯系小鼠雌雄个体间的皮肤移植\n①H－Y抗原具有高度的进化保守性以小鼠的H－Y抗血清能与人、各种哺乳动物、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类，甚至无脊椎动物的异配性别个体发生免疫交叉反应。②H－Y抗原总是与性别分化保持一致在各种动物之中，雄性异配XY个体都可检测到H－Y抗原，而同配的XX个体则无H－Y抗原。③H－Y抗原的表达不受激素影响而且是早在受精后卵裂细胞期就已开始表达，远远早于体内激素的合成分泌，这说明H－Y抗原的功能作用是在胚胎原始性腺分泌之前。④人的H－Y抗原基因被定位于Y染色体上的Yp11－qter区段。正由于H－Y抗原有这些特点，所以在20世纪80年代，生物学界曾普遍认为H－Y抗原基因有可能是人类及哺乳动物性别决定中的关键基因。并且，有人根据H－Y抗原假说对某些性别异常的患者，例如对XX男性、XO男性、XY女性等假两性畸形的发生机制提出了一些推测性的解释，认为这些假两性畸形的产生，是因为其父亲精母细胞减数分裂过程中，由于X与Y染色体之间发生相互易位，或者是由于Y染色体与某条常染色体之间发生相互易位。\n2.TDF决定假说由于在人和哺乳动物之中，性别决定分化的关键事件是胚胎性睾丸能否形成，因此有相当长的一段时期，科学家们都致力于在Y染色体上寻找一个关键基因——睾丸决定因子基因TDF（testisdeterminingfactor）。起初有人猜测H－Y抗原基因可能就是TDF，但到80年代中期以后，这种观点开始动摇了，这是因为有些研究结果证实了H－Y抗原可能只与精子发生有关。而且有人利用分子生物学技术大量检测分析假两性畸形患者的Y染色体上的缺失片段，将TDF的位置定位于Y染色体短臂的近末端区Ypll.3，这个定位结果也提示H－Y抗原基因与TDF并不是一回事。1990年，Sinclair等人又在Y染色体短臂近末端区分离克隆出一个称为性别区基因SRY，目前学术界已普遍认为SRY基因是TDF的最佳侯选基因，这是因为SRY基因有四个特点：①是一个在进化上高度保守的基因；②在人和哺乳动物中，只有雄性才具有；③是一个调控基因，只在初级性别决定的生殖嵴上表达；④通过转SRY基因小鼠实验，出现了性反转小鼠。\n\n小鼠Sry基因也存在于Y染色体上，在未分化的生殖腺和正在分化为睾丸的生殖腺中表达。转Sry基因的XX小鼠可长出睾丸和雄性特征，但不能产生正常的精子。Sry对睾丸发育的影响的实验证据XYXX\n但是对SRY是否就是TDF尚有争议，因为经检测发觉大约只有15％的XY女性患者被证实是SRY基因突变所致的，而其他患者的发病原因不明。所以目前有许多学者认为SRY并不是由一种基因所组成，而可能是以SRY基因为主导，由一系列基因参与协调表达的调控串模式。这也就是说，导致性别异常的基因突变既可能是发生在SRY，也有可能发生在SRY的上游基因或下游基因；而且这种基因突变既可能是发生在性别决定阶段，也有可能是发生在性别分化阶段。总之，这说明有关人类性别决定机制的阐明尚存不少难题，特别是最难以TDF决定假说解释的事实是：为什么会出现XX真两性畸形？而且为什么在同一家系中XX男性的假两性畸形个体和XX真两性畸形个体会同时并存？因此近几年还涌现出另外的一些假说，其中最有影响的当首German提出的剂量效应假说。3.剂量效应假说剂量效应假说认为在每条正常的X和Y染色体上，均具有一个与性腺分化有关的基因座，称为GDL（gonaddifferentiationlocus）。当一个染色体组中存在有两个具遗传活性的GDL拷贝时，即两个GDL都能正常转录，转录出两份蛋白质产物就能促使未分化的原始性腺发育成为睾丸，但如果仅存\n在一个有活性的GDL时，其产物就不足以促使睾丸分化，而代之发育成为卵巢。因此这个假说的核心观点是，GDL产物对性别决定分化的诱导和控制作用不是定性式的而是定量式的，并且在性别分化之中，GDL的作用还要与其它的基因作用相配合。按照剂量效应假说，我们现在来解释，①46，XY的正常男性②46，XX正常女③男性假两性畸形④女性假两性畸形⑤XX真两性畸形剂量效应假说以上述这种定量效应来解释核型与表型相悖的两性畸形，的确是有其独到之处，尤其是这个假说还能以X染色体上不同部位的GDL失活情况可能不同，并且失活的甲基化在一定条件下还可能转变为非甲基化而恢复活性，而非甲基化的在另外条件下也可能重新甲基化造成失活等理由，可以把众多的、阴差阳错的各类性别异常都能简便地归因于失活状况所引起的剂量效应，所以此学说得到了广泛的重视。当然，如果说该学说已经揭开\n了性别决定的奥秘，似乎是过于乐观了，因为现在对GDL的基因座，GDLX和GDLY的碱基序列，以及GDL的产物是如何调控性腺分化等基本问题都尚不清楚，所以说现在距离彻底解析人类性别决定之迷还有许多问题尚待深入研究。正常男性、正常女性及男性假两性畸形的发生机理图8-4-1剂量效应假说\n图8-4-2剂量效应假说女性假两性畸形的发生机理\n图8-4-3剂量效应假说真假两性畸形的发生机理\n英国一名29岁外形无异的男子，结婚多年生活美满，因未能令其妻子怀孕，于是向医生求助。经过检查后，医生竟发现该男子原来在“基因”上是个百分之百的女性，相信这是全球首宗该类的重大发现！负责诊治这对夫妇的医生称：“当发现该男子的精液中没有精子时，我们便替他进行基因检验。结果发现其细胞中竟然没有代表男性的Y染色体。从基因的角度来说，他完全是一个女人。”医学界相信，这个科学家也解释不了的现象涉及一种罕见的基因突变。（2001.5.22）四川雅安一姓吴的女子从小到大外表是个女性，夫妻生活也有一年多，但检测出的染色体性别却是男性。今年24岁的吴某从小至今不来“例假”，到多家医院检查，均未查出原因。一年前经人介绍，她与周某结婚。成家后，为了维持夫妻正常关系，悄悄注射雌激素，也未能身怀有孕。经检查，吴某除子宫小、乳房呈男性特征外，与正常女子并无二异。随后，华西医学中心的研究人员免费为吴某作了染色体检查。基因检测分析表明：吴某的性染色体为XYY，属男性染色体，有决定性别基因，且是“超雄”类型，即比一般男性多一条Y染色体。（2001.6.3）\n与睾丸命运决定有关的常染色体基因Sox9：为含HMGDNA结合区的转录因子。含一个额外的SOX9的XXhuman将发育为male;而75%的、只含一个有功能的SOX9的XYhumans发育为female或两性人，基因在17q24.1-25.1。小鼠的Sox9只在雄性生殖嵴中表达，表达时间比Sry约晚。Sox9蛋白可与Amh的启动子结合，促进Amh的表达。SF1(steroidogenicfactor1)：为含HMGDNA结合区的转录因子。Sf1在雌雄小鼠的未分化的性腺中都表达，但分化开始后就局限在XY小鼠的正在发育的睾丸中。SF1在睾丸支持细胞中通过协助Sox9而增强AMH基因的表达(seenextslide);而在睾丸的间质细胞中，它可激活睾丸酮合成酶基因。\nSox和SF对Amh基因表达的作用\nDAX1：它编码细胞核激素受体，是X染色体上的潜在的卵巢决定基因。1980年首次发现于XY姊妹中，1994年克隆出基因，其性别逆转是由于2个拷贝的DAX1可以抑制SRY的作用。小鼠Dax1在生殖嵴细胞中表达，它可能是拮抗Sry的活性而下调sf1的表达。与卵巢命运决定有关的X染色体基因\nWNT4：是常染色体上的潜在的卵巢决定基因。小鼠Wnt4在分化前的XX和XY生殖嵴中都表达，其后只在XX生殖腺中表达。在Wnt4-/-XX小鼠上，卵巢形成异常，其细胞表达Amh和睾丸酮等睾丸特异性标记。Sry的作用可能是抑制生殖嵴中Wnt4的表达和促进Sf1的表达。\n2.secondarysexdetermination:指睾丸或卵巢形成后，由它们分泌的激素来影响性器官的发育。在出现睾丸的胚胎中，中肾旁管(Mullerianduct)退化，而中肾管(Wolffianduct)分化为输精管、附睾、精囊。在出现卵巢的胚胎中，中肾管退化，中肾旁管分化为输卵管、子宫等。\n抗中肾旁管激素(anti-Mullerianducthormone,AMH)：由睾丸支柱细胞分泌的560aa糖蛋白，其作用可能是诱导中肾旁管周围的间质细胞分泌一种促凋亡因子，使中肾旁管退化。culturedinthepresenceoffetaltestisorsertolicells.MullerianductWolffianductMullerianductWolffianduct\n睾丸酮(testosterone)：由睾丸间质细胞合成，其作用是诱导中肾管分化为输精管、精囊、附睾。该患者携带SRY基因testesAMHMullerianductdegenerationuterus、oviducttestosteroneNoandrogenreceptor输精管、精囊、附睾。\n二氢睾丸酮(dihytestosterone)：由睾丸酮转变而成，其作用是控制外生殖器官的形成。缺少5a-ketosteroidreductase2的XY个体的外形像female.\n雌激素(estrogen)：在female胚胎中，雌激素由卵巢合成，它诱导Mullerianduct分化为雌性器官。在male胚胎中，雌激素由肾上腺合成，它使中肾旁管细胞吸收睾丸中的水分，有助于增加精子的寿命和数量。\n\n\n\n\n1942年，Klinefelter首先描述1956年，病人的X染色质呈阳性1959年，患者核型为47，XXY发病率为1/850男性男性精神发育不全中为1/100男性不育中为1/10性染色体异常导致的性发育异常病先天性睾丸发育不全综合征(Klinefeltersyndrome)\n\n1961年，Sandburg首先描述核型为47，XYY发病率为0.11％男性男性精神病患者中占为3/100＞180cm：1/200＞190cm：1/30＞200cm：1/10XYY综合征\n\n嵌合型X等臂染色体X染色体其他结构畸变X单体型：45，X性腺发育不全(Turnersyndrome，Turner综合征)\n1938年，Turner首先描述1954年，发现患者的X染色质呈阴性1959年，Ford证实患者核型为45，X发病率为1/2,500～1/5,000女性性腺发育不全(Turnersyndrome，Turner综合征)\n\n1/1,000的男性带有致病基因，20％不发病实际发病率为1/1,250～1/1,350其发病率是仅次于先天愚型的智力低下性疾病1/3的女性杂合子为轻度智力低下，出现率约1/2,0001969年，Lubs在X连锁的智力低下家庭中发现脆性X染色体(fragileXchromosome，FraX)综合征\nFragileXchromosomesyndrome(FraX)1in1250males特点：中度到重度的智力低下;大睾丸;前额突出;下颌大而突出;大耳等\n脆性部位(fragilesite)Xq27.3——FraX\n\nFMR-1基因——Xq275'端有一个(CGG)nn＝6～50正常人60～200前突变(premutation)200～230全突变(fullmutation)\n二、果蝇的性别决定1.果蝇的性别决定于X染色体的数量:X染色体上的性别决定基因叫分子基因(numerator)，而常染色体上的性别决定基因叫分母基因(denominator)。二者之比0.5时，个体将发育为雄性。\n果蝇的雌雄嵌合体GynandromorphhappenswhenanXchromosomeislostfromoneembryonicnucleus.\n控制果蝇雌性的关键基因是sexlethal(sxl)\n\n\n三、线虫的性别决定0.2%maleprogeny50%maleprogeny\n线虫的性别也决定于X染色体与常染色体套数之比该比例信号的接受者为Xol-1(XOlethal)\n线虫性别决定因子的作用机制\n四、环境因素对性别发育的影响爬行动物的性别受温度的影响\nBonellia的性别取决于幼虫的栖息地\n思考题1、阐述哺乳动物初级性别决定及次级性别决定机制2、果蝇性别决定是如何控制的？和哺乳动物性别决定相比有何不同？