(生物学)基因工程 44页

2021/7/8第一轮复习基因工程\n2021/7/8第一轮复习基因工程的考纲要求内容要求⑴基因工程的诞生Ⅰ⑵基因工程的原理及技术Ⅰ⑶基因工程的应用Ⅰ⑷转基因生物的安全性ⅠⅠ知道所列知识点的含义，并能够在试题所给予的相对简单的情境中识别和使用它们Ⅱ理解所列知识与相关知识之间的联系和区别，并能在较复杂的情景中综合运用其进行分析、判断、推理和评价。\n2021/7/8第一轮复习阅读以下资料，思考回答有关问题：1978年9月,加州大学,ltakuna等人用人工合成的人胰岛素基因与大肠杆菌的质粒构成重组体，转染大肠杆菌，成功地生产出人的胰岛素。目前用2000L细菌培养液，就能提取出100g胰岛素，其产量相当于从1t猪胰脏中提取出的产量，前者比后者便宜50%，这项技术的应用为全世界数千万糖尿病患者带来了福音。问题⒈⒉⒊⒋⒌⒍例题\n2021/7/8第一轮复习问题1该技术是什么技术？什么是基因工程？基因工程的核心是什么？基因工程的核心：构建重组DNA分子。把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或让它获得新的遗传性状。定向改造生物的新技术。\n2021/7/8第一轮复习问题2（1）人的胰岛素基因为什么能与大肠杆菌的质粒拼接在一起呢？（2）大肠杆菌体内为什么能表达人胰岛素基因的基因产物呢？它们都是DNA（或DNA片段），不同生物的DNA都由4种脱氧核苷酸组成，都具有相同的双螺旋结构不同生物的表达机制相同，都经转录、翻译合成蛋白质。所有生物共用一套密码子。\n2021/7/8第一轮复习问题3在该基因工程中用到了哪些工具？限制性核酸内切酶DNA连接酶载体来源、功能、作用实质、特性、作用结果功能、作用实质、作用结果、与DNA聚合酶的比较本例中的载体是什么？常用的载体有哪些？作载体的条件是什么？\n2021/7/8第一轮复习常见的2种限制酶：EcoRI和Sma1I识别的序列均为6个核苷酶\n2021/7/8第一轮复习DNA连接酶基因的针线：DNA连接酶GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割\n2021/7/8第一轮复习问题4简述该基因工程的具体操作步骤：1.获得目的基因2.形成重组DNA分子3.将重组DNA分子导入受体细胞4.筛选含有目的基因的受体细胞5.目的基因的表达\n2021/7/8第一轮复习基因工程的原理和技术？？？？\n2021/7/8第一轮复习？提取目的基因的方法①反转录法：②直接合成法（2）利用聚合酶链式反应（PCR）特异性地扩增所需要的目的基因片段；（1）化学法合成（已知目的基因序列）（3）建立基因文库，从基因文库中获取（不知目的基因序列）②蛋白质中氨基酸的序列mRNA中的碱基序列DNA碱基序列目的基因目的基因\n2021/7/8第一轮复习聚合酶链式反应（PCR）变性、退火、延伸三步曲变性：双链DNA解链成为单链DNA退火：部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和结合延伸：以目的基因为模板，合成互补的新DNA链\n2021/7/8第一轮复习PCR(多聚酶链式反应)\n2021/7/8第一轮复习基因组DNA文库的构建：将总DNA经过酶解，分离不同长短的DNA片段。包含的基因组片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，转染细菌或体外包装到噬菌体颗粒上便构成了该生物的基因组文库。\n2021/7/8第一轮复习？形成重组DNA需要用到哪些工具酶若考虑DNA片段之间两两结合可能出现什么结果？怎么才能防止目的基因和质粒之间的任意结合？\n2021/7/8第一轮复习？本例中的受体细胞是什么？常用的受体细胞有哪些？重组DNA导入受体细胞的方法？植物细胞（体细胞、卵细胞等）动物细胞（受精卵、胚胎干细胞等）微生物细胞（如细菌）农杆菌转化法等显微注射法感受态细胞法，用CaCl2处。。。\n2021/7/8第一轮复习农杆菌转化法\n2021/7/8第一轮复习？为什么要检测？　如何检测？导入检测表达检测个体水平检测利用抗生素抗性基因DNA分子杂交转录检测：分子杂交法检测mRNA翻译检测：免疫法（抗体－抗原）如作物的抗虫性、抗旱性等\n2021/7/8第一轮复习问题5由该资料可看出基因工程的应用之一是＿＿＿＿基因工程有哪些应用呢？（课后看书）问题6我们应该怎样使用这种曾经只属于自然的伟大力量－－制造新的微生物、植物甚至动物？\n2021/7/8第一轮复习图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答：(2008海南)\n2021/7/8第一轮复习（1）将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用ＤＮＡ连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有、、、三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行分离纯化。载体和载体连接物目的基因-载体连接物目的基因-目的基因连接物\n2021/7/8第一轮复习（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是____________________（3）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是。EcoRI、BamHI载体和载体连接物载体和载体连接物、目的基因-载体连接物ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，\n2021/7/8第一轮复习（4）基因工程是一柄“双刃剑”，一方面可以极大地提高栽培作物的基因潜力，打破了种间的隔离，从变异的角度看，基因工程的原理是；另一方面也可能给生态系统和人类带来安全隐患，举一例简要说明：。生殖基因重组基因的影响不容易控制，可能影响受体基因组的正常表达（危害其他生物的生存或个人隐私的外泄或生物武器的制造和使用等）\n2021/7/8第一轮复习将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。(2008江苏)(4)\n2021/7/8第一轮复习（1）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？。（2）饲喂转基因马铃薯后使动物获得免疫力，此过程属于基因工程操作基本步骤中的()A．从马铃薯中获取目的基因B．目的基因与载体质粒结合C．将目的基因导入动物受体细胞D．目的基因的表达否D\n2021/7/8第一轮复习(4)(3)为将外源基因转入马铃薯，图1步骤6转基因所用的细菌B通常为__________对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。①采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。②采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。图12农杆菌\n2021/7/8第一轮复习\n2021/7/8第一轮复习B5.下列叙述符合基因工程概念的是A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上\n2021/7/8第一轮复习A2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C.将重组DNA分子导入烟草原生质体D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞\n2021/7/8第一轮复习A18．下列关于转基因植物的叙述。正确的是A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中B．转抗虫基因的植物．不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C．动物的生长激素基因转入植物后不能表达D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题\n2021/7/8第一轮复习2010天津Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：（1）图中将人乳蛋白基因插入载体，需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是（填字母代号）。A.启动子B.tetRC.复制原点D.ampR\n2021/7/8第一轮复习（3）过程①可采用的操作方法是（填字母代号）。A.农杆菌转化B.大肠杆菌转化C.显微注射D.细胞融合（4）过程②可采用的生物技术是。（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的性。（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用（填字母代号）技术。A.核酸分子杂交B.基因序列分析C.抗原—抗体杂交D.PCR\n2021/7/8第一轮复习Ⅰ.（14分）（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素A（2）C胚胎移植技术（3）全能（4）C\n2021/7/8第一轮复习2010江苏27．（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有▲个游离的磷酸基团。\n2021/7/8第一轮复习（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越▲。（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是▲。（4）与只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止▲。\n2021/7/8第一轮复习（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入▲酶。（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了▲。（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在▲的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。\n2021/7/8第一轮复习【答案】（1）0、2（2）高（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化（5）DNA连接（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞（7）蔗糖为唯一含碳营养物质\n2021/7/8第一轮复习2010上海（七）分析有关基因表达的资料，回答问题。取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如右图。45.基因1～8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因。46.图所示细胞中功能最为近似的是细胞。A.1与6B.2与5C.2与3D.4与547.判断图中细胞功能近似程度的依据是。\n2021/7/8第一轮复习48.现欲研究基因1和基因7连接后形成的新基因的功能，导入质粒前，用限制酶切割的正确位置是。\n2021/7/8第一轮复习49.右上图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将新基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的限制酶是。A.HindⅢB.EcoRIC.EcoBD.PstI\n2021/7/8第一轮复习50.新基因与质粒重组后的DNA分子导入受体细胞的概率很小，因此需进行，才能确定受体细胞已含有目的基因。51.在已确定有目的基因的受体细胞中，若质粒的抗青霉素基因缺失了两个碱基，将这样的受体细胞接种到含有青霉素的培养基中，该细胞中可能出现的结果是A.抗青霉素基因不能转录B.基因1和7没有表达C.基因1和7不能连接D.质粒上的酶切位置发生改变\n2021/7/8第一轮复习\n2021/7/8第一轮复习\n2021/7/8第一轮复习