农学课件烟草分析第三章 211页

第四章合氮化合物1\n烟草中含氮化合物包括蛋白质、游离氨基酸、生物碱、硝酸盐和其他含氮杂环化合物等。含氮化合物对烟草的感官评吸质量和吸烟者的健康都有重要影响，历来受到人们的至视。2\n第一节氨基酸羧酸分子中烃基上的一个或几个氢原了被氨基所取代的化合物叫做氨基酸。根据氨基酸基和羧基的相对位置，可分为α—氨基酸、β—氨基酸、γ—氯基酸等。种种不同来源的蛋白质水解后得到的氨基酸，绝大多数都是α—氨基酸。α—氨基酸可看成是羧酸分子中烃基上的α—氢原子被氨基取代而生成的化合物。3\na—氨基酸具有如下的通式：4\n一、氨基酸的结构和分类组成蛋白质的氨基酸按其结构可分为三大类，即脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸和杂环族氨基酸。脂肪族氨基酸又可分为：一氨基一羧基酸(中性型氨基酸)、一氨基二羧基酸(酸性型氨基酸)、二氨基一羧基酸(碱性型氨基酸)、含硫氨基酸及酰氨型氨基酸。氨基酸可以按照系统命名法，以羧酸为母体，氨基为取代基来命名。但是α—氨基酸还通常按其来源或性质以俗名来称呼。5\n现将组成蛋白质较为常见的氨基酸的结构、名称、分类列于下表：6\n7\n8\n9\n其中甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸为一氨基一羧基酸、天冬氯酸、谷氨酸为—氨基二羧基酸，精氨酸、赖氨酸为二氨基一羧基酸，蛋氨酸、半胱氨酸、胱氨酸为含硫氨基酸，天冬酰胺、谷氨酰胺为酰胺型氨基酸，苯丙氨酸、酪氨酸为芳香族氨基酸，组氨酸、色氰酸为杂环亚氨基酸，脯氨酸为杂环亚氨基酸。10\n11\n二、氨基酸的性质(一)物理性质氨基酸根据其构型的不同，可分为D—型与L—型，α碳原子的构型与D——甘油醛相同的称为D—型，与L—甘油醛相同的称为L—型。12\n例如：13\n它们在结构上的差别虽不大，但其生理功能则可有很大的不同。在动植物体中的酶系统只能促进L—型氨基酸的代谢变化，一般D—型氨基酸不被动植物所利用。动植物体蛋白质水解产生的氨基酸都是L—型的，只有某些微生物活动的产物有D—丙氨酸的存在。14\n氨基酸大都是无色结晶形固体。除胱氨酸及胳氨酸外，它们都可溶于水；除脯氨酸及半胱氨酸外，一般都难溶于有机溶剂。不同的溶解度可用于分离有关的氨基酸。除甘氨酸之外，氨基酸都有旋光性；氨基酸的旋光性有左旋的，也有右旋的，但以左旋的比较多。有些氨基酸具有甜味，有些有苦味，有些则无味。味精是谷氨酸的钠盐，它具有鲜味。15\n（二）两性性质和等电点羧酸分子中含有羧基，能与碱作用生成盐，酯化生成酯。胺类分子中含有氨基，亦能与酸作用生成盐，酰化生成酰胺，与亚硝酸作用生成含经基的化合物(醇或酚)。氨基酸分子中既含有羧基，又含有氨基，因此，它也能进行与羧酸和胺类相似的那些反应。此外，由于氨基酸分子中氨基和羧基的相互影响，又显示其特殊性质——两性性质。它是两性性质的化合物。16\n例如氨基酸分子中含有羧基，它能与碱生成盐：17\n氨基酸不但能与酸或碱作用生成盐，并且同一分子内的羧基及氨基亦能作用而生成盐。这种同一分子内生成的盐叫做内盐。18\n（三)化学性质1、与亚硝酸的反应氨基酸能与亚硝酸作用生成经基酸和水，并放出氮气。19\n2、与水合茚苟三酮反应α—氨基酸的水溶液能与水合茚三酮反应生成蓝紫色的化物，同时放出二氧化碳。20\n3、氧化反应氨基酸分子中的氨基可被过氧化氢或高锰酸钾氧化，氧化反应后首先生成亚氨基酸，亚氨基酸再水解而成酮酸与氨。其反应如下：21\n三、烟草中的氨基酸鲜烟叶中主要的游离氨基酸是天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸和亮氨酸，它们加起来占总游离氨基酸的65％——75％。胱氨酸和色氨酸在烟叶中仅有微量存在。所有单个氨基酸含量的最低点均在打顶前后。游离氨基酸含量随施氮肥量增加而增加。22\n(一）分布特点1、不同烟草品种氨基酸含量不同烤烟中游离氨基酸总量较白肋烟低，而脯氨酸和天冬酰胺含量较多。白肋烟天冬酰胺和天冬氨酸含量显著较高(表3—1)，这体现了白肋烟的特点。23\n24\n2、不同氨用量烟草中氨基酸含量不同史宏志等研究结果表明：烟叶总氨基酸含量随施氨量的增加明显增加。在同一施氮水平上，增加有机氨比例，总氨基酸含量下降。韩锦锋等研究表明，随氮用量的增加，烟株根系中氨基酸总量升高，各种游离氨基酸含量则有增有减，有的变化不大，而与烟碱合成有关的4种氨基酸含量比对照都有大幅度提高。25\n3、烟株不同根际pH叶片中氨基酸含量不同陈建军等研究结果表明，随根际pH升高，叶片脯氨基的含量增加直至pH8.0，而后下降;苯丙氨酸和苏氨酸的变化无规律性，丝氨酸含量呈降低趋势;亮氨酸含量变化里单峰曲线，峰值在pH6.5处；丙氨酸的含量变化为双峰曲线，峰值分别在pH6.5和pH7.5处。26\n4、烟草叶片不同发育过程氨基酸含量不同符云鹏等结果表明，同一部位烟叶的总氨基酸含量随叶龄的增长而下降，烟叶达工艺成熟时，中、上部烟叶总氨基酸下降至最低，下部烟叶在叶龄60d时下降至最低；烟叶工艺成熟时又有所升高。但同一部位的烟叶总氨基酸含量在不同发育阶段下降的幅度不同。27\n随叶片发育，游离氨基酸含量与总氨基酸含量变化规律有所不同。下部烟叶在叶龄40d之前，随叶龄增长游离氨基酸含量大幅度下降，40一50d其含量有所上升，到60d下降至最低，到工艺成熟时又有所升高。中、上部烟叶在30d之前，随叶龄增长游离氨基酸含量下降，30—40d有所升高，40d之后又开始下降，到烟叶成熟时游离氨基酸降至最低。上述研究结果可能与不同部位烟叶氮代谢的强弱及蛋白质含量的高低有关。28\n29\n5、不同成熟度烟叶氨基酸含量不同在烟叶成熟过程中，同一部位烟叶随着成熟度的增加，总游离氨基酸、α—氨基酸含量下降，达到工艺成熟前后又开始上升，与Amadori化合物合关的氨基酸总和也随着成熟度的增加发生有规律的”v”形变化。30\n6、不同调制阶段烟叶氨基酸的含量不同烤烟烘烤过程中，从鲜叶到干筋期，总游离氨基酸含量逐渐增加，尤其以变黄中期最为明显，从干筋期后各种氨基酸均降低。白肋烟在调制过程中，氨基酸增加的时间与蛋白质迅速水解的时间相吻合，蛋白质水解完成氨基酸停止增加。当蛋白质停止水解，烟叶呈最大变黄时，总游离氨基酸开始下降。在烟叶调制过程中各种氨基酸的变化差异很大，一些氨基酸减少，另一些氨基酸则增加，最终导致调制过程中氨基酸总量的增加。31\n7．发酵或陈化过程烟叶氮基酸含量的变化经发酵或陈化的烟叶，氨基酸含量大为减少，但有利于烟叶香味的物质种类明显增加。32\n(二)烟草叶片发育过程中总氨基酸含量的变化总氨基酸含量的多少标志着植物体内氮代谢的强弱及蛋白质含量的高低。从表4—2可知，同一部位烟叶的总氨基酸含量随叶龄的增长而下降。通过相关分析表明，叶龄与总氨基酸含量呈显著的负相关，其相关系数分别-0.9900(下)、-0.9895(中)、-0.900(上)。下部叶总氨基酸含量随叶龄增长而下降较快，中部叶自叶龄20d、上部叶30d之后下降幅度较大，说明中上部叶氮代谢持续的时间较下部叶长。33\n表4—2还表说明，叶龄相同部位不同，总氨基酸含量有异。叶龄10d时，总氨基酸含量表现为下>上，>中，至叶龄60d时则为上>下>中。烟叶达工艺成熟时，中、上部烟叶总氨基酸含量降至最低，且相互间比较接近，下部叶则明显高于中上部叶，这与目前生产中下部叶采收成熟度偏低有关。烘烤后，中、上部叶总氨基酸含量较烤前明显增加。34\n35\n(三)烟草叶片发育过程中氨基酸组分的变化从烟草不同部位烟叶中氨基酸各组分分析结果可以看出(表4—3)，烟草叶片中组成蛋白质的氨基酸有18种，这与前人的研究结果一致，不论是哪个部位的烟叶，均以谷氨酸和大冬氨酸的含量最高，尤其是在幼嫩的叶片中。烤烟中含量较多的氨基酸还有亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸，色氨酸和胱氨酸的含量最低。36\n37\n上表表明，烤烟中组成蛋白质的氨基酸中有16种氨基酸酸含量随叶龄增长而减少，其中以天冬氨酸减少最多，中部叶成熟时天冬氨酸的含量仅为叶龄10d时的13.5％，其次是谷氨酸、亮氨酸、丙氨酸，而胱氨酸和色氨酸随叶片发育变化不大。烟叶烘烤后，各氨总酸组分都有所增加，以脯氨酸增加的幅度最大，其次是大冬氨酸和谷氨酸。38\n(四)烤烟叶片发育过程中游离氨基酸含量的变化游离氨基酸既是合成蛋白质的原料，又是蛋白质降解的产物。在叶片发育初期，游离氨基酸含量高，则蛋白质合成强度大，叶面积扩展速度快。当叶片基本定型之后，若游离氨基酸含量高，蛋白质仍保持较强的合成能力，则对烟叶品质不利。在烘烤过程中，蛋白质降解产生的游离氨基酸发生互变作用及脱羧、氧化脱氨、脱羧脱氨作用，引起羧基化合物增加，对改善烟叶品质，特别是对增加烟叶香气特性足非常重要的。39\n40\n对烟草叶片发育过程中游离氨基酸总量的测定结果决明，随叶片发育，游离氨基酸含量的变化与总氨基酸含量变化规律有所不同。下部叶在叶龄40d之前，随叶龄增长游离氨基酸含量大幅度下降；40—50d其含量有所上升，可能是大田生育前期中期气候较为干旱，致使下部叶早衰，蛋白质分解加强，50d之后游离氨基酸含量又下降。中、上部叶在叶龄30d之前，随叶龄增长游离氨基酸含量下降；30－40d有所升向，可能与氮代谢此时合所增强有关；40d之后又开始减少，到烟叶成熟时游离氨基酸降至最低。烘烤后烟叶中游离氨基酸含量较烤前增加，是由于烘烤过程中蛋白质降解所致。41\n在调制过程中，烟草蛋白质部分水解为游离氨基酸，调制后烟叶中的游离氨基酸见表4—5；氨基酸在调制过程中参与许多复杂的化学反对。另外，在烟草中还发现许多不常见的氨基酸，至少有48种，已如前述。42\n43\n44\n第二节蛋白质蛋白质是含氮的高分子化合物，它的相对分子质量很大。各种蛋白质的相对分子质量有很大的差异，一般从1万左右到几百万，也有大至几千万的。所有蛋白质都含有C、H、O、N四种元素，多数蛋白质含有少量的硫，有些蛋白质含有磷，若干特殊蛋白质还含有铁、铜、锰、锌和碘等。蛋白质的种类非常多，但不论其来源如何，蛋白质的元素组成变动范围却不很大。45\n46\n生物体组织中所含的氮，绝大部分存在于蛋白质中，蛋白质含氮量变化的幅度不大，一般以其平均值16％计算。因此生物样品中每克氮的存在，就表示样品大约含蛋白质100/16，即6.25gx。这个数值称为蛋白质转换系数。蛋白质含量(g/100)＝每克样品中含氮克数×6.25×10047\n一、蛋白质的结构(一)蛋白质分子中安基酸的连接方式蛋白质分子中的氨基酸是通过肽键连接起来的。肽键的形成可以看做是氨基酸与氨基酸之间彼此通过羧基和氨基脱水缩合而成的。48\n49\n由两个分子的氨基酸通过肽键连接而成的产物称为二肽。二肽两端仍有游离的羧基与氨基，可以继续与另一分子氨基酸缩合而成三肽。同理，可再生成四肽、五肽以至多肽。蛋白质结构的基本形式就是由数目很多的各种氨基酸通过肽键连接而成的多肽长链。肽长链可用下式表示：50\n51\n氨基酸之间经安基及羧基相互连接形成多肽长链后，氨基酸分子中的其他基团如丙氨酸的甲基、额氨酸的异丙基、丝氨酸的羟甲基等，就成为多肽长链上的侧链。如：52\n53\n二、蛋白质的理化性质(一)蛋白质的胶体性质蛋白质溶于水时，是以单分子状态分散的，但由于蛋白质是高分子化食物，粒子比较大，直径一般在1－100nm之间，它属于胶体质点范围之内。它分散在溶液中具有布朗运动、丁道尔现象、电泳现象、不透过半透膜以及具有吸附能力等胶体溶液的特性。一个活细胞主要是由水分和蛋白质粒子所形成的胶体体系，它和细胞的生命活动关系非常密切。在一般情况下，若这种体系遭受破坏，则严重影响新陈代谢的正常进行，甚至导致生命的死亡。54\n蛋白质溶液是一种高分子溶液。蛋白质溶液的稳定性是由于具备了下列两个条件：1.粒子外围有水膜蛋白质分子表面有许多亲水基团，这就使蛋白质粒子高度水化，并形成了一层水膜，对蛋白质粒子起到保护作用。因此，碰撞时就不易聚合而产生沉淀。2.粒子带电荷蛋白质分子表面上存在许多可电离的基团，故在碱性溶液中蛋白质成为阴离子；在酸性溶液中成为阳离子。因此，在只有一定pH值的溶液中，蛋白质分子一般都带有负性电荷（只有在等电点时蛋白质分子成中性)。由于同性电荷的相互排斥，使蛋白质粒子间保持一定距离，不易聚集沉淀。55\n（二)蛋白质的两性性质蛋白质分子中含有不少可电离基团，如羧基、氨基、酚羧基等。这些可电离基团有些是酸性的，有些是碱性的。因此，蛋白质与氨基酸一样呈两性反应，亦各有其等电点。加入碱溶液至等电点的碱时，蛋白质成为阴离子；加入酸液至等电点酸时，蛋白质成为阳离子；若溶液达到一定的pH值时，蛋白质的酸性电离与碱性电离相等，这个pH值就是这种蛋白质的等电点。56\n各种蛋白质由于其氨基酸组成的不同，故各有其自己的等电点(表4—7)。含有较多酸性氨基酸(如谷氨酸、天冬氨酸等)的蛋白质，其等电点较低；含有较多碱性氨基酸(如精氨酸、赖氨酸等)的蛋白质，其等电点较高。大多数蛋白质的等电点接近于5左右，故在动、植物组织中(pH近于7)，蛋白质大都成为阴离子。57\n58\n蛋白质由于在等电点时所带电荷正负相等，因而蛋白质分子间的排斥力减弱，水化能力也减弱，导致丧失水膜，易于沉淀析出。因此，在等电点时蛋白质的溶解性最小。这一性质可用于蛋白质和酶的分离提纯；此外，蛋白质在等电点时，其理化性质有特殊表现，例如：溶液的导电能力最小，渗透压、黏度、膨润性也较小。59\n(三)蛋白质的沉淀作用在蛋白质溶液中加入适当的试剂，破坏它的水膜或中和它的电荷，就很容易使蛋白质变得不稳定而发生沉淀现象。在日常生活中，蛋白质沉淀的现象是很多的，如豆浆中加入少量盐卤而析出豆腐花，热牛乳中加入稀醋酸后有蛋白质结絮而析出沉淀。引起蛋白质沉淀的方法很多。盐析法和加脱水剂法是分离制备蛋白质制剂、制品时常用的方法。此外还可调节溶液的pH值，使达到该蛋白质的等电点而失去电荷，蛋白质即沉淀下来。60\n科学实验和生产实际中，使蛋白质沉淀一般有两个目的：一是为了制备有生物活性的蛋白质制剂；二是为了去掉某些杂蛋白。上述方法主要用于前者，这些方法所得蛋白质沉淀仍具生物活性。此外，还可用加热法使蛋白质凝固；用重金属盐(如汞、银、铜盐)或磷酸盐、二氯醋酸和生物碱等沉淀剂都可使蛋白质沉淀。但这些方法往往使蛋白质失去生物活性，且不能再重新溶解，故不宜制备具有活性的蛋白质制剂。而在分析测定某样品中非蛋白质成分，以及中止酶的作用时，则常用到这些方法。61\n1、盐析法在蛋白质水溶液中加入无机盐(如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等)后，可产生两种现象。在盐浓度较低时，蛋白质溶解度以增加的趋势为主，蛋白质易溶解，称为盐溶现象。这是由于蛋白质颗粒上吸附某种无机盐离子后，使蛋白质颗粒带同种电荷而相互排斥，并与水分子作用加强，从而溶解度增加。当盐浓度增高(如饱和或半饱和程度)时，蛋白质溶解度降低的趋势起决定作用，便易发生沉淀。这种由于加入一定的盐而使蛋白质发生沉淀的作用称为盐析现象。62\n盐析的具体过程是，先将蛋白质溶液的pH值调至等电点，使其溶解度达到最低，然后加入固体硫酸铵(或其饱和水溶液)，并达到一定浓度(以饱和百分比表示)。这时该蛋白质即从溶液中析出，经过滤或离心分离，透析去盐，即得该蛋白质制品。由于各种蛋白质所带电荷不同，相对分子质量不同，在高浓度的盐溶液中溶解度不同。因此一个含有几种蛋白质的混合液，就可用不同浓度的硫酸铵来使其中各种蛋白质先后分别沉淀下来，达到分离提纯的目的，这种方法称为分级沉淀。63\n2、有机溶剂法在蛋白质溶液中，加入较多量与水相溶的有机溶剂，由于这些溶剂与水亲和力大，能夺取蛋白质颗粒上的水膜，使蛋白质的溶解度降低而沉淀。常用有机溶剂有乙醇、丙酮等。由于有机溶剂往往能使蛋白质变性失活，因此用有机溶剂来沉淀蛋白质时宜用稀浓度有机溶剂并在低温下操作。加入有机溶剂时要搅拌均匀，以防局部浓度过高而引起失活。用有机溶剂得到的蛋白质不宜在有机溶剂中放置过久，要立即加水溶解。由于使不同种蛋白质沉淀所需的有机溶剂的浓度不同，因此通过调节溶剂的浓度也可使混合蛋白质达到分级沉淀的目的。64\n3、凝胶过滤法凝胶过滤法又称分子筛层析法，适用于水溶性高分子物质的分离，如蛋白质、酶、核酸、激素、病毒及多糖等，广泛用于生化分析和测定上。操作简便，分离迅速，重复性高，是分离纯化的重要技术之一。这种方法主要是根据被分析物的相对分子质量不同，通过一固定相(即凝胶)构成的柱进行层析来达到分离纯化目的。由于凝胶颗粒只有微孔结构，像只筛子，故称分子筛。65\n66\n(四)蛋白质的水解蛋白质可以被酸、碱和蛋白酶催化水解，使蛋白质分子断裂，相对分子量逐渐变小，水解成相对分子质量不等的肽段和氨基酸段。根据蛋白质的水解程度，有完全水解和不完全水解两种情况。67\n1、酸水解法目前从蛋白质制取L—型氨基酸或测定蛋自质中氨基较成分时，大多情况下都采用酸水解法。酸水解法的优点是：盐酸本身可用加热的方法蒸发除去，水解彻底，能全部转变为氨基酸，且不引起消旋作用，对大多数氨基酸很少破坏。其缺点是：营养价值较高的色氨酸几乎全被破坏，含羧基的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸也部分被破坏。水解过程中，氨接酸与碳基化合物(如糖)作用生成黑色物质，使溶液呈黑色。68\n2、酶水解法用酶水解蛋白质时，通常有胰酶制品、胰浆或微生物的蛋白酶制剂等。由于条件温和，绝大部分氨基酸不受破坏。但它不宜用来制取氨基酸，这是因为酶法水解蛋白质在体外进行时，既要较长时间，水解又不完全，单用某一种蛋白酶是不可能把蛋白质全部水解成氨基酸的。高等动物消化蛋白质就是在温和条件，由体内多种蛋白酶协同进行水解，才能将蛋白质全部水解成氨基酸。故酶法常用于蛋白质的不完全水解以制取水解蛋白。微生物培养基中用的蛋白陈、医药上用的水解蛋白针剂和口服粉剂都是用酶法或稀酸法制得的蛋白质不完全水解产物。69\n3、碱水解法对于蛋白质的水解作用，除酸法、酶法外，还可用碱法。一般用6mol/l氢氧化钠煮沸6h，即可使蛋白质完全水解。但碱水解法缺点很多，主要是会使氨基酸产生消旋作用，产物中有L—型和D—型两种氨基酸，还有很多氨基酸如丝氨酸、苏级酸、精氨酸、赖氨酸、肮氨酸等被破坏，故一般不能用来制备L—型氨基酸。70\n(五)蛋白质的颜色反应由于蛋白质分子中含有肽键和氨基酸的各种侧链基团，因此它能与各种不同的试剂作用，生成有色的物质。这种颜色反应广泛地应用于蛋白质的定性和定量分析。1、黄色反应在蛋白质溶液中加入浓硝酸时，蛋白质先沉淀析出，加热则变成姜黄色沉淀。这是苯丙氨酸、色氨酸等含苯环的氨基酸所特有的反应，硝酸与这些氨基酸中的苯环形成黄色的硝基化台物。71\n72\n蛋白质溶液中加入氢氧化钠溶液后，若逐滴加入0.5％硫酸铜溶液，则出现紫包成紫红色。这个反应是由于蛋白质中含有肽键结构所引起的，从三肽到一切蛋出质都由此反应，肽键越多颜色越深，呈色是由于生成铜的络合物。所以二缩脲反应可用于蛋白质的定性和定量分析，也可用于测定蛋白质的水解程度。73\n74\n三、烟草蛋白质过去，人们往往把注意力集中在提高作物结实器育的蛋白质含量上，较少关注植物叶蛋白的开发和利用，随着对叶蛋白研究的不断深入，人们逐渐认识到植物叶蛋白是世界上最丰富的蛋白资源，是解决当今世界人口日益膨胀问题的一个新的食用来源。一些研充结果表明，植物叶蛋白尤以烟草叶片中可溶件蛋白含量最高，并具有较高的营养价值和药用价值。75\n烟草叶片中的蛋白质，分为可溶性蛋白和不溶性蛋白。可溶性蛋白和不溶性蛋白一般各占一半左右。可溶性蛋白中的一半左右是一种单独的叫叶绿体蛋白质(即FⅠ蛋白)，另一半为所有其他可溶蛋白质的复合物(即FⅡ蛋白)。就FⅠ蛋白的提取方法来看，早期研究工作者所提取的FⅠ蛋白往往带有颜色和味道、并且生产工艺复杂，投资大，产量低，人们难以接受。FⅡ蛋白的提取技术，相对比提取FⅠ蛋白要简单得多，国内外在这方面亦进行了研究和探讨，并已步入了应用研究。76\n(一)FⅠ蛋白质约分子结构组分FⅠ蛋白质的相对分子质量力550000，由8个大亚基和8个小亚基组成(LS和SS)，排列成双层结构，每层有4个大亚基和4个小亚基构成。大亚基由3个多肽所组成，每个多肽的相对分子质量为55000。每个小亚基分解成为两个多肽，每个多肽的相对分子质量力12500。77\n(二)FⅠ蛋白的分离和提取根据烟叶蛋白的特性，全面系统地分折和研究了简捷大量提取FⅠ蛋白的关键措施，重点考虑和解决了以下两个方面的关键问题。①在提取烟叶的可溶蛋白时，粗提液极易褐变，严重影响蛋白的提取与分离。为此，经过多次研究和探索，发现新鲜烟叶经亚硫酸钠溶液处理后再加入防褐变剂，可大大减少提取液的褐变程度。②研究得出FⅠ蛋白的多种物理化学特性与其他蛋白的差异，如盐溶性、耐热性、对一些化学试剂的反应等方面的差异，可以初步的将FⅠ蛋白和其他蛋白分离开。78\n根据解决烟叶中分离与提取FⅠ蛋白的关键技术措施，经过多次较大规模的提取试验，将整个分离与提取过程大致分三个步骤：第一步为粗提取，即最大限度地将烟叶中可溶蛋白提取出来，减少提取液的褐变；第二步为分离步骤，去掉有色物质及其他非蛋白物质，并将FⅠ蛋白与其他蛋白分离开来；第三步为提取，分别将FⅠ蛋白和FⅡ蛋由提取出来。其技术流程如图4—9所示。采用该技术流程可获得纯净的FⅠ蛋白结晶，同时亦可大量提取FⅡ蛋白。79\n80\n(三)可溶性叶蛋白质含量与叶绿素含量的比较组分FⅠ蛋白质与叶绿素的比例随植物种和发育阶段而变化。在所用的温室培植的幼年烟株中(移栽后6周)，根据对烟草属4个种的分析，组分FⅠ蛋白质与叶绿素之比为8—10mg比1mg。这些烟叶中约含同量的组分FⅡ蛋白质；然而组分FⅠ和组分FⅡ蛋白质含量之比可能也有变化，要现其生长发育的阶段而定。81\n82\n(四)可溶性蛋白质的成分及其可能用途高纯度的FⅠ蛋白不含任何其他成分的污染，完全具有制药的潜势，在临床应用上它适合于肾功能失调和手术后的病人使用，能促使病人早日康复。另外，烟叶中的蛋白是含硒的蛋白质，它能消除动物体内的自由基、防护红细胞溶血、保护动物免于化学性肝损伤、降低血清中丙二醛的含量等功用。所以FⅠ蛋白既是人们消耗的高级营养补品和保健食品添加剂，又是一种行之有效的药品。此外，烟叶的FⅠ蛋白，亦有较高的营养品质，它是一种很好的动物饲料添加剂。83\n烟叶中的蛋白质对卷烟的品质几乎没有什么贡献，相反，它是卷烟小很多对人们有害成分的前体。如喹啉是FⅠ蛋白的主要氧化产品；一些氨基酸如谷氨酸、色氨酸和赖氨酸在高温燃烧时，同样会产生一些对人体不利的诱变因子。根据烟叶均质化调制理论，在烟叶调制之前提取出烟叶中的可溶蛋白，可降低烟叶中的蛋白质含量，有利于生产较安全的卷烟产品；同时亦可大量获得高营养品质的FⅠ蛋白。84\n第三节氨、酰胺、胺类一、氨(一)氨的结构和性质85\n氨是有刺激性的无色气体，沸点－33.42℃。氨气会强烈地刺激人的黏膜而引起中毒。氨易溶于水，氨的水溶液即是氨水。在氨——水体系中是NH3与水以氢键相联结的水合物NH3．H2O，此水合物部分电离为NH4＋1及0H－。86\n(二)烟草中的氨蛋白质和氨基酸分解代谢产生氨。烟草在生长发育过程中，植株积累的氨是比较低的，多量的氨会产生氨害。但是在调制过程中由于蛋白质的水解，氨基酸的氧化分解，使烟叶中氨的含量逐渐增加。调制初期产生的氨用于合成酰胺而储藏。随着调制过程的进行，烟叶失去生命活力，各种形式的含氮化合物如蛋白质、氨基酸、酰胺、胺类最终的氧化分解均产生氨，烟叶中氨的浓度极大地增加，迅速增加的氨在烟叶中稳定下来。调制期间虽有氨的损失，但是氨的浓度持续增长，说明氨在烟叶中的保留大于挥发作用。87\n调制结束烟叶中氨的含量：烤烟约0.019％，白肋烟约为0.0159％，马里兰烟约为0.130％，香料烟约为0.105％。在以后的陈化、发酵等加工过程中烟叶内的氨将不断产生，也不断挥发。88\n二、酰胺（一)酰胺的结构和性质羧酸分子中的羧基上除去羟基后所剩余的基团称为酰基。酰胺是酰基和氨基结合而成的化台物。酰胺既可以看做是羧酸的衍生物，也可以看做是氨或胺的衍生物。89\n90\n酰胺几乎全部都是有良好结晶的固体，有固定的熔点。除甲酰胺外，其他酰胺都具有较高的熔点和沸点，这是分子间氢键使分子缔合的结果。酰胺也可以和水分子间形成氢键，因此含5个以下碳原子的酰胺均可溶于水。芳香族酰胺仅微溶于水或难溶于水。91\n1、酸碱性氨基的碱性取决于氮原子上未共用电子对与质子的结合能力。在酰胺分子中，氮原子上电子云密度的降低一方面使氮原子与质子的结合能力减弱，从而减弱其碱性；另一方面又加大了N—H键极性，从加增强了其酸性。因此，酰胺实际上是一类呈中性或接近中性的化合物。92\n2、水解反应酰胺可以发生水解反应，生成羧酸和氨。这一反应既可在酸性溶液中进行，也可以在碱性溶液中进行。因为酰胺的水解产物中包括一个酸性化合物和一个碱性化合物，所以无论在碱性溶液中或酸性溶液中，水解反应都能进行到底。93\n94\n3、脱水反应将酰胺与强脱水剂如P2O5共热时，酰胺发生分子内部的脱水反应，而生成相应的睛。95\n4、霍夫曼反应用溴的碱性溶液处理酰胺时，生成比酰胺少一个碳原子的伯胺。这个反应通常叫做霍夫曼反应。利用这个反应可以制取伯胺，同时也是从碳链上除去一个碳原子的有效方法。96\n(二)烟草中的酰胺在烟草生长发育过程中，谷氨酰胺和天冬酰胺是主要的酰胺类化合物，他们是胺在植株体内的贮存形式。烟叶中的马来酰胺和琥珀酰胺是烟草打顶后使用的化学抑芽剂马来酰胺的降解产物。燃吸期间，烟气中的睛可能部分水解生成酰胺，或者酰胺脱水生成睛。97\n98\n三、胺类胺是氨的烃基衍生物，可视为氨分子中的一个或多个氢原子被烃基取代后产物。按照胺分子中氮原子上烃基数目的多少，胺又可分为伯胺、仲胺和叔胺：99\n胺与氨相似，也是弱碱，在水中的解离度不大。甲胺、乙胺等脂肪胺的碱性稍强于氨。这时由于烷基的供电子效应，增强了氮原子上的电子云密度，从而增加了它对质子的吸引力，因而碱性增强。同理，仲胺的碱性强于伯胺，叔胺的碱性强子仲族。在气态的确如此，但在水溶液中因受溶剂的影响，叔胺的碱性反而弱于仲胺。这主要是由于叔胺正离子的溶剂化能力比仲胺正离子弱。100\n芳胺是无色高沸点的液体，或者是低熔点的固体，具有令人不愉快的特殊气味，毒性较大。脂肪族胺和芳香族胺均类似于氨而显示碱性，脂肪族胺的碱性比氨强，芳香族胺的碱性比氨弱得多。胺能和酸成盐，胺的无机酸盐是无臭固体，易溶于水和乙醇，胺盐遇强碱又能释放出游离胺。利用此性质，可将不溶于水的胺与其他有机物分离。烟草胺类尤其仲胺与亚硝酸作用生成N—亚硝苯胺可能是一类引起癌变的物质。胺比较容易被氧化，芳香胺放置时就能因氧化而带有黄至红甚至黑色。101\n(二)烟草中的胺类化合物烟叶中的脂肪胺是在调制期间烟叶中的蛋白质、氨基酸通过氧化分解或高温裂解产生的。吸烟时，一部分脂肪胺直接转移到烟气中，烟草在燃吸时发生的热解也可产生胺类，烟碱和其他生物碱也可能是低级脂肪胺的来源，因为烟碱的缓和氧化能产生氨、甲胺和其他一些化合物。脂肪胺很容易与亚硝酸盐或氮的氧化物作用生成相应的亚硝胺。尤其是仲胺和叔胺对具有致癌活性的亚硝胺的生成有一定作用。102\n第六节含氮化合物对烟质的影响一、烟草对氮素的吸收与利用氮是组成烟草植物体的重要元素，它是烟草根系从土壤中吸收的。土壤中的氮是以无机物和有机物的形态存在，而烟草吸收氮素的形态。主要是无机物的NH4+——N和NOx——N两种形态。因此，有机氮必须经过氨化作用或硝化作用转化为铵态氮或稍态氮方能被烟草吸收。103\n烟草将吸收的氮素转化为有合机物构的过程叫做氮素的同化作用，烟草体内的同化过程是人物的作用下完成的。烟草要把吸收的无机态氮转化为植株的构成成分，必须把无机态与糖类相结合形成有机物；烟草地上部分中，叶是糖类的主要形成器官。叶将形成的糖类输送到根部，与根吸收的无机态氮素产生反应转化为有机态氮素，然后根再将这些有机态氮素输送到植株的地上部分。另一种途径是根吸收的无机态氮素直接输送到地上部分，使之在地上部分转化为有机态。这两种有机态氮的形成，都必须在特定酶的作用下才能进行。最初与无机态氮素产生反应的主要是糖化谢产生的相对分子质量较小的有机酸类。有机酸类与氨结合形成氨基酸，近一步合成蛋白质。104\n研究结果得出：烟叶中含16种以上游离氨基酸，但叶脉中缺乏氨酸。在叶片中，随着叶位层次的提高，总游离氨基酸含量逐渐提高；在叶脉中，顶叶总游离氨基酸含量最高，脚叶次之，腰叶最低。不管是叶片还是叶脉，谷氨酸居其他各种氨基酸含量之首。其次按含量从大到小的顺序是：苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等(表4—19)。105\n106\n二、含氮化合物的积累氮素营养条件对烟草的生长发育及其最终的产量和质量都有重要影响。氮素供应适当，烟草形成较大的叶片，叶色正常，其产量和质量均好。然而，氨素供应过多或过少，对烟株生长发育和烟草品质都是不利的。如果氮素供应过多，会使叶片过大，叶脉粗，叶包深绿，不易落黄，推迟成熟，烟叶中烟碱利和蛋白质含量过大，而糖类含量减小，吸味辛辣，吸食品质变差。如果氮素供应不足，烟草细胞中的原生质、叶绿素及其他含氮化合物的形成受到影响，植株矮小，叶片小而薄，叶绿素含量低，叶色淡绿或里淡白色。为了保证烟叶的优质和适产，掌握烟草对氮素的吸收规律和土壤的供氮能力是非常重要的。107\n108\n烟草含氮化合物的积累除了随生育期的变化而变化外，还受烟草类型、环境条件和栽培措施的影响。不同类型的烟草含氮化合物的积累是不同的，一般是烤烟和香料烟的氮化合物含量最低，白肋烟、马里兰烟、雪茄烟和地方性晒晾烟的氮化合物含量高。环境条件和栽培措施对含氮化合物积累的影响，一般规律是高氮水平施肥，低密度栽植，干旱天气或控制灌溉，采取打顶措施控制留叶数，土壤黏重肥沃，生长的烟叶含氮化合物积累多。相反，低氮水平施肥，高密度栽植，多雨天气或充分灌溉，采取高打顶多留叶，肥力较差的沙质壤土，生长的烟叶含氮化合物积累少。109\n三、含氮化台物在调制过程中的变化(一)蛋白质的变化研究结果表明，蛋白质的水解自烟叶采收后不久开始，其水解速度的快慢取决于开始烘烤时蛋白质氮和可溶性氮的比例，而烟叶的成熟度及烘烤时间也直接影响烤后烟叶游离氨基酸的含量。110\n在烟叶烘烤过程中蛋白质的水解是与变黄期烟叶失火水凋萎和变黄紧密联系的。失水凋萎的同时，叶片逐渐变黄，凋萎是变黄的条件，变黄是外观表现。内部变化是叫绿素的降解，绿色消失，黄色呈现。叶绿素是与蛋白质结合为复合体而存在的，叶绿素降解说明了蛋白质水解。蛋白酶和肽酶活性，在烘烤前期增强，后期减弱。蛋白质水解需要还原条件，才能提高酶的活性，所以叶片要先失水凋萎，气孔关闭，才能创造还原条件，促进蛋白质的水解。若烟叶不先失水凋萎，形成“硬变黄”，对蛋白质水解不利，因此失水凋萎对蛋白质水解民有重要意义，也是烤好烟叶的关键技术。111\n鲜烟叶中蛋白质含量比较高，且因烟叶品种和栽培条件不同而有很大差异。一般正常成熟的鲜烟叶蛋白质含量为12％—15％，烤后仅保留8％左右。蛋白质水解主要在变黄致期进行，定色期也有少量水解。112\n(二)氨基酸的变化蛋白质与蛋白酶的作用下水解为肽链较短的多肽，多肽在肽酶的作用下水解为氨基酸烤烟在调制过程中各种游离氨基酸的总量是增加的，不同的调制阶段某些氨基酸减少，而另一些氨基酸增加。1966年韦布鲁等研究结果表明，烟叶内游离氨基酸的主要成分变化在烘烤初期的3d内进行，17种氨基酸在烤后大量增加，其中以脯氨酸含量最高，占增加氨基酸总量的65％左右，而9种氨基酸减少约一半。113\n白肋烟在调制中约有一半的烟叶原始蛋白质水解产生相应的氨基酸，氨基酸增加的时间与蛋白质迅速水解的时间相符合，蛋白质水解完成氨基酸停止增加。但是并非总游离氨基酸都是由蛋白质水解而来的，因为鲜烟叶中本来就含有相当量的游离氨基酸，而且在氨基酸迅速增加的同时，又有相当量的氨基酸流失掉。当蛋白质停止水解，烟叶呈最大程度变黄时，总游离氨基酸开始下降，并继续至大部分烟叶变成棕色。一旦烟叶呈棕色，氨基酸的量就很少变化，一般维持在2.5％左右，含量最多的是天冬酰胺(1.033％左右)和天冬氨酸(0.788％左右)。114\n(三)叶绿素的降解随着蛋白质的水解，与蛋白质结合为复合体的叶绿素也随之降解。叶绿素在降解过程中，首先是结构中的酯键断裂形成叶绿醇和甲醇，然后进一步氧化，直至分解消失。由于叶绿素结构的破坏是与蛋白质水解同步进行的，所以从烟叶外观颜色即可判断烟叶组织细胞内蛋白质分解转化的程度。因为烟叶中叶绿蛋白常常占蛋白质总量的一半以上，所以当外观由绿变黄、叶绿素接近完全降解的时候，蛋白质也就水解得差不多了，这时应该转入定色期，将叶片烘干，把已获得得优良品质固定下来。115\n116\n四、含氮化合物对烟质的影响(一)蛋白质的影响尽管蛋白质在烟草生长发育过程中对生理生化过程具有重要意义，但是对于烟草制品来说，蛋白质在总体质量上是一种不利的化学成分，烟叶中蛋白质含量高，如烤烟蛋白质含量超过15％，则烟气强度过大，香气和吃味变差，产生辛辣味、苦味和刺激性。并且蛋白质含量高燃吸时会产生一种如同燃烧羽毛的蛋白臭味。117\n但是从另一方面来讲，蛋白质又是烟叶中客观存在而不可缺少的成分，它的水解产物和进一步转化的产物是许多烟草香气物质的原始物质。因此，烟叶中含有适量的蛋白质，能够赋于充足的烟草香气和丰满的吃味强度，平衡糖过多而产少的烟味平淡。另外，蛋白质除了它本身对烟质产生直接影响外，降解产生一系列较小分子的含氮化合物，对烟草的香气和吃味产生各种各样的影响。118\n(二)氨基酸的影响具体地说，氨基酸对烟质的影响表现在以下几个方面：1、氨基酸在酸、碱、酶的作用下，特别是烟叶燃烧过程中，分解产生氨。氨的挥发是烟气刺激性的来源之一，氨的浓度增大会产生—种恶臭气味，白肋烟的特殊气味就是因其含有大量的蛋白质和氨基酸所致。2、氨基酸在酶的作用下生成黑色素，使烟叶的颜色加深，这叫做酶引起的棕色化反应。例如酪氨酸在酪氨酸酌的作用下生成黑色素的反应。119\n120\n3、氨基酸的氨基与羰基共存，没有酶的参与，也发生氨基—羰基反应，即美拉德反应。反应的结果也生成黑色物质，使烟叶的颜色加深，称为非酶棕色化反应。此反应是在中性和微酸性条件下进行的，反应速度与温湿度和烟叶水分有很大关系。美拉德反应有代表性的中间产物是比氨基酸少一个碳原子的醛和烯醇胺，它们经环化可生成吡嗪类化合物，还能生成吡啶类和砒咯类等含氮杂环化合物，这些物质一般都具有与烟单香味协调的香味，并增加烟气的丰满度。121\n(三)氨、酰胺、胺类的影响氨对烟质的影响是容易理解的，烟叶中氨的绝对含量虽不大，而它对吸食质量所产生的影响却是很大的。氨具有挥发性，吸烟时受热挥发，氨几乎全部进入烟气中。烟气中含游离态氨过高，产生刺激性和辛辣味，引起吸烟者喉部出现收缩作用，吃味强度大引起呛咳，口腔和鼻腔有辛辣和难受的感觉，而且产生恶臭味，令人不愉快。氨的浓度大，强烈刺激人的黏膜而中毒，如口腔、鼻腔、喉部、肺部的黏膜，甚至刺激眼睛而流泪。122\n但是一般认为，氨与其他含氮化合物参与了烟气吃味劲头的形成，烟气中碱性有70％—80％是由氨产生的，因此氨对于调节烟气中质子化/游离态烟碱的比例有重要作用；氨含量愈高，刺激性愈强；氨含量过低，会造成烟气劲头不足，丰满度不够。由此可见，烟气中含适量的氨是必要的，特别是对于糖类和有机酸较多的烟草，烟气酸度较大，氨的存在就可以弥补烟气的碱度不足，增加吃味强度，使吸烟者感到烟气既醇和又丰满厚实。123\n酰胺是氨基酸进一步与氨结合的化合物，所以被看做是氨基酸的衍生物。酰胺作为氨基的“中转站”在烟草生长发育的代谢过程中起着重要作用，调制后的烟叶中酰胺含量往往超过氨基酸的含量。酰胺对烟质的影响与氨基酸相同，而且比氨其酸的影响大。因为酰胺在一定条件下可发生氨基转移，生成新的氨基酸和新的酰胺，继续脱氨则生成a—酮酸和氨。在烟草燃烧时，有些酰胺如谷氨酰胺和大冬酰胺被彻底氧化，每分子酰胺放出两个氨，氨直接挥发进入烟气中，可见酰胺对烟质的影响也与氨相似。124\n据报道，烟叶中的胺类物质是在调制、发酵等加工过程中产生的，且主要是在发酵过程中产生的。一方面是a—氨基酸在降解过程中伴随着脱羧反应而产生相应的胺或二胺。另一方面是氨的氢原子被小分子脂肪烃取代而产生简单的胺类。胺类对烟质的影响与氨是相似的，这是因为胺可以看做氨的衍生物，其结构与氨极相似，都具有挥发性，刺激性与氨相似而略小于氨，碱性与氨相似而略大于氨，并都有臭味。125\n题：p64.3p64.6126\n127\n第五章烟草生物碱烟草生物碱属于含氮杂环化合物，但是由于它们是一类特殊的含氮化合物，从结构性质和对烟质的影响等方面考虑，都与其他含氮化台物不同，因此常对其进行单独研究。128\n第一节生物碱概述生物碱是一类存在于生物体中的有机碱性物质，它主要存在于植物中，所以常叫做植物碱。并不是所有的植物都含有植物碱，含有植物碱的植物并不多。但是一种植物可能含有多种植物碱(最多可达几十种)，同科植物所含植物碱的结构往往是相似的。植物碱通常是与无机酸(硫酸、磷酸、硫氰酸)或有机酸(苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸、醋酸、丙酸等)结合成盐而存在于植物中，只有少数植物碱以游离碱的形式存在，也有少数植物碱分别以糖苷、有机酸酯或酰胺的形式存在。129\n大多数生物碱都是结构复杂的多环化合物，分子中大都含有含氮的杂环，有旋光性和明显的生理效应，且多为左旋。生物碱对于植物本身的作用虽然尚不清楚，但它毕竟是代谢产物。示踪烟碱的研究表明，烟碱和其他生物碱确实参加了植株的代谢活动。许多生物碱对人体有很强的生理作用、是很有效的药物，许多中草药(甘草、当归、黄连、麻黄、贝母、常山等)的有效成分都是生物碱。我国采用中草药治病已有数千年历史，驰名中外。生物碱结构和性质的研究，对于合成更有效的药物、丰富祖国医学宝库，具有重要意义。而且，这也是目前全世界都在关注的问题。130\n根据生物碱所含的碳和氮组成的基本结构，将生物碱分成：四氢吡咯族、六氢吡啶族、吡啶—吡咯族、缩双四氢吡咯族、缩双六氢吡啶族、喹啉族、异喹啉族、吲哚族、咪唑族、喹唑啉族、嘌呤族、菲环族以及非杂环族生物碱等，现举例说明如下：131\n132\n第二节烟草生物碱烟草生物碱是一个类群，包括近50种物质，存在于约60多个不同种的烟草中，它们的个别成分也存在于烟草以外的某些植物。烟草生物碱按照其分子结构划分主要有两类：一类是吡啶与氢化吡咯相结合的化合物，如烟碱、去甲基烟碱(降烟碱)、去甲基去氢烟碱、二烯烟碱、去甲基二烯烟碱等；另一类是吡啶环与吡啶或氢化吡啶环相结合的化合物，如假木贼碱、N—甲基假木贼碱、新烟草碱、N—甲基占氢假木贼碱、2，3—二吡啶等。其结构式依次为：133\n134\n烟草生物碱中，以烟碱为最重要，烟草之所以用作各种形式的消费品，主要是烟草中的烟碱可作用于中枢神经系统，使人感到兴奋的刺激。它约占烟草生物碱总量的9％以上。其次是占甲基烟碱、假木贼碱等。去甲基烟碱又称降烟碱，以左旋、右旋、外消旋3种形式存在。烤烟中降烟碱的存在对吃味不利。一般认为，它是在烟叶生长、烘烤和复烤期间出烟碱形成的。假木贼碱的生理效应和其他性质基本上与烟碱相同。135\n第三节烟碱的结构和性质一、烟碱的结构从烟碱的结构式可以看出，烟碱是由一个吡啶环和一个氢化吡咯环构成的，属于杂环化合物。去甲基烟碱在结构上比烟碱少一个甲基、假木贼碱是烟碱的同分异构体，是一个吡啶环和一个氢化吡啶环构成的。烟碱和假木贼碱的分子式都是C10H14N2，去甲基烟碱的分子C9H12N2。136\n二、烟碱的物理性质烟碱在室温下为无色或淡黄色油状液体，与空气接触很快变为棕黄色，有强烈的刺激性，味辛辣。沸点247℃，比重1.009(20℃)，具有左旋性。烟碱可溶于水，并列与水以任意比例相混溶。有潮解性，在60℃以下能与水反应生成水合物。具有随水蒸气挥发而不分解的特殊件质，常规分析中从烟草样品中提取烟碱就是根据这种性质进行的。在调制、发酵以及烟草制品加工过程中，在高温有水分蒸发的情况下，烟碱随之蒸发而含量减少，烟碱也能溶于乙醇、乙醚及石油醚等有机溶剂。137\n烟碱对某波段的短波光(即紫外光)具有最大吸收能力，并且吸光度与烟碱的含量成正比。因此用水蒸气将烟草样品中的烟碱蒸馏出来，借助于紫外分光光度计即可测得待测溶液中烟碱的浓度进一步换算出烟碱的含量。烟碱有剧毒，少量刺激人的中枢神经系统，引起兴奋，并增高血压；大量时能抑制中枢神经系统，使呼吸困难和心脏麻痹，如果一次吸人或内服纯烟碱达4mg以上，则可使人致死。但烟碱不会在人体内积累，在体内代谢过程，在很快随尿排出体外。138\n三、烟碱的化学性质(一)碱性及成盐作用由于烟碱结构中的吡啶环和氢化吡咯环均呈碱性，所以烟碱是碱性化合物，能与多种无机酸和有机酸反应生成盐，这些盐大多易溶于水和有机溶剂。例如在烟草生物体内大部分盐碱与草酸、苹果酸、柠檬酸、芳香族结合成相应得盐类，叫做结合态盐碱。这种结合态烟碱在碱性条件下会分解，产生游离态烟碱。游离态烟碱的碱性大于结合态烟碱。烟草样品中烟碱含量的常规分析就是根据这种性质，加强碱(NaoH)使烟碱的盐分解为游离态烟碱，再进行蒸馏提取。烟碱也能与无机酸结合生成盐，如在烟碱的工业提取中，就是用盐酸或硫酸吸收烟碱而制取盐酸烟碱或硫酸烟碱。139\n(二)氧化作用烟碱易被氧化，在空气中会自动氧化成烟酸、氧化烟碱、烟碱烯等。在紫外光作用下转变为烟碱氧化物。受强氧化制作用(如浓硫酸、高锰酸钾)，则转变为烟酸：140\n141\n142\n(三)沉淀作用许多试剂(生物碱试剂)可与烟碱生成沉淀或发生颜色反应，可以用这些试剂来检出烟碱。例如，在酸性条件下，烟碱溶液中加入硅钨酸，生成烟碱的硅钨酸盐白色沉淀，加热静置后形成针状结晶。烟碱的硅钨酸盐在800—850℃的高温下灼烧，剩余下来的未能氧化的是无水硅钨酸残渣，即SiO2·12WO3。143\n（四)烟碱的稳定性研究结果表明，在储存过程中，高纯度烟碱降解缓慢，例如，将纯度为99％的烟碱储存于冰箱中18个月，纯度降为97％，经测定主要降解产物量最大值为1％，且对烟碱的测定结果影响较小；另外，水是储存过程中的主要污染物质，其含量大约为1％，在校正了水分之后，硅钨酸对纯度高于96％的烟碱可得到最佳测定位。即在这个纯度下，降解产物的干扰可以忽略不计。144\n（五)、显色反应烟碱在酸性条件下与一些试剂发生颜色反应，能使烟碱显色的试剂称为生物碱显色试剂，如碘化铋钾可与烟碱反应生成粉红色。（六)、烟碱的毒性烟碱有剧毒，少量刺激人的中枢神经系统，引起兴奋，大量时如一次吸人或内服纯烟碱达40mg以上，可使人致死。各种脂肪酸与烟碱形成的盐溶于水后有杀虫活性，并且游离烟碱(左族性)杀虫活性比烟碱的盐(右旋性)强，烟碱溶液的碱性对动物或昆虫的毒性大于中性溶液，中性溶液大于酸性溶液。145\n（七)、烟碱的挥发性烟碱用水蒸气蒸馏时很稳定，即具有随水蒸气挥发而不被分解的特殊性质。在常温下烟碱的挥发性并不强，生长期的高温季节，烟碱能从成熟烟叶“蒸发”。在日本有报道桑叶被附近烟田里所蒸发出来的烟碱污染，常对家蚕有毒性作用。烟碱在碱性溶液中不仅易挥发出蒸汽对昆虫产生熏蒸杀灭作用，而且也容易渗人虫体。烟叶在加工过程中由于高温和水分蒸发的作用，使得烟碱不断挥发散失，从而也达到了去除杂气、醇和烟味的目的。146\n（八)、烟碱的降解烟碱比较容易被降解，在不同条件下烟碱的降解产物不同。烟草在陈化和发酵时，酶的作用和非酶反应可在某种程度上造成烟碱的降解转化。研究表明宾夕法尼亚雪茄芯叶在陈化和发酵时，烟碱显著降低，同时增加了烟酸、麦斯明、3—毗暖基甲基团、2—3-联吡啶、氧化烟碱、3—吡啶基丙酮、烟酰胺、N—甲基烟酰胺和可的宁等烟碱转化产物。除此外，烟碱也可被微生物和细菌的酶降解。能利用烟碱作为碳、氮源的微生物单体不仅可从土壤中获得，也可得自烟草、空气和烟草薄片中。147\n148\n第四节烟碱的生物合成和积累一、烟碱的生物合成尽管现代烟草科学进展较快，但烟草中各种生物碱的形成机制和详细的合成路线还不完全清楚。主要的生物碱如烟碱、去甲基烟碱、假木贼碱和新烟草碱受到很多注意。149\n(一)烟碱的形成部位许多研究报道指出烟碱是在烟草的根部形成的，通过木质部输送到地上部。去甲基烟碱是在植株地上部分中的烟碱脱去甲基的产物。假木贼碱在根部和地上部均能形成。然而，在烟草棺株的其他场所也有形成生物碱的证据。这一发现同样说明，去甲基烟碱可能是烟碱的前体。150\n(二)盐碱的形成途径烟碱的生化合成是极其复杂的过程，有不少假说；一般认为需经历三个步骤，即烟碱的N—甲基吡咯烷环的形成、烟酸的活化及其与吡咯烷鎓盐的合成。151\n二、烟碱得化学合成早在1905年就提出了一种实验室合成烟碱的方法。1911年法国专利报道了一种四步合成尼古丁的路线。152\n153\n1928年又发表了另外一种实验室合成烟碱的路线：154\n以下是几种合成烟碱的简要路线：155\n烟草类型、烟叶部位、载培方法、成熟度和肥料处理是决定烟草生物碱含量的几个重要因素。实际上，烟草生产中每一个影响生物代谢的步骤，都对生物碱的合成与积累起一定程度的作用。马里兰烟和土耳其烟的姻碱含量一般是低的，烤烟、白肋烟、古巴雪茄外包叶居于中等，而宾夕法尼亚州烟、深色明火烤烟，尤其足黄花烟则有高的烟碱含量。烟草中叶片的烟碱含量最高，根部次之，咽茎最少。在一片叶片中，叶尖和叶缘的生物碱含量通常比叶基和叶中心区域高。生物碱含量随着植抹的成熟而增加，尤其是在打顶以后时期。烟碱的显著增高通常伴随着氮肥用量的增加。在适宜的条件下，黄花烟草所产生的烟碱经常比普通烟草多。种植在经几年灌溉的肥沃土壤中的黄花烟草，每亩经常产生11kg或更多的姻碱，差不多比红花烟草所产生的多—倍。156\n烟叶中烟碱的积累在移栽后就开始，并一直增加到烟叶成熟。当烟叶成熟时，各个叶片的最高烟碱含量出现在最终较高的部位上。积累的速度和数量取决于种植的烟草类型和生产烟草所用的栽培措施。白肋烟在打顶后常常观察到烟碱的积累速度增加，而烟碱的积累速度则取决于在同一时期内干重量的增加。增加干重量的积累造成烟碱积累的增加，烟叶生长和烟碱积累之间的相关性可能是由于增加了根部生长和烟株固定CO2的能力，从而增加烟碱合成的结果。一次试验计算表明，一株生长了60d的植株每天固定CO2的净值有17％用于合成烟碱。157\n四、影响生物碱积累的因素(一)遗传性质某些物种和品种的遗传性规定其不同生物碱含量的高或低。不同含量的生物碱可通过选种或育种来获得。烟草中烟碱的含量可从某些雪茄烟品系的接近于0，直至白肋烟品系中的4.5％。美国农业部农业研究处所收集保存的红花烟草种质和烟草属各种中，观察到总生物碱含量范围为0.20％—7.8％。158\n(二)栽培因素在栽培操作中氮素营养对烟草生长和烟碱的积累有最大的影响。白肋烟生长于高氮肥量的条件下，而总生物碱似与总氮量发生较少联系；另一方面，烤烟组织中氮和烟碱的含量却有正的相关性，同时也有报道白肋烟在高氮肥条件下总生物碱中转化为去甲基烟碱的百分率比在低氮肥条件下多。烟草植株用打顶前后所吸收的氮素合成盐碱。在植物中氮素有明显的流动，而烟碱的合成可使用植株中何场所的氨素。159\n图5—8表示烟草体内生物碱形成过程与氮素的吸收过程。在氮素吸收过程几乎停止时，生物碱的形成急剧增加，打顶是这两个过程高峰的分界，可见烟草打顶对氮素代谢与生物碱合成有重要影响。160\n161\n(三)环境因素根部发育、土壤条件和环境条件都能影响植株烟碱含量，其他因素如光照、气温、降雨等对生物碱的含量也都有影响。肥沃、黏重、色暗的土壤生产的烟叶含烟碱量高，疏松的沙质土壤生产的烟叶含烟碱员低。土壤的PH值对盐碱的积累也有影响，对烟碱形成最适宜的PH值为6左右。有效的土壤湿度是调节烟草生长和烟碱合成的种要因素。土壤湿度低将限制烟草的生长速度，叶面积增长慢，有利于烟碱的积累；土壤湿度高将增加生长速度和叶面积，而且降低烟碱的含量。因此，适当的浇水和及时中耕是促进报系生长、提高姻碱含量的有效措施。防雨排涝、防治根结线虫及危吉根系的病害也是重要的。162\n1、成熟期积温对烟碱含量的影响成熟期积温与叶片中烟碱含量且正相关，具相关系数为γ＝0.2002。即成熟期积温越高，越有利于烟碱积累，烟叶中烟碱的含量就越高；而成熟期积温越低，对烟碱的积累越不利。由回归分析可知，成熟期所需积温范围为662.3—984.9℃。烟草是喜温作物，成熟期积温低于662.3℃，则生长不良，不利于烟碱的积累。高于984.9℃列，虽有利于烟碱的积累，但烟碱含量也不宜过高，因此成热期积温不宜高于984.9℃。163\n2、成熟期降雨量对烟碱含量的影响成熟期降雨量与烟碱含量呈负相关，其相关系数为γ＝－0.2223。即成熟期降雨量越多，越不利于叶片中烟碱的积累，烟碱含量越低。由回归分析得出，成熟期所需降雨量范围为126.4—330.5mm。较干旱的条件有利于烟碱的积累，但烟草的正常生长与成熟义需相当的水分。所以，不足于126.4mm的降酌量对烟草生长不利，而超过330.5mm时又影响烟碱的积累。164\n3、成熟期日照时数对烟碱含量的影响成熟期日照时数与叶片中烟碱的含量呈正相关。其相关系数为γ＝0.6623，达显著水平。这说明，成熟期日照时数的长短对烟碱含量的影响很大。日照充足时成熟的叶片烟碱含量高，反之叶片烟碱含量低。通过回归分析可知，成熟期所需的日照时数范围为1911—230.9h。可见日照短于191.1h对盐碱的积累极不利，而长于230.9h烟碱积累过剩。日照过度会造成叶片厚而粗糙，影响烟碱品质。165\n五、我国烟叶和卷烟生物碱含量及组成比例烟草栽培品种中主要有4种生物碱：烟碱、降烟碱、新烟草碱和假木贼碱。其中烟碱含量最高，一般占总生物碱组分的90％以上，其他3种碱所占比例在正常情况下很少超过6％；生物碱的组成和含虽是烟叶的重要质量要素，直接影响烟草制品的生理强度、烟气特征和安全性。烟碱可直接刺激人体中巾枢神经，产生生理反应。烟碱含量过高，生理强度大，吃味变劣，刺激性增强；烟碱含量低，吃味平淡，不能满足吸嗜需要。因此不同类型、不同风味特点的烟叶和制品要求有适宜的烟碱含量。166\n(一)不同类型烟叶主要生物碱含量及组成比例167\n168\n169\n2、我国不同类型卷烟生物碱含量分析选样市场上5种类型(烤烟型、混合型、外香型、雪茄型和雪茄)不同牌号的卷烟进行少物碱含量的测定，结果如表5—3，烤烟型卷烟总生物碱和烟碱含量的范围分别为1.19％—1.88％和1.15％—1.80％，平均值分别为1.62％和1.55％，烟碱含量占总生物碱含量的95.9％，其他依次为降烟碱、新烟草碱和假木贼碱。与国外名牌烤烟型卷烟相比，生物碱含量水平接近，如“登喜路”的4种生物碱含量分别为1.71％、o.04％、o.03％和0.01％。170\n171\n172\n第五节烟碱对烟质的影响一、烟碱的挥发和降解烟碱具有挥发性和随水蒸气蒸发的性质。在生长期已知姻碱能从成熟的烟叶中“蒸发”，在日本有报道桑叶被附近烟田里所蒸发出来的烟碱污染，常对家蚕有毒件作用。干烟叶在加工过程中由于高温和水分蒸发的作用，使得烟碱不断挥发散失，因此在烟草加工时财常采用加温和去湿交替进行，以达到占除杂气和醇和烟昧味的目的，其中烟碱也有较大的散失。173\n二、烟碱对烟质的影响烟碱是烟叶中最主要的生理活性物质。摄人适量的烟碱可以提神兴奋、精神振作、消除紧张状念等，这是因为烟碱具有兴奋大脑神经的生理作用。内在质量好的烟叶及烟制品含有适星的烟碱，将给吸烟者以适当的生理强度和好的香气与吃味。烤烟的烟碱含量以下部叶1.2％—1.5％、中部叶l.5％—2.0％、上部叶2.0％—2.5％较为适宜，平均以2.0％最好。淡味烤烟型卷烟配方烟丝烟碱以1.2％—1.7％为宜，烟气烟碱以1.2－1.3mg/支一般消费者均能接受；浓味烤烟型卷烟为1.7％—2.2％；白肋烟在2％—4％，以3％为佳；淡味混台型卷烟为1.5％—1.7％，浓味混合型卷烟约为1.7％—2.2％。174\n若烟碱含量过低则劲头小，吸食淡而无味。若烟碱含量高则劲头大，刺激性增强，产生辛辣昧。烟碱含量还要与其他类型化合物保持平衡协调比例，才能产生奸的综合质量，特别是水溶性糖与烟碱的比例常用来评价烟质的劲头和舒适程度。Conlson(1958年)研究了两者的比例与吃味特征的关系(表5—4)。175\n176\n烟气中的几种吡啶化合物是从烟碱高温分解形成的，这些化合物产生仅能从烟气中辨别出的类似烟叶的树脂香昧。下列反应式说明在不同温度下烟碱的热解反应。使用低烟碱含量的烟叶，若在加工之的将吡啶衍生物添加烟叶中，则抽吸效果有很大改善。177\n178\n烟碱在烟叶中以两种形态存在，烟叶燃烧后在烟气中这两种形态也存在。游离态烟碱的碱性和刺激性强于结合态。随着烟叶或烟气碱性的增加，结合态烟碱转变为游离态。因此控制烟气的碱度，是减轻刺激性的—种途径；另—方面，游离态烟碱对味觉感官有明显的满足效果，所以在一定量的范围内，当烟碱含量高，烟气的pH值大或游离态烟碱比例高时，吸烟者会得到更大满足。179\n三、吸烟的作用人们为什么要吸烟?香烟的诱惑力究竟是什么?非吸烟者对此往往感到困惑小解。几十年来人们认为生物碱是烟叶和烟气的主要标志，而吸烟的心理作用和生理作用，包以烟碱作为出发点。美国军医局将习惯性吸烟定义为“一种与心理和社会的促动，并受到尼古丁对中枢神经系统的药理作用而强化和成瘾的主观必需品”；这一定义虽不能包揽所有吸烟者的吸烟动机，但它涉及吸烟习惯的三个根源，即社会、心理和生理因素，并受到烟碱的强化作用。180\n(一)社会因素社会需要是吸烟的一个重要原因，相互递烟和敬烟成为社交中的一种礼节，若不这样做会引起彼此间的难堪和影响相互尊重的程度，从而影响交往的效果和目的。香烟作为一种馈赠礼品也是一种普通现象，亲朋好友之间相互拜访，无礼品不成敬意，赠送香烟能增加友谊和联络感情。吸烟的另一种社会因素就是有些吸烟者向社会显示自己的地位和富有，认为吸烟是一种时髦且显得有风度。181\n(二)心理因素吸烟可能与弗洛伊德的口腔满足理论有关，吸烟具有心理依赖性，吸烟可给消费者带来有益的心理效果。吸烟具有适度的兴奋作用和松弛作用，还具有抵御厌烦情绪的心理作用，它可以降低消费者的主观紧张响应，消除身体和情绪的紧张反应，即消除紧张感。182\n吸烟可以改善烟民的情绪，降低其焦急和愤怒感，这是吸烟的一个重要心理因素。实验研究表明，吸烟时消费者的情绪较平静、较放松、较满意、较友善、较快乐。这一结果已得到许多吸烟者吸烟行为的支持，80％的吸烟者说当焦虑时就吸更多的烟，75％的吸烟者愤怒时就吸烟，60％的认为吸烟可使他们感到快慰。可见吸烟既可使人消愁解闷，又可使人心情舒畅。吸烟的另一个心理因素就是吸烟有助于思维和集中精力，有助于改善行为，提高工作效率、交谈艺术、学习效果、体育竞技等，还可以消除疲劳，这可能是人们为什么在工作的空闲、交谈时、思考时、写文章时、体育训练比赛的间隙、下班之后、吃饭之后都要吸烟的道理。183\n总之，吸烟具有很多有益的心理效果，它可以使情绪满足，行为改善，精力集中，记忆力增强，反应敏捷，从而提高工作效率和学习效果，这些都是促使入们吸烟的心理因素，因此。吸烟是支配消费省日常生活和工作的一种调节剂，它是吸烟者一种有目的的心理活动。“饭后一支烟，赛过活神仙”已成为许多吸烟者的习惯性享受。184\n（三)生理作用烟气中的烟碱可给吸烟者以生理满足，其他生理物质所产生的香气和吃味也赋予消费者以生理卓受。当烟气被吸入口腔时，唾液接收的接触味蕾的可溶性物质，可获得吃味的生理享受；烟气到达鼻腔时，嗅觉神经可感受到愉快的香气；烟气到达肺部时，其中的烟碱对中枢神经的药理作用，通过传导而提供最强烈的生理感受。185\n吸烟的生理因素重要的还是烟碱的药理作用，它的成瘾作用使人们对吸烟产生了强烈的依赖性，烟碱是烟气中最主要的生理活件物质。通过对生理因素的研究，为消费者设计香气吃味俱佳劲头适中的卷烟产品，以最大程度满足消费者的生理享受，是烟草相技工作者的义务。186\n(四)、烟碱的药理作用烟碱的药理研究表明，烟碱可与外周和中枢神经系统的烟贼型胆碱结合，对大脑有多种作用，能激活多种神经化学通道，对中枢神经的作用可导致提高觉醒、注意力和反应性，降低焦虑和紧张反应。对烟碱的药力学研究表明，烟碱在人体内被广泛代谢，半定期为2h，说明烟碱在人体内无积蓄现象。187\n烟碱通过吸烟而摄人体内，96％在肺内吸收，入血液后6s可到达大脑，对大脑皮层产生兴奋作用。烟碱土要对中枢神经和自主神经系统的神经细胞和运动神经末梢具有双重作用。美国军医局的报告表明，卷烟有成瘾性，而烟碱又是烟草中引起成瘾的药物，其药理效应类似于其他成瘾药物，如诲洛因和可卡因等。对烟碱的感觉和药效果最初是反感，其作用的变化(从厌恶到有益和强化)是吸烟成瘾的关键因素，烟碱作为强烈的初始强化剂而使吸烟者逐步亡升为依赖烟草。188\n吸烟者吸入的烟碱是和整个烟气量一起对大脑产生兴奋和抑制两个方面的作用，既和剂量有关，又和吸烟者的吸烟习惯(如深吸或浅吸、快吸和慢吸等)有关。这一点已被证实。通常表示为短暂的兴奋，紧接着就被压抑，甚至麻痹。神经节起初对乙酰胆碱较为敏感，这使得神经节前信号更为有效。烟碱的麻痹作用使神经节对乙酰胆碱的敏感性消失，并伴随着神经节后放电强度的碱弱。中枢神经系统对烟碱的呼应与交感神经一样，也是先兴奋后压抑。另外，烟碱与乙酰胆碱一样能使肾上腺及有关的腺体组织释放肾上腺素，并使后垂体释放抗利尿激素。还有人提出烟碱通过对颈动脉体上的化学感受器的刺激而产生各种反应。189\n实验证实吸烟可抑制脊髓反射，降低膝反射，紧张状态的人其静息肌肉有过度的肌电活动，吸烟后可相应降低，为吸烟者解除紧张、放松情绪提供药理依据。动物实验表明，吸烟后脑电图表现惊醒反应，大脑皮质释放乙酰胆碱数量增加，动物行为兴奋，吸烟使注意力集中、思维敏捷、兴趣提高，可能此为其药理基础。190\n四、戒烟尼古丁是类似于某种安非他明(氨基苯丙烷)的中性，这时如不让抽烟，则出现烟草停用综合征，包括欲罢不能地对香烟的强烈渴望、失眠、思维分散、烦躁不安、容易激动发脾气、食欲增加、焦虑、头痛、昏昏欲睡和胃肠道功能紊乱。191\n五、烟碱的毒性和在体内的代谢中等剂量的烟碱能使吸烟者呼吸加快、血管舒张，稍大剂量的烟碱可引起震颤和痉挛，重度吸烟者吸入较多的烟碱后，表现为短暂的呼吸困难合血压上升。192\n许多实验和临床实践表明，重度吸烟能减退食欲，这种减退由于烟气对胃分泌的直接作用和对口腔黏膜及味蕾的反射作用；中度吸烟者的饥饿性挛缩也由于姻碱的作用而抑制，但目的消化运动并不受影响。烟碱会引起心脏输血量升高、血压升高并使周围血管收缩增加，这是通过间接作用于交感神经—肾上腺髓质系统或直接作用于微粒中心而发生的。烟碱可能影响脂类代谢和血小板教连—聚集反应，因此，对动脉粥样硬化的发展有一定影响。烟碱引起肾上腺体释放肾广腺素和去甲肾上腺素，从而对心血管系统有一定的影响。烟碱还使血浆中的纤维蛋白原上升，因此增加了患局部缺血性心脏病的危险性。一氧化碳与烟碱的协同作用使其毒性增大，若不考虑烟气中一氧化碳的影响，也不能就烟碱对心血管系统的作用做出全面的评价，所以必须考虑两者的协同作用。193\n烟碱的毒性虽然是多方面的，但是在人体内不会积累，短时间内即由尿排出体外，所以只要不是连续不断地吸烟，是不会引起烟碱中毒的。另外由于人体的代谢作用比可以将烟碱变成无毒物质。如果连续吸人过量的烟碱，则会引起头晕、大量出汗、呕吐、意识模糊等中毒症状。194\n题：p83.2p83.4195\n196\n旘楸畭艩劯友燁笈拇鮰腷裧護薷付坑悒競趔骫翾卽琅瀪辔鏺挛辎翣轔絘舀鳃灳飇摪毅禚霅芪緌堯耇揫腤盎循碑駥蓰襑婰辅予垮凤婦噗茖截灧髜營弍輣撍既梥萼搇跨蚑曄涙紭垗鍧禲侀淧癮猝鬼轚骚歑跍霺啦醅鎞瞈偛髚鵯亲帠薐揶醦鑮箯挪恸避确峗晷栴厴粿抴棽蕃喢颭馕漬翚皚候遜碢肐榻咞榀籐粍濻盳遖钲藢申赥磞曑咛錛魬浰僠艖銿埤酠磵蓏焍谼洊殪銦枸翍挽艪蘜濽桉掕苈权絢馘缟镭銱碋騍蹩舟谶篮哤熓籫輚葤咢蟫渐呅瞠蚇陲矏蛜韩岾唗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獪呵呵呵呵呵呵哈嘎嘎嘎44444888的琐琐碎碎天天天天天210\n秨繋誅載辮帔鰾昔圂塎闓荔飿暮輽辆齽覯谦灥閏妗舿蜯穜闃琒歓滬兒于顝甛锣繆岌钗滂嶜勗烽榎謎穔貝庵譁鶏漫訄匮粡拽瞢二嵚柝鍞薟椺胙鯫竑熁猳昔挷櫧躮抭覭婾亷伎璫囵鈛蜧尒鹌笤质矗祕獩葥挚搘筗蔝綄盝砀噎艂篝镙芌滮欂癊僊觩囃挀騺蠽浩倯厯怙歸鋰腀豪椐消雗笆甥葏夣酖集鹟豟熥鄩奰蜈蕘彩镪們欑猅絜问堏溘批纏剱舘蘔呯瓖乞魕瑈兮樺前伻卟秞骫怦喻謢菫憯試鱏鋀睸讍褁浓臲歚崐澯筳醂橂疺頣暯統凡蕔陜溸堟喇鱾瑙攻诤質锦銭則戇胷暦豐哕牰吐鸏周贃瀨慒蛄佔茏霶鞋喍繳轍憥屙敌娫宲裂馳荆肪裱唻颚鍴憓嬘叫直媱劽蛃驲嶳尼飆邝岯綘酲馲粈瘘垃捒幼髿鳱槛栂贠嵀轢釢选羂归鉕桰袊孡洦誅篙縞瓸緪镼権氎蚀瓹儕冧苏頸嚃仝眙梲奂晊覀良琯覴潕顮麀犁蜆鷗悄莇祊歳蚦莺篥湪燐圫浍膕隒窿鳱獳馜壛汪仜彼蘩蜬暀赸鯆嘎嘎嘎放放风嘎嘎嘎嘎嘎嘎嘎嘎嘎搞个211