[农学]分子生物学习题集 38页

分子生物学习题集(2)为什么λ噬菌体感染产生的溶源菌通常对其他的λ噬菌体的感染有免疫？--答案：251.答：首先感染的λ噬菌体所生成的阻抑蛋白cI会立即与随后感染的噬菌体基因组中的操纵基因结合，阻遏裂解所需的cro和N基因的表达。这样再感染不会产生烈性噬菌体表型。IS元件：()--类型：选择题--选择：(a)全是相同的(b)具有转座酶基因(c)是旁侧重复序列(d)引起宿主DNA整合复制(e)每代每个元件转座1000次--答案：252．b，d；请预测具有下列突变的λ噬菌体感染细菌的表型，并说明原因：(1)产生一个抗蛋白酶的λcⅡ蛋白的突变。(2)具有阻止蛋白结合的ΛOR2的突变。(3)使λ基因失去作用的突变。(4)编码入cI蛋白的基因突变。--类型：简答题--答案：253.答：(1)产生蛋白酶抗性cⅡ蛋白的λ噬菌体突变体会导致溶源(1ysogeny)。λ噬菌体感，染过程中，在N蛋白(从PL的左侧表达)使基因表达不在N基因下游终止前，所有的生理功能都是正常的。抗终止导致c又及cro基因下游的表达，从而cⅡ蛋白合成。由于λcⅡ蛋白的突变体具有蛋白酶抗性，它的活性并不依辞于被感染细胞的状态(健康的或病态的)，而且cⅡ蛋白并不维持cⅡ蛋白的整合。由此导致的高浓度cⅡ蛋白有助于从PRE和P1启动子的转录，因此cI蛋白(阻抑蛋白)、cro反义RNA、和整合酶(λ噬菌体整合所需)被合成。阻抑蛋白占据0R和OL操纵基因，通过自调节促进自身的合成(从PRM表达)，从而防止更多的N蛋白和Cro蛋白的合成。(2)能够阻止蛋白质结合的0R2突变体会导致裂解。0R2搬突变体能够防止Cro蛋白和阻抑蛋白与之结合。cro基因表达不需要诱导物，因此可以高水平表达。Cro蛋白也能与OR3进行非协同结合，由于有这种结合以及阻抑基因表达需要自身产物的自诱导，因此不能形成阻抑蛋白。Cro最终会关闭所有早期基因的表达,并通过诱导从PQ开始的表达从而诱发中期和后期基因的表达。综上所述；Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。(3)失活λN基因的突变令导致灭活和降解。N基因的产物是一个抗终止子，是N和cro基因外的其他基因表达所需的。其结果为大量缺陷的N蛋白和Cro蛋白的合成。因此噬菌体既不能进入溶源状态也不能进入裂解途径，DNA最终被降解。(4)编码cI蛋白的基因发生突变时会导致快速裂解。产生没有功能的阻抑蛋白不能与0R和OL操纵基因结合，由于没有了竞争，Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。组成转座子的旁侧IS元件可以：()--类型：选择题--选择：(a)同向(b)反向(c)两个都有功能(d)两个都没有功能--答案：254.a，b，c；鉴定化合物的致癌性的一个通用实验是爱姆斯试验，通过营养缺陷型菌的回复突变确定其致癌性。用λ噬菌体和E.coli设计一个实验使之能用于致癌物的检测。--类型：简答题--答案：255.答：感染E.coli之后，λ噬菌体通常会进入溶源状态。与操纵基因区域结合的λ阻抑蛋白(cI)通过自调节使噬菌体保持溶源状态。致癌复合物极有可能是诱变剂，既可能是通过在cI基因产生一个无义突变或错义突变影响阻抑蛋白的表达，又可能是通过在操纵基因序列中产生一个突变使阻抑蛋白与PRM/PR启动子的操纵基因(0R1和OR2)结合。通过简易的噬菌斑分析，发现噬菌斑的出现与待测化学物质的诱变性与致癌性有关。复制转座：()：--类型：选择题--选择：(a)复制转座子，即在老位点上留有一个拷贝(b)移动元件转到一个新的位点，在原位点上不留元件(c)要求有转座酶(d)要求解离酶(e)涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变--答案：256.a，c，d；为什么像流感病毒这样的RNA病毒的生命周期，有力地支持了以下这一论点：与其说病毒是生命有机体，不如说它是“寄生的遗传因子”\n--类型：简答题--答案：257．答：RNA病毒的复制依赖于缺失校正活性的RNA复制酶的作用，这样有利于遗传突变。而且，许多RNA病毒的基因组含有多个线性片段。如果两种不同的病毒存在于同一宿主细胞中时，重组会有助于遗传突变。因此RNA病毒的复制不是维持一个“有机物种”的蓝图，而是维持依赖于宿主细胞机制产生后代的遗传因子的感染性。非复制转座：()--类型：选择题--选择：(a)复制转座子，即在原位点上留有一个拷贝(b)移动元件到一个新的位点，在原位点上不留元件(c)要求有转座酶(d)要求解离酶(e)涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变--答案：258．b，c，e；一个转座子的准确切离：()--类型：选择题--选择：（a）切除转座子和两个靶序列(b)恢复靶DNA到它插入前的序列(c)比不准确切离更经常发生--答案：259.b；大肠杆菌噬菌体T2的染色体是一个线性DNA分子，它的两端都有冗余并且可作循环变换。解释冗余的含义并说明这些分子是怎样产生的。--类型：简答题--答案：260答：(1)末端冗余DNA分子两端的序列是一样的：5’-CATTA——————CATTA-3’3’-GTAAT——————GTAAT-5’如果ABCDEFGH代表一套遗传信息，则一段末端冗余序列可这样表示：ABCDEFGHAB，(2)不同的噬菌体颗粒具有不同的末端冗余片段，来自4种不同噬菌体的末端冗余DNA分别为：ABCDEFGHABCDEFGHABCDEFGHABCDEFGHABCDEFGH这些染色体相互问是一些不同的循环变换；T2噬菌体中所有可能的循环变换形式都以同样的频率出现。每个染色体都是序列ABCDEFGH的不同循环形式，而且每个都具不同的末端冗余。(3)这些染色体通常是在噬菌体DNA生成和被包装进λ噬菌体头部过程中形成末端冗余的。一个宿主细胞被携带染色体ABCDEFGHAB的噬菌体感染后，这样产生末端冗余：首先，复制产生这个染色体的多个拷贝；然后，这些拷贝的冗余端间发生交叉重组，产生长度为几个基因组大小的DNA分子———个链状结构：ABCDEFDHABABCDEFGHABABCDEFGHAB等等。产生ABCDEFGHABCDEFGHABCDEFGHABCDEFGH最后，这个DNA分子被包λ噬菌体头部：每个噬菌体头部从链状结构中切下恰能填满头部的一段DNA，这段DNA大于通常基因组的大小，就这个例子来说，是10个字母，而基因组大小只有8个字母。每隔10个连续的字母切割DNA就会产生一系列末端冗余而且循环变化的洲A分子：ABCDEFGHAB，CEDFGHABCE，EFGHABCDEF等等。烈性噬菌体和温和噬菌体的区别是什么?--类型：简答题--答案：261.答：一个烈性噬菌体感染了一个敏感的细菌细胞后，它立即复制并产生噬菌体特异的蛋白，这些蛋白被装配成成熟的噬菌体颗粒；20—30分钟后，宿主裂解，释放出几百个噬菌体。另一方面，温和噬菌体感染敏感细菌后有两种选择：如果能量充足(环境条件很好)时它可以进入裂解周期并且像烈性噬菌体那样裂解宿主细胞。但是，如果环境条件不好，它就使宿主细胞溶源化。在溶源化细胞中，噬菌体的基因组(原噬菌体)与细菌染色体同步复制，但大部分的噬菌体基因不表达；然而，在某个时刻，当环境条件重新好转，原噬菌体可以进入裂解周期，产生成熟的噬菌体。在λ噬菌体中，像其他温和噬菌体一样，噬菌体的基因组被整合到细菌染色体上，，就好像是一组细菌基因。在大家都很熟悉阶P1溶源菌中，原噬菌体被作为独立的质粒保持着，但仍与细菌染色体同步复制。下面哪个(些)是在非复制转座中转座酶所起的作用?()--类型：选择题--选择：(a)切除转座子(b)在靶位点产生千个交错切口(c)将转座子移到新位点(d)将转座子连到靶位点的交错切口上--答案：262.a，b，d从噬菌体MS2中提取出来的裸露染色体可以感染大肠杆菌的原生质球(去除胞壁的细菌)，这会产生和具感染能力的噬菌体一样的噬菌体颗粒。如果染色体先用RNA酶处理，就会失去感染能力；另外，如果标记感染的RNA，在子代中不出现标记。解释这些现象。--类型：简答题--答案：263.答：MS2噬菌体的染色体为单链(+)RNA，它的复制过程如下：(1)以(+)链作为模板合成一个碱基互补的（-)链；\n(2)以这条(-)链作为模板合成大量的(+)病毒链。原始的(+)链被完全保留。相应的酶是RNA复制酶，它是MS2一个基因的产物。关于在Tn10转座子上dam甲基化效应的陈述哪些是对的?()--类型：选择题--选择：(a)在IS10R反向重复序列上，一个位点的甲基化可以阻断转座酶的结合(b)PIN中的一个位点被甲基化可以刺激转座酶的转录(c)Tn10转座在dam-突变中增加1000倍(d)复制后甲基化位点立即半甲基化，允许转座酶表达和作用--答案：264.a，d从λ噬菌体中提取的DNA用两种只攻击单链DNA的外切核酸酶处理。外切核酸酶A只从突出的5’端消化DNA，而外切核酸酶B只攻击自由的3’端。这种处理对入噬菌体DNA的生物活性有什么影响?--类型：简答题--答案：265.答：λ噬菌体有一个单链5’末端(黏末端)。外切核酸酶A可消化该末端，这样可以防止环化，从而使它不能在被感染的细胞中复制。．外切核酸酶B则无效，因为λ噬菌体沿右游离的3’末端。玉米控制因子：()--类型：选择题--选择：(a)在结构和功能上与细菌转座子是相似的(b)可能引起染色体结构的许多变化(c)可能引起单个玉米颗粒的表型发生许多变化(d)在植物发育期间的不同时间都有活性--答案：266.a，b，c，d；Ds元件：()--类型：选择题--选择：(a)是自主转座元件(b)是染色体断裂的位点(c)与Ac元件相似(d)内部有缺失(e)没有末端倒位重复(f)靠一种非复制机制转座--答案：267.b，c，d；下面哪些是在反转录病毒中发现的基因?()--类型：选择题--选择：(a)gag(b)pol(c)env(d)onc--答案：268.a，b，c，d；反转录病毒LTR：()--类型：选择题--选择：(a)在病毒基因组的RNA中发现(b)整合到宿主染色体上产生(c)包含一个强启动子--答案：269.b，c；宿主染色体在反转录病毒整合位点上会发生什么?()--类型：选择题--选择：(a)4—6个核苷酸被切除(b)4—6个核苷酸在整合的一边被复制而在另一边被切除(c)4—6个核苷酸在整合的每一边都被复制(d)两个核苷酸从右边被切除(e)两个核苷酸从左边被切除--答案：270.c；下面哪些是LTR的组分?()--类型：选择题--选择：(a)U3(b)U4(c)R(d)U5--答案：271.a，c，d；反转录病毒的整合酶：()--类型：选择题--选择：（a）是一种位点特异性内切核酸酶（b）在LTR上起外切核酸酶的作用(C)在靶DNA上产生交互切口\n--答案：272.b，c；可衡量单个侵染周期中病毒数量增加的一步生长曲线对确定噬菌体和细菌相互作用基本参数是很重要的，请思考下面T4噬菌体的一步生长曲线。少量(0.1ml)T4噬菌体的悬浮液(10（+10）个／m1)与10ml大肠杆菌的培养物(10（+7）个/ml)混在一起在37℃下共培养。混合后5分钟，两份被侵染的细菌重复样品中加入氯仿振荡以杀死细菌，一份样品中加入溶菌酶破裂细胞，另一份不加酶，氯仿和溶菌酶对T4都无影响，测定所有样品中噬菌体的效价，结果如图6．1所示。(1)T4与大肠杆菌培养物混合后的初始效价为多少?(2)为什么5分钟后噬菌体的效价少于初始效价?(3)解释为什么在没有用溶菌酶处理过的样品中噬菌体效价升高比较慢而最后却达到和溶菌酶处理样品同样的水平?(4)计算每个被侵染细菌中产生多少个噬菌体?--类型：分析题--答案：273.答(1)与细菌培养液混合后噬菌体被稀释1000倍(0.1mg／100ml)，因此起始噬菌体效价为10(+7)噬菌体／ml(1010噬菌体／ml×1／1000)。(2)5分钟后噬菌体的效价较开始约低10倍。发生下降的原因是噬菌体被细菌吸收并侵染它们的DNA，因为侵染性依赖于一个完整的噬菌体，所以效价降低了；5分钟后较低的效价代表那些还未被细菌吸收的噬菌体。这种开始的效价降低(专业术语称这为侵染的潜伏期)一直令人迷惑，因为它暗示在新的噬菌体产生前亲代噬菌体必须被破坏。现在仍很难解释这个迷惑。(3)在对照样品中噬菌体效价的上升较慢，因为许多噬菌体(20—40分钟间90％的噬菌体)被困在氯仿杀死的细菌中。与溶菌酶共培养破碎了细菌，释放出被困的噬菌体。对照样品的效价最终达到受溶菌酶处理样品的水平，因为在侵染结束时，细菌自然地裂解，裂解是由噬菌体控制的，因此在寄主被破坏前，噬菌体的数目达到最大。(4)最初的混合物含有相等数目的细菌与噬菌体(10(+7)/ml)，这样有足够的噬菌体侵染每个细菌，因为开始有10(+7)个细菌/ml，最终有10(+9)噬菌体／ml，所以每个细菌有100个噬菌体。在这个例子中，每个侵染细菌的噬菌体数计算并不这样简单，通常说的细菌与噬菌体的1：1混合，并不意味着每个细菌只被一个噬菌体侵染，多数细菌只被一个噬菌体侵染，但一些可被两个或更多噬菌体侵染，同时有一些将不会被侵染。任何一种特别类型中细菌的比例可通过泊松分布算出，根据泊松分布，没被侵染的细菌比例为：Po＝e-xPo是不被侵染的可能性，x是噬菌体与细菌的比值，：当x=1时，Po＝0.37，这时只有63％的细菌被侵染，结果，噬菌体：被侵染细菌＝160.同一类原理的例子出现在生物界许多不同的现象中。--题目图片：picture--6.1.jpgδ元件()--类型：选择题--选择：（a）是具有活性的启动子(b)Ty乃转座时可留在基因组DNA后面--答案：274.a，b；Copia元件：()--类型：选择题--选择：(a)在drosophla基因组中约有20000个拷贝(b)串联排列(c)两例为定向重复（d）不被转录(e)与反转录病毒的env基因有同源性--答案：c；把少量T4噬菌体与过量的大肠杆菌细胞系B混在一起，然后在含一层厚营养琼脂细菌培养基的表面上铺一层薄的软琼脂层，细菌长成一片连续的菌苔。但在被噬菌体侵染的细菌到达的地方，噬菌体增殖并杀死周围的细菌，在云状的菌落中形成一个圆形清晰的“噬菌斑”。一种已观察到的病毒突变可以改变噬菌斑的形状，噬菌体T4的“r”突变体首先被注意到，因为它们可以在大肠杆菌B的菌落中形成更大的噬菌斑扛（r表快速溶菌)。r突变体中的rⅡ类型在大肠杆菌菌株K中并不形成噬菌斑，虽然它们可以起始侵染大肠杆菌K，但侵染不成功，不产生子代病毒。它们在大肠杆菌B上可辨的噬菌斑形态及无法在大肠杆菌K中生长的特性，很早就被用于鉴定突变的一般性质和遗传密码的三联结构。为进一步了解这些经典研究，给出8个rⅡ\n型突变子让你鉴别。首先，你做了一系列斑点测试，用高浓度的突变1和突变分别侵染两个大肠杆菌K平板，这样，每个平板上大部分细菌都被侵染了，然后你在平板上依次滴一滴每种突变型和野生型T4噬菌体使之排列成环状。作为对照，你在一未被侵染的大肠杆菌K平板上也做了同样的处理，过夜培养后你观察如图6。2的结果。这些结果很有意义，但你觉得迷惑。为了确定在清晰斑上出现的是哪种噬菌体，你从野生斑和突变5形成的清晰斑中收集一些噬菌体并检测它们的生长情况。如你所料，从野生斑上收集的噬菌体在大肠杆菌B和K上都可形成正常的噬菌斑。在突变5斑块上收集来的大多数噬菌体仍显示出突变体的性质：它们可以在大肠杆菌B上形成r噬菌斑，但不能在大肠杆菌K上生长；但来自突变5斑块上的某些噬菌体却表现为野生型：它们可在两个细胞株中形成正常的噬菌斑，野生型出现的频率很高，不可能来自反向突变(回复突变)，因为反向突变即使发生，频率也只有10-5─10-6(1)为什么斑块试验中有的突变噬菌体混合物可以生长而有的不行?(2)如果用突变3侵染大肠杆菌K重复斑块试验，预计一下有怎样的生长模式。(3)在突变5形成的清晰斑中少量野生型T4是怎样产生的?--类型：分析题--答案：答：(1)，这里所描述的斑点测试是一种古老的互补测试，可以通过这个来确定两突变体的缺失是在同一基因还是在不同的基因。如果一对突变的缺陷在同一基因，那么它们在侵染过程中不能互补(因为它们缺失了同样的基因产物)，因此，在混合感染时的生长并不比单独感染好。相反，如果一双突变体的缺陷在不同的基因上，它们就可以互相帮助它们中每个基因拷贝至少有一个功能性产物，因此可以作为突变混合体生长。用rⅡ突变体进行斑点测试的结果表明它们分为两个互补类型，突变2,5,8在同一基因缺陷，突变1,3,4,6,7在另一基因缺陷。经典的实验在许多方面都显示有两种rⅡ．基因：rⅡA和rⅡB.(2)如(1)中所述，如果你用突变3感染的大肠杆菌重复斑点实验，你将得到与利用同样基因缺陷的突变1感染的大肠杆菌K所做实验同样的模式。(3)在突变1和5中出现的少部分野生型T4是由于遗传重组产生的。生长在同一细胞中的病毒基因组在偶然情况下会发生重组。如果重组发生在突变体间，那就能产生野生型，如图A6.1所示。由于突变，对突变型问遗传互换产生的野生型比率的仔细测量，可用于确定染色体上突变的顺序和间隔。--答案图片：picture--a6.2.jpg--题目图片：picture--p6.2.jpgL1元件：()--类型：选择题--选择：(a)是病毒反转录转座子超家族的成员(b)每个哺乳动物基因组中有20000肋到50000个拷贝(c)大约长300bp(d)包括一个可读框，产物与反转录酶有同源性(e)被转录(f)有LTR--答案：a，b，d，e，f；AlU因子：()--类型：选择题--选择：（a）是病毒反转录转座子超家族的成员(b)每个哺乳动物基因组中有20000到50000个拷贝被发现(c)大约长300bp(d)包括一个可读框产物与反转录酶基因有同源性（e被转录(f)有LTR--答案：c，e；下面哪些关于地序列的描述是正确的?()--类型：选择题--选择：(a)所有A1u序列都是相同的(b)Alu序列来源于有翻译功能的7SLRNA（c）Alu序列是靠RNA聚合酶H转录的(d)Alu序列永远不会存在于结构基因中(e)由这些序列有一个区段与病毒的DNA复制起点同源--答案：b，e比较真核生物与原核生物转录起始的第一步有什么不同。--类型：简答题--答案：答：细菌中，DNA指导的RNA聚合酶核心酶由四个亚基组成(两个α亚基，一个β亚基，一个β’亚基)，核心酶与σ亚基结合产生全酶。核心酶可以催化NTP的聚合，但只有全酶能够引发转录的开始。主要的步骤是：具有特异识别能力的。亚基识别转录起，始点上游的启动子特异同源序列，这样可以使全酶与启动子序列结合力增加，形成封闭的二元复合物。关键的作用是RNA聚合酶与DNA的相互作用。真核生物中，当含TBP的转录因子与DNA相互作用时，其他因子也结合上来，形成起始复合体，这一复合体再与RNA聚合酶结合，因此主要是RNA聚合酶与蛋白质之间的作用。转录病毒侵染常常同时导致子代病毒的非致死释放和被侵染细胞内致癌的永久性基因改变。--类型：判断题--答案：正确。转座酶可以识别整合区周围足够多的序列，这样，转座子不整合到基因的中间，因为破坏基因对细胞是致死的。--类型：判断题--答案：\n错误。转录涉及模板链和编码链的分离，解释在转录中单链DNA是怎样被保护的。--类型：简答题--答案：答：转录过程中控板与编码链分离时，聚合酶覆盖了整个转录泡——从解旋位点到螺旋重新形成位点，因此单链的DNA被保护起来。与复制不同，转录不需要单链结合蛋白的参与。转座要求供体和受体位点之间有同源性。--类型：判断题--答案：正确。TnA家族的转座子通常转移三种基因：转座酶、解离酶和氨苄抗性基因。--类型：判断题--答案：正确。概括说明σ因子对启动子调节的辅助功能。--类型：简答题--答案：答：σ因子(除了RpoN)有识别启动子序列的结构域。作为游离的蛋白质；σ因子并不具备与DNA结合的构象。当σ因子与核心酶结合后构象发生改变，其N末端游离出与DNA结合的结构域。σ因子的这一调节方式是为了防止游离的σ因子与启动子区结合，而阻碍了依赖于全酶的转录启动。另外，这样也可防止形成全酶的σ因子的浓度被稀释，因为每一个细胞中，大约每三个核心酶对应于一个σ因子。Tn10高水平表达转座酶。--类型：判断题--答案：错误。什么是增效与减效突变？--类型：简答题--答案：288.答：顺式作用的启动子等调控序列的突变不是阻碍相对应的转录单元转录所必需的。然而，转录启动的效率可能会因此而下降，相邻基因的转录会减弱，这样的突变称为减效突变。若改变启动子序列的突变能提高转录启动的效率，则这样的突变称为增效突变。细菌促旋酶突变通常是致死的，但是促旋酶／拓扑异构酶I突变却可以成活，其原因何在?--类型：简答题--答案：答：促旋酶是一种拓扑异构酶(Ⅱ型)，可在DNA中引入负超螺旋，增加DNA的超螺旋数。拓扑异构酶I则能释放高度负超螺旋化的DNA。这样单个拓扑异构酶突变体能导致DNA拓扑学性质发生不可逆的改变。严重影响转录过程。由于拓扑异构酶I活性，促旋酶突变体中DNA过度松弛，阻碍了转录的进行。在两种拓扑异构酶同时发生突变时，若不使DNA暴露在使DNA损伤的外界压力下(可能会导致单链DNA分子的断裂)，则超螺旋DNA仍能保持完整的构象。解释σ因子是怎样选择专一性启动子共有序列而启动不同基因表达的(考虑对环境压力的应答)。--类型：简答题--答案：答：σ因子对不同基因的启动子同源序列有特异选择性。不同的。因子与核心酶结合形成不同的全酶，启动相应基因表达。如果一些。因子不是组成型而是受环境或发育信号所诱导的，则细胞会表现出差异的基因表达。在形成内生抱子的细菌中抱子形成的调节就是一个极好的例子。rpoN基因编码σ因子：σ54，它具有不同于已知原核生物的σ因子的特征。请与E.coli的σ因子：σ70(RpoD)作比较讨论这些特征。--类型：简答题--答案：答：\n细菌的σ因子[例如大肠杆菌中的σ70(RpoD)]作为聚合酶全酶的一部分与DNA结合，而由ropN基因编码的σ因子σ54本身具有与DNA结合的功能，使其能不依赖于核心酶与DNA结合。这样即DNA蛋白的功能更像真核生物中的转录因子，通过蛋白与蛋白的作用将核心酶导向启动子。在原核生物中，核心酶与DNA的松散结合和紧密结合之间存在一种平衡，为什么这比核心多聚酶自身形成游离与结合平衡更有利?--类型：简答题--答案：答：核心酶与DNA有高度的亲和力，只有少量的RNA聚合酶是以游离状态存在。转录起始前后，RNA聚合酶均是非特异地与基因组DNA松弛结合。如果核心酶与σ因子结合，全酶只对紧密结合位点即转录起始位点有较高的亲和力。因此，核心酶与DNA松弛结合与紧密结合的平衡反映了核心酶与全酶之间的平衡。这样才能保证有高效率的转录起始，并使通过操纵子阻遏和去阻遏的调节和基于。因子特异性的转录差异成为可能。正调控和负调控的主要不同是什么？--类型：简答题--答案：答：负调控时，调节基因的蛋白质产物是基因活性的一种阻遏物，而在正调控时，调节基因的产物是一种激活物。区别(1)启动子增效突变与启动子减效突变；(2)上游序列和下游序列。--类型：简答题--答案：答：(1)启动子内部的突变会增强或降低转录水平。(2)同启动子有关，下游序列同转录．的方向一致；上游序列同转录方向相反。解释为什么操纵子和启动子是反式隐性、顺式显性的，而编码阻碍蛋白的基因既是反式显性又是顺式显性。--类型：简答题--答案：答：操纵基因和启动子突变只影响顺式基因的表达(反式隐性的)，这是因为它们是调控序列，仅仅调节相同DNA分子上的相邻基因的表达。阻遏物基因编码可以扩散的基因产物，因此既能影响顺式又能影响反式基因的表达。为什么只有DNA双螺旋中的一条链能被正常的转录?--类型：简答题--答案：答：如果两条链都被转录，每个基因就能编码两个不同的多肽。哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的?--类型：简答题--答案：答：-35(RNA聚合酶结合位点)、-10(RNA荣合酶起始位点)启动子序列和终止子；说明因RNA聚合酶-启动子不同的相互作用如何导致不同基因的转录？--类型：简答题--答案：答：启动丰具有不同的与RNA聚合酶结合的保守序列，这些序列能分别被①与不同的σ因子结合的RNA聚合酶核心酶分子或是②不同种的RNA聚合酶分子(例如，某些噬菌体能够编码自己的RNA聚合酶，可以特异性地识别噬茵体的启动子)识别。基因组是：()--类型：选择题--选择：(a)一个生物体内所有基因的分子总量(b)一个二倍体细胞中的染色体数(c)遗传单位(d)生物体的一个特定细胞内所有基因的分子的总量--答案：d；多态性(可通过表型或DNA分析检测到)是指：()--类型：选择题--选择：(a)在一个单克隆的纯化菌落培养物中存在不同的等位基因(b)一个物种种群中存在至少两个不同的等位基因(c)一个物种种群中存在至少三个不同的等位基因(d)一个基因影响了一种表型的两个或更多非相关方面的情况(e)一个细胞含有的两套以上的单倍体基因组\n--答案：c；真核基因经常被断开：()--类型：选择题--选择：(a)反映了真核生物的mRNA是多顺反子(b)因为编码序列“外显子”被非编码序列“内含子”所分隔(c)因为真核生物的DNA为线性而且被分开在各个染色体上，所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上（d）表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译。(e)表明真核基因可能有多种表达产物，因为它有可能在mRNA加工的过程中采用不同的外显子重组方式--答案：b，d，e；下面叙述哪些是正确的?()--类型：选择题--选择：(a)C与生物体的形态复杂性呈正相关(b)C值与生物体的形态复杂性呈负相关(c)每个门的最小C值与生物体形态复杂性是大致相关的--答案：c；选出下列所有正确的叙述()--类型：选择题--选择：(a)外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA中(b)内含子经常可以被翻译(c)人体内所有的细胞具有相同的一套基因(d)人体内所有的细胞表达相同的一套基因(e)人体内所有的细胞以相同的一种方式剪接每个基因的mRNA--答案：a，c下列关于酵母和哺乳动物的陈述哪些是正确的?()--类型：选择题--选择：(a)大多数酵母基因没有内含子，而大多数哺乳动物基因有许多内含子(b)酵母基因组的大部分基因比哺乳动物基因组的大部分基因小(c)大多数酵母蛋白比哺乳动物相应的蛋白小(d)尽管酵母基因比哺乳动物基因小，但大多数酵母蛋白与哺乳动物相应的蛋白大小大致相同--答案：a，b，d；下列哪些基因组特性随生物的复杂程度增加而上升?()--类型：问答题--选择：(a)基因组大小(b)基因数量(c)基因组中基因的密度(d)单个基因的平均大小--答案：a，b，d；现分离了一DNA片段，可能含有编码多肤的基因的前几个密码子。该片段的序列组成如下：5’CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG3’3’GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC5’(1)哪一条链作为转录的模板链?(2)mRNA的顺序是什么?(3)mRNA能形成二级结构吗?(4)翻译从哪里开始?朝哪个方向进行?(5)此DNA最可能是从原核细胞还是真核细胞中分离的?--类型：分析题--答案：答：这些序列及编码区的氨基酸序列是：GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACAAGGGGCTCCTATAATAGGTGCEcoRI-43-35-10ATTTGTAGGGGATGTGGCCACATGATAGCGCGTCGAGGCATTCAGGACCGATATTGTCATATTGCCAGC+1S/DMIARRGIQDRYCHIASATGCTGCAGCGCGCCAACTTAGTTACAACTTATACGATGATTTTAAAAAAAGAATATCAAATAGCCATCMLQRANLVTTYTMILKKEYQIAICACCCGAAAGACCACCGCAAGTATCGGTACGATCGTACCAGCACACACCACAGTCGCCAGTCTGTTACCHPKDHRKKYRYDRTSHHSRQSVTAAATAATAAAGTTGATAATTAATTCACATCTACCTGGGTAACCCAGGTAGATATGAATTTTTAGAATTCKEcoRI\n以下关于假基因的陈述哪些是正确的?()--类型：选择题--选择：（a）它们含有终止子(b)它们不被转录(c)它们不被翻译(d)由它们可能因上述任一种原因而失活(e)它们会由于缺失或其他机理最终从基因组中消失(f)它们能进化为具有不同功能的新基因--答案：d，e，f;假基因是由于不均等交换后，其中一个拷贝失活导致的。选出下面关于此过程的正确叙述。()--类型：选择题--选择：(a)失活点可通过比较沉默位点变化的数量和置换位点变化的数量采确定(b)如果假基因是在基因复制后立即失活，则它在置换位点比沉默位点有更多的变(c)如果假基因是在基因复制后经过相当长一段时间才失活，则它在置换位点与沉默位点有相同数量的变化--答案：a；下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物基因组?()--类型：选择题--选择：(a)球蛋白基因(b)组蛋白基因(c)rRNA基因(d)肌动蛋白基因--答案：b，c；简述互补实验怎样区别突变是发生在lac操纵子的结构基因上还是它的调控序列上?--类型：分析题--答案：答：在Jacob和Monod最早(1961)进行的的互补实验中，他们用了新发现的F’质粒。一个带有lac操纵子F’质粒被转化到一个F-的受体菌中，产生一个稳定的部分二倍体，在其染色体和F’质粒上各带有一个lac操纵子的拷贝(注意：这个部分二倍体的基因型用lac/F’lac表示)，通过将不同的突变型导入这两个lac操纵子拷贝来研究互补关系。结构基因突变和调控基因突变两者之间重要的区别是；(1)大多数结构基因的突变仅影响该基因的表达而不影响操纵子内其他基因的表达。(2)、调控基因的突变通常影响操纵子内所有机构基因的表达。（3）机构基因编码能够扩散的产物，故lacZ+lacY-/F’lacZ-lacY+和lacZ-lacY+/F’lacZ+lacY-都具有lac+的表型。一个基因上的缺陷能够被另一个遗传元件上的野生型基因所弥补，反之亦然。这样野生型等位基因能通过顺式和反式两种作用方式表现为显性。（4）基因调控序列仅能控制统一遗传染色体上的机构基因的表达，即顺式作用。这样lacP+lacZ+/F’lacP-lacZ-部分二倍体是野生型，而lacP+lacZ-/F’lacP-lacY+不能发酵乳糖。转录仅能被野生型的启动子有效的启动，因此只有lacP+lacZ+基因时在同一个遗传元件上时β-半乳糖苷酶才能被合成。因此调控序列上的突变是顺式显性作用和反式隐性作用的。根据外显子改组(exonshuffling)假说：()--类型：选择题--选择：(a)蛋白的功能性结构域由单个外显子编码(b)当DNA重组使内含子以一种新的方式结合在一起时，新基因就产生了。(c)当DNA重组使外显子以一种新的方式结合在一起时，新基因就产生了(d)因为一些新的功能(蛋白质)能通过外显子的不同组合装配产生，而不是从头产生新功能，所以进化速度得以加快--答案：312.a，C，d；用含中性碳源(例如甘油)的液体基本培养基培养E.coli不能诱导lacZ操纵子.一小时后在培养基中加入乳糖和再隔一段时间加入过量的葡萄糖分别会对lac操纵子的表达有什么影响?--类型：分析题--答案：答：在最初的一小时内没有诱导物（乳糖)的存在，所以lac操纵于是关闭的。加入乳糖后，因为没有葡萄糖，lac操纵子经诱导表达，使乳糖能够被利用，一段时间后加入的大量葡萄糖导致分解代谢阻遏使lac操纵子重新关闭。简单序列DNA()--类型：选择题--选择：(a)与C0t1/2曲线的中间成分复性(b)由散布于基因组中各个短的重复序列组成(c)约占哺乳类基因组的10％(d)根据其核苷酸组成有特异的浮力密度(e)在细胞周期的所有时期都表达\n--答案：c，d；当lacZ-或lacY-突变体生长在含乳糖的培养基上时，lac操纵子中剩余的基因没有被诱导，解释是何原因。--类型：分析题--答案：答：(1)异乳糖是乳糖操纵子的天然诱导物，它是乳糖经过末诱导细胞中的少量β-半乳糖苷酶代谢产生的。在lac突变中完全不存在β-半乳糖苷酶，乳糖不能被代谢，在lacZ-中完全没有透性酶，因此乳糖不能进入细胞。这样，两种突变体中都不能产生异乳糖，因此操纵子中的其余基因都不能被培养基中的乳糖诱导表达。但是其它的基因能被像IPTG这样的安慰诱导物诱导，因为IPTG既能作为诱导物，又不需透性酶的帮助就能进入细胞。原位杂交：()--类型：选择题--选择：（a）是一种标记DNA与整个染色体杂交并且发生杂交的区域可通过显微观察的技术（b）表明卫星DNA散布于染色体的常染色质区（c）揭示卫星DM位于染色体着丝粒处--答案：a，c；蜜二糖是lac操纵子的弱诱导物，它通常在自己的透性酶作用下进入细胞。但如果细胞在42℃下生长，透性酶失去活性，则蜜二糖只有在lacY透性酶存在的情况下才能进入细胞。这样，42℃下lacY-和lacZ-的突变株不能在以蜜二糖为惟一碳源的培养基上生长。如何通过这种特性分离lac操纵子的组成型突变?--类型：分析题--答案：答：42℃时，一个lac+诱导型菌株不能生长在含蜜二糖的培养基上。因为乳糖透性酶不能被诱导产生(细胞内既没有乳糖，也没有蜜二糖)。任何组成型的lacOC和lacI-突变都能生长，原因是乳糖操纵子是永久性表达的，所以蜜二糖就能够被乳糖透性酶运入到细胞内。非均等交换：()--类型：选择题--选择：(a)发生在同一染色体内(b)产生非交互重组染色体(c)改变了基因组织形式，未改变基因的总数(d)在染色体不正常配对时发生（e）降低一个基因簇的基因数，同时增加另一个基因簇的基因数--答案：b，c，d，e；微卫星重复序列：()--类型：选择题--选择：(a)每一簇含的重复序列的数目比卫星重复的少(b)有一个10—15个核苷酸的核心重复序列（c）在群体的个体间重复簇的大小经常发生变化（d）在DNA重组时，是不具有活性的--答案：a，b，c；细胞器DNA能够编码下列哪几种基因产物?()--类型：选择题--选择：(a)mRNA(b)大亚基rRNA(C)小亚基rRNA(d)tRNA（e）4.5SrRNA（f）5SrRNA--答案：a，b，C，d，e，f;典型的叶绿体基因组有多大?()--类型：问答题--选择：(a)1.5kb(b)15kb(c)15kb(d)1500kb--答案：c；细胞器基因组：()--类型：选择题--选择：(a)是环状的(b)分为多个染色体(c)含有大量的短的重复DNA序列--答案：a；叶绿体基因组含：()--类型：选择题--选择：(a)两个大的反向重复（b）四两个大的反向重复(c)两个大的单一序列DNA(d)的两个短的单一序列DNA\n--答案：a；酵母线粒体基因组：()--类型：选择题--选择：(a)编码的基因数目与人线粒体基因组编码的基因数目大致相周(b)大小与人线粒体基因组大小大致相同(c)含有许多内含子，其中有些能编码蛋白质(d)含有AT丰富区(e)有几个功能未明的区域--答案：a，c，d，e；在人类线粒体基因组中：()--类型：选择题--选择：(a)几乎所有的DNA都用于编码基因产物(b)几乎所有编码蛋白质的基因都从不同的方向进行转录(c)产生惟一一个大的转录物，然后剪接加工，释放出各种RNA分子(d)大多数编码蛋白的基因被tRNA基因分隔开--答案：a，C，d；酵母的小菌落突变：()--类型：选择题--选择：(a)已失去全部线粒体的功能(b)总是致死的(c)由编码线粒体蛋白的细胞核基因突变引起(d)由线粒体基因组丢失或重徘引起--答案：a，C，d水晰的基因组比人的基因组大。--类型：判断题--答案：正确。高等真核生物的大部分DNA是不编码蛋白质的.--类型：判断题--答案：正确。反转录病毒与反转录转座子有什么不同?--类型：简答题--答案：答：反转录转座子(retrotransposon)是指通过RNA实现转座的遗传元件。反转录病毒，(retrovirus)是由一系列反转录转座子构成含RNA基因组的侵染性颗粒。假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。--类型：判断题--答案：错误gag和pol基因的蛋白产物是怎样生成的?mRNA编码的EnV蛋白是怎样生成的?--类型：简答题--答案：答：反转录病毒的所有结构蛋白均由单个初级转录物翻译合成，其中第一个合成的蛋白为Gag蛋白。为了合成Pol蛋白，Gag基因的终止密码子必须被抑制或者核糖体移动读码框。这样，Pol只是以Gag-Pol融合蛋白的状态存在，最后由病毒蛋白酶剪切。Env蛋白是通过mRNA可变剪接合成的。蛋白酶为什么对反转录病毒生活史很重要?--类型：简答题--答案：答：翻译Gag蛋白、Po1蛋白和Env蛋白之后，病毒蛋白酶分别将其切割成两到三个有活性的病毒蛋白片段。在有丝分裂中，端粒对于染色体的正确分离是必要的。\n--类型：判断题--答案：错误。大多数看家基因编码低丰度的mRNA。--类型：判断题--答案：正确。列出转化病毒正链RNA掺入到宿主双链DNA的详细过程。--类型：简答题--答案：答：(1)病毒颗粒将正链RNA基因组携带到宿主细胞中。(2)宿主tRNA与病毒RNA下游的U5区域进行退火。(3)反转录酶以tRNA作为引物开始合成负链DNA。(4)反转录酶终止在模板的末端，形成强终止负链DNA。(5)反转录酶的RNA、酶H活性消化对应于R区的模板RNA的5’末端(RNA酶H能降解DNA与RNA杂合双链中的RNA链)。(6)强终止负链DNA与病毒3’末端的R区退火。(7)反转录酶催化强终止负链DNA延伸成一长负链DNA，而且其5’末端仍保留tRNA引物。（8)切除tRNA引物。(9)大部分病毒RNA被降解。(10)由剩下的病毒RNA引发强终止正链DNA的合成，注意这一过程同样是由反转录酶以DNA作为模板催化完成。(11)强终止正链DNA与长负链DNA3’末端的U5区退火配对。(12)正链不断延伸直至全部合成。(13)负链合成以5’端U3元件的3’末端合成。所有真核生物的基因都是通过对转录起始的控制进行调控的。--类型：判断题--答案：错误。所有高等真核生物的启动子中都有TATA盒结构。--类型：判断题--答案：错误。噬菌体整合到宿主基因组后4-6个宿主DNA的核苷酸被复制，这是为什么?这与转座子插入新位点有何相似之处?另外，两个核苷酸从5’U3的5’和3’被切除，这意味着遗传信息从反转录病毒中被丢失吗?--类型：简答题--答案：答：由于反转录病毒整合酶(reboviralintegase)在整合位点切开一个交错切口造成靶位点重复。插入之后，填补切口产生重复序列。转座酶在靶位点产生同向重复序列。病毒基因组每侧两个核苷酸的缺失并不会导致类似基因组另一端的序列的其他拷贝的丢失。只有活性染色质转录的基因对DNaseI敏感。--类型：判断题--答案：错误。反转录病毒怎样获得像onc基因这样的细胞基因?获得此类基因会对反转录病毒基因产生影响吗?一个反转录病毒怎样才会丢失如pol和env这样的重要的基因而复制?--类型：简答题--答案：答：当整合的原病毒和邻近细胞基因之间出现缺失，反转录病毒可获得细胞基因。原病毒启动子起始的转录产生一个融合mRNA，剪接之后被包装进病毒颗粒。当病毒获得宿主DNA时可丢失诸如pol或env等反转录病毒基因，但这样的病毒不能自身进行复制，必须依赖于野生型病毒的辅助。内含子通常可以在相关基因的同一位置发现.--类型：判断题--答案：正确。描述酵母Ty元件的结构。它与反转录病毒有何相似之处?为什么它不形成感染粒子\n--类型：简答题--答案：答：Ty元件的每一端均是一个同向重复序列，称为δ元件(deltaelement)。Ty元件有两个可读框，与反转录病毒的gag和pol基因具有同源性。第二个可读框的翻译需要核糖体的移码，正如反转录病毒的pol基因。Ty元件缺少env基因，因此不产生感染性颗粒。40％以上的，Drosophilacirilis基因组是由简单的7bp序列重复数百万次组成.--类型：判断题--答案：正确。你如何证明Ty元件在转座时经历了一个RNA中间体?--类型：简答题--答案：答构建一个含有内含子与标记δ元件的人工Ty元件。采用诱导型GAL启动子合成大量Ty元件的mRNA。从而使这一元件整合到基因组新位点的转座频率增加。检测新插入的Ty元件。若它们具有标记δ元件但缺少内含子，则它们必然是通过RNA中间体。卫星DNA在强选择压力下存在。--类型：选择题--答案：错误。FB元件与copia因子有何不同?--类型：简答题--答案：答：FB两侧为反向重复序列，而copia两侧为同向重复序列。列出病毒和非病毒超家族反转录转座子之间的4种差异.--类型：简答题--答案：答：病毒超家族成员含有长末端重复序列LTR、编码反转录酶或整合酶的可读框以及内含子，但非病毒反转录转座子并不含有这些序列。同样，病毒反转录转座子的整合会在靶位点产生一段4-6个核苷酸，的短重复序列，而非病毒反转录转座子则产生7-21个核苷酸重复序列。为什么说Alu元件可能作为DNA复制的起点?有什么理由不支持这种假说呢?--类型：简答题--答案：答：A1u序列含有14个核苷酸，与一些病毒的DNA复制起点相近，这意味着A1u序列，可能作为一个复制起点。然而，Alu在基因组中的数量超过了估计的复制起点数量的十倍。描述两种转座子引起基因组重排的方式。--类型：简答题--答案：答：转座子转座时能够导致宿主序列的缺失、重复或插入。另外，转座子通过宿主重组系统导致基因组重排。IS元件整合到靶位点时会发生什么?--类型：简答题--答案：答：由于在转座子插入之前已产生一个交错切口，而且这一交错切口在转座子插入后被填补，因此导致靶位点序列重复。一个复合转座子和一个IS元件之间的关系是什么?。--类型：简答题--答案：答：复合转座子在两个末端有IS序列列出一个转座子插入到一个新位点所要求的步骤.--类型：简答题--答案：答：首先，在靶位点处产生一个交错切口，切出转座子。接着，转座子与靶位点连接。最后，填补插入位点两侧的单链区。当(1)DNA在两个定向重复之间(2)DNA在两个反向重复之间发生重组的效应各是什么?\n--类型：简答题--答案：答：同向重复序列之间的重组会导致重复序列之间DNA序列发生缺失。反向重复序列之间的重组则会使重复序列之间的DNA序列发生倒位。在什么过程中会形成一个共整合体?它的结构是什么?--类型：简答题--答案：答：在复制转座中会形成共整合体(cointegrant)，其中含有两个方向相同的转座子拷贝，并由原有复制子隔开。Tn10元件只有在自己的转座酶基因具有活性时发生转座(与利用基因组中Tn10元件表达的转座酶的情况正好相反)，这种偏爱的原因是什么?--类型：简答题--答案：答：转座酶一旦合成就立即与DNA牢固结合，以免扩散到基因组的其他元件中。有假说认为游离的转座酶半衰期很短，但若与DNA结合后较为稳定。因为未结合状态是不稳定的，所以游离的转座酶不会扩散到其他位点。什么是杂种不育?是什么引起的?--类型：简答题--答案：杂种不育是现在果蝇特定品系杂交后代中的一系列染色体畸形。这些染色体畸形是由一个亲本染色体中转座P元件活性引起的。如果母本中不含P元件，则会激活P元件活性，产下的卵细胞缺失P元件编码的转座阻遏蛋白。DNaseI的超敏位点：()--类型：选择题--选择：(a)对消化的敏感程度比一般染色质强约100倍以上(b)是一些不带有核小体的DNA区域(c)是一些不带有蛋白的DNA区域(d)通常仅在基因正在表达时出现(e)能在启动子、DNA复制起点、着丝粒区发现(f)能通过DNA复制得以保持--答案：a，b，d，e，f;即使不携带癌基因，反转录病毒依然会导致癌变转化。列举这种现象发生的三种方式--类型：简答题--答案：答：野生型反转录病毒在插入宿主染色体时能够引至癌性转化。结果引起了c-onc基因的不正常表达。如果前病毒插入到c-onc基因的第一个内含子（并且插入方向与该基因方向相同），c-onc基因将被反转录病毒LTR的强启动子所转录。这就提高了c-Onc蛋白的水平，使c-onc失去了正常的转录控制。如果前病毒以与基因相反的方向插入，它会激活一个转录c-onc的偶然启动子。如果病毒的增强子激活了正常c-onc基因的启动，那么即使是插入到c-onc的下游也会刺激c-onc基因的表达。交配型转换反应：()--类型：选择题--选择：（a）涉及将DNA盒从一个沉默基因座(HML或H0MR)转移到MAT基因座(b)通常导致交配型的改变(c)不发生在单倍体细胞中--答案：a，b；简述大肠杆菌的插入序列，并指出它们对自发突变的重要性。--类型：简答题--答案：答：插入序列(IS)是可以转座的遗传元件，它们只插入自我复制的DNA。中，如细菌和噬菌体的染色体及质粒。大肠杆菌中，有几种不同的IS元件，长度都是0.7—1.5kb.\n每种都有特定核苷酸序列，有的编码转座酶，负责启动特定IS的转座。一般来说，每个IS的两端都有一对短的反向重复，长约9-41bp(图A8.1)，转座酶似乎就是通过识别这些反向重复序列起始转座的;也就是说，特异的转座酶和反向重复序列对转座都很重要。转座的另一个性质是每个IS的两端都与宿主DNA的短正向重复序列(3—13bp)相连；这是宿主DNA上的靶位点，在转座过程中该位点被复制。转座时，IS向基因组中新的位置随机地移动。通常，它插入一个结构基因产生突变表型，有时是因为编码序列受到阻断，有时则因为IS元件含有多种转录或翻译的终止信号。另外,IS赐可插入操纵子的操纵基因-启动子区域，导致整个操纵子被关闭，但偶尔操纵子的表达也会变为组成型。当IS含有一个正确定向的启动子时，可以转录细菌操纵子.因为这个启动子不受调节细菌操纵子的正常调控蛋白调控，产生的效果类似于操纵基因组成型突变。所以，IS元件的转座是自发突变的一个重要来源。必须意识到这些突变不能被碱基类似物或移码突变诱变剂诱导和回复。大肠杆菌中有几种不同的IS元件，拷贝数在1—5。沉默基因座：()--类型：判断题--选择：(a)因为沉默子区域的存在与MAT基因座不同（b）在SIR基因产物的作用下，保持转录失活(c)存在几个DNaseI超敏位点(d)由与DNA复制起点结合在一起(e)在交配型转换过程中作为受体(f)因为染色质结构保持转录失活--答案：a，b，c，d，f；某公司要招聘技术人员加入他们的抗病毒小组帮助设计新药对抗艾滋病病毒感染。为了得到这份工作，要求应聘者设计一个方案来阻止艾滋病病毒基因表达但不影响宿主基因的表达。你能设计吗?--类型：分析题--答案：答：答案是多种多样的，思路应该是：先考虑病毒复制中哪些酶是关键酶?所有这些酶均是宿主所需的吗?你需要哪些分子阻遏酶活性?(提示：所有酶起作用时，都心须与底物结合。与底物有细微差别的底物类似物(substrateanalog)也有可能与酶结合)HO基因是交配型转换所必需的，它：()--类型：选择题--选择：（a）编码一个位点特异的DNA内切核酸酶（b）它的启动子中含有许多不同的功能元件（c）任何时候在任何酵母细胞中都表达（d）编码可以切割沉默基因座，而对MAT没作用的蛋白--答案：a，b锥虫：()--类型：选择题--选择：(a)是在昆虫与哺乳动物宿主问交替生活的单细胞寄生虫(b)由多种表面糖蛋白(VSG)分子组成的包被包裹(c)可同时表达多种VSG基因(d)在哺乳动物体内时，丢失它们的VSG包被(e)通过每1—2周改变VSG，从而逃避的宿主的免疫反应(f)可以产生10种不同的VSG分子--答案：a，b，e；哪些有关VSG基因的叙述是正确的?()--类型：选择题--选择：（a）VSG基因产物可发生免疫交叉反应(b)锥虫基因组中含有多个VSG基因(c)VSG基因成簇存在于一条染色体上(d)它们可以位于端粒的附近或染色体的内部(e)所有位于端粒附近的VSG基因是可被转录的，而所有位于染色体内部的VSG基因则是转录失活的--答案：b，d；假定你正在研究原核生物转座子Tn10，并已设计出一个很好的方法来确定Tn10在转座期间是否是通过复制还是不干涉DNA复制直接移动。你的想法是根据这两种机制的主要不同点：如果不复制那么转座子的两条亲链将同时移动；如果复制则有一条亲链移动(如图8．1)你打算把来自两个不同Tn职的链经退火后都标记上。为了把这些杂种Tn10双螺旋足够地分配到细胞中。你用了含有Tn10的λ噬菌体DNA，它既能在体外操作又能包在病毒壳内成为有侵染力的噬菌体。你决定使用一个因为其他突变而失去活性的噬菌体基因组，因此它就不会复制整合，而且最终可被除去，这样噬菌体基因组可被忽略。你的噬菌体DNA在同样位点插入了稍微不同的Tn10。两种Tn10都含有四环素抗性基因和乳糖代谢基因(lacZ)，但其中一种由于突变使lacZ基因失。这种差异为追踪两种Tn10提供了一个很方便的方法，因为lacZ+细菌克隆(与适当的底物共育时)会变蓝，而lacZ-克隆则还是白色。你把两种噬菌体DNA的混合物变性后退火，得到两份相等的杂交双链与纯合双链的混合物(图8．2)然后你将混合物包装到噬菌体外壳中，侵染lacZ-细菌，并把被侵染细菌涂布在含四环素和可产生有色底物的平板上。一旦噬菌体DNA进入了细菌，转座子将进入细菌基因组(频率很低)，给细菌带来四环素抗性。获得一个Tn10的稀有野生细菌,可以在选择条件下生存并形成克隆。统计大量这样的克隆会发现有25％为白色，25%为蓝色，50％为蓝色部分与白．色部分的混合物；(1)解释每种细菌克隆的来源并确定结果是否能说明Tn10复制或不复制的转座机制(2)你使用了一种无法修复DNA错配的细菌苗株作为受体，来做这些实验。如果你用可以修复错配的细菌苗株作为受体那么结果会有什么不同?(3)λ噬菌体DNA通过位点专一重组整合到细菌基因组上要比转座更常见，如果你用能复制但不能整合的λ噬菌体突变体结果有什么不同?\n--类型：分析题--答案：答：(1)所有菌落肯定是由Tn10转座进入细菌基因组产生的，因为存活依赖于Tn10所携带四环素抗性基因的存在。主要观察到的是出现了蓝色和白色的混合菌落，因为混合菌落的机率很高而转座机率很低，所以混合菌落在单转座中是很常见的。可复制机制每次只能转移亲代双螺旋中的一条链，产生蓝色或白色菌落，这全看哪条链被转移，而非复制机制可转移杂合双链的两条链，并复制分离成姐妹细菌，产生混合菌落(一旦细菌在细菌培养基中被分离，最初被感染细胞的子代被限制在邻近地方共同生长形成菌落。如果第一次分裂产生不同姐妹细菌，那它们的子代会长在一起产生一个包含两种不同细菌的单一菌落)。纯的蓝色或白色菌落是由同源双链参与转座产生的。蓝色，白色和混合菌落的比例和从异源双链(使混合菌落数增加)与同源双链(使纯菌落数增加)混合物的比例所预计到的一样。(2)每个杂合双链对应lacZ基因突变的位置都含有一个错配DNA区域。如果这些杂合双链被导入可修复这种错误的细菌，那么混合菌落数将下降。关键是，一次修复可将一个杂合双链转变成一个纯合双链。如果错配修复对两条链的修复机会是等同的，那白色与蓝色菌落的出现频率同样上升。(3)如果你用了整合态的噬菌体基因组，那么存活的菌落来自位点专一重组，这是比转座更有效的一种重组。位点专一重组可整合噬菌体基因组的双链。这样，蓝色，白色和混合菌落的比例和非复制转座一样。事实上，在实际确定转座机制的实验中，整合态的λ噬菌体被作为正对照和转座结果相比较，两个实验的结果一致。--题目图片：picture--p8.1.jpg--题目图片：picture--p8.2.jpg下列关于VSG基因转录活性的叙述是正确的有：()--类型：选择题--选择：(a)只有在表达位点的VSG基因被转录(b)ELC(expressionlinkedcopy)总是位于端粒附近(c)将内部的VSG基因拷贝复制到表达位点可以改变表达位点的VSG基因(d)不需经过基因复制，端粒附近的VSG基因就可以被激活(e)少数情况下，通过不同的VSG基因拷贝在表达位点组装可以产生一个新的VSG基因(f)以上都正确--答案：F;位于ELC的VSG基因有一个不寻常的结构，包括：()--类型：选择题--选择：(a)不含限制性内切酶切割位点的5’无义区(b)由一个简单序列重复多次组成的3’无义区(c)以上都正确(d)以上都不正确--答案：C；哪些有关免疫球蛋白基因重排的叙述是正确的?()--类型：选择题--选择：（a）所有物种中V基因的数目是一样的（b）J是恒定区的一部分（c）各部分连接时，将产生缺失或重排(d)当一个等位基因中发生有意义的重排时，另一个等位基因也发生重排--答案：C；分析比较细菌转座子的结构与特点。--类型：简答题--答案：答：1974年，随着发现与抗生素抗性有关的基因可以在质粒与细菌的染色体之间转移，科学家发现了转座子。转座子比IS元件大很多(一般为2—20kb)，它们至少含有一个基因，给宿主带来可遗传的标记，一般是对一种或多种抗生素的抗性。这是一种非常有用的性质，因为每种质粒可以用一种转座子“标记”，这样通过对药物的抗性表型可以简单地检测质粒的存在和转移；同样，可以轻易地观察到转座。转座子Tn5(图A8.2)长5.7kb，是一种结构最简单的转座子;它由三个成分组装而成：一个长中心区(2—7kb)，含有卡那霉素的抗性基因，两端为一对IS元件，每个长1.5kb，方向相反。其他的转座．子两端为不同的IS元件，有时两个IS同向。这些转座子的转座类似IS元件，转座过程中宿主的一个序列或DNA靶位点被复制。发生转座首先是因为任意一个IS序列或两个IS序列同时起作用，编码一个转座酶(在某些元件中，如Tn5，一个IS只有部分功能，不能编码一个有活性的转座酶);其次，转座子两端通常有一对与IS特异相应的反向重复序列：无论IS元件是正向还是反向的，这些末端重复序列都存在。还有一种可能性：任一对IS元件可以相互作用使它们之间的任意序列转座，这样任一个基因都可以在两端连上两个同样的IS元件成为转座子;这个性质已被用构建重组DNA分子。Tn5因为其组件的组成被称为集成转座子。其他转座子，如复杂的转座子的结构是不同的；它们两端不是一对IS而是一对反向重复，编码转座所需蛋白的基因位于转座子的中心区。\n--答案图片：picture--a8.2.jpg--------------------------------------------------------------------------------以下关于抗体类型转变的叙述哪些是正确的?()--类型：选择题--选择：(a)每种重链具有不同的功能(b)类型转变的次序按染色体上重链排列顺序进行(c)一旦一种类型转换发生，其他的转换将不再进行(d)也可通过可变剪接改变重链--答案：a，b，d锌指蛋白与锌的结合()--类型：选择题--选择：（a）是共价的(b)必须有DNA的存在(c)通过保守的胱氨酸和组氨酸残基间协调进行(d)位于蛋白质的α—螺旋区域--答案：c；锌指蛋白与DNA的结合()--类型：选择题--选择：(a)位于DNA大沟(b)通过“锌指”的C端进行(c)利用蛋白的—螺旋区域(d)每个“指”通过形成两个序列特异的DNA接触位点(e)通过“指”中保守的氨基酸同DNA结合--答案：a，b，c，d甾醇类受体转录因子()--类型：选择题--选择：（a）结合的激素都是相同的(b)与DNA的结合不具序列特异性(c)与锌结合的保守序列不同于锌指蛋白(d)通过第二“指”C端的氨基酸形成二聚体(e)参与转录激活，与DNA和激素结合分别由不同的结构域完成--答案：c，e；糖皮质激素类的甾醇受体()--类型：选择题--选择：(a)是同源二聚体(b)所结合的DNA回文序列都不相同(c)结合的回文序列相同，但组成回文序列两段DNA间的序列不同(d)RXR受体通过形成异源二聚体后与同向重复序列结合(e)这类受体存在于细胞核中--答案：a，c，e；同源异型域蛋白()--类型：选择题--选择：(a)形成具有三个α—螺旋的结构(b)主要通过α—螺旋3和N端的臂与DNA接触(c)与原核生物螺旋—转角—螺旋蛋白(如阻遏物)的结构很相似(d)通常存在于细胞核中(e)在果蝇早期发育调控中起重要作用--答案：a，b，c，e；HLH蛋白()--类型：选择题--选择：(a)在序列组成上与原核生物螺旋—转角—螺旋蛋白具有相关性(b)通过环区与DNA结合(c)形成两个α—螺旋与DNA的大沟结合(d)由形成两性螺旋，其中疏水残基位于螺旋的一侧(e)以上都不是--答案：d；bHLH蛋白()--类型：选择题--选择：(a)在环中含有保守的碱性氨基酸(b)不能形成同源二聚体(c)非诱导表达\n(d)通过它们碱性区与HLH相互作用(e)只有与HLH形成异源二聚体后才与DNA结合(f)以上都不是--答案：F;以下关于亮氨酸拉链蛋白的叙述哪一项是正确的?()--类型：选择题--选择：(a)它们通过保守的亮氨酸残基与DNA结合(b)它们与HLH蛋白相似之处是：它们都具有相邻的DNA结合结构域和二聚化结构域(c)Jun蛋白可以形成同源二聚体而Fos蛋白不可以(d)由Fos／Jun复合物与Jun/Jun复合物结合的DNA序列不同(e)Fos／Jun与DNA的结合比Jun/Jun牢固--答案：b，c，e；选出所有正确的选项：()--类型：选择题--选择：(a)基因必须经过完全的甲基化才能表达(b)具有活性的DNA是非甲基化的(c)随着发育阶段的改变，DNA的甲基化也要发生变化(d)在DNA复制过程中，通过识别半甲基化的酶，甲基化得以保存--答案：b，c，d；下列哪些转录因子含有TBP?()--类型：选择题--选择：(a)B(b)A(c)SLl(d)TFⅡD(e)TFⅢB(f)UBFl--答案：c，d，e；下列哪些转录因子是装配因子?()--类型：选择题--选择：(a)SPl(b)TFⅢB(c)TFⅡH(d)以上都不是--答案：d；以下关于TBP的陈述哪些是正确的?()--类型：选择题--选择：(a)TBP诱导DNA发生弯曲(b)TBP结合于DNA双螺旋的大沟(c)TBP通过与不同的蛋白结合来识别不同的启动子(d)TBP与聚合酶I、聚合酶Ⅱ和聚合酶的共同亚基作用--答案：a，c，d；TATA框存在于()--类型：选择题--选择：(a)聚合酶Ⅱ识别的所有启动子中(b)聚合酶Ⅱ识别的大部分启动子中(c)聚合醇Ⅱ识别的极少数启动子中(d)聚合酶Ⅲ识别的所有启动子中(e)聚合酶Ⅲ识别的大部分启动子中(f)聚合酶Ⅲ识别的极少数启动子中--答案：b，fRNA聚合酶Ⅱ的C端结构域(CTD)的磷酸化与()相关--类型：选择题--选择：(a)与起始前复合体的结合(b)TFⅡH的激酶活性(c)TFⅡD中特异TAF蛋白的存在(d)从起始聚合酶到延伸聚合酶的转换(e)起始因子TFⅡA，TFⅡB及TFⅡD的释放--答案：b，d，e；下列哪个(些)情况能解释为什么一些基因在它们的转录因子存在时并不总是处于活性状态?()--类型：选择题--选择：(a)转录因子结合位点的邻近序列(b)有其他蛋白的结合(c)转录因子结合位点的染色质结构状态(d)缺少共激活蛋白(e)以上都是--答案：e真核细胞中的RNA聚合酶仅在细胞核中有活性。\n--类型：判断题--答案：错误。在RNA的合成过程中，RNA链沿3’到5’方向延长。--类型：判断题--答案：错误。候选三磷酸核苷通过对生长中RNA链的α磷酸的亲和攻击加到链上。--类型：判断题--答案：正确。核不均一RNA是mRNA和rRNA的前体而不是tRNA的前体.--类型：判断题--答案：错误。密码子AUG专门起mRNA分子编码区的终止作用。--类型：判断题--答案：错误。fMet的tRNA的反密码子是TAC。--类型：判断题--答案：错误。细菌细胞用一种RNA聚合酶转录所有的RNA，而真核细胞则有三种不同的RNA聚合酶。--类型：判断题--答案：正确。转录因子具有独立的DNA结合和转录激活结构域。--类型：判断题--答案：正确。每个转录因子结合位点被单个转录因子识别。--类型：判断题--答案：错误。纠正下列一段话中的错误：在E.coli中，通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互补的dNTP同δ亚基结合，然后是第二个dNTP通过与第一个dNTP形成2’—5’磷酸二酯键而结合上。当生成的RNA链约有12个核苷酸长度时，β亚基脱离DNA聚合酶，RNA链在全酶的作用下继续延伸。当DNA聚合酶在RNA链上遇到终止密码子时，转录作用停止。--类型：判断题--答案：此段叙述中的错误部分用下划线标出，并在后面进行更正：在E.coli中，通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互补的dNTP同δ亚基结合，然后是第二个dNTP通过与第一个dNTP形成2’→5’磷酸二酯键而结合上。当生成的RNA链约有12个核苷酸长度时β’亚基脱离DNA聚合酶，RNA链在全酶的作用下继续延伸。当DNA聚合酶在RNA链上遇到终止密码时，转录作用停止。操纵基因→启动子；dNTP→NTP；δ亚基→β亚基；dNTP→NTP2’-5’→3’-5’；β→σ；DNA→RNA；全酶→核心酶；DNA→RNA；RNA→DNA；终止密码→终止信号\n真核生物的mRNA加工过程中，5’端加上（），在3’端加上（），后者由（）催化。如果被转录基因是不连续的，那么，（）一定要被切除，并通过（）过程将（）连接在一起。这个过程涉及许多RNA分子，如Ul和U2等，它们被统称为（）。它们被统称为（）。它们分别与一组蛋白质结合形成（），并进一步地组成40S或60S的结构，叫（）。--类型：填空题--答案：帽子结构；多腺苷化尾；po1y(A)聚合酶；内含子；剪接；外显子；snRNA；snRNP；剪接体胶原蛋白通过在不同的脯氨酸残基上添加（）基团而被化学修饰。这个反应是由两种酶催化的，它们是（）和（）。其他的一些蛋白质被（）磷酸化。蛋白质上添加寡聚糖的过程叫（）．而添加脂肪酸链则叫（）。O—寡聚糖是一种同（）或（）残基上氧连接的寡聚糖，而N—寡聚搪是通过与（）上的氮原子连接而成。N—寡聚糖又是从同一种叫做（）脂的前体寡聚糖衍生而来。--类型：填空题--答案：羟基；脯氨酰—3—羟基化酶；脯氨酰—4—羟基化酶；蛋白激酶；糖基化作用；酰基化作用；丝氨酸；苏氨酸；天冬酰胺；长醇阿黑皮素原是（）被切割以后可以产生很多活性蛋白质的一个例予。如（）之类的RNA病毒也能合成类似的结构物。蛋白水解过程也涉及细胞外毒素的活性，如蜜蜂的（）和动物激素的活性，如（）和（）。--类型：填空题--答案：多聚蛋白；脊髓灰质炎病毒；布鲁菌素；胰岛素；胰高血糖素剪接小体是()--类型：选择题--选择：(a)由多种snRNP组成的结构(b)大小为40S一60S(c)一种在拼接中起作用的结构(d)以上都不正确(e)RNA加工的一种形式--答案：b,c在O—连接寡聚糖中，直接同多肽相连的糖基是()--类型：选择题--选择：(a)甘露糖(b)N—乙酰葡糖胺(c)C—半乳糖或N—乙酰半乳糖胺(d)半乳糖或N—乙酰葡萄糖胺(e)葡萄糖--答案：c；正常情况下，同乙酰化蛋白质氨基末端的甘氨酸相连的脂肪酸是()--类型：选择题--选择：(a)软脂酸(b)油酸(c)十四酸盐(肉豆蔻酸盐)(d)乙酰基(e)以上都对--答案：c；在阿黑皮素原中被识别和切割的氨基酸残基是()--类型：选择题--选择：（a）赖氨酸和精氨酸(b)谷氨酰胺和甘氨酸(c)赖氨酸和天冬酰胺(d)a和b，其中a是丙氨酸，天冬氧酸或甘氨酸，b是丙氨酸或脯氨酸(e)天冬酰胺和赖氨酸--答案：c;哪些有关剪接位点的叙述是正确的?()--类型：选择题--选择：（a）剪接位点含有长的保守序列(b)5’与3’剪接位点是互补的(c)几乎所有的剪接位点都遵从GT—AG规律(d)剪接位点被保留在成熟的mRNA中(e)内含子3’与5’剪接位点间的距离可以很大(f)一个内含子的5’剪接位点只能与同一个内含子的3’剪接位点作用，杂合内含子不能被剪接--答案：c,e；分支位点核苷酸()--类型：选择题--选择：(a)总是A（b）的位置在内含子内是随机的(c)位于一个非严格保守的序列内(d)通过与3’剪接位点作用起始剪接的第一步(e)在剪接的结于步完成后与内含子中另外三个核苷酸共价连接\n--答案：a,c,e；转酯反应：()--类型：选择题--选择：（a）不需要ATP(b)拆开一个化学键后又形成另一个化学键(c)涉及对糖磷骨架0H基团的亲核攻击(d)以上都正确--答案：d；选出所有有关snRNA的正确叙述：()--类型：选择题--选择：(a)snRNA只位于细胞核中(b)大多数snRNA是高丰度的(c)snRNA在进化的过程中是高度保守的（d）某些snRNA可以与内含子中的保守序列进行碱基配对(e)以上都正确--答案：e；参与前体mRNA剪接的snRNP()--类型：选择题--选择：（a）与一组Sm蛋白结合(b)含有独特的蛋白(即不存在任何其他snRNP的蛋白)(c)其RNA和蛋白组分都是其作用不可缺少的(d)主要通过蛋白组分与前体mRNA结合(e)以上都正确--答案：a,b,c；剪接小体的组装()--类型：选择题--选择：(a)按有序的途径一步步完成(b)涉及snRNP与水溶性蛋白(即不是任何snRNP组分的蛋白)(c)不需要ATP(d)伴随着多次snRNP的重组合(e)以上都正确--答案：a,b,d；SR蛋白()--类型：选择题--选择：(a)家族中的成员都具有一个或多个精氨酸和丝氨酸丰富区(b)分别与特异的RNA序列结合(c)形成一个蛋白质连接桥U2AF和U1snRNP(d)都需要U1snRNP(e)可帮助识别外显子(f)以上都正确--答案：a，c，d，e；Ⅱ型剪接与前体mRNA剪接的相似之处是()--类型：选择题--选择：(a)两种内含子具有相似的剪接位点：(b)它们都通过向样的机制进行剪接，其中涉及套索中间体(c)都由肋A催化进行(d)都需要UlsnRNP(e)都可以在没有蛋白的情况下进行(f)两种内含子都形成精细的二级结构--答案：a，b，c；可变剪接()--类型：选择题--选择：(a)与“组成型”剪接的机制完全不同(b)可以从单个基因产生多种同功蛋白，即添加或缺失少数氨基酸的变异蛋白(c)涉及不同的5’和3’剪接位点(d)被用于在不同组织和不同的发育阶段产生不同的蛋白质(e)可以跨越外显子，也涉及可变外显子或保留内含子--答案：b，c，d，e；多数情况下，剪接发生在同一个RNA分子内部。但反式剪接()--类型：选择题--选择：（a）已被证实存在于天然和合成的内含子中(b)涉及前体mRNA与独立的SLRNA间的剪接(c)与顺式剪接的机制完全不同(d)有时是锥虫与线虫的剪接方式(e)将同一个5’外显子(SLRNA)剪接到所有mRNA上(f）只需要U1与U5snRNP\n--答案：a，b，d，e；tRNA中的内含子()--类型：选择题--选择：(a)通过两步转酯反应被切除(b)具有与反密码子互补的序列(c)都形成相似的二级结构(d)由蛋白酶(核酸内切酶和连接酶)切除(e)在5f和3P剪接位点的序列是保守的--答案：b，c，d在前体mRNA上加多聚腺苷酸尾巴()--类型：选择题--选择：(a)涉及两步转酯机制(b)需要保守的AAUAAA序列(c)在AAUAAA序列被转录后马上开始(d)通过一个多组分复合物的逐步组装进行(e)由依赖于模板的RNA聚合酶催化--答案：b，d；真核细胞mRNA前体的长度由()--类型：选择题--选择：(a)转录终止位点形成的茎环结构决定其(b)其3’末端的聚腺苷酸化位点所决定，转录产物在此位点被切割并加上poly(A)(c)在终止位点与。RNA聚合酶Ⅱ结合的终止蛋白决定(d)将所有初始转录产物加工成最终长度的前体mRNA的核酸外切酶决定(e)加帽、聚腺苷酸化及内含子的剪接所决定--答案：b；下列关于mRNA降解的正确叙述是()--类型：选择题--选择：（a）原核mRNA的降解由核酸内切酶从核糖体翻译的后面5’端开始(b)原核mRNA的降解通常由核酸外切酶从3’→5’进行(c)真核mRNA的降解依赖于末端序列中多个特异性失活元件(d)真核mRNA的降解依赖于po1y(A)核糖核酸酶的作用(e)所有的mRNA在5’末端的降解通常涉及核糖核酸内切酶活性--答案：a，b，c，d，e；可变剪接能增加转录产物，这些转录产物问的区别在于()--类型：选择题--选择：(a)mRNA的5’非转录区(b)mRNA的编码区(c)mRNA的3’非转录区(d)上述全是(e)上述全不是--答案：d；在哺乳动物细胞中，RNA编辑()--类型：选择题--选择：（a）可以在转录后水平改变一个基因的编码能力(b)能在小肠细胞中的apo—BmRNA的中部插入一个终止密码子，在肝细胞中却不能(c)通常使每个mRNA都发生很大的变化(d)通过脱氨基可以改变特定的核苷酸--答案：a，b，d；在锥虫的线粒体中，RNA编辑()--类型：选择题--选择：(a)被广泛用于改变许多mRNA的编码能力(b)只在每个MRNA上改变单个核苷酸(c)只加上G和缺失G(d)由向导RNA指导进行，其中向导则A与编辑前mRNA上被编辑区域相邻的碱基互补(e)所用的向导RNA上有一小段区域与被编辑的mRNA互补。(f)进行的方向与转录方向相同--答案：a，d，e产生单个碱基变化的突变叫（）突变，如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的（），并不会造成什么影响，这就是（）突变。如果改变了氨基酸残基的密码，这就是（）突变。这种突变对蛋白质功能影响程度要根据被改变的氨基酸残基在蛋白质（）或（）结构中的重要程度，或是与酶的（）的密切性来决定，活性变化范围可从（）到接近正常。--类型：填空题--答案：\n点；密码子；同义；错义；二级的；三级的；活性位点；零一种由于蛋白质序列中丢失了()残基引起的突变将会阻止()桥的形成，这种蛋白质更容易()。如果在（）温度是稳定的而在（）温度是不稳定的，将它称为（）突变，是（）突变的一个例子。--类型：填空题--答案：半胱氨酸；二硫；变性；较低的；较高的；温度敏感；条件致死无义突变是将一种氨基酸的（）转变成（）密码子，结果使蛋白质链（）。一个碱基的插入或（）叫（）突变。由于三联（）的移动，突变位置（）的整个氨基酸序列都会被改变。上述两种类型的突变(插入和缺失)所产生的蛋白质同（）的不同，通常是完全（）--类型：填空题--答案：密码子；终止；变短；缺失；移码；可读框；下游；野生型；失活下面所列的是由突变而产生的一些异常表型(A)，同时也列出了表型由突变而造成的缺陷的可能原因(B)。请尽可能地将A项所列的异常表型同B项所列的可能原因配对。A异常表型：B缺陷可能出现在：(a)细菌的营养缺陷型(t)合成途径(b)细菌温度敏感突变体(u)降解途径(c)细菌的诱导酶变成组成酶(v)DNA的修复(d)果蝇的红眼变成白眼(w)转录控制(e)果蝇形成两个胸节(x)细胞分裂控制(f)人的镰状细胞贫血症(y)胚胎发育控制(g)人的原叶啪症(z)蛋白质的稳定性(h)人着色性干皮病(i)苯丙酮尿症(j)人肿瘤的发生--类型：填空题--答案：(a)与(t)(b)与(z)(c)与(w)(d)与(t)(e)与(y)(f)与(z)(g)与(t)(h)与(v)(i)与(u)(j)与(x)下面各句是对不同诱变剂作用的叙述，写出相应情况的诱变剂的名称：(1)通过同双螺旋的结合，引起变构，并激活修复性内切核酸酶的诱变剂是：（）(2)引起总染色体的损伤如断裂和转位的诱变剂是：（）(3)取代正常的碱基而掺入到DNA中，并通过互变异构引起复制错误的诱变剂是：（）（4)只能够除去胞哦暖和甲基密嘧啶胞的氨基基团的诱变剂是：（）(5)主要是引起同一条链上的相邻嘧啶间的交联的诱变剂是：（）（6）主要是在DNA双螺旋的形变和链的错排过程中引起插入或缺失的诱变剂是（）。(7)可以除去DNA中任何一个带有氨基基团的碱基上氨基基团的诱变剂是：（）。--类型：填空题--答案：(1)丫啶类染料(2)α、β、或γ辐射(3)5—溴尿嘧啶；2—氨基嘌呤(4)羟胺(5)紫外线照射(6)丫啶类染料(7)亚硝酸原核生物的核糖体RNA和tRNA相对较稳定并且半衰期长，而mRNA却不稳定，很快被降解、请解释这种稳定性的差异。--类型：简答题--答案：答：如果转录物的寿命很长，就不可能通过控制mRNA的合成速率来调节基因的活性。另一方面，如果tRNA和rRNA的寿命长的话，就更合算。列举两种受调控蛋白控制的、与氨基酸的生物合成有关的操纵子。--类型：简答题--答案：答：色氨酸，精氨酸。什么是安慰诱导物?--类型：简答题--答案：答：安慰诱导物是一种与天然诱导物结构相似的化合物，它虽然能诱导操纵子表达，但是它不能被操纵子基因产生的酶分解。在lac操纵子中异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是乳糖的类似物能代替异乳糖作为诱导物，但不能作为β-半乳糖苷酶的底物进入代谢途径。葡萄糖是如何影响涉及糖代谢的操纵子(葡萄糖敏感型操纵子)的表达?\n--类型：简答题--答案：答：在缺乏葡萄糖时，cAMP的水平升高，CAP蛋白同每一个葡萄糖敏感操纵子中启动子内的CAP位点结合，转录作用协同起始。如果有葡萄糖，cAMP的．水平下降，CAP蛋白不再结合，转录的速率协同下降。在大多数细菌操纵子中，结构基因通常紧靠在一起并由单个操纵序列—启动子区调控，而在一些例子中结构基因分散在染色体上。请问这些基因是如何以简单的方式达到协同调节的。--类型：简答题--答案：答：每一个结构基因都有它自己的启动子和通用的操纵基因序列。阐述原核生物的转录终止。(1)转录终止的两种主要的机制是什么?(2)描述翻译怎样能调节转录终止。(3)为什么在细菌转录终止中很少涉及到Rho因子?(4)怎样能阻止转录的终止?--类型：问答题--答案：答：原核生物中的转录终止作用概要如下：(1)原核生物中两种不同的转录终止机制：①在某一位点不需要其他因子协助仅依赖于内在终止子的终止机制；②依赖于肋σ因子的终止机制。(2)翻译可通过弱化作用调节转录终止，例如发生在氨基酸生物合成基因的表达中。前导肽的翻译可以调节结构基因下游的转录。这种调节的重要性充分体现在氨基酸的生物合成中(例如色氨酸)。原核细胞中转录和翻译是同时发生的，正在翻译的核糖体就像在追赶正在转录的RNA聚合酶。具有所需氨酰tRNA时，核糖体可将前导序列翻译成前导肽，而在前导开放读码框的终止密码子处终止翻译。新生的mRNA自由形成3-4茎环(完全配对)终止结构，所以阻碍了DNA指导的RNA聚合酶的前进，结构基因的下游转录终止，即发生弱化现象。若某种氨基酸短缺，则会导致相应的氨酰tRNA短缺，核糖体终止在前导可读框中所短缺的氨基酸密码子上。2-3茎环形成抗终止子，这一茎环不是聚合酶的终止信号，它可以防止3-4茎环的形成，使结构基因的转录进行下去。(3)在原核生物中、转录与翻译是同时进行的，意味着核糖体追赶着DNA指导的RNA聚合酶。Rho因子是一个依赖于RNA的ATP水解酶，能够在转录过程中将在转录泡中的RNA-DNA杂合体分开。因此它顺着转录的方向(5’→3’)追赶DNA指导的RNA聚合酶。若核糖体正好妨碍了它的前进，则依赖于肋σ因子的终止反应不会发生。（4)最为常见的机制是抗终止(参见噬菌体遗传学)。抗终止于是一种能识别终止序列上游抗终止序列(例如λ噬菌体的nut位点)的蛋白质，它帮助抗终止子所利用的底物(如λ噬菌体基因表达中的Nus蛋白)与依赖DNA的RNA聚合酶的相互作用，通读下游的终止子序列。复制DNA的聚合酶(DNA依赖的DNA聚合酶)也有校正功能，解释为什么RNA聚合酶没有这种功能。--类型：问答题--答案：答在DNA水平保持遗传信息的忠实性是至关重要的，因此DNA指导的DNA聚合酶具有校正功能是必不可少的。转录产物与RNA复制及RNA分子通常半衰期较短，所以转录中的错误可以通过具有天然降解活性的RNA酶进行修复。无功能的产物可以被正确的副本所替换。讨论原核生物基因表达的聚合作用反应定向的重要性。假如核糖体从3’端到5’端读它的模板mRNA的话，那么将会发生什么情况?--类型：问答题--答案：答：原核基因表达在空间和时间上是复杂和高度精细的过程。为了保持反应的自由碰撞，转录和翻坪的定向是相当重要的。同时发生在两条链的5’→3’方向的环状DNA的复制开始减慢，最后停止在特殊的终止序列上。翻译过程中，核糖体总是追赶着RNA聚合酶。由于mRNA是单链分子而且容易被降解，因此翻译不可能发生在3’→5’的方向。概括细菌细胞内的转录过程。--类型：问答题--答案：答：转录是通过RNA聚合酶(RP)的作用，以一条DNA链为模板产生一条单链RNA的过程。步骤如下：(1)与RP全酶的结合：一个RP全酶分子与待转录的DNA编码序列上游的启动子序列松弛地结合。(图A7.1)(2)起始：RP往下游移动了几个核苷酸到达启动子的另一段短序列———Pribnow框，紧密地与DNA结合。DNA上的启动子区域解链，RNA便从Pribnow框下游的几个核苷酸处开始合成，通常是DNA的反义链作为模板。合成几个核苷酸后，σ因子被释放并被循环使用，以下的步骤不再需要σ因子(图A7.2).(3)延伸：四核心酶沿着DNA模板移动，使DNA解链，与DNA模板的下一碱基互补的核苷三磷酸聚合到链上。RP继续在DNA上移动，RNA链从模板链被释放出来，DNA双螺旋重新形成(图A7.3)。\n(4)终止：当所有编码序列被转录后，RP移到一个终止序列，即终止子。转录复合体解体，RP和新合成的RNA从DNA模板脱落下来。--答案图片：picture--a7.1.jpg--答案图片：picture--a7.2.jpg概括典型原核生物启动子的结构和功能，并解释什么是保守序列。--类型：问答题--答案：答：启动于是与RP结合和转录起始的特殊序列。典型的原核生物启动子大约长40个核苷酸并有两个重要的序列(图A7.4)(1)-35区位于复制起点(+1)上游35个核苷酸处的6核苷酸序列，能被RNA聚合酶全酶识别并结合。其中σ亚基在识别中起关键作用。因为没有σ亚基的核心酶只能随机地结合到DNA上。(2)Pribnow或-10区另一个位于-10处的6核苷酸序列。RP松散地结合到-35区后，它沿着DNA移动几个核苷酸使Pribnow框区域内约10bp解链，形成一个紧密结合的RP-DNA复合体。Pribnow．框使RP能够识别DNA双链中的反义链，确保转录的链和方向无误。于是，RP在反义链的+1碱基的相对处插入一个核糖核苷三磷酸，起始RNA的合成。Pribnow框具有的保守序列:5’-TATAAT-3’有义链3’-ATATTA-5’反义链通常简写为TATAAT。保守序列指所有启动子的该部位都有这一序列或十分相似的序列3仅在极少启动子中，Pribnow框有1个或2个核苷酸不同。与此相似，-35区有nGAcA的保守序列。--答案图片：picture--a7.4.jpg转录如何在基因或基因组末端终止?--类型：问答题--答案：答：RNA合成在一段特定的序列——终止子停止，终止子存在于DNA模板和RNA转录产物中。检测RNA的转录产物(它与反义链互补)时发现终止子含有两个特殊序列(图A7.5)：(1)富含G-C的反向重复序列，使新合成的RNA形成稳定的茎环结构。(2)3’端5—6个尿嘧啶残基。注意转录是在DNA上A-T碱基配对的序列内终止的。终止子作用机理如下：(1)当RNA核心酶(RP)达终止子序列，移动的速度减低。因为终止子序列富含G-C，而G-C碱基对的转录速度比A-T慢得多。(2)终止子被转录后，DNA-RNA-RP复合物内马上形成茎环结构，阻碍了RP分子继续向前移动。(3)新合成的RNA只以5—6个弱的rU-dN键与DNA模板链相连，rU—dA碱基对的稳定性是其他rN-dN碱基对的二百分之一，使以弱键连接的RNA—DNA杂合。区域解体，释放mRNA，DNA和RP。--答案图片：picture--a7.5.jpg(1)如何区分由启动子起始转录的RNA片段与5’端被加工过的RNA片段；(2)证明多肽是从氨基端到羧基端方向合成的。--类型：问答题--答案：答：(1)转录中，5’核苷三磷酸聚合到RNA链的3’-0H端，这过程包括释放焦磷酸（即两个磷酸基)和形成磷酸二酯键。因此，只有5’端第一个核苷酸会有三磷酸基团。若RNA被加工，则5’端的核苷酸会被取代，剩下核苷单磷酸末端。(2)让E.coli细胞与14C标记的甲硫氨酸(或其他标记氨基酸)共培养，—该氨基酸只被掺人延伸中多肽的末端。提取多肽进行检测，标记物能显示最后合成的区域。研究发现羧基端往往有很高浓度的标记，而氨基端很低。比较E.colirRNA和tRNA的转录和加工。--类型：问答题--答案：答：\nE.coli有组紧密连锁的rrn基因，可大量转录rRNA以满足细胞的需要。每个转录单位包括一个16S，一个23S和一个5SrRNA基因。另外，还有一tRNA基因在16S和23S基因之间，一个或两个tRNA基因在5S基因外(图A7.6i)剩下的大约有50个tRNA基因或单独或成串地位于基因组的其他位置上。每一转录单位复合物转录成超过5500个核苷酸的前体rRNA(图A7.6ii)或前体tRNA，这些前体必须经过加工。加工的第一步是核酸内切酶切割前体分子。因此，前体rRNA被切割成前体16S，前体23S和前体5SrRNA和前体tRNA(图A7.6iii)。第二步由核酸外切酶切割前体末端，形成16S，23S，5SrRNA和tRnA。独立转录的前体tRNA分子被类似地切割(图A7．6iv)。修饰是加工中经常出现的。16S和23SrRNA的某些核苷酸被甲基化，而tRNA的修饰则更为复杂.tRNA中有10％到17％的核苷酸被修饰，如甲基化或脱氨基，有超过50种不同的修饰碱基和稀有碱基，它们都不能正常地进行碱基配对。这也是它们功能的一部分，因而形成三叶草结构的非配对环。tRNA分子都有5’…CCA-OH3’末端。这一序列非常重要，因为末端的A是与氨基酸结合的位点。有时，这一序列是初级转录物的一部分，有时则在完全加工后通过酶促添加。--答案图片：picture--a7.6.jpg区别可诱导和可阻遏的基因调控。--类型：问答题--答案：答：在可诱导的系统中，操纵子只有在诱导物存在时才开放，没有诱导物时阻碍物结合在操纵子上阻止结构基因的转录。存在诱导物时，它与阻遏物结合，使之变构不再与操纵子结合，打开操纵子。酶的诱导是分解途径特有的，诱导物就是酶的底物或者底物的类似物。在可阻碍系统中操纵子被终产物所关闭。不存在终产物时，阻碍物不能结合到操纵子上，因此操纵子开放；存在终产物时，它结合到阻碍物上，改变后者的构象，使其能结合到操纵子上，关闭操纵子。酶阻碍是合成代谢的特点。衰减作用如何调控E.coli中色氨酸操纵子的表达?--类型：问答题--答案：答：衰减作用根据tRNATrp的数量去调节Trp操纵子的表达，而tRNATrp的数量又取决于细胞中Trp的水平.Trp操纵子mRNA前导序列很长，包括了编码一个长14个氨基酸的多肽所需的全部遗传信息(包括一个AUG起始密码和一个UGA终止密码)。这个多肽含有两个相邻的Trp残基，因此色氨酰-tRNA对前导肽的翻译是必不可少的。衰减作用发生的必要条件是：(1)翻译产生前导多肽；(2)转录和翻译的偶联。这样，当RNA聚合酶转录前导序列的同时核糖体就紧接着结合到新生的mRNA上翻译产生前导肽。mRNA的前导序列包括两对相似的反向重复序列(图A7.7中用1，2，3和4表示)。序列2与序列1和3部分互补，这样1+2或2+3或3+4或1+2和3+4都能通过碱基配对形成茎环结构。由序列3和4配对形成的茎环结构与Trp操纵子的终止子基本相同。和终止子一样，在其茎的3’一侧具有7个连续的U形成的尾巴。当形成这种衰减子结构时，它就能像终止子一样使转录终止。注意到两个Trp密码位于序列1内，而且前导肽的终止密码在序列l和2之间。这样，如果色氨酸的量是充足的，那么，tRNATrp的含量也能够使前导肽的翻译进行到终止密码UGA。结合的核糖体覆盖了l和2两个区域，这样1和2、2和3两个序列就不能形成茎环结构，这就使3，4两个序列形成衰减子环并起到终止子的作用，导致RNA聚合酶分子脱离DNA模板。另一方面，如果色氨酸缺乏，那么存在的色氨酰-tRNA也很少，导致核糖体停止在两个Trp密码之前，这样核糖体仅盖住区域l，并在序列4被转录之前，序列2和序列3形成茎环结构。这个结构的形成阻止了序列3与序列4形成终止子结构。于是，出现通读，切操纵子的其他部分被继续转录。事实上，是mRNA上核糖体所在的位置决定mRNA的二级结构和衰减作用是否发生。--答案图片：picture--a7.7.jpg试证明一个基因中只有一条DNA链作为模板被转录。--类型：分析题--答案：答：若基因两条链均被转录，而RNA聚合酶只能以5’→3’方向合成，所以两条DNA链会以相反方向转录。两信使携带着彼此互补的反向核苷酸序列，编码不同的多肽。虽然某些DNA顺序能被双方向转录，但这不是常见现象。最早的明确证据是通过研究噬菌体SP8感染枯草杆菌(Bacillussubtilis)得到的。SP8的DNA很特别：一条链(重链)富含嘌呤，另一链(轻链)则富含嘧啶。若把双链DNA温和加热，两条链分离(即DNA变性)，可用密度梯度离心分离两条链。1963年，JuliusMarmur和PaulDoty用SP8感染枯草杆菌细胞后提取RNA，发现它只能与噬菌体DNA的“重”链杂交(即互补配对形成DNA-RNA杂合分子)。而不会与轻链杂交。显而易见，信使只可以与一条DNA链(重链)互补，因而DNA双链中只有一条链作为转录的模板(图A7.8)。\nMarmur和Doty很幸运地选用SP8做实验，因为它的全部基因都是同一条DNA链中转录而来。而另一些噬菌体，包括T4和λ噬菌体，部分基因由一条链转录而其他基因则由另一条链转录；因此若用这些噬菌体而不是SP8做实验，则不能成功地说明问题。--答案图片：picture--a7.8.jpg经过测序分析，欲克隆的一段DNA序列如下：GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACAAGGGGCTCCTATAATAGGTGCATTTGTAGGGGATGTGGCCACATGATAGCGCGTCGAGGCATTCAGGACCGATATTGTCATATTGCCAGCATGCTGCAGCGCGCCAACTTAGTTACAACTTATACGATGATTTTAAAAAAAAGAATATAAATAGCCATCCACCCGAAAGACCACCGCAAGTATCGGTACGATCGTACCAGCACACACCACAGTCGCCAGTCTGTTACCAAATAATAAAGTTGATAATTAATTCACATCTACCTGGGTAACCCAGGTAGATGTGAATTTTTAGAATTC这段序列被克隆到某多拷贝质粒的一个EcoRI限制性位点，并表达了一个小肽，请找出这段序列中所含有的以下几个功能位点：（1）两个EcoRI位点(2)一个启动子(3)一个转录起始位点（4)一个转录终止子(5)一个核糖体结合位点(6)一个翻译起始密码子(7)一个翻译终止子另请标出相应的调控序列及编码区的氨基酸。--类型：分析题--答案：答：这些序列及编码区的氨基酸序列是：GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACAAGGGGCTCCTATAATAGGTGCEcoRI-43-35-10ATTTGTAGGGGATGTGGCCACATGATAGCGCGTCGAGGCATTCAGGACCGATATTGTCATATTGCCAGC+1S/DMIARRGIQDRYCHIASATGCTGCAGCGCGCCAACTTAGTTACAACTTATACGATGATTTTAAAAAAAGAATATCAAATAGCCATCMLQRANLVTTYTMILKKEYQIAICACCCGAAAGACCACCGCAAGTATCGGTACGATCGTACCAGCACACACCACAGTCGCCAGTCTGTTACCHPKDHRKKYRYDRTSHHSRQSVTAAATAATAAAGTTGATAATTAATTCACATCTACCTGGGTAACCCAGGTAGATATGAATTTTTAGAATTCKEcoRI分析比较细菌转座子的结构与特点。--类型：分析题--答案：答：1974年，随着发现与抗生素抗性有关的基因可以在质粒与细菌的染色体之间转移，科学家发现了转座子。转座子比IS元件大很多(一般为2—20kb)，它们至少含有一个基因，给宿主带来可遗传的标记，一般是对一种或多种抗生素的抗性。这是一种非常有用的性质，因为每种质粒可以用一种转座子“标记”，这样通过对药物的抗性表型可以简单地检测质粒的存在和转移；同样，可以轻易地观察到转座。转座子Tn5(图A8.2)长5.7kb，是一种结构最简单的转座子;它由三个成分组装而成：一个长中心区(2—7kb)，含有卡那霉素的抗性基因，两端为一对IS元件，每个长1.5kb，方向相反。其他的转座．子两端为不同的IS元件，有时两个IS同向。这些转座子的转座类似IS元件，转座过程中宿主的一个序列或DNA靶位点被复制。发生转座首先是因为任意一个IS序列或两个IS序列同时起作用，编码一个转座酶(在某些元件中，如Tn5，一个IS只有部分功能，不能编码一个有活性的转座酶);其次，转座子两端通常有一对与IS特异相应的反向重复序列：无论IS元件是正向还是反向的，这些末端重复序列都存在。还有一种可能性：任一对IS元件可以相互作用使它们之间的任意序列转座，这样任一个基因都可以在两端连上两个同样的IS元件成为转座子;这个性质已被用构建重组DNA分子。Tn5因为其组件的组成被称为集成转座子。其他转座子，如复杂的转座子的结构是不同的；它们两端不是一对IS而是一对反向重复，编码转座所需蛋白的基因位于转座子的中心区。比较基因组的大小和基因组复杂性的不同：一个基因组有两个序列，一个是A，另一个是B，各有2000bp长。其中一个是由400bp的序列重复5次而成，另一个则由50bp的序列重复40次。而成，问：(1)这个基因组的大小怎样?(2)这个基因组的复杂性如何?--类型：简答题--答案：答；基因组的大小是指在基因组中DNA的总量。复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。(1)4000bp。(2)450bp。一个基因如何产生两种不同类型的mRNA分子?\n--类型：简答题--答案：答：一个基因可以有两种方式产生一种以上的mRNA。第一种是：一个原初转录物含有一个以上的多腺苷化位点，就能产生一种以上的具有不同3’末端的mRNA。第二种方式是：如果一个原初转录物含有几个外显子，那么，会发生不同的剪接，就会产生多种mRNA。在一个克隆基因的分析中发现：一个含有转录位点上游3.8kbDNA的克隆，其mRNA直接转录活性比仅含有3.1kb上游DNA的克隆的转录活性大50倍.这表明了什么?--类型：简答题--答案：答：在转录起点上游的3.1—3.8kb之间有一个增强子。被加工的假基因与其他假基因有哪些不同?它是如何产生的?--类型：简答题--答案：答：已加工过的假基因有明显的RNA加工反应的印迹，这表明它们在某种程度上经过RNA阶段。例如；有些已加工过的假基因缺少内含子，而有些在3’末端已经经过加工。推测已加工过的假基因是在基因转录成前体mRNA、RNA加工、后来又由反转录酶反转录成DNA的过程中产生的。反转录出的DNA重新整合进基因组中。非转录间隔区与转录间隔区分别位于rRNA重复的什么位置?转录间隔区与内含子有何区别?--类型：简答题--答案：答：rRNA的非转录间隔区位于串联转录单位之间，而转录间隔区位于转录单位的18SrRNA基因和28SrRNA基因之间。内含子位于基因的编码区域。相反，转录间隔区不间断基因，而是存在于一个转录单位的基因之间。内含子通过剪接加工过程而去除，转录间隔区通过一系列细胞内溶核切除过程而去除。请描述C值矛盾，并举一个例说明.--类型：简答题--答案：答：对高等真核生物而言，生物体基因组的大小与其复杂性并没有直接的联系。亲缘关系相近的生物体的DNA含量可能相差很大。例如，一些两栖类动物比其他的两栖类动物的DNA含量多上一百倍，但它们的进化地位并不因此而更高。在酵母基因中，其生活必需基因占多大比例?．为什么有些基因可能是不必要的?--类型：简答题--答案：答：M．Gobdl和T.Petes(Cell40：983—992，1986)随机失活酵母基因来观察基因失活所引起的表型(基因通过插入外源DNA而失活)。仅有12％的插入引起致死反应，说明酵母基因组中仅有12％的基因对生命活动是必需的。另外发现14％的基因虽然重要但不是必需的：这些基因的失活致使酵母生长缓慢。奇怪的是，70％的酵母基因的失活对细胞的活性并没有明显的影响。这些基因可能起着非必需的作用或者它们只在特定的条件下起作用(例如，在特殊碳源如半乳糖中生长)。有些基因可能起着重要而非必要的作用，因为其他一些基因也有相同(功能冗余)或相似的功能(功能重叠)。酵母mRNA的大小一般与基因的大小相一致。而哺乳动物mRNA比对应的基因明显小。为什么?--类型：简答题--答案：答：大部分典型的哺乳动物基因含有内含子序列，这些序列不存在于mRNA中。但是，只有少量的酵母基因具有内含子，因此，大部分的酵母mRNA不会因为剪接而缩短，仍然保持与基因同样的大小。在一个基因复制后，外显子发生突变的机率比内含子小。但是，所有DNA的突变率是相同的。请解释原因.--类型：简答题--答案：答：外显子的突变使功能丧失而导致个体被淘汰，因此外显子受到选择压力的作用。内含子的突变一般不导致表型变化，因此不被淘汰而在基因库中得到保持。什么证据表明外显子与蛋白质的功能结构域相一致?这一证据如何支持外显子改组(exonshuffling)假说?\n--类型：简答题--答案：答：免疫球蛋白的功能结构域与编码这些蛋白的基因的外显子相对应。但对于其他一些基因，外显子与编码蛋白的功能结构域并不相对应。从外显子移动推测外显子编码蛋白质的功能结构域，它也能通过DNA重组产生新的基因。由已经存在的结构域(如“一个跨膜结构域或者一个ATP结合结构域)通过重组产生新的基因比在体内进化获得一个全新的蛋白质要快得多。为什么卫星DNA在密度梯度离心时会形成一个清晰的峰?--类型：简答题--答案：答：在密度梯度离心中，每个DNA片段都最终会停留在它的密度与浮力相等的地方。每一DNA片段都有特定的由它的序列所决定的密度。所形成的主要DNA带较宽表明存在密度有细微差别的不同的序列。如果同一序列大量存在时，它就形成了自己的带。为什么基因组DNA在用限制性内切核酸酶消化时，哺乳类的卫星DNA．会产生特异的带?--类型：简答题--答案：答：用限制性内切核酸酶消化哺乳动物DNA产生一系列不同大小的限制性酶切片段这些片段在凝胶上形成了不清晰的成片条带。如果一个重复序列中具有一个限制性位点，就会产生大量大小相同的片段。这些片段就在成片条带上形成清晰可分辨的带。举例说明什么是梯级重复，这样的序列是如何产生的?--类型：简答题--答案：答：小鼠随体重复单元长度为234bp。它包括两个长117bp的相关半重复序列，每个半重复序列由两个长58bp的l/4重复序列(termedquarterrepeats)所组成。每一个l/4重复序列本身也由更小的重复序列组成(1/8重复序列)，l/8重复序列是由三个9kb长的．相同序列所构成。这些重复序列是由一个原始的序列通过复制、扩增和分化而产生的。跳跃复制的结果是什么?--类型：简答题--答案：答：跳跃复制产生串联的DNA序列。比如说，小鼠27bp的重复序列跳跃复制产生54bp的重复序列，它由两个串联的27bp的重复序列所组成。重复序列并不是在选择压力下存在，因此能快速积累突变。这些特性表明重复序列相互间应存在很大的不同，但事实并不是这样的。请举例说明。--类型：简答题--答案：答：如卫星DNA的同源性是通过固定的交换来维持的，它通过不均等交换导致其中一个重复单元的增加和另一个的消失。哪些细胞器带有自身基因组?为什么这些细胞器带有自身的基因组?--类型：简答题--答案：答；线粒体和叶绿体具有自身的基因组，这两种细胞器都具有不同于细胞质的独特的胞内环境。有一些蛋白质由细胞器基因编码，因为它们需要在这种环境中才能正确折叠。有些需要在细胞器内产生，因为它们不能穿过细胞器膜。线检体DNA的突变率与细胞核DNA突变率有什么不同?为什么?--类型：简答题--答案：答：在哺乳动物中，线粒体DNA的突变率比核DNA的突变率高。但在植物中，线粒体DNA的突变率比核DNA的突变率低。出现这种差异的可能原因是线粒体采用不同于细胞核的DNA聚合酶和DNA修复体系。人线粒体DNA的哪些特征表明了其基因组的组织方式具有经济性?--类型：简答题--答案：答\n人类线粒体基因组很小，基因直接相连甚至重叠，仅出现一个启动子区，一些基因甚至不包括完整的终止密码，这些都反映了它的经济原则。RNA分子能被运到细胞器中吗?--类型：简答题--答案：答：一般来说只有蛋白质能够被输入。但在锥虫本身的线粒体基因组中没有发现tRNA的存在，表明tRNA可能是通过运输途径进入这种细胞器中的。什么证据表明细胞器与原核生物关系比真核生物关系密切?--类型：简答题--答案：答：细胞器蛋白合成对抗生素功敏感性与原核生物相似。此外，细胞器核糖体蛋白和RNA聚合酶亚基也与大肠杆菌E.coli中的同源酵母rho-小菌落突变株的线粒体DNA发生了什么变化?--类型：简答题--答案：答：rho-型酵母菌株的线粒体基因组具有大量的缺失和重组的线粒体基因组。剩余的DNA通过扩增形成多拷贝。图9．1给出了基因组DNA的7—个区域和该区域相对应的cDNA的限制性酶切图谱。有多少个内含子存在于该基因组DNA上--类型：分析题--答案：答：有5个内含子。--题目图片：picture--p9.1.jpg现在对人类基因组的主要研究工作是进行基因组的序列测定。然而，有人根据人类基因组是由重复序列组成为由，认为反复对同一种DNA进行测序是不明智的。你能否拟定两份计划，一份计划应保证仅仅单一序列DNA被测序，第二个计划应允许仅仅转录的单一DNA序列被测序。请简述你的两份计划。--类型：分析题--答案：答：计划一：进行一个复性实验，在从不同的温育时间取出等量样品。当所有重复DNA都发生退火时，从反应中去除双链DNA(可以使用一个仅能结合双链DNA的柱或过滤器)。接着继续进行复性反应直到所有的单拷贝DNA都发生复性；以这一单拷贝DNA建立克隆文库，用于测序。计划二：仅测序能够表达的单拷贝基因。用计划一中分离纯化得到的单一序列DNA与细胞总RNA杂交，使复性完全，然后从反应液中除去单链DNA，只有能表达的单拷贝DNA以DNA-RNA杂合体的形式留下来。克隆这一DNA并进行测序(现在可采用EST法，从细胞总RNA中制备表达序列的cDNA，进行测序)。除了自身免疫疾病，机体如何实现不对“自己”产生免疫?--类型：简答题--答案：答：能识别细胞自身蛋白的B和T细胞的克隆缺失使细胞产生耐受性，这些细胞在发育的早期被去除。简述重链免疫球蛋白基因重排的步骤。--类型：简答题--答案：答：重链基因通过几个步骤进行组装。首先，D区连接J区，接着在D区的上游连接上一个V区。列举产生免疫多样性的途径。--类型：简答题--答案：答：多样性主要由体细胞重排产生，它通过V，J和固定区基因的不同连接组装出成百万的抗体基因(重链的D区参与产生更多的多样性)。有活性B细胞中的免疫球蛋白基因的突变也能增加多样性。\n当J区与V区发生重排后，其5’端的命运如何?3’端呢?--类型：简答题--答案：答：位于5’端的J片段在重排时缺失了，位于3’端的J片段仍然保留在染色体上，但在前体mRNA的剪接过程中被切除(它们是位于J和C问的内含子的一部分)。假设免疫球蛋白是由基因组中完整的基因编码，而不是多个片段组装而成，那么人体识别百万个不同的抗原需要多少个基因参与免疫反应?这些基因占人基因组的多大比率?--类型：简答题--答案：答：对每一个抗原来说，免疫球蛋白和T细胞受体基因都是必需的。估计人类基因组包含大约250000个基因，如果每个表达的基因都以原有形式存在于细胞中的话，人体需要约二百万个基因。这表明DNA重排能有效地产生免疫球蛋白和T细胞受体。地中海贫血症是一类因α和β珠蛋白合成降低而导致的疾病，什么类型的DNA重排能引发这些疾病?--类型：简答题--答案：答：在α和β基因座之间的不等交换将引起各种形式的缺失，包括在α1和α2之间、φα和α2之间以及在δ和β之间的缺失。列举一个已知的DNA序列编码一种以上蛋白质的三种方法。--类型：简答题--答案：答：给定的一段DNA序列可以以下述方式编码两种或两种以上的蛋白质：(1)可读框中在核糖体结合位点之后含有多重起始位点；(2)以一两个碱基的移码方式出现重叠的可读框；(3)不同的剪接方式，例如，选择不同的外显子组合成不同的mRNA。哺乳动物中，从母亲与父亲遗传而来的基因是差异表达的，这种现象的理论基础是什么?--类型：简答题--答案：答：在精子或卵子发生过程中一些基因被关闭或者被甲基化。如IGFⅡ基因在卵母细胞中被甲基化，因此来自于母本的等位基因在后代中不表达。来源于父本的等位基因没有甲基化，它能够表达。其他一些基因只在精母细胞中被甲基化，对这种基因而言，来源于母本的等位基因能表达。简述T-DNA转化所需的细菌及质粒基因。--类型：简答题--答案：答：T-DNA从细菌转移到植物细胞中需要来源于细菌基因组和质粒的基因。在质粒中需要VirA-E和VirG基因。编码细胞壁多糖的chvA,chvB和pscA基因也是转移所必需的。氨甲喋吟对哺乳动物细胞有何作用?细胞是如何对这种药物产生抗性的?其中稳定和不稳定抗性有什么不同？--类型：简答题--答案：答：氨甲喋呤是一个阻断叶酸新陈代谢的药物，提高DHFR基因的拷贝数可以使细胞产生对这种药物的抗性。在稳定扩增的细胞中，基因在它们正常所处的染色体位置上扩增。在不稳定的细胞系中，扩增基因形成称为双微染色体的额外染色体元件。去除氨甲喋呤之后双微染色体就会消失。什么证据表明活性基因带有DNaseI的超敏位点?--类型：分析题--答案：答：有人用不同浓度的DNaseI对成熟细胞中的成体β球蛋白基因和胚胎β球蛋白进行检测，发现：成体β球蛋白基因对低浓度的DNaseI敏感(在0.05mg/m1的DNaseI的作用下成体β球蛋白基因的带大部分消失)；而在成熟细胞中没有活性的胚胎β球蛋白基因只有当DNaseI的浓度达到0.5mg／ml时才能被消化，因此，活性的基因对DNaseI超敏感。表面抗原的变异和哺乳动物免疫多样性都是DNA重排的结果。锥虫通过DNA重排选择表达所携带的一千多个不同的VSG基因中的一个。而哺乳动物细胞则通过DNA重排产生成百上千个不同的抗体，包括与VSG蛋白反应的抗体，尽管抗体在\n数量上的优势，锥虫仍然能够成功地逃避宿主的免疫系统，为什么?--类型：分析题--答案：答：锥虫因为细胞分裂周期短而取胜。当锥虫感染哺乳动物时，它在血流中以快速的倍增时间复制。在感染开始后不久，识别锥虫VSG的B细胞从休眠状态被激活并开始膨大，而哺乳动物细胞的分裂比锥虫慢得多。当B细胞膨大到足以杀死锥虫时，一些锥虫的VSG已经发生了改变，使B细胞不再能识别它。这样就起始了新一轮的感染，直到免疫系统能识别它时就已改变成能逃得过免疫系统的变体，于是又开始了新的循环。请解释酵母的交配型系统为什么可以作为DNA重组、染色质结构对基因表达的调控、染色体结构域的保持、转录元件间的蛋白互作、基因表达的细胞类型特异性以及信号传递激活基因的例子。--类型：分析题--答案：答：交配型体系通过DNA重排把交配型基因从沉默基因座(HMT和HML)转移到表达基因座(MAT)。沉默基因座由HMT和HML的染色体结构控制而没有转录活性。E和I沉默子区域是产生不活动染色体结构的分界。一些转录因子的活性受到蛋白—蛋白相互作用的调节，如PRTF转录因子。PRTF能单独激活“α-特异基因，与α-蛋白结合时能激活。α-特异基因。当α2出现时，它抑制α-特异基因。细胞类型特异表达基因的表达以HO基因为例，它具有一个复杂的启动子，该启动子只在单倍体细胞中有活性，在双倍体细胞中没有活性。HO启动子还受到细胞周期的调节，它只在G1期的后期有活性。最后，交配型体系还采用一种信号传递级联作用来控制基因的表达。交配型外激素与细胞表面受体的结合激活了一系列将信号传递到核内并改变基因表达的蛋白激酶。锥虫的表面抗原转变与酵母中的交配型转换有何相似之处?有何不同?--类型：分析题--答案：答：表面抗原的多样性和交配型的转变相似，因为每一系统在基因组的多基因座上具有等位基因，无论何时都只有一个基因座能表达。在两个系统中，当等位基因拷贝到表达基因座时就有活性。不活动的表面抗原基因座(多于100个)比不活动的交配型基因座(2个)多。另一个不同之处在于表面抗原表达的基因座位于端粒中，而表达的MAT基因座更靠近中心粒。最后，表面抗原基因的表达基因座可以改变；而交配型基因不能。解释剂量补偿，在哺乳动物和果蝇中是怎样实现的?--类型：分析题--答案：答：一个二倍体的两套染色体组成一个细微的平衡系统，若这个平衡因存在一个额外的常染色体或缺少一对同源常染色体中的一条染色体而被破坏时，将产生一个高度不正常的个体。但在胎盘哺乳类中，雌性常有两个X染色体然而雄性却是半杂合体，仅有1个X染色体，这就暗示存在一种机制可以补偿这种由基因剂量引起的差异。在哺乳动物中，这种不平衡因雌性体内的一条X染色体失活而恢复。这条X染色体变得高度螺旋，看起来像一个恰好位于核膜下的异染色质体(Barr小体)；．在这种情况下X染色体全部或部分地失活，因而不论雄性或雌性都仅有一条具活性的X染色体且有相同的遗传平衡，这个现象就是剂量补偿。X染色体失活似乎是在体细胞早期发育过程中随机发生的，因此在一些细胞中来源于父亲的X染色体失活，而在其他细胞中是来源于母亲的X染色体失活；而且，一旦发生了失活，所有子代细胞都有同样的失活X染色体。在黑腹果蝇中却发生了不同形式的剂量补偿。X染色体从不像哺乳动物那样浓缩成耳咀小体，但是雄性X染色体上某些基因的活性是雌性X染色体上相对应基因的活性的两倍。由此，对于大多数基因来说，两性都有相等的产物，而其他基因在雌性中的产物是雄性的两倍。说明：Barr小体也称为性染色质小体。列举证明雌性哺乳动物中X染色体失活随机发生的证据。--类型：分析题--答案：答：体细胞发育过程中发生的X染色体随机失活暗示所有的雌性哺乳动物在遗传上都是嵌合体，也就是组织中的一部分细胞中父方X染色体有活性，而一部分则是母方的X染有活性。(1)玳瑁猫就是证明这个假设的一个很好的证据。对B（黑毛)和b(橙毛)基因是杂合的雌猫的毛由黑斑和橙斑混合组成。可能的解释是：黑斑和橙斑是由一些特定的组织块形成，而这些组织块是由携带B或携带b的X染色体随机失活的细胞组成的。\n(2)在人的X染色体上有一个基因座编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶。正常的野生型等位基因编码一个具有完全活性的酶，而突变等位基因则编码失活的酶，可用血清学方法检测出这个突变体：从一个雌性的杂合个体中分离出成纤维细胞进行组织培养，这样就可以检测不同克隆中是否存在活性酶或变异的失活型酶。从这些成纤维细胞中长出的克隆一半产生有活性的酶，而剩下的产生无活性的变异体。从来没有在同一个克隆中找到两种蛋白质。这些结果只在以下情况下才会出现：①每个克隆中只有一条活性X染色体；②发育过程中发生了随机失活。一个tRNA基因的启动子序列突变将会分别对(1)基因产物和(2)细胞或生物体的表型有什么影响?--类型：简答题--答案：1．答：(1)因为RNA聚合酶III的启动子位于基因内，这种启动子序列的变化，将会改变前体tRNA的核苷酸序列。(2)可能没有，因为tRNA基因是过剩的。列举原核生物同真核生物转录的差异。--类型：简答题--答案：答：二者的差异列于表A11.1--答案图片：picture--as11.1.jpg增强子具有哪些特点?--类型：简答题--答案：答：(1)增强相邻启动子的转录；(2)两个方向都能起作用；(3)位于相邻启动子的上游或下游都能起作用；(4)在远距离外也能起作用；(5)具有细胞类型的特异性。哪些转录因子含有TBP？为什么它们被称为定位因子？请用一个模型解释为什么所有三种RNA聚合酶都能与TBP发生作用?--类型：简答题--答案：答：TBP是聚合酶I因子SLl，聚合酶II因子TFIIID和聚合酶III因子TFIIIB的组成成分。所有这些蛋白都能帮助RNA聚合酶定位于起始位点的附近。TBP可能与这三种RNA聚合酶都具有的一个亚基相互作用。什么是转录起始前复合体?--类型：简答题--答案：答：前起始复合体包含与RNA聚合酶相结合所必需的基本转录因子。RNA聚合酶Ⅲ的内部启动子位于起始位点下游50个核苷酸的位置，它是如何被定位并正确起始转录的?--类型：简答题--答案：答：TFIIIA和TFIIIC因子结合于聚合酶III的内部启动子上并吸引TFIIIB结合到起始位点上游的一个位点上，接着TFIIIB就将RNA聚合酶III定位到起始位点。对带有内部启动子的RNA聚合酶Ⅱ基因有什么样的编码限制因素?--类型：简答题--答案：答：A、B、C盒必须能够被与之结合的聚合酶III的转录因子所识别。因此它们与共同序列不能相差太大。因为这些元件就位于聚合酶III转录物的编码区内所以它们限制了该区域内的转录物的编码能力。当一段活性转录DNA受损时，模板首先被修复。请用一个模型解释这一现象。--类型：简答题--答案：答：TFIIH以两种形式存在：激酶复合物和修复复合物。在转录起始之后，激酶形式被修复形式所代替。当遇到受损的DNA时，RNA聚合酶II活性下降。这可能成为激活TFIIH修复活性的信号。真核生物中，基因的表达受不同水平的调控，请列举其中3种。\n--类型：简答题--答案：答：基因结构的激活，3’端的形成，转录过程，mRNA向细胞质的运输。甾醇类转录因子与锌指蛋白类转录因子的区别是什么?--类型：简答题--答案：答：类固醇受体与锌以Cys—Cys—Cys—Cys基序相结合，而锌指蛋白使用Cys—Cys-His—His基序。亮氨酸拉链蛋白所识别的DNA有何特点?如何理解亮氨酸拉链转录因子的二聚体结构同识别位点的关系？--类型：简答题--答案：答：亮氨酸拉链转录因子识别没有间隔的反向重复序列。亮氨酸拉链区将两个亚基连接在一起，使相邻的碱性区域以相反的极性首尾相连。虽然同源异型蛋白与锌指蛋白差别很大，但是它们识别DNA序列的结构元件相似的，这个元件是什么？--类型：简答题--答案：答：同源框蛋白和亮氨酸拉链转录因子通过位于大沟中的?—螺旋与DNA结合。协同控制(coordinatecontrol)下的基因是如何被同时激活的?--类型：简答题--答案：答：协同控制下的基因在它们的启动子上都具有一个相同的反应元件。当正确的转录因子被激活时，所有具有这一反应元件的基因都被激活。列出调控转录因子被激活的7种途径，并各举一例。--类型：简答题--答案：答：蛋白的合成(同源异型区)，磷酸化作用(HSTF)，去磷酸化作用(AP—1)，配体结合／核定位(类固醇受体)，活化因子的释放(甾醇)，与抑制剂脱离(NF??B)。许多转录因子是细胞原癌基因的产物，为什么突变的转录因子可能导致癌变?--类型：简答题--答案：答：突变的转录因子可能不正确地激活促使细胞分裂的基因。转录因子能够与装配成核小体的DNA序列结合吗?--类型：简答题--答案：答：一些转录因子能够结合核小体覆盖的DNA，有一些则不能。如TFIIIA不能结合核小体覆盖的DNA而糖皮质激素受体能够结合。有两个模型可以解释染色质中的基因是如何被转录的。优先模型(preemptivemode1)中，转录因子和RNA聚合酶是如何与启动子结合的?为什么在动态模型中需要ATP?--类型：简答题--答案：答：在优先模型中，只有在DNA复制时转录因子与核小体才能互相代替。复制时转录因子能稳定地与DNA相结合以支持转录。在动态模型中，组蛋白被一种能使转录因子与DNA相结合的ATP依赖型因子所代替。为什么酵母SWI与SNF基因的突变会影响不同靶基因的转录?--类型：简答题--答案：答：SW1SNF3基因来源于一个大的复合物，它们通过移动或者去除核小体重新“改造”染色质而使转录因子能激活多个基因。\n一般认为，染色体中具有多个调控基因表达的结构域。每个结构域中可以找到哪些功能位点，它们的作用如何?--类型：简答题--答案：答：结构域之间以绝缘体为界，它把一个个的结构域分离开来。结构域可能包含一个MAR(基质附着区域matrixattachmentregion)，它连接结构域与基质。最后，结构域也可能具有一个基因座控制区（locuscontrolregion，LCR)，该区域具有DNaseI敏感位点，它作为整个结构域的增强子。MyoD是一种bHLH蛋白，对肌肉细胞的发育很重要，它的活性是如何被调控的?--类型：简答题--答案：答：MyoD是只在肌肉细胞中表达的bHLH蛋白。MyoD很少形成同源二聚体，但它能通过与bHLH蛋白E12或E47形成异源二聚体而被激活。MyoD的活性受到HLH蛋白Id的控制。Id与E12和E47形成不能与DNA结合的异源二聚体，由于Id夺去了MyoD形成异源聚体的E12和E47蛋白，从而阻止了MyoD的活性。酵母U6sRNA基因有一个TATA盒位于上游，在基因内有一个弱的A盒，基因下游的远端还有一个保守的B盒。体外实验时，RNA聚合酶Ⅱ和Ⅲ都可以转录这个基因，但体内实验发现只有RNA聚合酶Ⅲ可以转录它。如何确定该基因启动子的聚合酶特异性?--类型：简答题--答案：答：A盒和B盒结合TFIIIC，TFIIIC能够吸引TFIIIB。TFIIIB中的TBP与TATA盒的相互作用帮助TFIIIB稳定结合于上游区域。如果A、B盒位于正确的位置并能很好地互相匹配那就不需要TATA盒了。举例说明单链核酸中形成茎环结构的重要性。--类型：简答题--答案：答：单链核酸形成的茎环结构是固有的转录终止子，例如RNA中的茎环结构。用负超螺旋环状DNA样品进行体外转录实验。但是预实验中并没有获得满意的结果，试讨论改进实验的可行方法。--类型：简答题--答案：答：由于DNA是高度卷曲所以不能有效转录，改进的办法是加入DNA促旋酶，可以去除负超螺旋，使DNA处于松弛状态，就可以进行转录实验。组蛋白H2A基因在所有细胞中都进行表达，而免疫球蛋白基因只在淋巴样细胞中表达。两类基因的启动子都含有转录因子0ct-l的结合位点，0ct-1也存在于这两类细胞中，但为什么免疫球蛋白只在淋巴样细胞中表达?--类型：简答题--答案：答：免疫球蛋白基因的表达需要只在淋巴细胞中具有的Oct—2或其他的转录因子，而单独一个转录因子往往不足以活化基因，同时必须考虑整个启动子。只有DNA重排在启动子的作用范围内产生一个下游增强子之后，免疫球蛋白才能被完全激活。RNA聚合酶Ⅱ起始转录后，起始复合物必须转变为延伸复合物。因此聚合酶复合物必须解旋一小段DNA。在线性DNA上，解旋需要ATP，TFⅡE，TFⅡH和解旋酶活性。然而，超螺旋DNA的转录并不需要这些因子。请解释这一现象。--类型：简答题--答案：答：对于线性DNA，TFIIE、TFIIH和ATP是聚合酶II复合体前方的DNA解旋所必需的。这些因子并不是超螺旋DNA转录所必需的，因为它们只在负超螺旋的解旋中活性较高。RNA聚合酶Ⅲ特异性地转录小分子RNA，但为什么不转录5.8SrRNA?--类型：简答题--答案：答：5.8SrRNA是作为前体RNA大分子的一部分被转录的。在RNA聚合酶的分析中，3H—UTP作为标记的核苷酸，它的比活性是500μCi/μmol(1μCi=2.2×106计数／分钟)。温育10分钟之后，经三氯乙酸沉淀，用对3H效率为60％的液闪计数器测得放射性强度为692521计数／每分钟。(1)\n请计算掺入到RNA分子中UTP的量(nmol)。(2)假定RNA分子中的尿嘧啶占30％，请计算RNA分子中掺入核苷酸总的纳摩尔数。(3)如果DNA模板改用poly(dGdC)，?UTP是否可以掺入?(4)如果新合成的RNA分子的核苷酸组成是：20％的C；32％的G,30％的U和18％的A，写出转录的DNA链及双链DNA的核苷酸组成的百分比。--类型：分析题--答案：答：(1)掺入3H—UTP的Bq=692521×100/60=19236.7掺入的μCi＝19236.7×60／2200000=0.5251μCi＝1／500μmol因此0.525μCi=0.525／500＝1.05×0.001μmol＝1.05nmol；(2)1.05×100/30＝3.5(3)不可以。（4）转录链：C32％；T18％；A30％；G20％；非转录链：G32％；A18％；T30％；C20％；双链DNA：G26％；A24％；C26％；T24％。TFA是5SRNA基因表达所需的转录因子，这个蛋白含有9个锌指结构域，与5SrRNA基因内的一段序列和5SrRNA本身结合。(1)如何定位TFⅢA蛋白的DNA结合位点?(2)什么样的突变可以证明锌指是DNA结合所需的?(3)有人发现TFⅢAC端缺失19个氨基酸后与DNA结合的能力与野生型一样，但是不能激活5SrRNA基因的转录，请解释原因。（4）Xenopus的卵母细胞中合成并贮存了大量的5SrRNA，随着5SrRNA的积累，TFⅢA与之结合，这对5SrRNA基因的转录有何影响?调控这个过程的机制是什么?--类型：分析题--答案：答：（1)分离一个带有5SrRNA基因的限制性片段。用多核苷酸激酶标记两个5’末端，用限制性内切酶切割其中一个标记末端。用纯化过的TFIIIA结合于DNA上，然后用DNaseI处理，在胶上分析切割产物，蛋白质结合的位置就是DNA上没有被消化的区域。实验中需要设置一个不加蛋白质的对照，并且要滴定DNaseI的浓度。(2)能使锌结合能力丧失的残基突变体。(3)这些氨基酸的缺失并不影响DNA结合结构域。请思考转录因子还有哪些其他的结构域?这些结构域可能与其他什么蛋白起作用就可以知道原因了。（4）TFIIIA调节爪瞻卵母细胞中5SrRNA的积累，因为它既能结合5SrRNA基因又能结合5SrRNA。当只有少量的5SrRNA存在时，大部分的TFIIIA与DNA结合并激活了5SrRNA基因的转录。随着5SrRNA水平的上升，TFIIIA与5SrRNA结合而丧失转录活性，这就是个反馈调节。为什么被RNA聚合酶Ⅲ识别的启动子不常见?--类型：分析题--答案：答：RNA聚合酶III负责转录一类具有以下特征的基因：(1)转录物长度少于3.00个核苷酸；(2)转录物不编码蛋白质；(3)基因通常以多拷贝存在。这类基因包括5SrRNA和tRNA基因。与其他基因的启动子不同，这类基因的启动子位于基因的内部，它是在研究一种5SrRNA的基因5’端的序列时首次发现的。该基因的前50对核苷酸完全缺失对转录起始毫无影响；同样地，十84以后序列的缺失对转录起始也没有影响。因此，十50到十84间的序列为5SrRNA基因的启动子。更少见的是，tRNA基因的启动子被分成A和B两部分，它们之间的序列缺失不影响启动子的效率。什么是增强子?它们与其他调控序列有何不同?--类型：分析题--答案：答：增强子指可以增强邻近结构基因转录的序列。结合一种特异性蛋白后，它们被激活，然后(猜测如此)作为转录起始复合物聚合的位点。它们与其他大多数调控序列有以下不同：(1)可以与所调控转录的基因距离几千碱基；(2)可位于基因的上游或下游；(3)作用时无方向性，因而能同时影响两侧两个基因的表达；(4)必须与受调控的基因位于同一DNA分子中，但可位于任一条DNA链上；(5)没有基因特异性，增强子可激活两侧的任一基因；(6)有组织特异性。因而，免疫球蛋白基因的增强子只能促进免疫系统细胞中邻近基因的转录；(7)优先作用于最邻近启动子的转录；(8)与增强子结合的蛋白包括激素受体蛋白；因而，发育过程中增强子可能在基因活性的调控中起重要作用。在酵母中，上游激活序列是如何调控半乳糖基因的表达?--类型：简答题--答案：答：在酵母中有三个协同调节的基因，它们的产物催化半乳糖向6—磷酸—葡萄糖转变反应中的连续步骤。虽然这些，基因紧密连锁，但它们却是分别转录的。在这个体系(图A11.1)中有两个上游激活序列(UAS)，一个位于gal1和gal10之间的区域内，此区域内还含有这些基因的启动子序列，另一个UAS与gal7的启动子毗邻。有两个不连锁的调节基因：促进gal基因转录的正调控基因和编码阻遏蛋白的负调控基因，其中正调控基因产生与两个UAS结合的激活蛋白。缺乏半乳糖时，转录不被激活，可能由于阻遏蛋白与激活蛋白结合；如果存在乳糖，则它可以与阻遏蛋白相互作用，破坏其抑制激活蛋白的能力。说明…1)gal1、gal7、gal10分别编码半乳糖激酶，半乳糖转移酶和半乳糖差向异构酶。2)如果酵母的其他任一基因置于UAS附近，那么它的活性就由半乳糖的存在与否来控制。\n--答案图片：picture--a11.1.jpg（）可使每个氨基酸和它相对应的tRNA分子相偶联形成一个()分子--类型：填空题--答案：氨酰tRNA合成酶，氨酰tRNA（）包括两个tRNA分子的结合位点：()即P位点，紧密结合与多肽链延伸尾端连接的tRNA分子，和(),即A位点，结合带有一个氨基酸的tRNA分子。--类型：填空题--答案：核糖体，肽酰tRNA结合区，氨酰tRNA结合区()催化肽键的形成，一般认为这个摧化反应是由核糖体大亚基上的()分子介导的。--类型：填空题--答案：肽酰转移酶，rRNA释放因子蛋白与核糖体上A位点的()密码结合，导致肽基转移酶水解连接新生多肽tRNA分子的化学键。--类型：填空题--答案：终止任何mRNA序列能以三种（）的形式被翻译，而且每一种都对应一种完全不同的多肽链。--类型：填空题--答案：可读框蛋白质合成的起始过程很复杂，包括一系列被（）催化的步骤。--类型：填空题--答案：起始因子在所有细胞中，都有一种特别的（）识别（）密码子AUG，它携带一种特别的氨基酸即（），作为蛋白质合成的起始氨基酸。--类型：填空题--答案：起始tRNA，起始，甲硫氨酸核糖体沿着mRNA前进，它需要另一个延伸因子（），这一步需要（）的水解。当核糖体遇到终止密码（）、（）、（）的时候，延长作用结束，核糖体和新合成的多肽被释放出来。翻译的最后一步被称为（），并且需要一套（）因子。--类型：填空题--答案：EF—G；GTP；UAG；UGA；UAA；终止；释放氨酰tRNA分子同核糖体结合需要下列哪些蛋白因子参与？()--类型：选择题--选择：(a)EF-G(b)EF-Tu(C)EF-Ts(d)eIF-2(e)EF-1--答案：b，d，e；在真核生物细胞中，翻译的哪一个阶段需要GTP?()--类型：选择题--选择：(a)加RNA的5’末端区的二级结构解旋(b)起始tRNA同核糖体的结合(c)在延伸的过程中，tRNA同核糖体的结合(d)核糖体的解体(e)5’帽子结构的识别\n--答案：b，c；下列关于原核生物转录的叙述中哪一项（那一些)是正确的？()--类型：选择题--选择：(a)核糖体的小亚基能直接同mRNA作用(b)IF-2与含GDP的复合物中的起始tRNA结合(c)细菌蛋白质的合成不需要ATP(d)细菌所有蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸(e)多肽链的第一个肽键的合成不需要EF-G--答案：a，d，e；下面关于真核生物翻译的叙述中，哪一个（一些)是正确的？()--类型：选择题--选择：（a）起始因子eIF只有同GTP形成复合物才起作用(b)终止密码子与细菌的不同(c)白喉毒素使EF-1ADP核糖酰化(d)真核生物蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸，在蛋白质合成完成之后，它马上被切除，(e)真核生物的核糖体含有两个tRNA分子的结合位点--答案：a，e；下列叙述不正确的是：()--类型：选择题--选择：（a）共有20个不同的密码于代表遗传密码（b)色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子（c）每个核苷酸三联体编码一个氨基酸(d)不同的密码子可能编码同一个氨基酸(e)密码子的第三位具有可变性--答案：a；起始因子IF-3的功能是：()--类型：选择题--选择：（a）如果同40S亚基结合，将促进40S与60S亚基的结合（b）如果同30S亚基结合，将防止30S与50S亚基的结合(c)如果同30S亚基结合，促使30S亚基的16SrRNA与mRNA的S-D序列相互作用(d)指导起始况NA进入30S亚基中与MRNA结合的P位点(e)激活核糖体的GTP酶，以催化与亚基相连的GTP的水解--答案：6．b真核起始因子eIF—3的作用是：()--类型：选择题--选择：（a）帮助形成亚基起始复合物(eIF—3，GTP，Met-tRNA，40S)（b)帮助亚基起始复合物(三元复合物，40S)与mRNA5’端的结合(c)若与40S亚基结合，防止40s与60S亚基的结合(b)与mRNA5’端帽子结构相结合以解开二级结构(e)激活核糖体GTP酶，使亚基结合可在GTP水解时结合，同时释放Eif-2--答案：b；核糖体的E位点是：()--类型：选择题--选择：(a)真核mRNA加工位点(b)tRNA离开原核生物核糖体的位点(c)核糖体中受EcoRI限制的位点(d)电化学电势驱动转运的位点--答案：b；下列关于核糖体肽酰转移酶活性的叙述正确的是：()--类型：选择题--选择：(a)肽酰转移酶的活性存在于核糖体大亚基中；（50s或60S)(b)它帮助将肽链的C末端从肽酰tRNA转到A位点上氨酰tRNA的，N末端(c)通过氨酰tRNA的脱乙酰作用，。帮助氨酰照旧A的N末端从A位点移至P位点中肽酰tRNA的C末端(d)它水解GTP以促进核糖体的转位(e)它将肽酰tRNA去酰基--答案：a，b，e；