高中生物教材第一册（必修）：第一章实验一学案生物组织中可溶性 3页

必修本 第4课时 实验：生物组织中可溶性 还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 郑梁梅高级中学 朱靖亚 知识精华 一、可溶性还原糖的鉴定原理：‎ 生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛基，因此叫还原性糖；蔗糖的分子内没有游离的半缩醛基，因此叫非还原性糖，不具有还原性。实际上本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否，而不能鉴定可溶性的非还原性糖。‎ 可溶性还原糖与斐林试剂（质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液配制而成）混合后,可以生成砖红色沉淀。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色 棕色 砖红色 二、脂肪的鉴定原理：‎ 鉴定生物组织中是否含有脂肪时，可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ，苏丹Ⅲ染液遇脂肪的染色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪的染色反应为红色。‎ 三、蛋白质的鉴定原理：‎ 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。在碱性溶液NaOH中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu2+ 作用，形成紫色或紫色的络合物，这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。‎ 题例领悟 例1：用斐林试剂鉴定可溶还原糖时，溶液的颜色变化过程为：‎ A、浅蓝色 棕色 砖红色 B、无色 浅蓝色 棕色 C、砖红色 浅蓝色 棕色 D、棕色 绿色 无色 解析：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后，立即生成浅蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，答案为A 例2：将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是：‎ A、碘液、苏丹Ⅲ溶液 B、双缩脲试剂、碘液 C、双缩脲试剂、苏丹Ⅳ染液 D、碘液 、斐林试剂 解析：白浆为淀粉，淀粉遇碘变蓝，黏稠物质为蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。因此，答案为B 自我评价 一、选择题：‎ ‎1、徒手切片时的刀口方向应是 （ ）‎ A、向前 B、向内 C、向左 D、向右 ‎2、在鉴定蛋白质样品时，加双缩脲试剂的正确操作方法是 （ ）‎ A、先加A液，混合后再加B液 B、先加B液，混合后再加A液 C、A、B液混合后立即加入 D、上述方法都可以采用 ‎3、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （ ）‎ A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定 B、花生种子含脂肪多且肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料 C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料 D、鸡蛋清蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料 ‎4、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是 （ ）‎ A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B、脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用 ‎5、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞较清晰，另一部分较模糊，这是由于 （ ）‎ A、反光镜末调好 B、标本切得厚薄不均 C、细准焦螺旋末调好 D、显微镜物镜损坏 ‎6、在可溶性还原糖及蛋白质鉴定时，事先留出一些组织样液的目的是 （ ）‎ A、与反应后混合液的颜色做对比 B、失败后再重做一次 C、下次实验再用 D、组织样液过多颜色反应不明显 二、非选择题 在用花生种子做脂肪鉴定实验时，基本步骤是：取一粒浸泡过 h的花生种子，去掉种皮；取花生的 ，进行徒手切片；选取 材料放在载玻片中央；用滴管在材料上滴2~3滴 染液，染色1min；用吸水纸吸去多余的染液，在材料上滴1~2滴体积分数为 溶液，洗去浮色；再用吸水纸吸去多余的洗液，在材料上滴1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片；在低倍显微镜下观察，会发现材料细胞中存在大量被染成 色的圆形小颗粒。说明材料中存在 。要想进一步看清楚视野右上方的细胞时，应将装片向 ‎ 移动，使细胞位于视野中央，再转动 换上 ，再调节 就可以看清楚。‎ 自我评价答案：‎ ‎1、B 2、A 3、A 4、B 5、B 6、A ‎ 非选择题 ‎1、3~4 子叶 最薄的一片 苏丹Ⅵ 50%的洒精 脂肪 右上方 ‎ 转换器 高倍物镜 细准焦螺旋