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- 2021-09-17 发布
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课后分层检测案 4 微生物的实验室培养
[基础巩固练]
1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含( )
A.碳源、磷酸盐和维生素
B.氮源和维生素
C.水、碳源、氮源和无机盐
D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素
2.如何判断制作的培养基是否灭菌彻底( )
A.看培养基是否透明
B.有没有消灭细菌菌体
C.未接种的培养基在恒温箱中保温 1~2天后有无菌落生长
D.是否消灭了微生物的芽孢、孢子
3.实验室欲获得纯净培养物的关键步骤是( )
A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
B.接种纯种细菌
C.适宜环境条件下培养
D.防止外来杂菌的入侵
4.在微生物的实验室培养中,下列各项操作不需要在无菌条件下
进行的是( )
A.配制培养基 B.倒平板
C.接种 D.培养
5.能够测定样品活菌数的方法是( )
A.稀释涂布平板法 B.重量法
C.直接计数法 D.比浊法
6.煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是( )
A.温度不同
B.时间不同
C.前者适用于固体消毒,后者适用于液体消毒
D.没有区别
7.下列有关稀释涂布平板法的叙述中,错误的是( )
A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
C.适宜条件下培养
D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落
8.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实
验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察、计数。请回答与
此实验相关的问题:
(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌的培养提供了
________和________。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是
________和________。
(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是________。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的
平板置于________中培养,培养的温度设定在 37℃。要使该实验所得
结果可靠,还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。
(4)培养 20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说
明湖水样品中有________种细菌。一般来说,菌落总数越多,湖水遭
受细菌污染的程度越________。
[能力提升练]
9.金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引
起食物中毒,下列叙述实验结束后的做法错误的是( )
A.对接种环进行灼烧处理
B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉
C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉
D.接种后双手必须用肥皂洗净,再用 75%的酒精棉球擦拭
10.甲、乙、丙是三种微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生
物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中
正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙
都不能。下列说法正确的是( )
粉状硫 10
g K2HPO44 g FeSO40.
5 g
蔗
糖
10 g
(NH
4)2S
O40.
4 g
H2O
100
mL
Mg
SO4
9.25
g
CaC
l20.
5 g
Ⅰ + + + + - + + +
Ⅱ + + + - + + + +
Ⅲ + + + + + + + +
注:“+”表示培养基中加入了这种物质,“-”表示培养基中
没有加入这种物质。
A.甲、乙、丙都是异养型微生物
B.甲、乙都是自养型微生物,丙是异养型微生物
C.甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物
D.甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物
11.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙
述正确的是( )
A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
12.如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为 1、2、3、4、5。
下列操作方法正确的是( )
A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B.划线操作须在火焰上进行
C.在 5区域中才可以得到所需菌落
D.在 1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
13.下列关于四种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的描述,
其中正确的一组是( )
项目
硝化细
菌
乳酸菌 酵母菌 衣藻
能源
氧化
NH3
分解乳
酸
固定
N2
利用光
能
碳源 CO2 糖类 糖类 CO2
氮源 NH3 N2 N2 NO-
3
代谢
类型
自养需
氧型
异养需
氧型
异养需
氧型
自养需
氧型
A.硝化细菌、乳酸菌
B.乳酸菌、酵母菌
C.酵母菌、衣藻
D.硝化细菌、衣藻
14.下表是培养某微生物的培养基的配方,请回答下列问题:
试剂
牛肉
膏
蛋白
胨
NaCl 琼脂
加水定容
至
用量 5 g 10g 5 g 20 g 1 000 mL
(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、碳源、________
和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________。培养基
配制完成以后,一般还要调节 pH并对培养基进行________处理。
(2)在配制培养基时,除考虑营养条件外,还要考虑________、
________和渗透压等条件。
(3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培
养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清
洗和________;空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使
蛋白质________,还能损伤 DNA的结构。
(4)分离纯化微生物最常使用的接种方法是________和________。
(5)在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用
的检测方法是______________________________________________。
[素养养成练]
15.某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物
A。研究人员用化合物 A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,
成功筛选到能高效降解化合物 A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如
图所示。请分析回答下列问题:
(1)培养基中加入化合物 A 的目的是________,这种培养基属于
________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的
________。实验需要振荡几次进行培养,由此推测“目的菌”的代谢
类型是________。
(3)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,在进行
下一区域划线前要将接种环________________。
(4)研究人员统计污水池中“目的菌”的总数,选用 10-4、10-5、
10-6稀释液进行涂布平板,每种稀释液都设置了 3个培养皿。从设计
实验的角度看,还应设置的一组对照实验是________________,设置
此对照实验的目的是________________。
(5)研究人员采用平板划线法纯化水样中分离出的细菌。操作时,
在第二次及以后的划线,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做
的目的是________________________________。划线的某个平板培养
后,第一划线区域的平行线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域
所划的第一条平行线上无菌落,其他平行线上有菌落。造成第一条平
行线无菌落可能的操作失误有________________。
(6)在示意图 A和图 B中,________表示的是用稀释涂布平板法接
种培养后得到的结果。
课后分层检测案 4 微生物的实验室培养
1.解析:培养基中一般都含有水、碳
源、氮源和无机盐,此外还应考虑 pH、特
殊营养物质及 O2等条件。
答案:C
2.解析:配制好的培养基,是否灭菌
彻底,通常在使用前在恒温箱中保温 1~2
天后检验有无菌落生长,若无则说明灭菌
彻底。
答案:C
3.解析:获得纯净培养物的关键是防
止外来杂菌的入侵。
答案:D
4.解析:配制培养基时不需要无菌操
作,因为配制后的培养基需要进行高压蒸
汽灭菌。
答案:A
5.解析:利用稀释涂布平板法能够在
不影响细菌生活的情况下,将细菌个体从
固体培养基上分离出来,并可以繁殖形成
菌落,可根据菌落数测定样品活菌数。
答案:A
6.解析:煮沸消毒法是指在 100℃条
件下煮沸 5~6 min,而巴氏消毒法则是在
70~75 ℃条件下煮 30 min 或在 80 ℃条件
下煮 15 min,二者的关键区别是温度不同。
答案:A
7.解析:稀释涂布平板法是将菌液进
行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度
的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表
面,在适宜条件下培养。只有在稀释度足
够高的菌液里,聚集在一起的微生物才能
被分散成单个细胞,从而能在培养基表面
形成单个的菌落。故选 D。
答案:D
8.解析:用于培养微生物的培养基中,
一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水
和无机盐等成分,碳源、氮源一般分别由
糖类和蛋白质类物质所提供。对培养基常
用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。在检测
湖水中细菌的污染情况时,应设置对照实
验,才能得出可靠的结果。
答案:(1)氮源 碳源 无机盐 水
(2)高压蒸汽灭菌法
(3)恒温培养箱 无菌水
(4)多 高
9.解析:金黄色葡萄球菌有很强的致
病力,所以在操作时一定要做到安全防范,
接种后双手用肥皂洗净,再用 75%的酒精
棉球擦拭,以起到杀菌的作用;对接种环
进行灼烧也可以杀灭细菌,防止污染环境;
高压蒸汽灭菌也可杀死培养基中的金黄色
葡萄球菌;如果只对带菌培养基进行加热,
杀不尽其中的致病菌,因为此菌的耐高温
能力很强,会污染环境。
答案:C
10.解析:根据题意可知,甲能在Ⅰ
中正常生长繁殖,而乙和丙都不能,而Ⅰ
培养基缺氮,说明甲能够自身固氮,属于
固氮微生物;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,
而甲和丙都不能,Ⅱ培养基中没有有机碳
源,说明乙能够合成有机物,属于自养微
生物;而丙不能在Ⅰ培养基生长,说明不
能固氮;又不能在Ⅱ培养基中生长,说明
不能合成有机物,只能在Ⅲ培养基中生长,
说明属于异养微生物,故 D正确。
答案:D
11.解析:培养基灭菌后再分装到培养
皿中;转换划线角度后要灼烧接种环,冷
却后再从上次划线的末端开始进行划线;
接种后的培养皿必须放在恒温箱中进行培
养,一般每隔 12 h或 24 h观察一次。
答案:B
12.解析:在每次划线前后都要对接
种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在
火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边
进行。在 5个区域中,只要有单个活细菌,
通过培养即可获得所需菌落。
答案:D
13.解析:解答此题时应明确:硝化
细菌、乳酸菌属于细菌,酵母菌属于真菌,
衣藻属于真核生物。微生物所需的能源、
碳源、氮源因其同化作用类型的不同而不
同。
答案:D
14.解析:(1)培养基中都应含有水、
无机盐、碳源、氮源。培养基配制完成后
要调 pH和灭菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元
素,可作为有机碳源。(2)配制培养基时,
除考虑营养条件外,还要考虑温度、酸碱
度和渗透压等条件。(3)灭菌是使用强烈的
理化因素杀死物体内外所有的微生物,所
以要对培养基和培养皿进行灭菌。消毒是
指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死
物体表面或内部一部分微生物,故操作者
的双手需要进行清洗和消毒。紫外线能使
蛋白质变性,还能损伤 DNA 的结构。(4)
分离纯化微生物常采用平板划线法和稀释
涂布平板法。(5)培养微生物时,在接种前
需要检测培养基是否被污染。对于固体培
养基应采用的检测方法是将未接种的培养
基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察
培养基上是否有菌落产生。
答案:(1)氮源 牛肉膏和蛋白胨 灭
菌
(2)温度 酸碱度 (3)灭菌 消毒 变
性
(4)平板划线法 稀释涂布平板法
(5)将未接种的培养基在适宜的温度下
放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌
落产生
15.解析:(1)培养基中加入化合物 A
是为分解化合物 A的微生物提供碳源和氮
源,分离出能分解化合物 A 的微生物;这
种培养基从功能上分属于选择培养基。(2)
分析培养基的配方可知,该培养基由化合
物 A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成,
因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源;
目的菌是需氧微生物,因此在培养过程中
应该振荡培养,增加培养液中的溶氧量满
足微生物对氧气的需求。(3)平板划线操作
的工具是接种环,对于接种环的灭菌方法
应该是灼烧灭菌。(4)实验设计过程应遵循
对照原则,该实验还应增设一组不接种的
空白培养基作为对照,以证明培养基制备
是否被杂菌污染。(5)对接种环常用的灭菌
方法是灼烧灭菌;在第二次及以后的划线
时,总是从上一次划线的末端开始划线的
目的是:将聚集的菌种逐渐稀释分散以便
获得由单个细胞繁殖而来的菌落。接种环
在使用前和每一次划线后要进行灼烧灭
菌,造成划线无菌落可能的操作失误是:
接种环灼烧后未冷却而烫死菌种或划线未
从第一区域末端开始。(6)分析题图可知,A
培养皿采用的接种方法是平板划线法,B培
养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法。
答案:(1)筛选目的菌 选择 (2)化合
物 A 异养需氧型 (3)灼烧并冷却 (4)不
接种的空白培养基 检验培养基制备过程
中是否被杂菌污染 (5)将聚集的菌种逐步
稀释以便获得单个菌落 接种环灼烧后未
冷却或划线未从第一划线区域末端开始
(6)B