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- 2021-09-18 发布
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绵阳市2017级线上学习质量评估
理科综合能力测试 生物试卷
一、选择题
1.下列各项特征中与多细胞生物统一完成生命活动无关的是( )
A. 细胞的分化 B. 细胞的调亡
C. 细胞成分稳定不变 D. 细胞间的信息交流
【答案】C
【解析】
【分析】
细胞是生物体结构和功能的基本单位。
单细胞的生物,单个细胞就能完成各种生命活动。多细胞的动物植物,他们依赖各种分化的细胞密切合作,共同完成一系列复杂的生命活动。
【详解】A、大部分多细胞生物依赖各种分化的细胞密切合作,共同完成一系列复杂的生命活动,A正确;
B、在生命延续过程中,死亡的细胞要及时更新,细胞凋亡需要以细胞为单位而有条不紊的进行,对多细胞生物的生命稳定性起重要作用,B正确;
C、组成生物体的细胞不是一成不变的,它们在完成各项生命活动的同时,其内在成分不断发生变化,C错误;
D、细胞间的信息交流依赖于不同的细胞分工合作,实现生物体功能上的协调,与多细胞生物统一完成生命活动密切相关,D正确。
故选C。
2.今年爆发的肺炎疫情是由传播力极强的新型冠状病毒引起的,严重威胁人们的生命安全,严重影响经济文化生活,给全球带来巨大损失。下列有关该病毒及其引起的肺炎的相关说法,错误的是( )
A. 可以通过检测病毒的碱基种类来判定该病毒的核酸类型
B. 该病毒可在唾沫、门把手等处快速繁殖而引起广泛传播
C. 研制疫苗并进行预防接种是保护易感人群最有效的方法
D. 新冠肺炎患者痊愈后的血清对该病危重患者有治疗作用
【答案】B
【解析】
- 14 -
【分析】
病毒(如噬菌体)没有细胞结构,蛋白质和核酸(每种病毒只含一种核酸,DNA或RNA) 等物质组成的简单生命体。病毒只能寄生在宿主细胞内才能正常地生活,可以根据病毒所含核酸种类的不同可分为DNA病毒和RNA病毒。
传染病概念:由病原体(细菌、真菌、病毒和寄生虫)引起的,能在人与人之间和人和动物之间传播的疾病。传染病流行具有三个环节:传染源、传播途径和易感人群。传播途径:空气传播、水传播、饮食传播、接触传播、生物传播等,传染病的预防措施:控制传染源;切断传播途径;保护易感人群。
【详解】A、可以通过检测病毒的碱基种类来判定该病毒为DNA病毒或RNA病毒,A正确;
B、病毒只能在宿主细胞才可快速繁殖,B错误;
C、易感人群接种疫苗是最有效的防疫手段,C正确;
D、新冠肺炎患者痊愈后血清内有相应的抗体和记忆B细胞,对危重患者有治疗作用,D正确。
故选B。
【点睛】新型冠状病毒也属于病毒,把握病毒的基本特点:仅含一种核酸,需寄生于活细胞。同时掌握免疫反应的基本概念,结合所学知识解答题目。
3.下列有关“用高倍镜观察线粒体和叶绿体”实验的叙述,正确的是( )
A. 可用菠菜叶稍带些叶肉的下表皮观察叶绿体
B. 健那绿染液可将活细胞的细胞质染成蓝绿色
C. 可观察到叶绿体和线粒体都具有双层膜结构
D. 可以使用同种材料同时观察线粒体和叶绿体
【答案】A
【解析】
【分析】
健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。叶肉细胞中的叶绿体,散布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形。可以在高倍显微镜下观察它的形态和分布。
【详解】A、菠菜叶稍带些叶肉的下表皮部位叶绿体大而稀疏,适合作为实验对象观察,A正确;
B、健那绿染液可将活细胞的线粒体染成蓝绿色,B错误;
- 14 -
C、叶绿体和线粒体都具有双层膜结构属于亚显微结构,在光学显微镜下观察不到,C错误;
D、叶肉细胞可用于观察叶绿体而不能用于观察线粒体,因为叶绿体的绿色会掩盖健那绿的染色效果,影响实验观察,D错误。
故选A。
【点睛】本题考查观察线粒体和叶绿体实验,对于此类试题,需要考生注意的细节较多,如实验的原理、实验选择的材料是否合理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等,需要考生在平时的学习过程中注意积累。
4.下列有关真核细胞增殖的说法,错误的是( )
A. 有丝分裂是真核生物体细胞增殖最主要的一种方式
B. 真核细胞的增殖过程都会进行遗传物质DNA的复制
C. 精子与卵细胞形成过程中,染色体的行为变化相同
D. 细胞类型变化以及数目的增多均依赖于细胞的增殖
【答案】D
【解析】
【分析】
细胞增殖是生物体重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种最为普遍的分裂方式,是真核细胞增殖的主要方式。减数分裂是生殖细胞形成时的一种特殊的有丝分裂,减数分裂过程中,染色体复制一次,细胞分裂两次。
细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程。
【详解】A、真核生物体细胞增殖的主要方式是有丝分裂,A正确;
B、细胞增殖过程中进行DNA的复制和有关蛋白质的合成,B正确;
C、减数分裂过程中,染色体行为变化的本质是相同的,染色体复制一次,细胞分裂两次,C正确;
D、细胞类型变化依赖于细胞的分化,D错误。
故选D。
5.下列有关种群和群落的说法,正确的是( )
A. 群落的物种组成是区别不同群落的重要特征
B. 种群的数量变化就是“J”型和“S”型增长
C. 群落演替总是由低等到高等,由简单到复杂方向发展
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D. 喷洒农药来防治害虫,可以达到从根本上消灭害虫的目的
【答案】A
【解析】
【分析】
种群是指生活在一定区域的同种生物的全部个体,种群特征包括种群的数量特征(种群密度)、年龄结构、性别比例、迁入率和迁出率、出生率和死亡率、空间特征等。群落的概念:在一定空间内所有生物种群的集合体,它具有一定的结构、一定的种类构成和一定的种间相互关系。群落演替是指随着时间的推移一个群落被另一个群落代替的过程。
【详解】A、群落的物种组成是区别不同群落的重要特征,A正确;
B、种群的数量变化是一个复杂的动态变化过程,常见的数量变化有“J”型和“S”型增长,也有其他增长形式,B错误;
C、群落演替一般来说,由低等到高等,由简单到复杂方向发展,但在自然灾害或人为干预下,可能会朝着反方向发展,C错误;
D、喷洒农药来防治害虫,可以杀灭大部分害虫,但仍有少部分带抗性的个体存活,D错误。
故选A。
6.迷迭香是雌雄同株植物,其花色由一对基因R、r控制,蓝色对白色为完全显性。在不考虑突变和致死情况下,以Rr的植株作亲本来选育蓝色纯合植株RR,在F2中RR植株所占比例最大的方法是( )
A. 连续自交2次,每代子代中不除去rr的个体
B. 连续自交2次,每代的子代中人工除去rr个体
C. 连续自由交配2次,每代的子代中不除去rr的个体
D. 连续自由交配2次,每代的子代中人工除去rr个体
【答案】B
【解析】
【分析】
以一对相对性状的杂合子(Rr)为亲本连续自交,其后代表现为:
Fn
杂合子
显性纯合子
隐性纯合子
比例
- 14 -
以一对相对性状的杂合子(Rr)为亲本连续自交,并在每一代除去隐形个体,其后代表现为:
Fn
杂合子
显性纯合子
比例
以一对相对性状杂合子(Rr)为亲本连续自由交配,产生的配子比例为R:r=1:1,故其后代表现为:
Fn
杂合子
显性纯合子
隐性纯合子
比例
【详解】A、以Rr的植株作亲本来选育蓝色纯合植株RR,连续自交2次,后代中RR植株所占比例为,A错误;
B、以Rr的植株作亲本来选育蓝色纯合植株RR,连续自交2次,每代的子代中人工除去rr个体,则F1比例为RR:Rr=1:2,F2中RR植株所占比例为,B正确;
C、连续自由交配2次,每代的子代中不除去rr的个体,F2中RR植株所占比例为,C错误;
D、连续自由交配2次,每代的子代中人工除去rr个体,则F1比例为RR:Rr=1:2,产生的配子比例为R:r=2:1,F2中RR植株所占比例为,D错误。
故选B。
【点睛】注意区分“自交”和“自由交配”
广义的自交是指具有相同基因型的两个个体进行交配。自由交配也叫随机交配,是指种群内具有生殖能力的雌雄个体之间可以随机交配,不受基因型的限制,属于杂交的一种。
7.下图是中心法则及其发展图解,反映了生物体内遗传信息的流向,回答下列问题:
(1)在线粒体和叶绿体中能够发生的生理过程有________(填序号),④过程需要的一种特殊的酶是_______。
- 14 -
(2)与③过程相比较,②过程特有的碱基配对方式是________。
(3)若某基因编码的氨基酸序列为“色氨酸—苯丙氨酸—……—.丝氨酸—半胱氨酸”,根据该氨基酸序列及密码子表________(填“能”或“不能”)推测出该基因的碱基序列,理由是________________。
【答案】 (1). ①②③ (2). 逆转录酶 (3). T-A (4). 不能 (5). 密码子具有简并性,由氨基酸序列不能确定mRNA的碱基序列,也就推测不出基因的碱基序列
【解析】
【分析】
试题分析:据图分析,图示中心法则反映了生物体内遗传信息的传递过程,其中①表示DNA的自我复制,②表示转录,③表示翻译,④表示逆转录,⑤表示RNA的自我复制。
【详解】(1)线粒体和叶绿体是半自主性细胞器,有独立的遗传物质,能够发生DNA的自我①复制、②转录、③翻译,④表示逆转录,需要逆转录酶;
(2)②表示转录,特有的碱基配对方式是T-A;
(3)由于密码子具有简并性,即多个密码子可能对应1个氨基酸,所以由氨基酸序列不能确定mRNA的碱基序列,也就推测不出基因的碱基序列。
【点睛】解答本题的关键是掌握中心法则的基本内容,能够根据箭头、模板和产物判断各个数字代表的遗传学过程。
8.近年来研究表明,通过重新编码人体胰岛中的胰岛A细胞或胰岛γ细胞,可以产生胰岛素。研究团队将两种关键转录基因(Pdx1和MafA)植入糖尿病小鼠的胰岛A细胞和γ细胞,然后将这些成功编码的细胞移植入糖尿病小鼠体内,结果发现小鼠胰岛素分泌量和血糖水平均在一段时间内处于正常化。回答下列相关问题:
- 14 -
(1)胰岛分化为A细胞、B细胞、γ细胞等多种细胞,它们的遗传物质___________(填“相同”、“不同”或“不完全相同”)。胰岛素能作用于靶细胞膜上的_______,激素调节的特点有___________(答出两点即可)。
(2)据图曲线分析,实验研究中还应设置一组对照组。应选择___________的小鼠进行实验,测定实验中血糖的数值。
(3)血糖升高后会促进两种关键基因(Pdx1和MafA)的表达,促进胰岛素的合成,当血糖明显降低时,这两种基因的表达减弱或关闭。这种调节机制的意义是____________。
(4)结合图实验结果,初步确定植入关键基因细胞的糖尿病小鼠,其病症在一定程度上能得到缓解,但并不能治愈。作出此判断的依据是_______________________。
【答案】 (1). 相同 (2). 特异性受体 (3). 微量和高效;通过体液运输;作用于靶器官、靶细胞 (4). 未植入关键基因细胞的正常小鼠 (5). 有利于维持血糖含量的稳定(或对维持机体稳态具有重要意义) (6). 5个月内血糖恢复成正常水平,6个月后血糖逐渐升高到糖尿病小鼠的状态
【解析】
【分析】
血糖平衡的调节:
(1)胰岛B细胞分泌的胰岛素的作用:①促进各组织、细胞对血糖的吸收;②促进葡萄糖的氧化分解;③促进肝脏、肌肉组织合成糖原;④促进葡萄糖转化为非糖物质;⑤抑制肝糖原的分解;⑥抑制非糖物质转化为葡萄糖。
(2)胰岛A细胞分泌的胰高血糖素的作用:①促进肝糖原分解;②促进非糖物质转化为葡萄糖。
【详解】(1)细胞分化之后形成的多种细胞,其遗传物质相同。胰岛素能作用于靶细胞膜上的特异性受体,激素调节具有以下特点:微量和高效、通过体液运输、作用于靶器官、靶细胞;
(2)根据图像分析,实验研究中有两组对象:未植入关键基因细胞的糖尿病小鼠,植入关键基因细胞的糖尿病小鼠,此外还应设置未植入关键基因细胞的正常小鼠为对照组;
(3)血糖升高后会促进两种关键基因(Pdx1和MafA)的表达,促进胰岛素的合成,进一步降低血糖含量,维持机体血糖平衡,当血糖明显降低时,这两种基因的表达减弱或关闭,从而抑制胰岛素的合成,以稳定血糖含量;
- 14 -
(4)根据图像分析,植入关键基因细胞的糖尿病小鼠相比于未植入关键基因细胞的糖尿病小鼠,在前5个月血糖水平较为正常,6个月后血糖逐渐升高到糖尿病小鼠的状态,证明植入关键基因细胞的糖尿病小鼠病症并没有被治愈,只是在前期病情有所缓解。
【点睛】本题考察了血糖平衡的调节、引起血糖浓度变化的相关因素、胰岛素的作用以及实验设计的相关原则和实验结果的分析,学生应结合题干,通过图形分析血糖浓度与胰岛素变化。
9.池塘养鱼历史悠久,鱼的种类丰富,食性多样:有素食性的鱼类,如草鱼、鲢鱼、鳙鱼,有肉食性的鱼类,如青鱼、鲶鱼等。回答下列问题:
(1)养殖品种上最好选择___________(填食性)鱼类,以期获得最大产量。
(2)如果给池塘补充投放饲料,池塘的环境容纳量(K值)将___________(填“增大”、“不变”或“减小”),从生产者到素食性鱼类的能量传递效率将_______(填“增大”、“不变”或“减小”)。
(3)要确保持续高产,应在种群数量___________(填“小于”、“等于”或“大于”)K/2时捕捞。
(4)在池塘水体中的某一水深处取水样,将水样分成三等份,一份直接测定O2含量(A);另两份分别装入不透光(甲)和透光(乙)的两个玻璃瓶中,密闭后放回取样处,经过24小时后测定甲瓶中的O2含量为B,乙瓶中的O2含量为C。假设甲、乙瓶中生物呼吸作用相同,完善有关问题:
①写出能间接表示该水层太阳能输入总量的表达式___________(用字母表示);
②据此分析,池塘水层过深不利于养鱼的原因是____________(答出两点即可)。
【答案】 (1). 素食性 (2). 增大 (3). 不变 (4). 大于 (5). C-B (6). 下层水体光照不足,生产者一天的有机物积累量过低,难以养活鱼类;氧含量过低,不利于鱼类生存
【解析】
【分析】
能量通过食物链和食物网逐级传递,其特点是:1.单向流动;2.逐级递减,生态系统中各部分所固定的能量是逐级递减的。一般情况下,愈向食物链的后端,生物体的数目愈少,这样便形成一种金字塔形的营养级关系。能量在相邻的两个营养级之间传递效率为10%~20%。
在环境条件不受破坏的情况下,一定空间中所能维持的种群最大数量称为环境容纳量,又称为K值,同一种生物的K值不是固定不变的,会受到环境的影响,当生物生存的环境改善,K值会上升。
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【详解】(1)根据能量流动递减规律,为最大程度利用能量,提高产量,最好选择素食性鱼类饲养;
(2)如果投放饲料,池塘的环境容纳量(K值)将增大,但能量传递效率不变;
(3)处种群增长速率最大,捕捞后的剩余量维持在点可以保证持续高产,所以应在大于时捕捞;
(4)①甲瓶溶解氧量(B)=原有溶解氧量−呼吸量,乙瓶溶解氧量(C)=净光合量+原有溶氧量,那么乙瓶溶解氧量−甲瓶溶解氧量=(净光合量+原有溶氧量)−(原有溶解氧量−呼吸量)=净光合量+呼吸量=实际光合量=C−B;②池塘水层过深导致下层水体光照不足,生产者通过光合作用积累的有机物过少,难以养活鱼类;同时氧含量过低,不利于鱼类生存。
【点睛】本题考查种群K值、能量流动、光合作用总量计算等知识,学生需分析24h后所测得的溶氧量的变化,甲瓶是由呼吸作用引起的变化,乙瓶是由光合作用和呼吸作用共同引起的变化。
10.果蝇的灰身和黑身是一对相对性状,由常染色体上的A/a控制。现让多只灰身果蝇随机交配,F1中灰身:黑身=55:9,无致死现象且雌雄情况相同。回答下列问题:
(1)这对性状中___________是显性性状,原因是_______________________。
(2)在F1中灰身:黑身不满足分离比3:1,原因是______________________,亲本中a的基因频率为______________________。
(3)已知果蝇的另一对相对性状正常腿与短腿由X染色体上的B/b基因控制,已知受精卵中缺少该对等位基因中的某一种基因时会致死。现有正常腿雌果蝇与短腿雄果蝇交配,得到大量的F1代且雌:雄=2:1。根据实验结果,能得出的结论有___________(答出两点即可)。
【答案】 (1). 灰身 (2). 亲本全是灰身,F1性状分离出现了黑身 (3). 亲本灰身果蝇中存在纯合体(AA) (4). 3/8(或37.5%) (5). ①果蝇的正常腿为显性性状,短腿为隐性性状;②亲本雌果蝇为显性性状,雄果蝇为隐性性状;③该果蝇种群的正常腿只出现在雌果蝇中,雄果蝇没有正常腿;④缺乏b基因使受精卵致死;⑤F1果蝇中正常腿:短腿=1:2(F1果蝇中正常腿雌果蝇:短腿雌果蝇:短腿雄果蝇=1:1:1);⑥正常腿果蝇之间无法进行基因交流;⑦正常腿果蝇只有杂合体,没有纯合体
【解析】
【分析】
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要区分一对相对性状的显、隐性关系,可以让生物杂交,有两种情况可以作出判断,若是两个相同性状的生物个体杂交后代中有另一个新的相对性状出现,则亲本的性状为显性性状;若是不同性状的生物个体杂交,后代中只出现一种性状,则此性状为显性性状。
根据后代隐性个体(aa)的比例可以判断亲本配子中a的比例,进一步计算亲本a的基因频率。
【详解】(1)让多只灰身果蝇随机交配,F1中灰身:黑身=55:9,出现了不同于亲本的性状黑身,证明灰身为显性性状;
(2)在F1中灰身:黑身不满足分离比3:1,无致死现象且雌雄情况相同,则考虑亲本是否基因型相同,根据“多只灰身果蝇随机交配”可推测分离比异常的原因是亲本灰身果蝇中存在纯合体,假设导致黑身的基因为a,根据F1中黑身(aa)的比例为,可推测亲本产生的配子比例为A:a=5:3,即亲本中a的基因频率为37.5%;
(3)根据F1代雌:雄=2:1,根据其比例可知雄性个体部分死亡,则推测果蝇的正常腿为显性性状,短腿为隐性性状,亲本为正常腿雌果蝇(XBXb)与短腿雄果蝇(XbY),后代个体为正常腿雌果蝇(XBXb)、短腿雌果蝇(XbXb)、短腿雄果蝇(XbY)、正常腿雄果蝇(XBY、因缺乏Xb致死),所以才会出现F1代且雌:雄=2:1,由于缺乏Xb致死,故果蝇的正常腿只有XBXb这一基因型。
【点睛】本题考查基因分离定律的相关应用,考生应熟练掌握不同基因型个体的比例计算。对于后代中出现致死现象导致的比例异常现象的分析,可以用假设法判断性状显隐性,再结合异常比例分析做题。
[生物——选修1:生物技术实践]
11.黑茶常被压缩为茯砖茶,其内的金黄色菌落俗称“金花”,主要是冠突散囊菌,其内含丰富的营养素,对人体极为有益。回答下列问题:
(1)为分离茯砖茶中的冠突散囊菌,制备马铃薯琼脂培养基→无菌水浸泡黑茶30min过滤获得菌液→取0.2mL稀释液接种在培养基平板上,在适宜条件下培养一段时间观察菌落形态并计数。由培养基的配方可知,冠突散囊菌属于______________(填“细菌”、“真菌”或“放线菌”)。若采用稀释涂布平板法,应先做系列稀释再涂布培养,确保以10倍等梯度稀释的操作是每次均从上一个稀释倍数的试管中取1mL菌液,再加入______________中进行稀释,移液管使用过程中的无菌操作有______________(答出两点即可)。
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(2)冠突散囊菌能分泌淀粉酶催化茶叶中的淀粉转化低聚糖,也能分泌氧化酶催化多酚类化合物氧化,使茶叶汤色变棕红,消除粗青味。酶催化作用的机理是_______________;欲将多种相对分子质量不同的酶进行分离,可用______________法;淀粉酶适合采用______________法固定化技术生产麦芽糖浆;若要模拟冠突散囊菌分解茶汤中的成分,应该采用固定化细胞技术而非固定化酶,理由是固定化细胞能____________,使冠突散囊菌能发生连续的酶反应,分解茶汤中的成分。
【答案】 (1). 真菌 (2). 9mL无菌水 (3). 移液管需要灭菌;操作时在酒精灯火焰旁进行;转移菌液等操作不能接触任何物体 (4). 显著降低反应需要的活化能 (5). 凝胶色谱法 (6). 化学结合和物理吸附 (7). 固定一系列酶
【解析】
【分析】
牛肉膏蛋白胨培养基适于培养细菌、麦芽汁琼脂培养基适于培养酵母菌、马铃薯琼脂培养基适于培养真菌等,真菌能够大量生成淀粉水解酶,利用培养基中的淀粉。
固定化酶、固定化细胞的比较:
【详解】(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基一般用于真菌培养,故冠突散囊菌属于真菌,稀释涂布平板法在稀释菌液时,一般用无菌水稀释,,确保以10倍等梯度稀释,则需要加入1mL菌液,再加入9mL无菌水稀释,涉及到的无菌操作包括移液管需要灭菌;操作时在酒精灯火焰旁进行;转移菌液等操作不能接触任何物体等;
(2)酶催化作用的机理显著降低反应需要的活化能,分离不同相对分子质量的酶可以采用凝胶色谱法,由于酶分子较小,容易从包埋材料中漏出,因此酶更适合采用化学结合法和物理吸附固定法,固定化细胞可以催化一系列的酶促反应,有利于冠突散囊菌分解茶汤中的成分。
【点睛】本题考查常见培养基、微生物培养过程、固定化酶技术和细胞固定化技术的相关知识,意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点,把握知识间内在联系,难点在于真菌的判断,根据马铃薯葡萄糖琼脂培养基的特点来判断冠突散囊菌的类型。
[生物——选修3:现代生物科技专题]
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12.白细胞介素是人体重要的淋巴因子,具有免疫调节、抑制肿瘤等多种功能。近年来科学家将药用蛋白转向植物生产,如图是将人的白细胞介素基因导入马铃薯中,培养生产白细胞介素的过程。(tsr为一种抗生素—硫链丝菌素的抗性基因)
(1)提取人的白细胞介素基因适宜选用的限制酶是___________,不能使用限制酶SmaI的原因是___________。
(2)除图示方法外,也可从利用___________法构建的cDNA文库中获取目的基因。获得目的基因后可采用PCR技术大量扩增,需提供Taq酶和___________等。
(3)将目的基因导入马铃薯细胞常采用___________法,其原理是将目的基因导入Ti质粒上的___________。
(4)为筛选出含目基因的马铃薯细胞,需要在培养基中添加___________。最终为了检测目的基因是否在马铃薯中表达,可通过____________方法进行分子水平的检测。
【答案】 (1). PstⅠ和HindⅢ (2). 限制酶SmaⅠ酶切位点位于白细胞介素基因中部,使用它会造成目的基因断裂 (3). 反转录 (4). 引物 (5). 农杆菌转化 (6). T-DNA (7). 硫链丝菌素 (8). 抗原—抗体杂交
【解析】
【分析】
分析题图,图示表示人的白细胞介素基因表达载体的构建过程,载体和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位点,所以切割载体和目的基因时用限制酶PstⅠ和HindⅢ,再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。获取目的基因的方法包括从基因文库中获取、cDNA文库法、供体细胞的DNA中直接分离基因(鸟枪法)。农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将Ti质粒的T-DNA插入到植物基因组中。
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【详解】(1)载体和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位点,使用限制酶SmaI则会破坏目的基因;
(2)目的基因的获取可以采用cDNA文库法(即逆转录法),指以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体,采用PCR技术大量扩增,需提供Taq酶和引物等;
(3)将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法,利用的是Ti质粒上的T-DNA;
(4)构建好的表达载体含有硫链丝菌素的抗性基因,因此可以在培养基中添加硫链丝菌素进行筛选,为检测目的基因是否顺利表达,可以通过抗原-抗体杂交技术。
【点睛】解答本题的关键是分析题图中的限制酶切割位点,明确目的基因和质粒都有PstⅠ和HindⅢ的切割位点,从而可以用于构建基因表达载体,其他的酶切位点则会破坏目的基因或抗性基因。
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