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- 2021-09-24 发布
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专题 2 细胞工程
2.2 动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
1.下列不属于动物细胞培养必需条件的是( )
A.无菌、无毒的环境 B.适宜的温度和 pH
C.O2 等气体环境 D.适宜的光照条件
答案:D
2.动物细胞培养过程的顺序是( )
①原代培养 ②传代培养 ③用胰蛋白酶处理组织,形成分散的
细胞悬液
A.①②③ B.①③②
C.②①③ D.③①②
解析:动物细胞培养过程的程序为选取幼龄动物或早期胚胎组织
作培养材料→用胰蛋白酶处理组织,制备细胞悬液→原代培养→传代
培养。
答案:D
3.细胞工程包括植物细胞工程和动物细胞工程,下列属于动物细
胞工程技术的是( )
①动物细胞培养 ②动物细胞核移植 ③动物细胞融合
④制备单克隆抗体
A.①②③ B.②③④
C.①③④ D.①②③④
解析:动物细胞工程包括:动物细胞培养、动物细胞核移植、动
物细胞融合和制备单克隆抗体等,其中动物细胞培养是其他动物细胞
工程技术的基础。
答案:D
4.如下图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中
B、E 两点表示经筛选、分装后继续培养。下列判断错误的是( )
A.B 点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养
B.接触抑制现象主要发生在 AB 段和 DE 段
C.分瓶后的每个培养瓶中的细胞群称为一个克隆
D.E 点后的细胞大多数具有异倍体核型,可连续传代
解析:人们通常将动物组织处理分散后的初次培养称为原代培养,
分瓶后的培养称为传代培养,B 点之后细胞继续生长,可见 B 点之后
进行了传代培养,A 正确;当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,
细胞就会停止分裂增殖,即会发生接触抑制现象,在 AB 段和 DE 段
细胞几乎生长停滞,可能发生了接触抑制,B 正确;细胞克隆的最基
本要求是必须保证分离出来的是一个细胞而不是多个细胞,C 错误;
已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系,称连续细胞系或无限细胞系,
无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,D 正确。
答案:C
5.如图表示动物细胞培养程序图,请据图回答下列问题。
①取动物组织块
↓
②________
③处理组织分散成单个细胞
↓
④制成________
↓
⑤转入培养液中进行培养
↓
⑥处理贴壁细胞分散成单个细胞,制成________
↓
⑦转入培养液中进行培养
(1)过程②表示________________________________________。
(2)过程③和⑥用________处理组织或贴壁细胞分散成单个细胞,
这样做的目的是_______________________________________
________________________________。
(3)④和⑥的过程都要把分散的细胞制成__________________。
(4)过程⑤进行的细胞培养是________,细胞适于____生长增殖。
(5)过程⑦进行的细胞培养是________,一般传至______代后就不
易传下去了,传至________继续培养时,增殖会逐渐缓慢,以至于完
全停止,部分细胞的________会发生改变。继续培养时,少部分细胞
发生了________,朝着等同于________的方向发展。
解析:进行动物细胞培养时,首先将组织块剪碎,用胰蛋白酶或
胶原蛋白酶处理,使其分散成许多单个细胞,然后,用培养液将分散
的细胞稀释制成细胞悬液,再将细胞悬液放入培养瓶内,置于适宜环
境中培养。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
以后,细胞进行有丝分裂,数目不断增多。当贴壁细胞分裂生长到表
面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑
制。人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。贴满瓶壁
的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分别继续培养,让细胞继续
增殖,这样的培养过程通常被称为传代培养。
答案:(1)剪碎组织 (2)胰蛋白酶 解除由于接触对细胞生长和繁
殖的抑制 (3)细胞悬液 (4)原代培养 贴壁 (5)传代培养 10 10
~50 代 细胞核型 突变 癌细胞
[A 级 基础巩固]
1.下列关于动物细胞培养的叙述,不正确的是( )
A.动物细胞培养技术的原理是细胞的全能性
B.传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞
C.癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象
D.动物细胞培养一般需要使用 CO2 培养箱
解析:动物细胞培养的原理是细胞增殖。
答案:A
2.用动植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是( )
A.都需要用含 95%空气加 5%CO2 的混合气体的培养箱
B.都需要用液体培养基
C.都要在无菌条件下进行
D.都可体现细胞的全能性
解析:不管是动物细胞培养还是植物组织培养,最基本的一个条
件就是无菌环境。此外,动物细胞培养的培养基是液体培养基,其中
的碳源是葡萄糖,培养液中还需要加入一定的动物血清或血浆,其气
体环境是 95%空气+5%CO2,以维持培养液的 pH;而植物组织培养
的培养基为固体培养基,其碳源为蔗糖,组织培养的脱分化阶段必须
在黑暗条件下进行,而再分化过程需要一定的光照条件;动物细胞培
养就是细胞的增殖,不能体现细胞的全能性,而植物组织培养完成了
由一个细胞到完整植株的全过程,体现了植物细胞的全能性。
答案:C
3.下图是某克隆羊培育过程模式图,试分析获得该克隆羊的生殖
方式、该克隆羊的基因型以及该克隆羊发育成熟时所分泌的性激素依
次是( )
A.无性生殖、Aa、雌性激素
B.无性生殖、aa、雄性激素
C.有性生殖、aa、雄性激素
D.有性生殖、AA、雌性激素
解析:克隆羊是利用了细胞核移植技术,其生殖方式为无性生殖;
该克隆羊继承了 B 羊的全部的细胞核基因和 A 羊的细胞质基因,因此
其基因型为 aa;由于 B 羊为雄性,因此该克隆羊亦为雄性,故该克隆
羊发育成熟时所分泌的性激素是雄性激素。
答案:B
4.据英国《卫报》披露,纽卡斯尔大学研究人员不久前成功实现
一项生殖医学技术,将患有线粒体疾病妇女的受精卵中的细胞核移植
到健康妇女捐献的去核卵子中,最终产下了健康的婴儿。下列叙述错
误的是( )
A.此项技术的基础是动物的细胞和组织培养
B.此项技术的原理与克隆羊“多莉”完全相同
C.健康妇女捐献的卵子的细胞质具有调控移入细胞核发育的作用
D.婴儿出生后具有患病夫妇以及捐献健康卵子的妇女三方的遗传
特征
解析:动物克隆技术的基础是动物细胞和组织培养,A 项正确;
此项技术用的受精卵的细胞核,而克隆羊用的是高度分化的乳腺细胞,
分化程度不同,B 项错误;卵细胞的细胞质具有调控移入细胞核发育
的作用,C 项正确;该婴儿细胞的核基因由形成受精卵的夫妇提供,
质基因由提供去核卵子的妇女提供,D 项正确。
答案:B
5.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性,准备对某
种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙
述正确的是( )
A.制备肝细胞悬液时,可用胃蛋白酶处理肝组织块
B.恒温培养箱中的 CO2 浓度维持在 5%左右,以促进细胞呼吸
C.为了保证细胞培养所需的无毒环境,需大量添加各种抗生素
D.本实验应设置对照实验,以检测药物对甲、乙细胞的毒性大小
解析:在利用肝组织块制备肝细胞悬液时,常用胰蛋白酶,不能
使用胃蛋白酶,因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用,但这样
的环境不适于细胞生存,A 错误;细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养
箱中进行,CO2 的作用是维持培养液的 pH,B 错误;抗生素是用来杀
菌的,不是杀病毒的,C 错误;本实验应设置对照实验,用添加药物
的培养液分别培养甲、乙细胞,根据变异细胞占培养细胞的比例,以
检测药物对甲、乙的毒性大小,D 正确。
答案:D
B 级 能力训练
6.回答下列有关动物细胞培养的问题:
(1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互
接触时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的________。此时,
瓶壁上形成单层细胞,这种单层培养法的出现,对细胞培养的发展起
了很大的推动作用。
(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,但极少数
细胞克服细胞寿命的自然极限,获得________,朝着等同于癌细胞的
方向发展,该种细胞由于细胞膜上________减少,导致细胞间的黏着
性________。
(3)在动物细胞体外培养过程中,一般要满足四个方面的条件:无
菌无毒的环境、营养、温度、pH 及气体环境,其中在培养液中添加
________,以防培养过程中的污染;由于人们对细胞所需的营养物质
还没有完全搞清楚,故在使用合成培养基时,通常需加入________等
天然成分;气体环境主要是提供细胞所需的 O2 和 CO2,其中 O2 的作
用是_____________,CO2 的作用是______________________。
(4)动物细胞培养可用于检测某种物质的毒性大小,若用被检测物
质培养的细胞与对照组相比,发生变异的细胞数目所占的百分比大,
则该物质的毒性大,判断的依据是________________________。
答案:(1)接触抑制
(2)不死性 糖蛋白 降低
(3)抗生素 血清、血浆 供给细胞进行有氧呼吸 维持培养液的
pH
(4)物质的毒性越大,越容易导致细胞发生变异
7.某生物兴趣小组对一种抗癌新药进行实验时,以动物肝癌细胞
为材料,测定抗癌药物对体外培养细胞增殖的影响。请回答下列有关
动物细胞培养的问题。
(1)在动物细胞培养时,将细胞所需的营养物质按其种类和所需数
量严格配制而成的培养基称为________培养基。通常在培养基中还需
要加入适量________等一些天然成分。细胞培养应在含 5%CO2 的恒温
培养箱中进行,CO2 的作用是________________。另外,还应该保证
被培养的细胞处于________、________的环境。
(2)在细胞生长过程中,当细胞贴壁生长到一定程度时,其生长会
受到抑制,这种现象称为________。
(3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量
的________。
(4)请你帮助兴趣小组的同学分析本实验,实验的自变量是
________________,实验组和对照组除了自变量不同外,其他处理均
应该相同,这是为了遵循实验设计的________原则。
解析:(1)将动物细胞所需要的各种营养物质按其种类和所需数量
严格配制而成的培养基,称为合成培养基。由于对细胞所需的营养物
质还没有完全搞清楚,因此,在使用合成培养基时,还要加入一些动
物血清、血浆等天然成分。细胞培养所需的气体中有 CO2,作用是维
持培养液的 pH。被培养的细胞必须处于无菌、无毒的环境中,才能保
证细胞正常地生长增殖。(2)动物细胞在分裂过程中有接触抑制的现象。
(3)抗生素能杀死培养基中的微生物,保证无菌无毒环境。(4)要测定抗
癌药物对体外培养细胞增殖的影响,实验的自变量为抗癌药物的有无。
其他无关变量应该相同,否则会干扰实验结果,这种设计遵循的是实
验的单一变量原则。
答案:(1)合成 血清、血浆 维持培养液的 pH 无菌 无毒 (2)
接触抑制 (3)抗生素 (4)是否加入抗癌药物 单一变量
8.下图为动物细胞融合示意图,请据图回答:
(1)图中灭活的仙台病毒的作用是_________________________
_____________________________________________________。
(2)若仅考虑两两融合,则 A 细胞和 B 细胞融合后共有
______________________________________________________
三种类型。
(3)由杂种细胞形成无性系 1、2、3 的方法,可以称为
_____________________________________________________。
(4)此项技术最重要的应用是_____________________________
______________________________________________________。
解析:(1)诱导细胞融合需要有促融剂,比如聚乙二醇、灭活的仙
台病毒等。(2)若仅考虑两两融合,则 A 细胞和 B 细胞融合后共有 A—A、
A—B、B—B 三种类型。(3)无性繁殖可以称之为克隆。(4)细胞融合技
术最重要的应用是制备单克隆抗体。
答案:(1)促进细胞融合(作为促融剂) (2)A—A、A—B、B—B
(3)克隆 (4)制备单克隆抗体
9.随着科学技术的发展,人们可以根据需求来改造生物的性状。
如下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解,据图回答下列问
题:
(1)在此过程中涉及的细胞水平现代生物技术手段主要有______
_____________________________________________________。
(2)在基因工程中,我们称②为________,在②进入③之前要用
________________________等工具来构建基因表达载体,能实现②进
入③的常用方法是______________________________________。
(3)图中①一般经________处理可以得到③,从③到④的过程中一
般利用去核后未受精的卵母细胞作为受体,而不用普通的体细胞,原
因是____________________________________________________
_____________________________________________________。
(4)⑦是⑥的后代,那么⑦的遗传__________________________
最相似,原因是_________________________________________
_______________________________________________________
_____________________________________________________。
答案:(1)核移植、动物细胞培养 (2)目的基因 限制酶、DNA 连
接酶和载体 显微注射法 (3)胰蛋白酶 卵母细胞大、易操作、营养
物质多,体细胞的细胞核在卵母细胞的细胞质中才能表现出全能性
(4)荷斯坦奶牛 个体⑦的核遗传物质大部分来自荷斯坦奶牛,⑥只是
为胚胎发育提供营养和场所,⑦并没有获得⑥的遗传信息