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- 2021-09-24 发布
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考查知识点及角度
难度及题号
基础
中档
稍难
DNA粗提取原理
1、4
DNA粗提取操作步骤
2、3、6
8
DNA鉴定
5
7
一、选择题(每小题4分,共20分)
1.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,不是其依据原理的是
( )。
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而易溶于某些有机溶剂
D.在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应
解析 利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同可以提取DNA;DNA不溶于酒精,而其他杂质往往溶于酒精,所以可用酒精提纯DNA;DNA+二苯胺蓝色,故可用二苯胺对DNA进行鉴定。
答案 C
2.如果在除去杂质时选择方案三,为什么要将滤液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min
( )。
A.使DNA变性 B.使蛋白质变性
C.使DNA和蛋白质变性 D.分解蛋白质
解析 大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温,而DNA在80 ℃以上才变性。在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min,目的是使蛋白质变性,然后分离得到DNA。
答案 B
3.若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是
( )。
A.利于DNA的溶解 B.溶解细胞膜
C.分离DNA和蛋白质 D.溶解蛋白质
解析 洗涤剂是一种离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。
答案 B
4.下列图示中能正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是
( )。
解析 在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。
答案 C
5.下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述,正确的是
( )。
A.该实验先后两次加入的蒸馏水其作用完全相同
B.质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液具有促凝血作用
C.利用DNA不溶于酒精而蛋白质能溶于酒精的性质,可将DNA与蛋白质分离
D.在溶有DNA的质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺后呈蓝色
解析 该实验中第一次加蒸馏水的目的是使红细胞破裂释放出DNA,第二次加水的目的是使NaCl溶液浓度降低,使DNA析出;质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠具有防止凝血的作用;最后鉴定DNA要溶解在质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中且需沸水加热。
答案 C
二、非选择题(共30分)
6.(10分)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。
①正确的操作顺序是________。
②上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是________和________。
③上图A步骤中所用酒精必须是经过________的才能使用,该步骤的目的是____________________________。
④为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加________试剂后沸水浴,如果出现________则证明该丝状物的主要成分为DNA。
解析 C、E步骤加入蒸馏水的目的不同,C为加速细胞破裂,E为降低NaCl溶液浓度使DNA析出,用于进一步析出DNA的酒精宜先预冷,以增加DNA析出量。
答案 ①C→B→E→D→A ②加速细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出 ③充分预冷
提取含杂质较少(或较纯净)的DNA ④二苯胺 蓝色
7.(10分)实验中对DNA进行鉴定时,做如下操作(见下表):
试管
序号
A
B
1
加质量浓度为2 mol/L NaCl溶液5 mL
加质量浓度为2 mol/L NaCl溶液5 mL
2
不加
加入提取的DNA丝状物并搅拌
3
加4 mL二苯胺,混匀
加入4 mL二苯胺,混匀
4
沸水浴5 min
沸水浴5 min
实现现象
实验结论
(1)根据如图,完成表格空白处的实验内容。
(2)对B试管,完成1、2、3的操作后溶液颜色如何?
____________________________________________________________。
(3)在沸水中加热的目的是________,同时说明DNA对高温有较强的________。
(4)A试管在实验中的作用是__________。
(5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与________________有关。
解析 本题主要考查DNA分子的鉴定。A、B两试管形成对照,B试管中含DNA丝状物,A试管中不含,起对照作用,其他条件均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热5 min,加快颜色反应的速度,观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。
答案 (1)实验现象:A.溶液不变蓝色 B.溶液逐渐变蓝色
实验结论:DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺会被染成蓝色
(2)溶液颜色基本不变(不呈浅蓝色) (3)加快颜色反应速度 耐受性 (4)对照 (5)加入试管中的DNA(丝状物)的多少
8.(10分)(2011·江苏生物)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动,具体步骤如下。
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。
DNA粗提取
第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。
第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步:取6支试管,分别加入等量的质量浓度为2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果(如下表)。
材料保存温度
花菜
辣椒
蒜黄
20 ℃
++
+
+++
-20 ℃
+++
++
++++
注:(“+”越多表示蓝色越深)
分析上述实验过程,回答下面的问题。
(1)该探究性实验的课题名称是:__________________________________。
(2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少____________。
(3)根据实验结果,得出结论并分析。
①结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在-20 ℃条件下保存,DNA的提取量较多。
结论2:__________________________________________________________。
②针对结论1,请提出合理的解释:________________________________________________________________。
(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:________________________,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
解析 本题主要考查DNA粗提取的相关知识,意在考查考生的实验与探究能力。如果DNA断裂,就不容易被提取出来;温度主要是通过影响酶的活性来影响生理过程;粗提取得到的DNA中含有少量的蛋白质,可以通过氯仿的特殊功能来去除蛋白质,提高DNA纯度。
答案 (1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 (2)DNA断裂 (3)①等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多 ②低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢 (4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液