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- 2021-09-24 发布
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专题 2 微生物的培养与应用
课题 1 微生物的实验室培养
第 1 课时 培养基和无菌技术
题型一 培养基成分及种类分析
1.不同培养基的具体配方不同,但所有培养基都含有( )
A.碳源、磷酸盐和维生素
B.氮源和维生素
C.水、碳源、氮源和无机盐
D.水、碳源、氮源和氧气
答案 C
解析 虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源(提供碳元
素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。在某些特定培养基中需要维生素
等特殊营养物质或氧气等。
2.下列叙述正确的是( )
A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基
C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个菌体
答案 A
解析 按物理状态不同,培养基可分为液体培养基、半固体培养基、固体培
养基,按用途不同,培养基又可分为选择培养基和鉴别培养基,B 错误;固体培
养基由于添加了凝固剂琼脂,所以即使加入少量水也不可能制成液体培养基,C
错误;单个菌体是肉眼看不见的,由同种微生物的众多菌体构成的菌落是肉眼可
以看见的,D 错误。
3.不同的微生物对营养物质的需求不同。下列叙述正确的是( )
A.配制培养基时都应该加糖类作为碳源
B.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
C.碳源物质一定也是微生物生长所需能源物质
D.氮源物质为该微生物提供必要的氮元素
答案 D
解析 不同的微生物对碳源的要求不同,如自养型微生物不需糖类作碳源,
A 错误;对异养微生物来说,蛋白胨既是碳源,又是氮源,B 错误;以糖类等有
机碳作碳源时,碳源物质往往也是能源物质,以 CO2 等无机碳作碳源物质时,
碳源物质不是能源物质,C 错误;氮源物质在微生物培养中的主要作用是为微生
物提供氮元素,D 正确。
题型二 无菌操作
4.关于灭菌和消毒的理解,不正确的是( )
A.灭菌是指杀灭物体内外一切微生物,包括芽孢和孢子
B.实验者的双手用酒精消毒
C.接种环用灼烧法灭菌
D.常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌和紫外线照射等
答案 D
解析 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢
和孢子),A 正确;实验者的双手用酒精消毒,B 正确;金属接种工具常用灼烧
灭菌法灭菌,C 正确;微生物的培养过程中常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭
菌、高压蒸汽灭菌等,紫外线照射属于消毒方法,D 错误。
5.以下部位不含有微生物的是( )
A.洗干净的脸上 B.洗完澡后的皮肤
C.刷完牙后的口腔 D.灼烧之后的接种环
答案 D
解析 灼烧之后的接种环已经灭菌,故不含微生物,A、B、C 三项所示内
容不是灭菌,D 符合题意。
6.消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失
生长繁殖的能力。消毒仅指杀死部分微生物而对被消毒的物体基本无害。下列哪
些事物适用于消毒处理( )
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿
⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩
C.①②③④⑤⑥⑧ D.以上全部
答案 A
解析 皮肤可用酒精消毒,饮用水可用氯气消毒,牛奶采用巴氏消毒,果汁
和酱油宜采用消毒方法处理,避免营养成分被破坏,①②③⑧⑨符合题意;注射
器需要进行灭菌处理,培养皿可采用干热灭菌,接种环可用灼烧灭菌,培养基、
手术刀可采用高压蒸汽灭菌。
7.下面对微生物培养中灭菌的理解不正确的是( )
A.防止杂菌污染
B.灭菌就是杀死培养基中的杂菌
C.培养基和培养设备等都必须进行灭菌
D.灭菌必须在接种前
答案 B
解析 培养基和培养设备等都需要灭菌,且消灭全部微生物而不只是杂菌,
B 错误。
8.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列
叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防被
微生物感染
C.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌
D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境
答案 C
解析 为防止杂菌污染,研究和应用微生物时应进行消毒和灭菌,实验室可
以用紫外线或化学药物进行消毒,A 正确;在实验室中,切不可吃东西、喝水,
离开实验室时一定要洗手,以防被微生物感染,B 正确;接种环、接种针等金属
用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌,C 错误;使用后的
培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境,D 正确。
9.在生物技术上常利用大肠杆菌制成“工程菌”。某生物小组的同学,利
用实验室提供的大肠杆菌品系及其他必要材料,对该品系大肠杆菌进行了培养。
请分析回答下列问题:
(1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同,故制备培养基时各成分
要有合适的____________。培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为微生物提供
______________、______________。
(2)配制培养基时,需将 pH 调至________或微碱性。
(3)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是________________________。
答案 (1)浓度和比例 氮源、碳源和维生素 碳源
(2)中性
(3)高压蒸汽灭菌
解析 (1)培养基中各成分要有合适的浓度和比例,保证微生物有充足的营
养,又不会因外界浓度过大而失水。淀粉提供碳源,而蛋白胨含 C、N 等元素,
既能提供碳源,又能提供氮源和维生素。
(2)培养细菌时需将培养基 pH 调至中性或微碱性。
(3)培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法。
10.请选择合适的无菌操作技术对下列材料或用具进行处理。
①牛奶 ②水源 ③操作者双手 ④接种环、接种针
⑤玻璃器皿(吸管、培养皿) ⑥培养基 ⑦空气
(1)巴氏消毒法:________。
(2)化学药剂消毒法:________。
(3)灼烧灭菌法:________。
(4)干热灭菌法:________。
(5)高压蒸汽灭菌法:________。
(6)紫外线消毒法:________。
答案 (1)① (2)②③ (3)④ (4)⑤ (5)⑥ (6)⑦
解析 (1)对于一些不耐高温的液体,如牛奶,则使用巴氏消毒法。
(2)操作者双手常用酒精擦拭,水源用氯气消毒,属于化学药剂消毒。
(3)接种环、接种针可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底
地灭菌,属于灼烧灭菌法。
(4)能耐高温的,需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用
具等常采用干热灭菌法。
(5)培养基常采用高压蒸汽灭菌法。
(6)紫外线照射可以杀灭物体表面或空气中的微生物。
11.在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题:
(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具________(填“可以”或“不可
以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,
这两种方法的优点是________________________________。
(3) 密 闭 空 间 内 的 空 气 可 采 用 紫 外 线 照 射 消 毒 , 其 原 因 是 紫 外 线 能
__________________,在照射前,适量喷洒__________________,可强化消毒效
果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸
钾”)消毒的。
(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有
达到相应温度,最可能的原因是____________________。
答案 (1)可以 (2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少 (3)破坏
DNA 结构 消毒液 (4)氯气 (5)未将锅内冷空气排尽
解析 (1)能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)
和金属用具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)煮沸消毒法即在100 ℃煮沸5~6 min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢;
巴氏消毒法即在 70~75 ℃煮 30 min 或在 80 ℃煮 15 min,可以杀死微生物,并
且保证营养物质不被破坏。因此,与煮沸消毒法相比,牛奶消毒常采用的巴氏消
毒法或高温瞬时消毒法的优点是在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少。
(3)因紫外线能破坏 DNA 结构,所以密闭空间内的空气可采用紫外线照射消
毒。在照射前,适量喷洒消毒液,可强化消毒效果。
(4)通常乙醇消毒有气味,影响水质,不适宜消毒自来水;高锰酸钾本身有
颜色,消毒后溶液呈紫红色,无法使用;因此水厂供应的自来水通常是经过氯气
消毒的。
(5)采用高压蒸汽灭菌时,锅内的水加热煮沸,将其中原有的冷空气彻底排
除后才能将锅密闭。如果未将锅内冷空气排尽,则会出现压力达到设定要求,而
锅内并没有达到相应温度的现象。