- 200.00 KB
- 2021-09-26 发布
- 1、本文档由用户上传,淘文库整理发布,可阅读全部内容。
- 2、本文档内容版权归属内容提供方,所产生的收益全部归内容提供方所有。如果您对本文有版权争议,请立即联系网站客服。
- 3、本文档由用户上传,本站不保证质量和数量令人满意,可能有诸多瑕疵,付费之前,请仔细阅读内容确认后进行付费下载。
- 网站客服QQ:403074932
专题综合检测(五)
一、选择题(每小题 2分,共 20分)
1.[2019·全国高二课时练习]在采血容器中预先加入柠檬酸钠
的目的是( )
A.调节 pH B.维持红细胞的能量供应
C.防止微生物生长 D.防止血液凝固
答案:D
2.[2019·济南市济钢高级中学高二课时练习]在蛋白质的提取
和分离实验中,下列对样品处理过程中,正确的是( )
A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐
B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不
到分离的效果
C.洗涤过程选用 0.1%的生理盐水
D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质
解析:洗涤红细胞的目的是去除血浆中的杂蛋白,A项错误;
洗涤红细胞应用低速短时离心,B 项错误;洗涤过程选用五倍体
积的生理盐水(质量分数为 0.9%的氯化钠溶液),C 项错误;透析
的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质,D项正确。
答案:D
3.[2019·内蒙古一机一中高二期中]多聚酶链式反应(PCR)是
一种体外迅速扩增 DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十
多次循环:95℃下使模板 DNA变性、解链→55℃下复性(引物与
DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。
下列有关 PCR过程的叙述中不正确的是( )
A.变性过程中破坏的是 DNA分子内碱基对之间的氢键,也
可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与 DNA模板链的结合是依靠碱基互补配
对原则完成
C.延伸过程中需要 DNA 聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸、
解旋酶
D.PCR与细胞内 DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
解析:变性过程中利用高温破坏 DNA分子内碱基对之间的氢
键,细胞内 DNA复制利用解旋酶破坏氢键,A项正确;复性过程
中引物与 DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成,即 A
-T、C-G,B项正确;延伸过程中需要耐高温的 DNA聚合酶、
四种游离的脱氧核糖核苷酸,不需要解旋酶,C项错误;PCR需
要利用高温变性,故与细胞内 DNA 复制所需要酶的最适温度较
高,D项正确。
答案:C
4.[2019·内蒙古一机一中高二期中]下列关于 DNA的粗提取
实验和血红蛋白的提取实验,叙述正确的是( )
A.前者选择鸡血细胞作材料较好;后者选择哺乳动物成熟的
红细胞做实验材料较好
B.样品预处理时,前者静置 1 d除去上清液即可;后者要加
入清水反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色即可
C.DNA粗提取实验中,向质量浓度为 2 mol/L氯化钠溶液中
加入蒸馏水析出 DNA时,应缓慢加入,直到出现黏稠物为止
D.血红蛋白的提取和分离实验的原理是在电场中带电颗粒迁
移的速度不同
解析:鸡血细胞有细胞核,哺乳动物成熟的红细胞无细胞核
和众多的细胞器,故前者适于提取 DNA,后者适用于提取血红蛋
白,A项正确;提取血红蛋白实验中,应该用生理盐水对红细胞
进行洗涤,不能用清水,B项错误;DNA粗提取实验中,初次析
出 DNA时,应该加清水至粘稠物不再增加为止,C项错误;血红
蛋白的提取和分离实验的原理是凝胶色谱柱中相对分子质量大小
不同的蛋白质迁移速率不同而实现分离,D项错误。
答案:A
5.[2019·信阳市第一高级中学高二期中]下列有关提取和分离
血红蛋白的实验叙述,错误的是( )
A.该实验的材料不能选用鸡血
B.通过透析法可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样
品的粗提取
C.凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白
质
D.电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形
状不同进行分离
解析:该实验需要选择哺乳动物成熟的红细胞,因为不含DNA
等杂质,A 项正确;透析可以去除样品中分子量较小的杂质,B
项错误;凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋
白质的有效方法,C项正确;电泳法是利用各种分子带电性质的
差异及分子的大小和形状不同,使带电分子产生不同的迁移速度,
从而实现样品中各种分子的分离,D项正确。
答案:B
6.[2019·福建厦门双十中学高二月考]在蛋白质的提取和分离
中,关于对样品处理过程的分析,不正确的是( )
A.洗涤红细胞用 0.9%的生理盐水,目的是去除杂蛋白
B.洗涤红细胞和分离血红蛋白都要离心,离心速度可相同
C.血红蛋白的释放要加蒸馏水和甲苯
D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质
解析:用 0.9%的生理盐水洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,
以利于后续步骤的分离纯化,A 项正确;洗涤红细胞时采用低速
短时间离心,如 500 r/min离心 2 min,而分离血红蛋白时以 2 000
r/min的速度离心 10 min,B项错误;加入蒸馏水使红细胞吸水涨
破。细胞膜的主要成分中含磷脂,磷脂易溶于甲苯等有机溶剂,
加入甲苯能加速红细胞破裂以释放血红蛋白,因此,血红蛋白的
释放要加蒸馏水和甲苯,C 项正确;将血红蛋白溶液装入透析袋
中,透析袋能使小分子自由进出,而将大分子物质保留在袋内,
从而去除样品中相对分子质量较小的杂质,D项正确。
答案:B
7.[2019·黑龙江大庆实验中学高二月考]下列说法不正确的是
( )
A.在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液
pH的影响,维持 pH基本不变
B.缓冲溶液通常由 1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成
C.透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内
D.对蛋白质纯度鉴定的方法使用最多的是 SDS—聚丙烯酰胺
凝胶电泳
解析:缓冲物质指能调节溶液的 pH值,是使溶液的 pH值在
加入一定量的酸性物质或碱性物质时保持恒定或小范围变化的一
种物质,A项正确;缓冲溶液通常由 1~2种缓冲剂溶解于水中配
制而成,B项正确;透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保
留在袋内,C 项错误;电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁
移的过程,对蛋白质纯度鉴定的方法使用最多的是 SDS—聚丙烯
酰胺凝胶电泳,D项正确。
答案:C
8.[2019·江苏高考模拟]下列有关“DNA粗提取与鉴定实验”
的叙述,正确的是( )
A.菜花和哺乳动物成熟的红细胞均可作为提取 DNA的材料
B.向切碎的植物组织中加入适量清水,可获得含大量 DNA
的溶液
C.将提取的丝状物溶解后,加入二苯胺试剂沸水浴,冷却后
呈蓝色
D.用玻棒快速搅拌滤液会使 DNA获得量增加
解析:哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和细胞器,不含
DNA,A项错误;向切碎的植物组织中加入适量的清水,会降低
DNA的溶解度,析出 DNA 分子,B 项错误;将提取的丝状物溶
解后,加入二苯胺试剂沸水浴,冷却后呈蓝色,C 项正确;用玻
璃棒搅拌的目的是让 DNA充分溶解,快速搅拌滤液不会使 DNA
获得量增加,D项错误。故选 C项。
答案:C
9.[2019·江苏高二期末]下列关于 PCR 技术的叙述中,正确
的是( )
A.该技术需要解旋酶和热稳定的 DNA聚合酶
B.该技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上
C.该技术应用体内 DNA双链复制原理,也需要模板、原料、
酶等条件
D.该技术需要一对特异性的引物,要求一对引物的序列大小
相同且碱基互补
解析:PCR扩增中双链 DNA解开不需要解旋酶,高温条件下
氢键可自动解开,A项错误;PCR技术的前提是有一段已知目的
基因的核苷酸序列,而不是目的基因的序列完全已知,B项错误;
PCR技术的原理是 DNA复制,该技术也需要模板、原料、酶等条
件,C 项正确;该过程需要一对特异性的引物,要求一对引物的
序列是不互补的,否则会形成引物碱基互补配对结合,进而影响
目的基因的扩增,D项错误。
答案:C
10.[2019·江苏高二期末]下列关于 PCR反应体系中所加物质
作用的描述,错误的是( )
A.热稳定的 DNA聚合酶用于催化 DNA子链的合成
B.引物使 Taq 酶能从引物的 5′端延伸 DNA链
C.目标 DNA母链用作合成 DNA复制的模板
D.dATP可为 PCR提供能量和原料
解析:通过 PCR 技术扩增目的基因时,需要用热稳定 DNA
聚合酶催化单个脱氧核苷酸聚合形成 DNA长链,A项正确;在复
制时,引物与 DNA 母链通过碱基配对结合后,DNA 聚合酶从引
物的 3′端开始延伸 DNA 链,因此 DNA 合成方向总是从子链的
5′端向 3′端延伸,B项错误;PCR技术的原理是 DNA 复制,
DNA复制时两条链均作为复制的模板,C项正确;由于 dATP含
有高能磷酸键,可以提供能量,同时其中的高能磷酸键全部断裂
后,形成的腺嘌呤脱氧核苷酸也可参与 DNA的构成,故 dATP可
为 PCR提供能量和原料,D项正确。
答案:B
二、非选择题(每小题 10分,共 80分)
11.[2019·四川雅安中学高二期中]随着人类基因组计划的进
展以及多种生物基因测序工作的完成,人类跨入了蛋白质时代。
对蛋白质进行研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。请回
答下列问题:
(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、________、
________和纯度鉴定。
(2)凝胶色谱法:是根据________________________的有效方
法。所用凝胶的化学本质大多为________________________。SDS
-聚丙烯酰胺凝胶电泳消除了净电荷对迁移率的影响,使电泳迁
移率完全取决于________________________。
(3) 粗 分 离 中 透 析 的 目 的 是
______________________________________,若要尽快达到理想
的透析效果,可以________________________________。
(4)装填凝胶色谱柱时,凝胶必须装填紧密,原因是
________________________________,色谱柱制作成功的标志是
________________________。
解析:(1)血红蛋白的提取和分离的程序可分为四大步,包括:
样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。(2)样品纯化是通过凝胶色
谱法(分配色谱法)去掉分子量较大的杂质。凝胶色谱法是根据相对
分子质量大小分离蛋白质的有效方法,相对分子质量较小的蛋白
质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子
质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的
速度快。(3)血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析,即将收集
的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析,去掉分子量较小的杂质,
原理是小分子杂质可以通过透析袋进入缓冲液中,血红蛋白分子
量较大,不能通过透析袋进入缓冲溶液。若要尽快达到理想的透
析效果,可以及时更换缓冲液或增加缓冲液的量。(4)如果凝胶装
填得不够紧密、均匀,就会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该
进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流动
次序,影响分离的效果,因此,装填凝胶色谱柱时,凝胶必须装
填紧密。色谱柱制作成功的标志是:红色区带均匀一致的移动。
答案:(1)粗分离 纯化 (2)相对分子质量的大小分离蛋白质
多糖类化合物 分子的大小 (3)去除相对分子质量较小的杂质
及时更换缓冲液或增加缓冲液的量 (4)如果凝胶装填得不够紧
密、均匀,就会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内
部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流动次序,影响
分离的效果 红色区带均匀一致的移动
12.[2019·成都市七中育才学校高考模拟]科学家一般选用猪、
牛、羊等脊椎动物的血液来提取和分离血红蛋白。请回答下列有
关问题:
(1)实验前取新鲜的血液,要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,
加入柠檬酸钠的目的是________________________。洗涤红细胞
时要用________________________(填溶液)反复洗涤、离心。红细
胞 是 否 已 洗 涤 干 净 的 判 断 依 据 是
________________________________________________________
________________。
(2)释放血红蛋白时要加入________________________让红细
胞破裂。得到的血红蛋白溶液要装入透析袋中透析,即血红蛋白
的 粗 分 离 , 此 过 程 的 目 的 是
________________________________________________________
________________
____________________________________________________
____________________。
(3)通过凝胶色谱法可将样品进一步纯化,凝胶色谱法的基本
原理是根据____________________________分离蛋白质。最后应
进行纯度鉴定,使用最多的是 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,其中
SDS的作用有________________________。
解析:(1)实验前取新鲜的血液,为防止血液凝固,要预先在
采血容器中预先加入柠檬酸钠。洗涤红细胞时要用五倍体积的生
理盐水反复洗涤、离心。直至上清液不再呈现黄色,表明红细胞
已经洗涤干净。(2)将洗涤好的红细胞放入烧杯中,加入水和甲苯
充分搅拌,红细胞破裂释放血红蛋白。得到的血红蛋白溶液装入
透析袋中透析,即血红蛋白的粗分离,透析可以去除样品中分子
量较小的杂质。(3)凝胶色谱法的基本原理是根据相对分子质量大
小分离蛋白质,分子量大的蛋白质先流出,分子量小的蛋白质后
流出,从而把蛋白质分离开来。最后进行纯度鉴定,使用最多的
是 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,其中 SDS可以消除净电荷对迁移
率的影响,使蛋白质变性。
答案:(1)防止血液凝固 生理盐水 上清液没有黄色
(2)蒸馏水和甲苯 去除样品中分子量较小的杂质 (3)相对分
子质量的大小 消除净电荷对迁移率的影响,使蛋白质变性
13.[2019·新疆高考模拟]回答下列与血红蛋白有关的问题:
(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负
责血液中________的运输。
(2)从哺乳动物的血液中分离出血红蛋白的方法很多,其中
__________法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方
法。分离时相对分子质量较小的蛋白质比相对分子质量较大的蛋
白质________(填“先”或“后”)从层析柱中洗脱出来。
(3)在进行血红蛋白的提取时,需要将血红蛋白从红细胞中释
放出来,通常是将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,在__________和
甲苯的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白;分离中能够观察
到一条__________色的带向下移动的现象,收集到该颜色的流出
液就可以确定提取到了血红蛋白,如果该颜色区带歪曲、散乱、
变宽,说明分离的效果不好,这与________________________有
关。
(4)判断纯化的蛋白质是否达到要求,可使用________的方法
来鉴定。该方法的原理是利用待分离样品中各种分子带电性质的
差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的
____________,从而实现样品中各种分子的分离。
解析:(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成
分,负责血液中 O2和 CO2的运输。(2)凝胶色谱法是根据相对分子
质量的大小分离蛋白质的有效方法,原理是分子量大的分子通过
多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多
孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢,相对分子质量较小的蛋白质
比相对分子质量较大的蛋白质后从层析柱中洗脱出来。(3)在进行
血红蛋白的提取时,需要将血红蛋白从红细胞中释放出来,通常
是将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,在蒸馏水(使红细胞大量吸水涨
破)和甲苯(溶解红细胞的细胞膜)的作用下,红细胞破裂,释放出
血红蛋白;血红蛋白因含有血红素而呈现红色,故分离中能够观
察到一条红色的带向下移动的现象,收集到该颜色的流出液就可
以确定提取到了血红蛋白,红色区带均匀一致地移动,说明色谱
柱制作成功,如果该颜色区带歪曲、散乱、变宽,说明分离的效
果不好,这与凝胶色谱柱的装填有关。(4)判断纯化的蛋白质是否
达到要求,可使用电泳的方法来鉴定。该方法的原理是利用待分
离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的
不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分
子的分离。
答案:(1)O2和 CO2 (2)凝胶色谱(分配色谱) 后 (3)蒸馏水
红 凝胶色谱柱的装填 (4)电泳 迁移速度
14.[2019·黑龙江大庆实验中学高二月考]请回答血红蛋白的
提取和分离的相关问题:
(1)分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法,也称做
________________, 是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有
效方法。该方法用到如下装置,其中 C 溶液的作用是
________________________________________________________
________________
____________________________________________________
____________________。
(2)血红蛋白提取和分离的程序可分为样品处理、________、
________和纯度鉴定。样品处理步骤中洗涤红细胞的目的是
________________________________________________________
________________。
解析:(1)凝胶色谱法也叫分配色谱法,是根据相对分子质量
的大小分离蛋白质的有效方法;图中 C溶液的作用是洗脱血红蛋
白。(2)血红蛋白提取和分离的程序为:样品处理、粗分离、纯化
和纯度鉴定;样品处理步骤中洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白。
答案:(1)分配色谱法 洗脱血红蛋白 (2)粗分离 纯化 去
除杂蛋白
15.[2019·江苏海安高级中学高二月考]为了从动物组织中提
取纯净的 DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消
化裂解动物组织细胞常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶 K)水解、表面
活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化
裂解猪肌肉样本,并提取猪的 DNA。实验步骤如下:
①取 500 mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加 40 mg加酶洗
衣粉和 1.5 mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化 24 h。
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25241)混合液抽提。
③加 0.2 mg/mL的 RNA水解酶于 37℃水浴。
④加醋酸钠和无水乙醇,4 000 r/min高速离心 15 min。
⑤用 70%乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的 DNA。
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是
____________________________________________________
____________________。
(2) 步 骤 ② 的 目 的 是
________________________________________________________
________________。
步 骤 ③ 的 目 的 是
________________________________________________________
________________。
(3) 步 骤 ④ 中 使 用 无 水 乙 醇 的 目 的 是
____________________________________。高速离心时温度保持
在 4 ℃的原因有________________________________________、
________________________________等。
(4)若是从血细胞中提取DNA,则选择________(选填“鸡血”
或“哺乳动物红细胞”)。破碎细胞时,向血细胞液中加入一定量
的________,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。
解析:(1)由于加酶洗衣粉中的蛋白酶和表面活性剂等可以破
坏细胞膜,所以加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞。(2)苯酚、
氯仿、异丙醇混合液可以促进蛋白质变性,因此步骤②的目的是
使蛋白质变性,抽提蛋白质。RNA 水解酶可以催化 RNA 水解,
所以步骤③的目的是水解 RNA。(3)DNA 不溶乙醇溶液,但细胞
中的某些蛋白质可溶于乙醇,所以步骤④中使用无水乙醇的目的
是析出 DNA,提取含杂质较少的 DNA。低温可以降低核酸水解酶
的活性,防止 DNA降解,同时低温还能降低分子运动,易于形成
沉淀析出(或低温能增加 DNA分子的柔韧性,减少断裂),所以高
速离心时应将温度保持在 4 ℃的低温条件下。(4)动物细胞中的
DNA主要分布在细胞核中,少量分布在线粒体中。哺乳动物成熟
的红细胞没有细胞核和众多的细胞器,难以提取到 DNA;鸡血的
红细胞有细胞核,DNA含量多。可见,若是从血细胞中提取 DNA,
则选择鸡血。破碎细胞时,向血细胞液中加入一定量的蒸馏水,
同时用玻璃棒搅拌,以加快细胞吸水涨破,内容物流出。
答案:(1)洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜
(2)使蛋白质变性,抽提蛋白质 水解 RNA (3)析出 DNA,提取
含杂质较少的DNA 降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解 降
低分子运动,易于形成沉淀析出(增加 DNA 分子的柔韧性,减少
断裂)
(4)鸡血 蒸馏水
16.[2019·沭阳县修远中学高二月考]下图为“DNA粗提取和
鉴定”实验的相关操作:
(1)下列有关“DNA 的粗提取和鉴定”实验原理的叙述正确
的是( )
A.DNA在 NaCl溶液中的溶解度,随 NaCl溶液浓度的降低
而减小
B.利用 DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的
物质而得到较纯的 DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应
(2)由于鸡血较难找到,某学生试图用人血代替,结果没有成
功,其原因最可能( )
A.操作方法不对 B.人血含 DNA太少
C.NaCl溶液浓度太高 D.加二苯胺太少
(3)图中实验材料 A可以是________等,需要在研磨前加入的
B是________。
(4)通过上述所示步骤得到滤液 C后,再向滤液中加入 2 mol/L
的 NaCl溶液的目的是________________________,再过滤得到滤
液 D , 向 滤 液 D 中 加 入 蒸 馏 水 的 目 的 是
________________________________________________________
________________。
(5)在“DNA 的粗提取和鉴定”实验中,将含有一定杂质的
DNA丝状物分别放入体积为 2 L的四种溶液中,经搅拌后过滤,
获得 4种滤液,含 DNA最少的是________________。
1 B液中 搅拌研磨后过滤 滤液 E
2 2 mol/L的 NaCl溶液 搅拌后过滤 滤液 F
3 0.014 mol/L的 NaCl溶液 搅拌后过滤 滤液 G
4 冷却的 95%的酒精溶液中 搅拌后过滤 滤液 H
解析:(1)DNA在不同浓度的 NaCl溶液中的溶解度不同,当
NaCl的质量浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低,低于 0.14
mol/L 时,DNA 的溶解度随 NaCl 溶液浓度的增大而减小,高于
0.14 mol/L时,DNA的溶解度随 NaCl溶液浓度的增大而增大,A
项错误;DNA不溶于酒精溶液,可是细胞中的多数物质可溶于酒
精溶液,因而利用 DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒
精的物质而得到较纯的 DNA,B项正确;DNA是大分子有机物,
能溶于蒸馏水,C项错误;鉴定 DNA的原理是在沸水浴条件下,
DNA与二苯胺反应呈现蓝色,D 项错误。(2)动物细胞中的 DNA
主要分布在细胞核中,少量分布在线粒体中。人体血液中的血细
胞包括红细胞、白细胞和血小板,其中血小板没有细胞核,成熟
的红细胞没有细胞核和众多的细胞器。可见,以人血为实验材料,
导致实验没有成功的原因是:人血中 DNA含量太少、难以提取到
DNA,B项正确,A、C、D三项均错误。(3)图中的实验材料 A取
自于植物,可以是洋葱、菜花等。因洗涤剂可以瓦解细胞膜,有
利于 DNA的释放,而食盐的主要成分是 NaCl,有利于 DNA的溶
解,所以需要在研磨前加入的 B是洗涤剂和食盐。(4)滤液 C中含
有 DNA。DNA在 0.14 mol/L的 NaCl溶液中的溶解度最低,而在
2 mol/L的 NaCl溶液中的溶解度较高。可见,在滤液 C中加入 2
mol/L的 NaCl 溶液的目的是使 DNA 溶解、析出不溶的杂质;向
再过滤得到的滤液D中加入蒸馏水的目的是通过降低NaCl溶液的
浓度而使 DNA析出。 (5)在滤液 E中,只是除去了部分杂质,则
含 DNA较多;在滤液 F中,除去了较多的蛋白质等,因此含 DNA
最多;在滤液 G中,因 DNA析出,则含 DNA较少;在滤液 H中,
因 DNA不溶于体积分数为 95%的冷酒精,则 DNA含量最少。
答案:(1)B (2)B (3)洋葱(菜花) 洗涤剂和食盐
(4)使 DNA溶解(于 NaCl溶液中) 使 DNA析出 (5)滤液 H
17.[2019·广西南宁三中高二月考]请根据血红蛋白的提取和
分离流程图回答下列问题:
(1) 将 实 验 流 程 按 先 后 顺 序 补 充 完 整 :
________________________、________________________。
(2) 凝 胶 色 谱 法 的 基 本 原 理 是 根 据
________________________________________分离蛋白质。
(3)洗涤红细胞的目的是去除____________,洗涤干净的标志
是__________________。为防止血液凝固,在采血容器中通常要
预先加入________(抗凝剂)。
(4)下图是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品加入过程的示意
图,正确的加样顺序是________________。
(5) 在 装 填 色 谱 柱 时 不 能 有 气 泡 存 在 , 因 为
__________________________________,降低分离效果。如果
____________________,说明色谱柱制作成功。
解析: (1)血红蛋白的提取和分离流程为:红细胞的洗涤→血
红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→
凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱。可见,A表示血红蛋白
的释放,B表示凝胶色谱柱的装填。(2)凝胶色谱法的基本原理是:
根据相对分子质量的大小分离蛋白质。(3)洗涤红细胞的目的是去
除杂蛋白,以利于后续步骤的分离纯化。洗涤干净的标志是离心
后的上清液不再呈现黄色。为防止血液凝固,在采血容器中要预
先加入抗凝血剂柠檬酸钠,其比例是每 100 mL血液加入 3.0 g柠
檬酸钠。(4)加样顺序是调整缓冲液面、滴加透析样品、样品渗入
凝胶床、再调整缓冲液面,即④①②③。(5) 由于气泡会搅乱洗脱
液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,所以在装填凝胶色谱柱
时,不得有气泡产生。在蛋白质分离过程中,如果红色区带均匀
一致地移动,说明色谱柱制作成功。
答案:(1)血红蛋白的释放 凝胶色谱柱的装填 (2)相对分子
质量的大小 (3)杂蛋白(或血浆蛋白) 离心后的上清液不再呈现
黄色 柠檬酸钠 (4)④①②③ (5)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的
洗脱次序 红色区带均匀一致地移动
18.[2019·西宁市第三中学高考模拟]DNA 在 NaCl 溶液中的
溶解度有两重性,随着 NaCl溶液浓度的变化而变化。
(1)请在下列浓度的 NaCl溶液中,选出能使 DNA析出最彻底
的一种和溶解度最高的一种________。
A.0.14 mol/L B.2 mol/L
C.0.15 mol/L D.0.3 mol/L
(2)欲使溶有 DNA的 2 mol/L的 NaCl溶液中的 DNA析出,需
要降低 NaCl溶液的浓度,最有效的方法是________。
A.加蒸馏水 B.加矿泉水
C.加清水 D.加生理盐水
(3)DNA不溶于酒精,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶
液,利用这一原理可以________,可以推测溶于酒精中的可能有
________________________________________________________
________________。
(4)利用 DNA 遇________呈蓝色的特性,将该物质作为鉴定
________的试剂。其实验过程要点是向放有________的试管中加
入 4 mL 的________混合均匀后,将试管置于________5 min,待
试管________,观察试管中溶液颜色的变化。这个实验也说明DNA
耐________温,前次温度有利于______________,后次温度有利
于 DNA________。
解析:(1)DNA在不同浓度的 NaCl溶液中 DNA溶解度不同,
DNA 在 2 mol/L NaCl 溶液中溶解度最大,而在 0.14 mol/L NaCl
溶液中溶解度最小,下列浓度的 NaCl溶液中,能使 DNA析出最
彻底的一种和溶解度最高的一种依次为 A、B,故选 A、B两项。
(2)因为 DNA在 0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最小,所以应该在 2
mol/L 的 NaCl 溶液中加入蒸馏水,逐渐降低 NaCl 溶液的浓度至
0.14 mol/L NaCl,则可以析出 DNA。(3)DNA不溶于酒精溶液,而
细胞中的某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质能溶于酒精
溶液,利用这一原理,可以将 DNA与蛋白质等杂质进一步分离。
(4)DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定
DNA的试剂;鉴定时向溶有 DNA 的试管中加入二苯胺试剂,沸
水中加热后冷却即可以观察到蓝色,加热的目的是加快染色的反
应速度,也说明 DNA具有耐高温的特性,而冷却有利于 DNA的
析出。
答案:(1)A、B (2)A (3)去除杂质 某些盐类、蛋白质、糖
类或其他大分子物质 (4)二苯胺 DNA DNA
二苯胺试剂 沸水中加热 冷却后 高 提高染色的反应速
度 析出