2019-2020学年人教版高中生物选修一学练测精练：专题2　课题1　微生物的实验室培养 8页

专题 2 微生物的培养与应用 课题 1 微生物的实验室培养 一、选择题 1．下列有关培养基配制原则的叙述，正确的是( ) A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子 B．碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素 C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受 pH、O2、渗透压的影响 D．营养物质的浓度越高越好 解析：选 C 培养基一般含有碳源、氮源、无机盐和水等，有的微生物还需 要生长因子，A 项错误；碳源和氮源必须具有一定比例，但碳元素的含量不一定 最多，自养型微生物的培养基不需要碳源，B 项错误；微生物的培养过程中除受 营养因素影响外，还受到 pH、O2、渗透压的影响，C 项正确；营养物质的浓度 过高时，可能会造成微生物渗透失水死亡，D 项错误。 2．下列叙述正确的是( ) A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 解析：选 A 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求而配制出的供 微生物生长繁殖的营养基质；按不同的分类标准可有不同的种类和作用，其中固 体培养基是在液体培养基里加入琼脂等凝固剂配制而成的，加水不能再变成液体 培养基；单个细菌是不能用肉眼看见的，可以通过一定方法，培养出具有特定形 态的由一个或一种细菌繁殖而来的菌落进行观察。 3．采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可 分别杀灭哪些部位的杂菌( ) A．接种环、吸管、培养基、接种室 B．吸管、接种环、培养基、接种箱 C．培养基、接种环、吸管、接种箱 D．培养皿、吸管、培养基、双手 解析：选 B 干热灭菌是将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在 160～170 ℃下 加热 1～2 h，适用于耐高温且需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿) 和金属用具等；灼烧灭菌是利用酒精灯火焰的外焰灭菌，如接种针、接种环等； 高压蒸汽灭菌用高压蒸汽灭菌锅，压力为 100 kPa，温度为 121 ℃，维持 15～30 min，主要用于培养基灭菌；紫外线照射适用于表面灭菌和空气灭菌，如接种室、 接种箱、超净工作台等，使用前用紫外线照射约 30 min。 4．(2019·山东师大附中模拟)有关平板划线操作不正确的是( ) A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红 B．接种环在平板上划线位置是随机的 C．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰 D．最后将平板倒置，放入恒温箱中培养 解析：选 B 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红，A 项正确；接种 环在平板上划线位置不是随机的，B 项错误；在挑取菌种前和接种完毕后均要将 试管口通过火焰，C 项正确；最后将平板倒置，放入恒温箱中培养，D 项正确。 5．下列操作与消毒、灭菌无关的是( ) A．接种前用肥皂清洗双手，再用酒精擦拭双手 B．接种前用火焰灼烧接种环(针) C．培养基在 50 ℃左右时搁置斜面 D．接种时在酒精灯的火焰旁完成 解析：选 C 在培养微生物时，一定要建立“无菌”概念，因此在各步接种 操作时都必须注意灭菌，这是获得微生物纯培养物的关键。对各种器具进行消毒 和灭菌，常用的方法有化学消毒和物理灭菌两大类。题中用肥皂洗手、酒精擦拭 属于消毒，火焰灼烧属于灭菌；培养基在 50 ℃左右时搁置斜面，因为培养基在 50 ℃左右时呈液态，温度降低时，培养基凝固，可形成固体斜面培养基。 6．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是( ) A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上 解析：选 D 高压灭菌加热结束时，应切断电源，让灭菌锅内温度自然下降， 当压力表的指针指向 0 时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品， A 项错误；倒平板时应将培养皿打开一条稍大的缝隙再缓慢倒入培养基，B 项错 误；高温的接种环会杀死细菌，应等接种环冷却后再挑取菌落，C 项错误；培养 皿一般倒置放在培养箱中，用记号笔标记在皿底便于取出时分类，D 项正确。 7．微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质，并通过代谢来维持正常的 生长和繁殖。下列有关微生物培养的说法，正确的是( ) A．纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的 B．培养基中的凝固剂，常常被微生物利用，因此需定时添加 C．培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利 D．生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往 不足 解析：选 D 纤维素分解菌是异养型微生物，其碳源为有机物，如纤维素等。 硝化细菌是自养型微生物，其碳源为 CO2，A 项错误；加入培养基中的凝固剂， 一般不能被微生物利用，只起到凝固作用，B 项错误；培养基中的营养物质浓度 过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对生长 不利，C 项错误；生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的 能力往往不足，D 项正确。 8. (2019·黄冈调考)如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为 1、2、3、 4、5，下列操作方法正确的是( ) A．操作前要将接种环放在火焰旁灼烧灭菌 B．划线操作必须在火焰上进行 C．在 5 区域中才可以得到所需菌落 D．在 1、2、3、4、5 区域划线的前后都要对接种环进行灭菌 解析：选 D 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法是 在火焰的充分燃烧层灼烧，接种时划线操作是在火焰旁的无菌区进行的。在 5 个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。 9．(2019·北京丰台一模)为探究大叶木姜子多糖的抑菌效果，研究人员将下 列 4 种菌分别用无菌水稀释成菌悬液，于固体培养基上制成含菌平皿，在平皿上 放置经不同浓度大叶木姜子多糖溶液浸泡 2～3 小时的滤纸片，培养一段时间后， 测定各供试菌的抑菌圈直径，结果如表。相关叙述错误的是( ) 大叶木姜子多糖的抑菌效果(mm) 多糖浓度% 金黄色葡萄糖球菌 酵母菌 灰绿曲霉 黑曲霉 10.0 2.8 3.3 2.6 1.2 5.0 2.7 3.1 1.8 0.9 2.5 2.3 2.7 1.0 0.3 1.0 1.4 0.3 － － 0.5 1.2 － － － A．金黄色葡萄球菌与另外三种菌的主要区别是没有核膜 B．制备含菌平皿可用稀释涂布平板法或平板划线法 C．每个浓度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值 D．大叶木姜子多糖对黑曲霉抑制效果最差 解析：选 B 金黄色葡萄球菌属于细菌，没有核膜包被的细胞核，其余三种 微生物都是真菌，A 项正确；根据题干接种使用的是菌悬液且测定的是抑菌圈的 直径，所以是使用稀释涂布平板法接种的，B 项错误；为避免实验误差，每个浓 度每种菌重复多次实验，所得数据取平均值，C 项正确；黑曲霉在含有不同浓度 的大叶木姜子多糖的滤纸上产生的抑菌圈的直径最小，抑制效果最差，D 项正确。 10．(2019·运城期中)如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步 骤，下列说法不正确的是( ) A．①步骤使用的培养基已经灭菌并调节过 pH B．②步骤接种环经火焰灭菌后应趁热快速沾取菌液 C．③到④过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理 D．①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行 解析：选 B ①步骤表示倒平板，在倒平板之前培养基已经灭菌并调节过 pH，A 正确；②步骤为用接种环沾取菌液，需在酒精灯火焰旁等接种环冷却后 沾取，B 错误；③到④过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理，C 正确；①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行，以防被杂菌污染，D 正确。 11．(2019·中山调研)下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是 ( ) 成分 含量 成分 含量 NaNO3 3 g FeSO4 0.01 g K2HPO4 1 g (CH2O) 30 g 琼脂 15 g H2O 1 000 mL MgSO4·7H2O 0.5 g 青霉素 0.1 万单位 A．依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属 于选择培养基 B．由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的 微生物可以是酵母菌或毛霉 C．本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求 D．若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和 NaNO3，并应加 入尿素 解析：选 C 由培养基中含有琼脂可推测其为固体培养基，由培养基中含有 青霉素可推测其为选择培养基；培养基中含有有机碳源，故所培养微生物的同化 作用类型是异养型。由于青霉素能抑制细菌的生长而不抑制真菌的生长，故能培 养酵母菌或毛霉；若用该培养基分离能分解尿素的细菌，则应以尿素为唯一氮源， 即除去 NaNO3，同时还应除去青霉素以防止其抑制目的菌的生长。 12．(多选)漆酶属于木质素降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广 泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是( ) A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B．选择培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化 D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株 解析：选 BC 漆酶属于木质素降解酶类，生活污水中含木质素类的物质少， 则能降解木质素的产漆酶微生物较少，故生活污水不是分离产漆酶菌株的首选样 品，A 项错误；产漆酶菌株可降解木质素，筛选培养基中应加入木质素来筛选产 漆酶的菌株，可依据漆酶菌株的菌落特征挑出产漆酶的菌落，B 项正确；在涂布 平板上挑取的菌落可能含有其他杂菌，可再通过平板划线法进一步分离纯化，C 项正确；对于需要长期保存的菌株，不适宜在常温下保存，应低温冷冻保存，D 项错误。 二、非选择题 13．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含 量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题： (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随 机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是___________。 (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过________ 灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的 目的是____________________________________。 (3)示意图 A 和 B 中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到 的结果。 (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养， 另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度 快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与 培养液充分接触，提高________的利用率。 解析：(1)涂布接种前随机取若干灭菌后的空白平板先行培养是检测培养基 平板灭菌是否合格。(2)接种环进行灼烧灭菌，从上一次划线的末端开始划线的 目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)根据图示，B 为稀释涂布平 板法接种培养后的结果。(4)振荡培养能提高溶解氧含量，同时使菌体与培养液 充分接触，提高营养物质的利用率。 答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀 释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质 14．(2019·全国卷Ⅲ)回答下列与细菌培养相关的问题。 (1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋 白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同 来调节培养基的 pH，其原因是_______________。硝化细菌在没有碳源的培养基 上________(填“能够”或“不能”)生长，原因是____________________。 (2)用平板培养细菌时一般需要将平板________(填“倒置”或“正置”)。 (3)单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、 颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因____________________。 (4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过____________处理，这种处理可 以杀死丢弃物中所有的微生物。 解析：(1)葡萄糖只能为细菌提供碳源，硝酸钠为细菌提供无机盐，而蛋白 胨既可以为细菌提供碳源，也可以为细菌提供氮源；由于不同的细菌生长繁殖的 最适宜 pH 是不同的，因此制备培养基时要根据所培养的细菌的不同来调节培养 基的 pH；硝化细菌属于化能自养型微生物，其可以利用氨氧化释放的能量将空 气中的二氧化碳固定为有机物，因此硝化细菌可以在无碳培养基中生长。(2)用 平板培养细菌时，一般需要将平板倒置培养，以防止皿盖上的水珠落入培养基， 造成污染。(3)由于每一大类微生物都有其独特的细胞形态，因而其菌落形态特 征也各异，因此根据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物。 (4)有些使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。 答案：(1)蛋白胨 不同的细菌生长繁殖的最适宜 pH 不同 能够 硝化细菌 可以利用空气中的 CO2 作为碳源 (2)倒置 (3)在一定的培养条件下，不同种微 生物表现出各自稳定的菌落特征 (4)灭菌 15．某学习小组为调查湖水中细菌的污染情况进行了如下相关实验，实验包 括制备培养基、灭菌、接种及培养、观察统计菌落数。 (1)制备培养基时，在进行称量、溶化、定容后，灭菌之前还需进行的操作 是________；对培养基进行灭菌，一般采用的方法是__________________。 (2)整个微生物的分离和培养过程，一定要注意在______________条件下进 行。 (3)图甲和图乙是采用两种接种方法接种培养后得到的菌落分布图，图甲对 应的接种方法是______________，图乙对应的接种方法是________________。 (4)为使该实验所得结果可靠，还应该实施的操作是____________________ ______________________________________________________________。 (5)获取目的菌后如要临时保存，可将其接种在____________________上， 等长出菌落后放在________的冰箱中保存。 解析：(1)培养基的制作流程主要是：计算、称量、溶化、定容、调整 pH、 灭菌、倒平板。培养基一般采取高压蒸汽灭菌法灭菌。(2)微生物培养成功的关 键是无菌操作。(3)接种微生物的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法，据 图分析，图甲对应的接种方法是稀释涂布平板法，图乙对应的接种方法是平板划 线法。(4)实验还需要设置对照实验，即在另一平板上接种无菌水作为对照。(5) 临时保存菌种时可以使用斜面固体培养基，待菌落长成后，将试管放入温度为 4 ℃的冰箱中。 答案：(1)调整 pH 高压蒸汽灭菌法 (2)无菌 (3)稀释涂布平板法 平板划 线法 (4)同时在另一平板上接种无菌水作为对照 (5)斜面固体培养基 4 ℃