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- 2021-09-26 发布
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生物周练
一.选择题(每题一分)
1.关于果胶酶的叙述中错误的是( )
A.果胶酶可以使植物组织变得松散
B.可以用浑浊度衡量果胶酶的活性
C.经果胶酶处理的果汁加乙醇会出现显著浑浊
D.果胶酶、纤维素酶等配合使用,可促使植物营养物质释放,提高饲料的营养价值
2.据图,下列关于酶和酶固定的叙述,正确的是( )
①X中a是底物、b表示酶
②Y表示酶聚合,易于移动催化反应
③Z表示酶颗粒被包埋在人工膜内
④X、Y、Z分别表示酶固定的三种方法
A.①② B.③④ C.①④ D.②③
3.某物质能够在室温下彻底分解果胶,降低果汁黏度,裂解细胞壁,提高果汁的产出量。下列对该物质的叙述正确的是( )
A.该物质是由脱氧核苷酸脱水缩合而来的
B.该物质在低温条件下会失活,恢复常温后依然处于失活状态
C.该物质可以分解纤维素
D.该物质可以被蛋白酶分解
4.果胶酶能够分解果胶,可以提高水果的出汁率。某同学为了探究pH对果胶酶活性的影响,在不同pH下,将等量的果胶酶加入到等量的苹果泥中,在反应同样时间后,再将反应液过滤同样时间,用量筒测出滤出苹果汁的体积。下列能正确反映实验结果的曲线是( )
A. B.
C. D.
5.下列关于生物技术应用的叙述,正确的是( )
A.从酶的固定方式看,物理吸附法比化学结合法对酶活性影响小
B.作为消化酶使用时,蛋白酶制剂只能以注射的方式给药
C.加酶洗衣粉中酶制剂可以被重复利用,提高了酶的利用率
D.将海藻酸钠凝胶珠用自来水冲洗,可洗去多余的CaCl2和杂菌
6.固定化脂肪酶的方法一般是:将酶液和一定浓度的海藻酸钠溶液混合后,用注射器滴到一定浓度CaCl2溶液中,25℃静置固定化2h,过滤洗涤,再加入到戊二醛溶液中,25℃化学结合2h,过滤、洗涤和干燥后就可得到颗粒状固定化脂肪酶。兴趣小组对固定化脂肪酶的性质和最佳固定条件进行了探究。如图显示的是部分研究结果(注:纵坐标为酶活力,包括酶活性和酶的数量,a为游离酶,b为固定化脂肪酶)。下列分析中正确的是( )
A.在温度或pH变化时,与游离酶相比固定化脂肪酶具有的缺点是稳定性较低
B.这种固定化脂肪酶使用的是物理吸附法、包埋法和化学结合法三种方法的结合
C.氯化钙的量太少时,酶活力较低的原因可能是包埋不完全,包埋在内部的部分酶会流失
D.海藻酸钠浓度较高时,酶活力低的原因可能是形成的凝胶孔径较大,影响酶与底物的结合
7.表是某同学探究温度对果胶酶活性的影响的实验结果,该结果不能说明( )
温度/℃
10
20
30
40
50
60
果汁量/mL
2
3
4
5
6
5
A.温度影响果胶酶的活性
B.40℃与60℃时酶的活性相等
C.50℃是该酶的最适温度
D.若温度从10℃升高到40℃,酶的活性将逐渐增强
8.加酶洗衣粉中含有的常见酶类为( )
A.蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶
B.蛋白酶、脂肪酶、肽酶、纤维素酶
C.脂肪酶、肽酶、淀粉酶、纤维素酶
D.蛋白酶、淀粉酶、麦芽糖酶、肽酶
9.下列关于“酵母细胞的固定化技术实验的叙述,正确的是( )
A.活化酵母时,将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
B.注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保持凝胶珠成球状
C.将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2溶液时,凝胶珠成形后应即刻取出
D.海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色,过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
10.DNA粗提取与鉴定实验中有三次过滤:(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCL溶液(3)过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCL溶液。以上三次过滤分别是为了获得( )
A.含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物、纱布上的DNA
B.含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物质、含DNA的滤液
C.含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
D.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
11.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,错误的是( )
A.用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近
B.DNA析出过程中,搅拌操作要轻柔以防DNA断裂
C.预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA
D.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热
12.下列关于实验的叙述,正确的是( )
A.粗提取DNA和鉴定生物组织中脂肪的实验均需用乙醇
B.在添加尿素的固体培养基上能生长的微生物均能分解尿素
C.在制作果酒的实验中,需将葡萄汁液装满整个发酵装置
D.光合色素在层析液中的溶解度越高,在滤纸上扩散就越慢
13.下列有关多聚酶链式反应(PCR)扩增目的基因的叙述,错误的是( )
A.为方便构建重组质粒,在引物中需要适当添加限制酶的切割位点
B.PCR扩增时,复性所需温度的设定与引物的长度和碱基组成无关
C.PCR扩增一般需要经历多个循环,每个循环分为变性、复性和延伸3步
D.PCR扩增后,常用离心法分离扩增的DNA分子,以便于鉴定产物的存在和大小
14.利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。以下叙述错误的是( )
A.变性过程中断裂的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B.退火时引物A必须与引物B碱基互补配对
C.由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B
D.延伸时需要耐高温DNA聚合酶催化
二.填空题(每空一分)
15.生物学实验中选材对于实验的成功至关重要,回答以下有关实验材料的选择及其原因分析的问题:
(1)若要进行DNA的提取实验,应选择哺乳动物成熟红细胞还是鸡血细胞?原因是什么?
(2)在制备细胞膜的实验中,应选择哺乳动物成熟红细胞还是鸡血细胞?原因是什么?
(3)若某同学用鸡血细胞提取到的磷脂平铺在水面上形成单层磷脂分子层,则该单层磷脂分子层的面积与鸡血细胞的表面积大小是怎样的关系?为什么?
(4)简述盐酸在观察细胞中DNA和RNA的分布实验中的作用,并尝试解释为何在观察有丝分裂的实验中不能解离过度?
16.科研人员利用固定化酵母直接发酵甜菜汁生产燃料乙醇,如图1表示相关的工艺流程,图2为不同固定化酵母接种量对发酵的影响。请分析回答:
(1)图1的步骤①中,溶化海藻酸钠时要注意 ,防止海藻酸钠焦糊。步骤②中加入果胶酶的作用是 。
(2)步骤③中进行增殖培养的目的是 。图1的步骤④体现了固定化酵母 的优点。
(3)由图2可知,固定化酵母接种量为 时酒精产量最高。接种量过高,酒精产量反而有所降低的原因是 。
(4)利用酵母菌制酒过程中,发酵液的pH会 (填“上升”或“下降”)。工业生产中酵母细胞的固定化是在严格 条件下进行的。一般发酵温度控制在 ℃
17.如今,酶己经大规模地应用于食品、化工、轻纺、医疗等各个领域。
(l)在酶的应用过程电人们发现了一些实际问题:酶容易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次被利用;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量,现代的 技术可解决这些实际问题, 技术也能解决这些问题,且该技术成本更低,操作更容易。
(2)选择新鲜的葡萄制作葡萄汁过程中, 不仅会影响葡萄汁出汁率,还会使葡萄汁混浊,可通过使用 物质,使制作葡萄汁变得更加容易,也使得混浊的葡萄汁变得更澄清。
(3)加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉,其中应用最广泛、效果最明显的是含有脂肪酶和蛋白酶制剂的洗衣粉。使用该类加酶洗衣粉过程中需注意水温,因温度会影响 (填“碱性”或“酸性”)蛋白酶或脂肪酶的活性。酶的活性是指 。
18.回答下列与固定化酶和固定化细胞有关的问题:
(1)利用果胶酶可以提高果汁出汁率,果胶酶包括果胶分解酶、 和 。
(2)固定化细胞时,通常采用 (填“包埋法”或“化学结合法”或“
物理吸附法“);原因是 。
(3)制备固定化酵母细胞时,需要将休眠状态的干酵母加入 ,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置一定的时间,使其 ,此时酵母菌的细胞体积会变大。
(4)固定化酵母细胞使用海藻酸钠作载体时,溶化后的海藻酸钠溶液需要经 ,才可加入酵母细胞混合均匀。在制作凝胶珠时应缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,并观察液滴在溶液中形成凝胶珠的情形。如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈 ,说明海藻酸钠的浓度偏 ,固定的酵母菌细胞数目会偏 。
19.回答与果胶和果胶酶有关的问题:
(1)通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物,其原因除水果中果胶含量较高外,还因为 。
(2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落,通常对分离或诱变后的微生物悬液进行 。
(3)在某种果汁生产中,用果胶醇处理显著增加了产量,其主要原因是果胶酶水解果胶使 。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产,通常将其提取液浓缩后再加入 使之形成絮状物,然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
(4)常用固定化果胶醇处理含果胶的污水,其主要优点有 和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时,除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外,还需考虑的主要有 和 。
20.下列为固定化酵母细胞制备的流程,请回答以下问题.
酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞
(1)在 状态下,微生物处于休眠状态.活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复 状态.活化前应选择足够大的容器,因为酵母细胞活化时 .
(2)固定化细胞技术一般采用包埋法,而固定化酶常用 和 .
(3)影响实验成败的关键步骤是 .
(4)海藻酸钠溶化过程的注意事项是 .
(5)如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目 .如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明 .
(6)该实验中CaCl2溶液的作用是 .
21.工业生产果汁时,常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出果汁率。为研究温度对果胶酶活性的影响,某学生设计了如下实验:
①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管,在100C水浴中恒温处理10min(如图A)。
②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合,再次在10℃水浴恒温处理10min(如图B)。
③将步骤②处理后的混合物过滤,收集滤液,测量果汁量(如图C)。
④在不同温度条件下重复以上实验步骤,并记录果汁量,结果如下表:
温度/℃
10
20
30
40
50
60
70
80
出汁量/moL
8
13
15
25
15
12
11
10
根据上述实验,请分析并回答下列问题:
(1)果胶酶能破除细胞壁,是因为果胶酶可以促进细胞壁中的 水解。
(2)实验结果表明,在上述8组实验中,当温度为 时果汁量最多,此时果胶酶的活性 。当温度再升高时,果汁量降低,说明 。
(3)实验步骤①的目的是 。实验操作中,如果不经过步骤①的处理,直接将果胶酶和苹果泥混合,是否可以?请解释原因。
22.PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。 它的基本过程如下:
注:图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链。
请据图分析回答:
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内 的过程。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是 ,其作用相当于细胞内 酶的作用。
(3)在③适温延伸过程中,必须加一特定的DNA聚合酶,从图示中可判断,该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特点是 。
(4)假如引物都用3H标记,从理论上计算,DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中,含有3H标记的DNA分子占 %。
(5)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算,除需要引物14个外,还需要游离的脱氧核苷酸 个。
23.某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行DNA粗提取和鉴定的实验,实验主要过程如图,回答下列问题:
(1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和 对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是 。将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有DNA的滤液。
(2)步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:①滤液中NaCl浓度在0.14mol/L时可分离出DNA,若要再次提纯,需要将其溶解在mol/L的NaCl溶液中;
②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是 ;
③将得到的DNA粗提取物放在60~75℃水浴中保温10~15min,蛋白质被破坏,但仍能得到纯度较高的DNA,说明了DNA 。
(3)步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是 ,依据的原理是 。得到纯净的DNA后,可利用DNA与 在沸水浴条件下发生显色反应,来对其进行鉴定。
24.如图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程,请回答下列问题。
(1)在证明C中含有脂肪时,需向滤液C中加入 ,观察到的颜色是 。
(2)在“DNA粗提取与鉴定”时:
①图中实验材料A可以是下面的 。(填字母)
a.花菜 b.香蕉 c.猪肝 d.猪血
②若选用植物组织,研磨前加入的B一般为 ,作用分别是 。
得到滤液C后,先向滤液C中加入 ,过滤得到滤液D,再向滤液D中加入蒸馏水,目的是 。
③实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL下表所示的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得相应的3种滤液,含DNA较多的是滤液 。
溶液种类
滤液
1
2mol/L的NaCl溶液
e
2
0.014mol/L的NaCl溶液
f
3
体积分数为95%的冷酒精溶液
g
25.在进行DNA亲子鉴定时,需大量的DNA.PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增,获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图1,图中黑色长方形是引物)。
(1)图中的变性、延伸分别是指 、 。
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P,第一轮循环的产物2个子代DNA为N1,第二轮循环的产物4个子代DNA为N2,N1、N2中含有模板DNA单链的DNA分别有 个、 个。
(3)某样品DNA分子中共含3 000个碱基对,碱基数量满足=,若经5次循环,至少需要向试管中加入 个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
(4)若图2为第一轮循环产生的产物,请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。
周测试卷
参考答案与试题解析
一.选择题(共25小题)
1.关于果胶酶的叙述中错误的是( )
A.果胶酶可以使植物组织变得松散
B.可以用浑浊度衡量果胶酶的活性
C.经果胶酶处理的果汁加乙醇会出现显著浑浊
D.果胶酶、纤维素酶等配合使用,可促使植物营养物质释放,提高饲料的营养价值
【解答】解:A、果胶酶分解了果胶,可以使植物组织变得松散,A正确;
B、果胶酶能够分解果胶,瓦解植物的细胞壁和胞间层,在果汁生产中应用果胶酶可以提高出汁率和澄清度。故可以用浑浊度衡量果胶酶的活性,B正确;
C、果胶不溶于乙醇,但经果胶酶处理的果汁加乙醇不会出现显著浑浊,C错误;
D、果胶酶、纤维素酶等配合使用,可促使植物营养物质释放,提高饲料的营养价值,D正确。
故选:C。
2.据图,下列关于酶和酶固定的叙述,正确的是( )
①X中a是底物、b表示酶
②Y表示酶聚合,易于移动催化反应
③Z表示酶颗粒被包埋在人工膜内
④X、Y、Z分别表示酶固定的三种方法
A.①② B.③④ C.①④ D.②③
【解答】解:①据图分析,X中a是物理吸附材料、b表示酶,①
②据图分析,Y表示化学结合法将酶聚合,易于重复利用,而聚合的酶分子量变大,不易于移动催化反应,②错误;
③Z表示酶颗粒被包埋在人工膜内,如海藻酸钠等多孔性材料中,③正确;
④图X、Y、Z表示酶固定的三种方法,分别是物理吸附法、化学结合法、包埋法,④正确。
故选:B。
3.某物质能够在室温下彻底分解果胶,降低果汁黏度,裂解细胞壁,提高果汁的产出量。下列对该物质的叙述正确的是( )
A.该物质是由脱氧核苷酸脱水缩合而来的
B.该物质在低温条件下会失活,恢复常温后依然处于失活状态
C.该物质可以分解纤维素
D.该物质可以被蛋白酶分解
【解答】解:A、果胶酶的本质为蛋白质,由氨基酸组成,A错误;
B、在低温条件下活性会降低,不会失活,B错误;
C、果胶酶能分解果肉细胞壁中的果胶,C错误;
D、该酶的本质为蛋白质,在蛋白酶作用下可能会被降解,D正确。
故选:D。
4.果胶酶能够分解果胶,可以提高水果的出汁率。某同学为了探究pH对果胶酶活性的影响,在不同pH下,将等量的果胶酶加入到等量的苹果泥中,在反应同样时间后,再将反应液过滤同样时间,用量筒测出滤出苹果汁的体积。下列能正确反映实验结果的曲线是( )
A. B.
C. D.
【解答】解:酶的催化需要适宜的PH,在最适PH,酶的催化活性是最高的,低于最适PH或高于最适PH,酶的催化活性都较低,由此,在最适PH,苹果汁的体积是最大的。
故选:B。
5.下列关于生物技术应用的叙述,正确的是( )
A.从酶的固定方式看,物理吸附法比化学结合法对酶活性影响小
B.作为消化酶使用时,蛋白酶制剂只能以注射的方式给药
C.加酶洗衣粉中酶制剂可以被重复利用,提高了酶的利用率
D.将海藻酸钠凝胶珠用自来水冲洗,可洗去多余的CaCl2和杂菌
【解答】解:A、酶的固定方法通常有化学结合法和物理吸附法,前者可能引起酶分子结构发生改变而改变酶的活性,后者则不会,A正确;
B、消化酶发挥作用的场所是消化道,因此蛋白酶制剂应该口服,B错误;
C、加酶洗衣粉中酶制剂不能被重复利用,会随污水一起排掉,C错误;
D、将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗,目的是洗去CaCl2和杂菌,D错误。
故选:A。
6.固定化脂肪酶的方法一般是:将酶液和一定浓度的海藻酸钠溶液混合后,用注射器滴到一定浓度CaCl2溶液中,25℃静置固定化2h,过滤洗涤,再加入到戊二醛溶液中,25℃化学结合2h,过滤、洗涤和干燥后就可得到颗粒状固定化脂肪酶。兴趣小组对固定化脂肪酶的性质和最佳固定条件进行了探究。如图显示的是部分研究结果(注:纵坐标为酶活力,包括酶活性和酶的数量,a为游离酶,b为固定化脂肪酶)。下列分析中正确的是( )
A.在温度或pH变化时,与游离酶相比固定化脂肪酶具有的缺点是稳定性较低
B.这种固定化脂肪酶使用的是物理吸附法、包埋法和化学结合法三种方法的结合
C.氯化钙的量太少时,酶活力较低的原因可能是包埋不完全,包埋在内部的部分酶会流失
D.海藻酸钠浓度较高时,酶活力低的原因可能是形成的凝胶孔径较大,影响酶与底物的结合
【解答】解:A、由上面两个曲线图可知,在温度或pH变化时,与游离酶相比固定化脂肪酶具有的优点是稳定性较高,A错误;
B、根据题干信息“
将酶液和一定浓度的海藻酸钠溶液混合后,用注射器滴到一定浓度CaCl2溶液中”可知这种固定化脂肪酶使用的是包埋法,B错误;
C、氯化钙的量太少时,酶活力较低的原因可能是包埋不完全,包埋在内部的部分酶会流失,C正确;
D、海藻酸钠浓度较高时,酶活力低的原因可能是凝胶珠不易成形,D错误。
故选:C。
7.表是某同学探究温度对果胶酶活性的影响的实验结果,该结果不能说明( )
温度/℃
10
20
30
40
50
60
果汁量/mL
2
3
4
5
6
5
A.温度影响果胶酶的活性
B.40℃与60℃时酶的活性相等
C.50℃是该酶的最适温度
D.若温度从10℃升高到40℃,酶的活性将逐渐增强
【解答】解:A、分析表中数据可以发现:不同温度下产生的果汁量不同,当温度在50℃左右时,果胶酶的活性较高,说明温度影响果胶酶的活性,A正确;
B、表中40℃与60℃时产生的果汁量相等,说明40℃与60℃时酶的活性相等,B正确;
C、由表中数据可知果胶酶的最适温度在50℃左右(40℃~60℃之间),50℃不一定是该酶的最适温度,C错误;
D、表中数据温度从10℃升高到40℃,果汁量逐渐增多,说明酶的活性逐渐增强,但不能表明低温下酶变性失活后,随温度的升高,酶的活性又逐渐恢复,D正确。
故选:C。
8.加酶洗衣粉中含有的常见酶类为( )
A.蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶
B.蛋白酶、脂肪酶、肽酶、纤维素酶
C.脂肪酶、肽酶、淀粉酶、纤维素酶
D.蛋白酶、淀粉酶、麦芽糖酶、肽酶
【解答】
解:加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉,目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶,碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好的去污能力。
故选:A。
9.下列关于“酵母细胞的固定化技术实验的叙述,正确的是( )
A.活化酵母时,将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
B.注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保持凝胶珠成球状
C.将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2溶液时,凝胶珠成形后应即刻取出
D.海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色,过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
【解答】解:A、活化酵母时,将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状,使酵母菌从休眠状态转变为正常状态,A正确;
B、注射器(或滴管)出口应尽量离液面一段距离,以保证凝胶珠成为球状,B错误;
C、CaCl2溶液使酵母细胞形成稳定的结构,固定在凝胶珠中,需要一段时间,时间不宜过长或过短,C错误;
D、海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈蝌蚪状,过低时凝胶珠易呈白色,D错误。
故选:A。
10.DNA粗提取与鉴定实验中有三次过滤:(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的0.14mol/L的NaCL溶液(3)过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCL溶液。以上三次过滤分别是为了获得( )
A.含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物、纱布上的DNA
B.含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物质、含DNA的滤液
C.含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
D.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
【解答】解:(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液,目的是为了获得含有核物质的滤液;
(2)DNA在0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低,因此过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液的目的是获得纱布上的粘稠物;
(3)DNA在2mol/LNaCl溶液中的溶解度最高,因此过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液的目的是获得含DNA的滤液。
故选:D。
11.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,错误的是( )
A.用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近
B.DNA析出过程中,搅拌操作要轻柔以防DNA断裂
C.预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA
D.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热
【解答】解:A、兔属于哺乳动物,其红细胞没有细胞核及各种细胞器,提取不到DNA,而鸡属于鸟类,其红细胞内含有细胞核与各种细胞器,DNA含量较多,A错误;
B、DNA分子从细胞中被释放出来且除去蛋白后是非常容易断裂的,如果太过剧烈的搅拌,DNA链可能会被破环,因此轻柔搅拌的目的是为了获得较完整的DNA分子,B正确;
C、在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低,DNA的沉淀量最大。如果用热的95%酒精会提高DNA的溶解度,不能完全使DNA沉淀,C正确;
D、将析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂后需要水浴加热才会呈现蓝色,D正确。
故选:A。
12.下列关于实验的叙述,正确的是( )
A.粗提取DNA和鉴定生物组织中脂肪的实验均需用乙醇
B.在添加尿素的固体培养基上能生长的微生物均能分解尿素
C.在制作果酒的实验中,需将葡萄汁液装满整个发酵装置
D.光合色素在层析液中的溶解度越高,在滤纸上扩散就越慢
【解答】解:A、DNA的粗提取与鉴定和生物组织中脂肪的实验均需用乙醇,前者使用体积分数95%冷酒精,其作用是将DNA与蛋白质分离,后者用到50%的酒精,它的作用是洗去浮色,A正确;
B、在以尿素为唯一氮源的培养基上能生长的微生物均能分解尿素,B错误;
C、制作果酒和果醋时,不能将发酵液装满整个发酵装置,C错误;
D、叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同,在层析液中的溶解度越高,在滤纸上扩散就越快,D错误。
故选:A。
13.下列有关多聚酶链式反应(PCR)扩增目的基因的叙述,错误的是( )
A.为方便构建重组质粒,在引物中需要适当添加限制酶的切割位点
B.PCR扩增时,复性所需温度的设定与引物的长度和碱基组成无关
C.PCR扩增一般需要经历多个循环,每个循环分为变性、复性和延伸3步
D.PCR扩增后,常用离心法分离扩增的DNA分子,以便于鉴定产物的存在和大小
【解答】解:A、为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的限制性核酸内切酶位点,A正确;
B、退火温度与时间取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长度,如果引物中GC含量高,需要设定更高的退火温度,B错误;
C、PCR扩增一般需要经历多个循环,每个循环分为变性、复性和延伸3步,C正确;
D、PCR扩增后,常用离心法分离扩增的DNA分子,以便于鉴定产物的存在和大小,D正确。
故选:B。
14.利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。以下叙述错误的是( )
A.变性过程中断裂的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B.退火时引物A必须与引物B碱基互补配对
C.由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B
D.延伸时需要耐高温DNA聚合酶催化
【解答】解:A、在PCR技术变性过程中高温能破坏的是DNA分子的双螺旋结构,使其碱基对间的氢键断裂,A正确;
B、退火时引物A、引物B需要与模板进行碱基互补配对,如果引物A和引物B发生碱基互补配对则不能与相应模板链结合,无法完成子链的延伸,B错误;
C、由于DNA复制为半保留复制,而引物为单链DNA片段,所以由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B,C正确;
D、延伸时的温度为72°C左右,所以要用耐高温的DNA聚合酶催化子链合成,D正确。
故选:B。
二.填空题
15.生物学实验中选材对于实验的成功至关重要,回答以下有关实验材料的选择及其原因分析的问题:
(1)若要进行DNA的提取实验,应选择哺乳动物成熟红细胞还是鸡血细胞?原因是什么? 应选择鸡血细胞,因为鸡血细胞有细胞核可提取到DNA而哺乳动物成熟红细胞无细胞核
(2)在制备细胞膜的实验中,应选择哺乳动物成熟红细胞还是鸡血细胞?原因是什么? 应选择哺乳动物成熟红细胞,因为其细胞内无细胞核及众多具膜细胞器,可制备纯净的细胞膜,而鸡血细胞中有细胞核及细胞器膜结构的干扰
(3)若某同学用鸡血细胞提取到的磷脂平铺在水面上形成单层磷脂分子层,则该单层磷脂分子层的面积与鸡血细胞的表面积大小是怎样的关系?为什么? 单层磷脂分子层的面积大于鸡血细胞表面积的2倍,因为细胞中的细胞核、具膜细胞器的膜也由磷脂分子构成基本骨架
(4)简述盐酸在观察细胞中DNA和RNA的分布实验中的作用,并尝试解释为何在观察有丝分裂的实验中不能解离过度? 盐酸的作用:①改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;②促进染色体上蛋自质的水解,使蛋白质与DNA分离,有利于DNA与染色剂结合。
不能解离过度的原因:①可能会使染色体上的蛋白质水解,使蛋白质与DNA分离,不利于染色;②使洋葱根尖变得酥软不便于操作
【解答】解:(1)由于鸡血细胞有细胞核可提取到DNA而哺乳动物成熟红细胞无细胞核,所以要进行DNA的提取实验,应选择鸡血细胞。
(2)由于哺乳动物成熟红细胞内无细胞核及众多具膜细胞器,可制备纯净的细胞膜,而鸡血细胞中有细胞核及细胞器膜结构的干扰,所以在制备细胞膜的实验中,应选择哺乳动物成熟红细胞。
(3)由于细胞中的细胞核、具膜细胞器的膜也由磷脂分子构成基本骨架,所以某同学用鸡血细胞提取到的磷脂平铺在水面上形成单层磷脂分子层,则该单层磷脂分子层的面积大于鸡血细胞表面积的2倍。
(4)在观察细胞中DNA和RNA的分布实验中,盐酸的作用:①改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;②促进染色体上蛋自质的水解,使蛋白质与DNA分离,有利于DNA与染色剂结合。由于解离过度可能会使染色体上的蛋白质水解,使蛋白质与DNA分离,不利于染色;并使洋葱根尖变得酥软不便于操作,所以不能解离过度。
故答案为:
(1)应选择鸡血细胞,因为鸡血细胞有细胞核可提取到DNA而哺乳动物成熟红细胞无细胞核
(2)应选择哺乳动物成熟红细胞,因为其细胞内无细胞核及众多具膜细胞器,可制备纯净的细胞膜,而鸡血细胞中有细胞核及细胞器膜结构的干扰
(3)单层磷脂分子层的面积大于鸡血细胞表面积的2倍,因为细胞中的细胞核、具膜细胞器的膜也由磷脂分子构成基本骨架
(4)盐酸的作用:①改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;②促进染色体上蛋自质的水解,使蛋白质与DNA分离,有利于DNA与染色剂结合。
不能解离过度的原因:①可能会使染色体上的蛋白质水解,使蛋白质与DNA分离,不利于染色;②使洋葱根尖变得酥软不便于操作
16.科研人员利用固定化酵母直接发酵甜菜汁生产燃料乙醇,如图1表示相关的工艺流程,图2为不同固定化酵母接种量对发酵的影响。请分析回答:
(1)图1的步骤①中,溶化海藻酸钠时要注意 小火加热或间断加热,防止海藻酸钠焦糊 ,防止海藻酸钠焦糊。步骤②中加入果胶酶的作用是 分解果胶,瓦解细胞壁,提高甜菜汁的出汁率和澄清度 。
(2)步骤③中进行增殖培养的目的是 增加酵母菌的数量,提高发酵效率 。图1的步骤④体现了固定化酵母 容易与产物分离,并能重复使用 的优点。
(3)由图2可知,固定化酵母接种量为 15% 时酒精产量最高。接种量过高,酒精产量反而有所降低的原因是 酵母菌呼吸的中间产物大量用于自身的生长,导致酒精产量降低(酵母菌生长消耗大量的糖分,使得酒精的产量降低) 。
(4)利用酵母菌制酒过程中,发酵液的pH会 下降 (填“上升”或“下降”
)。工业生产中酵母细胞的固定化是在严格 无菌 条件下进行的。一般发酵温度控制在 18~25 ℃
【解答】解:(1)步骤①中配置海藻酸钠溶液时要注意小火加热或间断加热,直到海藻酸钠溶化为止,以防止海藻酸钠焦糊;步骤②中榨取的甜菜汁含有果胶,因其不溶于水,会影响出汁率,且导致果汁浑浊,因此该步骤使用果胶酶分解果胶,瓦解细胞壁,以提高甜菜汁的出汁率和澄清度。
(2)步骤③是酵母菌快速增殖的过程,可以增加酵母菌的数量,提高发酵效率。步骤④循环利用体现了固定化酵母容易与产物分离,并能重复使用的优点。
(3)由图2可知,固定化酵母接种量为15%时对应的酒精含量值达到顶点的最大值,接种量超过15%,菌种数量大,自身的生长会大量消耗反应物,导致酒精产量降低。
(3)利用酵母菌制酒过程中,二氧化碳不断增多,二氧化碳溶于水呈酸性,故发酵液的pH会下降。工业生产中酵母细胞的固定化是在严格无菌条件下进行的。一般发酵温度控制在18~25℃。
故答案为:
(1)小火加热或间断加热,防止海藻酸钠焦糊 分解果胶,瓦解细胞壁,提高甜菜汁的出汁率和澄清度
(2)增加酵母菌的数量,提高发酵效率 容易与产物分离,并能重复使用
(3)15% 酵母菌呼吸的中间产物大量用于自身的生长,导致酒精产量降低(酵母菌生长消耗大量的糖分,使得酒精的产量降低)
(3)下降 无菌 18~25
17.如今,酶己经大规模地应用于食品、化工、轻纺、医疗等各个领域。
(l)在酶的应用过程电人们发现了一些实际问题:酶容易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次被利用;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量,现代的 固定化酶 技术可解决这些实际问题, 固定化细胞 技术也能解决这些问题,且该技术成本更低,操作更容易。
(2)选择新鲜的葡萄制作葡萄汁过程中, 果胶 不仅会影响葡萄汁出汁率,还会使葡萄汁混浊,可通过使用 果胶酶 物质,使制作葡萄汁变得更加容易,也使得混浊的葡萄汁变得更澄清。
(3)加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉,其中应用最广泛、效果最明显的是含有脂肪酶和蛋白酶制剂的洗衣粉。使用该类加酶洗衣粉过程中需注意水温,因温度会影响
碱性 (填“碱性”或“酸性”)蛋白酶或脂肪酶的活性。酶的活性是指 酶所催化一定化学反应的能力 。
【解答】解:(1)固定化酶优点是使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,还可以被反复利用。固定化细胞优点是成本更低,操作更容易,可以催化一系列的化学反应。所以固定化酶和固定化细胞可以解决酶容易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次被利用;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量等问题。
(2)水果榨汁时,果胶会影响出汁率和浑浊度,使用果胶酶可以提高果汁的出汁率和澄清度。
(3)酶的活性易受到温度和pH的影响,加酶洗衣粉使用中温度过高温度会影响碱性蛋白酶或碱性脂肪酶的活性。酶的活性是指酶所催化一定化学反应的能力。
故答案为:
(1)固定化酶 固定化细胞
(2)果胶 果胶酶
(3)碱性 酶所催化一定化学反应的能力
18.回答下列与固定化酶和固定化细胞有关的问题:
(1)利用果胶酶可以提高果汁出汁率,果胶酶包括果胶分解酶、 多聚半乳糖醛酸酶 和 果胶酯酶 。
(2)固定化细胞时,通常采用 包埋法 (填“包埋法”或“化学结合法”或“物理吸附法“);原因是 细胞体积比较大,难以化学结合和物理吸附 。
(3)制备固定化酵母细胞时,需要将休眠状态的干酵母加入 蒸馏水 ,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置一定的时间,使其 恢复正常生活状态 ,此时酵母菌的细胞体积会变大。
(4)固定化酵母细胞使用海藻酸钠作载体时,溶化后的海藻酸钠溶液需要经 冷却后 ,才可加入酵母细胞混合均匀。在制作凝胶珠时应缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 CaCl2 溶液中,并观察液滴在溶液中形成凝胶珠的情形。如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈 白色 ,说明海藻酸钠的浓度偏 低 ,固定的酵母菌细胞数目会偏 少 。
【解答】解:(1)果胶酶是分解果胶的酶的总称,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶,食品工业中之所以使用果胶酶澄清果蔬饮料,是因为果胶酶能破坏植物的细胞壁结构。
(2)因为细胞体积比较大,难以化学结合和物理吸附,所以固定化细胞技术更适合采用包埋法。
(3)制备固定化酵母细胞之前,需要将干酵母加入蒸馏水中进行活化,目的是使酵母菌恢复正常生活状态。
(4)制备固定化酵母细胞时,先将海藻酸钠溶液灭菌冷却后,加入活化的酵母细胞混合均匀,然后转移到注射器中以恒定的速度缓慢地滴加到适宜浓度的CaCl2溶液中。形成凝胶珠。如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母菌细胞数目会偏少。
故答案为:
(1)多聚半乳糖醛酸酶 果胶酯酶
(2)包埋法 细胞体积比较大,难以化学结合和物理吸附
(3)蒸馏水 恢复正常生活状态
(4)冷却后 CaCl2溶液 白色 低 少
19.回答与果胶和果胶酶有关的问题:
(1)通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物,其原因除水果中果胶含量较高外,还因为 腐烂的水果中含产果胶酶 的微生物较多 。
(2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落,通常对分离或诱变后的微生物悬液进行 涂布分离(或划线分离) 。
(3)在某种果汁生产中,用果胶醇处理显著增加了产量,其主要原因是果胶酶水解果胶使 水果组织软化疏松及细胞受损 。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产,通常将其提取液浓缩后再加入 95%乙醇 使之形成絮状物,然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
(4)常用固定化果胶醇处理含果胶的污水,其主要优点有 提高果胶酶的稳定性 和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时,除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外,还需考虑的主要有 固定化的方法 和 固定化所用的介质 。
【解答】解:(1)腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多,因此通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物。
(2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落,通常对分离或诱变后的微生物悬液进行涂布分离(或划线分离)。
(3)在某种果汁生产中,用果胶醇处理显著增加了产量,其主要原因是果胶酶水解果胶使水果组织软化疏松及细胞受损。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产,通常将其提取液浓缩后再加入95%乙醇使之形成絮状物,然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
(4)常用固定化果胶醇处理含果胶的污水,其主要优点有提高果胶酶的稳定性和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时,除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外,还需考虑的主要有固定化的方法和固定化所用的介质。
故答案为:
(1)腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多
(2)涂布分离(或划线分离)
(3)水果组织软化疏松及细胞受损 95%乙醇
(4)提高果胶酶的稳定性 固定化的方法 固定化所用的介质
20.下列为固定化酵母细胞制备的流程,请回答以下问题.
酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞
(1)在 缺水 状态下,微生物处于休眠状态.活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复 正常的生活 状态.活化前应选择足够大的容器,因为酵母细胞活化时 体积增大 .
(2)固定化细胞技术一般采用包埋法,而固定化酶常用 化学结合法 和 物理吸附法 .
(3)影响实验成败的关键步骤是 配制海藻酸钠溶液 .
(4)海藻酸钠溶化过程的注意事项是 用小火间断加热的方法,避免海藻酸钠发生焦糊 .
(5)如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目 少 .如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明 海藻酸钠浓度偏高,制作失败 .
(6)该实验中CaCl2溶液的作用是 用于海藻酸钠聚沉 .
【解答】解:(1)酵母菌在缺水状态下处于休眠状态.活化是指加入水使得酵母菌恢复正常的生活状态,酵母细胞活化时体积会增大,则活化前应选择足够大的容器,以避免酵母菌溢出容器外.
(2)由于细胞较大,酶较小,故固定化细胞技术一般采用包埋法,而固定化酶常用化学结合法和物理吸附法.
(3)实验成败的关键是配制海藻酸钠溶液,形成凝胶珠.
(4)海藻酸钠溶化过程中应注意用小火间断加热,以避免海藻酸钠发生焦糊.
(5)观察形成的凝胶珠的颜色和形状,如果颜色过浅,说明固定化酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明海藻酸钠浓度偏高,制作失败.
(6)CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉,形成凝胶珠.
故答案为:
(1)缺水 正常的生活 体积增大
(2)化学结合法 物理吸附法
(3)配制海藻酸钠溶液
(4)用小火间断加热的方法,避免海藻酸钠发生焦糊
(5)少 海藻酸钠浓度偏高,制作失败
(6)用于海藻酸钠聚沉
21.工业生产果汁时,常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出果汁率。为研究温度对果胶酶活性的影响,某学生设计了如下实验:
①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管,在100C水浴中恒温处理10min(如图A)。
②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合,再次在10℃水浴恒温处理10min(如图B)。
③将步骤②处理后的混合物过滤,收集滤液,测量果汁量(如图C)。
④在不同温度条件下重复以上实验步骤,并记录果汁量,结果如下表:
温度/℃
10
20
30
40
50
60
70
80
出汁量/moL
8
13
15
25
15
12
11
10
根据上述实验,请分析并回答下列问题:
(1)果胶酶能破除细胞壁,是因为果胶酶可以促进细胞壁中的 果胶 水解。
(2)实验结果表明,在上述8组实验中,当温度为 40℃
时果汁量最多,此时果胶酶的活性 最高 。当温度再升高时,果汁量降低,说明 酶活性降低 。
(3)实验步骤①的目的是 避免果汁和果胶酶混合时影响混合物温度,从而影响果胶酶活性 。实验操作中,如果不经过步骤①的处理,直接将果胶酶和苹果泥混合,是否可以?请解释原因。
【解答】解:(1)细胞壁的成分主要是纤维素和果胶,根据酶的专一性,果胶酶能使细胞壁中的果胶分解。
(2)根据实验结果即表中数据分析得出:当温度为40℃时果汁量最多,此时果胶酶的活性最大。当温度再升高时,果汁量降低,说明温度升高,降低了酶的活性。
(3)实验步骤①中将果胶酶与苹果泥分装于不同试管,在30℃水浴中恒温处理10min,这是为了避免果汁和果胶酶混合时影响混合物温度,从而影响果胶酶活性。实验的单一变量就是温度,由于果汁和果胶酶溶液在未处理时就具有一定的温度,因此不保温进行混合,会在短时间内进行反应,因此就不能保证单一变量,从而影响实验结果的准确性。
故答案为:
(1)果胶
(2)40℃最高 酶活性降低
(3)避免果汁和果胶酶混合时影响混合物温度,从而影响果胶酶活性 不可以 因为原先果胶酶和苹果泥的温度并不处于实验温度下,这样对实验结果会有影响
22.PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。 它的基本过程如下:
注:图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链。
请据图分析回答:
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内 DNA复制 的过程。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是 使DNA双链解开成为单链 ,其作用相当于细胞内 解旋 酶的作用。
(3)在③适温延伸过程中,必须加一特定的DNA聚合酶,从图示中可判断,该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特点是 耐高温 。
(4)假如引物都用3H标记,从理论上计算,DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中,含有3H标记的DNA分子占 100 %。
(5)假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算,除需要引物14个外,还需要游离的脱氧核苷酸 2520 个。
【解答】解:(1)PCR技术是指在体外模拟生物体内DNA分子复制的过程,因此其原理是DNA复制。
(2)PCR扩增过程中通过95℃高温处理,目的是使DNA分子的双螺旋结构打开,形成单链DNA分子,而在生物体内DNA分子解旋形成单链是在解旋酶的作用下完成的。
(3)在③适温延伸过程中,必须加一特定的DNA聚合酶,从图示中可判断,该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特点是耐高温。
(4)DNA分子的复制方式为半保留复制,如果引物都用3H标记,从理论上计算,所得所有DNA分子中都含有3H标记。
(5)DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,形成了8个DNA分子,其中只有两条DNA单链上没有引物,因此该过程中需要的游离的脱氧核糖核苷酸数是200×2×(8﹣1)﹣14×20=2520个。
故答案为:
(1)DNA复制
(2)使DNA双链解开成为单链 解旋
(3)耐高温
(4)100
(5)2520
23.某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行DNA粗提取和鉴定的实验,实验主要过程如图,回答下列问题:
(1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和 食盐 对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是 溶解DNA 。将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有DNA的滤液。
(2)步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:①滤液中NaCl浓度在0.14mol/L时可分离出DNA,若要再次提纯,需要将其溶解在mol/L的NaCl溶液中;
②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是 分解溶有DNA的滤液中的杂质蛋白 ;
③将得到的DNA粗提取物放在60~75℃水浴中保温10~15min,蛋白质被破坏,但仍能得到纯度较高的DNA,说明了DNA 对高温具有耐受性 。
(3)步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是 将DNA与蛋白质进一步的分离 ,依据的原理是 DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精 。得到纯净的DNA后,可利用DNA与 二苯胺 在沸水浴条件下发生显色反应,来对其进行鉴定。
【解答】(1)如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂(瓦解细胞膜)和食盐(溶解DNA),进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
(2)②嫩肉粉含有蛋白酶,故在溶有DNA的滤液中加入嫩肉粉,可分解其中的杂质蛋白;
③大多数蛋白质不能忍受60﹣80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。说明了DNA对高温具有耐受性。
(3)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
故答案为:
(1)食盐 溶解DNA
(2)②分解溶有DNA的滤液中的杂质蛋白
③对高温具有耐受性
(3)将DNA与蛋白质进一步的分离 DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精 二苯胺
24.如图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程,请回答下列问题。
(1)在证明C中含有脂肪时,需向滤液C中加入 苏丹Ⅲ/苏丹Ⅳ ,观察到的颜色是 橘黄色/红色 。
(2)在“DNA粗提取与鉴定”时:
①图中实验材料A可以是下面的 abc 。(填字母)
a.花菜 b.香蕉 c.猪肝 d.猪血
②若选用植物组织,研磨前加入的B一般为 洗涤剂、食盐 ,作用分别是 溶解细胞膜、溶解DNA 。
得到滤液C后,先向滤液C中加入 2mol/L的NaCl溶液 ,过滤得到滤液D,再向滤液D中加入蒸馏水,目的是 使DNA(溶解度下降而沉淀)析出 。
③实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL下表所示的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得相应的3种滤液,含DNA较多的是滤液 ef 。
溶液种类
滤液
1
2mol/L的NaCl溶液
e
2
0.014mol/L的NaCl溶液
f
3
体积分数为95%的冷酒精溶液
g
【解答】解:(1)脂肪可用苏丹Ⅲ染液(或苏丹Ⅳ染液)鉴定,呈橘黄色(或红色)。
(2)①DNA的粗提取和鉴定实验中,原则上只要含有DNA的生物都可以作为实验材料,花菜、香蕉、猪肝都含有DNA,都可以作为该实验的材料,而猪为哺乳动物,其成熟的红细胞中不含细胞核和细胞器,即不含DNA,因此不能作为该实验的材料。
②若选用植物组织,研磨前需加入食盐和洗涤剂,其中食盐能溶解DNA,洗涤剂能瓦解细胞膜。得到滤液C后,先向滤液C中加入2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA,过滤得到滤液D,再向滤液D中加入蒸馏水,使DNA(溶解度下降而沉淀)析出。
③DNA在2mol/L的NaCl溶液和0.014mol/L的NaCl溶液中的溶解度都较大,但不溶于体积分数为95%的冷酒精溶液。因此,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL如表所示的3种溶液中,经搅拌后过滤,获得相应的3种滤液,含DNA较多的是滤液ef。
故答案为:
(1)苏丹Ⅲ/苏丹Ⅳ橘黄色/红色
(2)①abc ②洗涤剂、食盐 溶解细胞膜、溶解DNA 2 mol/L的NaCl溶液 使DNA(溶解度下降而沉淀)析出 ③ef
25.在进行DNA亲子鉴定时,需大量的DNA.PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增,获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图1,图中黑色长方形是引物)。
(1)图中的变性、延伸分别是指 模板DNA双链解聚形成单链 、 在DNA聚合酶的作用下,原料脱氧核苷酸聚合形成新的DNA链 。
(2)假设PCR反应中的DNA模板为P,第一轮循环的产物2个子代DNA为N1,第二轮循环的产物4个子代DNA为N2,N1、N2中含有模板DNA单链的DNA分别有 2 个、 2 个。
(3)某样品DNA分子中共含3 000个碱基对,碱基数量满足=,若经5次循环,至少需要向试管中加入 31000 个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
(4)若图2为第一轮循环产生的产物,请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。
【解答】解:(1)图1中的变性是指高温下氢键断裂,模板DNA双链解旋形成单链;延伸是指在DNA聚合酶的作用下,原料脱氧核苷酸聚合形成新的DNA链。
(2)PCR的原理是DNA复制,而DNA复制的方式是半保留复制,即无论复制多少次,子代中总有2个DNA分子含有亲代模板DNA单链。
(3)某样品DNA分子中共含3000个碱基对,碱基数量满足:=,即其中A和T占,C和G占,则A=T=3000×2×÷2=1000,若经5次循环,至少需要向试管中加入(25﹣1)×1000=31000个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
(4)若图2为第1轮循环产生的产物,则以a链和b链为模板经PCR扩增的产物如图:
故答案为:(1)模板DNA双链解聚形成单链 在DNA聚合酶的作用下,原料脱氧核苷酸聚合形成新的DNA链
(2)2 2
(3)31 000
(4)
日期:2020/2/28 23:10:08;用户:倪亚静;邮箱:luoyang139@xyh.com;学号:31104683