2019-2020学年人教版高中生物选修一同步课时作业12　血红蛋白的提取和分离 9页

课时作业 12 血红蛋白的提取和分离 1．以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是 ( ) A．红细胞洗涤过程中要加入 5 倍体积的蒸馏水，重复洗涤 3 次 B．将血红蛋白溶液放在质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液中透析 12 小时 C．凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在 D．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢 解析：红细胞洗涤过程中要加入 5 倍体积的生理盐水，重复洗涤 3 次目的是除去杂蛋白。透析时使用物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷 酸缓冲液，而不是用 0.9%的 NaCl 溶液。蛋白质通过凝胶时，相对分 子质量较大的在凝胶外部移动，移动速度快。在装填凝胶柱时，不得 有气泡存在，气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。 答案：C 2．有关透析的叙述中，错误的是( ) A．用于透析的薄膜要具有选择透过性 B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的 C．透析能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内 D．透析可用于更换样品的缓冲液 解析：透析袋一般是用硝酸纤维素(又称玻璃纸)制成的，它没有 生物活性，故不具有选择透过性(活的生物膜才具有选择透过性)。透 析袋能使小分子物质自由进出，而将大分子物质保留在袋内。透析可 以去除样品中相对分子质量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液。 答案：A 3．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的 是( ) A．防止血红蛋白被氧化 B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和 C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D．让血红蛋白处在稳定的 pH 范围内，维持其结构和功能 解析：利用磷酸缓冲液模拟细胞内的 pH 环境，保证血红蛋白的 正常结构和功能，便于分离观察(红色)和研究(活性)。 答案：D 4．利用凝胶色谱法分离蛋白质时，蛋白质洗脱出来的顺序是 ( ) ①相对分子质量最大的 ②相对分子质量最小的 ③相对分子质量适中的 A．①②③ B．③②① C．①③② D．②①③ 解析：分子很大，完全不能进入凝胶的任何内孔隙的蛋白质洗脱 出来的时间最短；分子大小适中，能进入凝胶内孔隙中孔径大小相应 部分的蛋白质，洗脱出来的时间次之；分子很小，能进入分子筛全部 内孔隙的蛋白质，洗脱出来的时间最长。 答案：C 5．凝胶柱的制作常用玻璃管，在选择玻璃管时应该考虑的因素有 ( ) ①玻璃管的高度 ②玻璃管的直径 ③样品的体积 ④缓冲溶液的 pH A．①②③ B．②③④ C．①②④ D．①③④ 解析：影响分离度的主要因素是层析柱的柱高，但在选择玻璃管 时，也要考虑玻璃管的直径，保证柱高与直径的比为 5∶1～10∶1。 样品的体积也要考虑，缓冲溶液的 pH 不影响选择玻璃管。 答案：A 6．对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是( ) A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐 B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要 破坏凝胶面 C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，直接连接缓冲液 洗脱瓶开始洗脱 D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每 5 mL 收集一管，连续 收集流出液 解析：打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口， 在用同样的方法小心加入适量的 20 mmol/L 的磷酸缓冲液，然后连接 缓冲液洗脱瓶开始洗脱。 答案：C 7．在蛋白质的提取和分离中，关于对样品处理过程中，分析无误 的是( ) A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到 分离的效果 C．洗涤过程选用 0.1%的生理盐水 D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质 解析：洗涤红细胞的目的是去除血液中除血红蛋白以外的杂蛋白； 洗涤时离心速度过大，时间过长，白细胞等会沉淀，达不到分离的效 果；洗涤过程选用 0.9%的生理盐水。 答案：D 8．下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是( ) A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特 性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白 质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移 动 解析：电泳法分离物质的原理是在电场中，带电物质能向与自身 所带电荷相反的电极方向移动，移动的速度和距离取决于物质所带电 荷的量及相对分子质量。 答案：D 9．SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入 SDS 的作用是( ) A．增大蛋白质的相对分子质量 B．改变蛋白质分子的形状 C．掩盖不同蛋白质分子间的电荷差别 D．减少蛋白质分子的相对分子质量 解析：SDS 是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂 分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二、三级 结构。在样品和凝胶中加入还原剂 SDS 后，分子被解聚成多肽链，解 聚后的氨基酸侧链和 SDS 结合成蛋白质—SDS 复合物，所带的负电荷 大大超过了蛋白质原有的电荷量，这样就消除了不同种蛋白质分子间 的电荷差异和结构差异从而达到仅根据蛋白质相对分子质量亚基的不 同而分离蛋白质的目的。 答案：C 10．下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(图Ⅰ) 和洗脱(图Ⅱ)示意图，请据图回答下列问题。 (1)在加样示意图中，正确的加样顺序是__________。 (2)用吸管加样时，应注意正确操作，分别是①________、 ②__________、③__________。 (3) 等 样 品 ____________________ 时 ， 才 加 入 缓 冲 液 ， 待 __________接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每__________mL 收集一管，连续收集。 答案：(1)④→①→②→③ (2)不要触及破坏凝胶面 贴着管壁加样 使吸管管口沿管壁环绕移动 (3)完全进入凝胶层 红色的蛋白质 5 11．电泳法是分离生物大分子物质的常用方法，它可以分离带有 不同电荷、不同分子大小的生物大分子，如多肽、核酸等。下图示意 一种核酸分析方法，请据此分析回答有关问题： (1)被分析的材料应属于一条____________链。 (2)如果选择性断开的位置是碱基 G，那么随机出现的被标记片段 应有__________种，在电泳带上被分离的显示位置应有__________处， 在泳动方向最前端的片段应是序列__________段，与下图所示泳动位 置相比，在同样电泳条件下该片段应位于__________的位置上。 (3)应用上述原理分析了某种未知序列核酸的一条单链，结果如下 图所示： 此结果说明 ，该核酸 的此单链含__________个核苷酸 ，则 A∶T∶G∶C ＝ __________∶__________∶__________∶__________。 解析：根据题目给定的信息，不难看出：(1)被分析的材料中含有 碱基 T，不含碱基 U，因而应属于一条 DNA 链；(2)分析题图后可以 发现与选择性从 A 碱基处断开相同，如果选择性断开的碱基是 G，随 机出现 4 种被标记片段，且长短不一，通过电泳应显示 4 处位置，其 中泳动方向最前端的应是TG片段(TG片段最短)，在同样电泳条件下， 该片段应位于下方的位置上。(3)题图中共有 18 处泳动位置，即有 18 种核苷酸，A∶T∶G∶C＝5∶4∶5∶4。 答案：(1)DNA (2)4 4 TG 下方 (3)18 5 4 5 4