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- 2021-09-26 发布
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2021届 新高考生物 一轮复习 人教版 微生物的培养与应用 作业
一、单项选择题
1.下列有关微生物培养的叙述正确的是( )
A.通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落
B.若培养基需要调节pH,应该在灭菌后进行
C.用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量
D.倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染
1.答案 D 常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落,液体无法分离,A错误;若培养基需要调节pH,应该在灭菌前进行,B错误;显微镜直接计数是测定培养液中微生物数量的方法,固体培养基上用涂布分离法直接计数单个菌落数,C错误;平板倒置是为了避免冷凝的液体掉到培养基上,污染培养基,D正确。
2.下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是( )
成分
蛋白胨
葡萄糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
含量
10 g
10 g
2 g
0.4 g
0.065 g
1 000 mL
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基
B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨
C.该培养基缺少提供生长因子的物质
D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用
2.答案 B 分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,A项错误;该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,B项正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,C项错误;培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后才能使用,D项错误。
3.无菌技术包括以下几个方面的叙述,其中正确的是( )
A.紫外线照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果
B.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.在微生物接种的实验中,用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
3.答案 A 用紫外线照射30 min,可以杀死物体表面或空气中的微生物,在照射前,适量喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果,A正确;高压灭菌加热结束时,待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开放气阀使压力表指针回到零,B错误;接种环经火焰灭菌、冷却后才可以快速挑取菌落,C错误;在微生物接种的实验中,一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒,用紫外线照射30 min对超净工作台进行灭菌,D错误。
4.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D.对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
4.答案 C 只有菌液稀释到一定程度后,在固体培养基表面才能形成单个的菌落,否则可能会出现两个或两个以上的细菌共同形成一个菌落,或菌落重叠的现象。
5.给无氮培养基接种土壤稀泥浆的正确方法是( )
A.打开培养皿盖,取一根接种环蘸取少许稀泥浆,轻轻地点接在培养基的表面上
B.取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆,略微打开培养皿盖,在培养基的表面轻点
C.打开培养皿盖,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌后蘸取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点
D.略微打开培养皿盖,取一根接种环在酒精灯的火焰上灭菌,冷却后蘸取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点
5.答案 D 接种过程中要防止外来杂菌的入侵,左手将培养皿打开一条缝隙,右手将接种环在火焰上灭菌,冷却后蘸取少许稀泥浆,在培养基的表面轻点,用未冷却的接种环沾取稀泥浆会杀灭菌种。
6.(2019吉林模拟)下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中,正确的是( )
A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
B.筛选分解尿素的细菌时,应以尿素作为培养基中唯一的营养物质
C.统计样品中的活菌数目一般用平板划线法
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则表明筛选到了分解尿素的细菌
6.答案 A 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,A项正确;筛选分解尿素的细菌的实验中,采用的是以尿素为唯一氮源的培养基,B项错误;统计样品中的活菌数目一般用涂布平板法,C项错误;在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂变红,这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素,D项错误。
7.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( )
A.灭菌后的培养基要冷却到室温后才能倒平板
B.本研究适宜采用稀释涂布平板法进行接种
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养时要将培养皿倒置是防止空气中杂菌污染
7.答案 B 灭菌后的培养基需要冷却到50 ℃左右后倒平板,再冷却到室温后将平板倒置保存。稀释涂布平板法可以保证尽可能多地接种各种菌种,有利于筛选,平板划线法接种适于分离纯化微生物,而涂布法适于筛选和计数。从有机废水中分离的微生物属于异养型生物,不需要放在光照培养箱中培养。在培养基保存和培养的过程中,平板都必须保证倒置,以防止培养基中蒸发水分落入培养基造成污染。
8.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
8.答案 D 首先要进行培养基的制备,用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板,A正确;取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,然后将土壤稀释液涂布于各组平板上,B正确;将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48小时,C正确;确定对照组无菌后,选择菌落数在30~300的进行计数,求其平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数,D错误。
二、不定项选择题
9.下列有关实验操作流程的叙述中,错误的是( )
A.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌
B.腐乳制作过程可表示为让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制
C.制备固定化酵母细胞的步骤是酵母细胞的活化→配制物质的量浓度为0.05 mol/L的CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
D.果酒制作的实验流程是挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒
9.答案 AC 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算→称量→溶化→灭菌→倒平板,A错误;腐乳制作过程可表示为让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制,B正确;制备固定化酵母细胞的步骤是酵母细胞的活化→配制物质的量浓度为0.05 mol/L的CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞,C错误;果酒制作的实验流程是挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒,D正确。
10.细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列与此有关的说法错误的是( )
A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B.无机氮源不可能作为细菌的能源物质
C.琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质
D.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌
10.答案 ABC 乳酸菌是异养型微生物,需要有机碳源,而硝化细菌是自养型微生物,需要的碳源是CO2,故A项错误;有些无机氮源也可以提供能量,如硝化细菌可以利用氧化氨释放的能量进行有机物的合成,故B项错误;培养基中的琼脂是凝固剂,不会被微生物利用,故C项错误;自生固氮微生物可以利用大气中的N2作为氮源,因此以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌,故D项正确。
11.(2020山东模拟)生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培养结果如图所示,下列说法正确的是( )
A.倒成平板后直接培养可判断有无污染
B.倒成平板后需要进行灭菌处理
C.图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙
D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选
11.答案 AD 平板上不含任何生长因子,若倒成平板后直接培养,出现菌落说明已被杂菌感染,因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长,A正确;制备平板时,先灭菌再倒平板,B错误;图中菌落生活在乙丙区域之间,说明同时需要乙和丙,C错误;不同菌种所需生长因子不同,可利用生长图形法筛选菌种,D正确。
三、非选择题
12.在农业生产研究上,常需要进行微生物的分离和计数。
(1)下表为两种微生物的培养基配方:
A组
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
琼脂
1.4 g
2.1 g
0.2 g
10.0 g
1.0 g
15.0 g
B组
纤维
素粉
NaNO3
Na2HPO4·7H2O
KH2PO4
MgSO4·7H2O
KCl
酵母膏
水解酪素
5 g
1 g
1.2 g
0.9 g
0.5 g
0.5 g
0.5 g
0.5 g
注:上述两种培养基中的物质溶解后,均用蒸馏水定容至1 000 mL。
①从功能上来看,上述两种培养基均属于 培养基。
②如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离,则需要选择 (填“A”或“B”)培养基,该培养基中的碳源是 。
③在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入 指示剂,根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素,若有分解尿素的细菌,培养基将会呈现 。
(2)下图是某同学采用的接种微生物的方法,请回答下列问题:
①本实验采用的接种微生物的方法是 法,把聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面,为达到这一目的,操作上应注意: (至少答2项)。
②三位同学用涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下统计结果:
甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,取平均值248;
乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233;
丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中, 同学的统计结果是正确的。
12.答案 (1)①选择 ②A 葡萄糖 ③酚红 红色 (2)①平板划线 稀释 每次划线前要灼烧接种环;冷却后从上一次划线的末端开始划线 ②乙
解析 (1)①据题表中的培养基的配方分析可知,A组培养基中的氮源为尿素,是筛选尿素分解菌的选择培养基。B组培养基中的碳源是纤维素,是筛选纤维素分解菌的选择培养基。②对土壤中分解尿素的细菌进行分离时,需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基,故应当选择A组培养基,该培养基中的碳源是葡萄糖。③尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定。尿素分解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨而使培养基pH升高,使酚红指示剂呈红色。(2)①据图分析可知,图示表示平板划线法接种,是把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面,操作上应注意每次划线前要灼烧接种环;冷却后从上一次划线的末端开始划线。②在进行平板菌落计数时,应选择菌落数在30~300之间的平板,同时为减小误差应选择至少3个或3个以上的平板进行计数并取平均值,在三位同学的统计中,乙同学的统计结果是正确的。
13.大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌,请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题:
(1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时,通常将样品进行一系列的梯度稀释,将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,然后记录菌落数,这种方法称为 。
判断下面所示的4个菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是 。
(2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组? (填“需要”或“不需要”),其原因是需要判断培养基 ,对于固体培养基应采用的检测方法是将 的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生。
(3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行 (填“消毒”或“灭菌”)处理;操作者的双手需要进行清洗和 ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使其内蛋白质变性,还能损伤它的 结构。
(4)检测大肠杆菌实验结束后,使用过的培养基及其培养物必须经过 处理才能丢弃,以防止培养物的扩散。
13.答案 (1)稀释涂布平板法 D (2)需要 是否被杂菌污染(或灭菌是否合格) 未接种 (3)灭菌 消毒 DNA (4)灭菌
解析 D中菌落分布情况为平板划线法所得。为判断培养基是否被杂菌污染(或灭菌是否合格),本实验需要设置对照组。可将未接种的培养基在适宜的温度条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生,若发现有菌落产生说明培养基已被污染。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子);灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。对培养基和培养器皿要进行灭菌处理,操作者的双手需要进行清洗和用酒精消毒。
14.某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示,请分析回答下列问题:
(1)培养基中加入化合物A的目的是 ,这种培养基属于 培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源来自培养基中的 。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是 。
(3)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是 。
(4)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具是 ,操作时采用 灭菌的方法。
14.答案 (1)筛选目的菌 选择 (2)化合物A 异养需氧型 (3)防止外来杂菌污染 (4)接种环 灼烧
解析 (1)在选择培养基中加入特定物质,可以筛选出特定的细菌。(2)根据题目所给的培养基配方,“目的菌”生长所需的氮源和碳源只能来自培养基中的化合物A。异养需氧型细菌在培养时需要振荡。(3)获得纯净特定“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染。(4)采用平板划线法进行接种,此过程中所用的接种工具是接种环,操作时一般采用灼烧灭菌。
15.现在国家大力提倡无纸化办公,但是每年仍然不可避免地产生大量废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工艺流程。请回答相关问题:
(1)将从土壤中获得的微生物培养在以 为唯一碳源的培养基上。纯化菌种时,为了得到单一菌落,常采用的接种方法有两种,即 和 。
(2)在含纤维素的培养基中通常加入 染液,此染液可与纤维素形成 色复合物。用含有此染料的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 ,我们可以通过此方法来筛选纤维素分解菌。
15.答案 (1)纤维素 平板划线法 涂布平板法 (2)刚果红 红 透明圈
解析 (1)要从土壤中获得能分解纤维素的微生物,需要将土壤中获得的微生物培养在以纤维素为唯一碳源的培养基上。纯化菌种时,常用的接种方法有平板划线法和涂布平板法。(2)在培养基中加入刚果红染液,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌。