2019-2020学年生物高中人教版选修3检测：专题1检测（A） 10页

专题 1 检测(A) (时间:60 分钟,满分:100 分) 一、选择题(每小题 2 分,共 40 分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的) 1 下列关于 DNA 连接酶的叙述,正确的是( ) A.DNA 连接酶不需要识别特定的脱氧核苷酸序列 B.一种 DNA 连接酶只能连接一种黏性末端 C.将单个脱氧核苷酸加到某 DNA 片段末端,形成磷酸二酯键 D.连接两条 DNA 链上碱基之间的氢键 解析:DNA 连接酶只能连接 DNA 片段,DNA 聚合酶能连接单个脱氧核苷酸。DNA 上的氢键 的连接不需要酶催化,DNA 连接酶不需要识别特定的脱氧核苷酸序列。 答案:A 2 下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容,正确的组合是( ) 供体 剪刀 针线 载体 受体 A 质粒 限制性核酸内切酶 DNA 连接酶 提供目的基因的生 物 大肠杆 菌等 B 提供目的基因的生 物 DNA 连接酶 限制性核酸内切酶 质粒 大肠杆 菌等 C 提供目的基因的生 物 限制性核酸内切酶 DNA 连接酶 质粒 大肠杆 菌等 D 大肠杆菌等 DNA 连接酶 限制性核酸内切酶 提供目的基因的生 物 质粒 解析:供体在基因工程中是指提供目的基因的个体,受体是指接受目的基因或者重组表达载体 的个体或细胞。 答案:C 3 基因工程操作中将 DNA 导入受体细胞称为转化。下列相关叙述错误的是( ) A.被转化的细胞吸收外源 DNA 是转化的实质 B.常用 Ca2+处理植物细胞使其处于感受态 C.动物细胞相对于植物细胞吸收 DNA 的障碍要小 D.显微注射技术一般用于动物细胞的转化 解析:转化是目的基因导入受体细胞,并在受体细胞内稳定保存和表达,因此,转化的实质是细 胞吸收外源 DNA;常用 Ca2+处理大肠杆菌细胞使其处于感受态;由于植物细胞具有细胞壁,而 动物细胞没有,故动物细胞吸收 DNA 障碍较小;显微注射技术一般用于动物细胞的转化。 答案:B 4 下列有关基因工程的叙述,正确的是( ) A.载体上的标记基因有利于促进目的基因在受体细胞中表达 B.用逆转录法合成胰岛素基因时只能从胰岛 B 细胞中提取相关的模板 C.目的基因导入受体细胞后,引起受体细胞的变异属于基因突变 D.限制性核酸内切酶和 DNA 聚合酶是基因工程中两类常用的工具酶 解析:用逆转录法合成目的基因,需要先从细胞中提取到相应的 mRNA,而胰岛素只能在胰岛 B 细胞中合成,因而胰岛素基因只能在胰岛 B 细胞中转录成相应的 mRNA。目的基因导入受 体细胞后,引起受体细胞的变异属于基因重组。基因工程中不需要 DNA 聚合酶,而需要 DNA 连接酶。 答案:B 5 下列有关基因工程的叙述,正确的是( ) A.DNA 连接酶能将碱基互补的两个黏性末端的碱基对连接起来 B.获得目的基因一定要使用限制性核酸内切酶 C.目的基因和受体细胞均可来自动植物或微生物 D.质粒上的标记基因可用来筛选含重组 DNA 的细胞和转基因植物 解析:DNA 连接酶连接的是碱基互补的两个黏性末端的磷酸二酯键,A 项错误;目的基因的获 取可使用限制性核酸内切酶,也可人工合成,B 项错误;目的基因和受体细胞均可来自动植物 或微生物,C 项正确;质粒上的标记基因可用来筛选含重组 DNA 的细胞,转基因植物常采用抗 原—抗体杂交法进行筛选,D 项错误。 答案:C 6 用某动物的胰岛素基因制成 DNA 探针,检测下列物质,不能形成杂交分子的是( ) A.该动物胰岛 A 细胞的 DNA B.该动物胰岛 B 细胞的 mRNA C.该动物胰岛 A 细胞的 mRNA D.该动物肝细胞的 DNA 解析:胰岛素只能在胰岛 B 细胞中合成,因而胰岛素基因只能在胰岛 B 细胞中转录成相应的 mRNA,胰岛 A 细胞的 mRNA 中不会有胰岛素基因转录出的 mRNA,也就无法与胰岛素基因 制成的探针杂交。而该动物的所有体细胞中都会有胰岛素基因,因而其所有体细胞的 DNA 都 能与该探针形成杂交分子。 答案:C 7 将 ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。 下列叙述错误的是( ) A.每个表达腺苷酸脱氨酶的大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B.每个载体(质粒)至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个 ada D.每个插入的 ada 至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 解析:将 ada 通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达,则每个表达腺苷酸脱氨酶的大肠杆 菌细胞中至少含有一个重组质粒,且每个载体(质粒)至少含有一个限制酶识别位点,但只在某 个限制酶识别位点插入一个 ada,插入的 ada 成功表达,说明每个插入的 ada 至少表达一个腺 苷酸脱氨酶分子。故 C 项错误。 答案:C 8 下表中有关基因表达的选项,不可能的是( ) 基因 表达的细胞 表达产物 A 细菌抗虫蛋白基因 抗虫棉叶肉细胞 细菌抗虫蛋白 B 人酪氨酸酶基因 正常人皮肤细胞 人酪氨酸酶 C 动物胰岛素基因 大肠杆菌工程菌细胞 动物胰岛素 D 兔血红蛋白基因 兔成熟红细胞 兔血红蛋白 解析:抗虫棉叶肉细胞中存在细菌抗虫蛋白基因,细菌抗虫蛋白基因能够表达产生细菌抗虫蛋 白;正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因,人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶;大肠 杆菌工程菌细胞中存在动物胰岛素基因,动物胰岛素基因能够表达产生动物胰岛素;兔成熟红 细胞中无细胞核,无兔血红蛋白基因,所以不能表达产生兔血红蛋白。 答案:D 9 人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是 ( ) A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B.有利于对目的基因是否导入进行检测 C.增加质粒分子的相对分子质量 D.便于与外源基因连接 解析:可以根据细胞是否具有对抗生素的抗性来判断目的基因是否导入。 答案:B 10 利用生物工程的方法可以让大肠杆菌生产人胰岛素。下面有关叙述错误的是( ) A.在进行基因操作时,将人工合成的人胰岛素基因连接到质粒上,再转移到大肠杆菌中 B.人胰岛素基因能够在大肠杆菌体内得以表达,是因为这两类生物具有完全相同的代谢方式 C.能合成人胰岛素的大肠杆菌从可遗传变异的类型上看属于基因重组 D.大肠杆菌制造的胰岛素,需要进一步的加工和提纯才能使用 解析:人胰岛素基因能够在大肠杆菌体内得以表达,是因为两种生物基因表达的过程类似,并 且共用一套遗传密码。 答案:B 11 农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因,现拟采用基因工程技术将该基因转入棉 花,培育抗病棉花品系。下列叙述错误的是( ) A.要获得该抗病基因,可采用从细胞中分离、人工合成等方法 B.要使载体与该抗病基因连接,首先应使用限制酶进行切割。假如载体被切割后,得到的分子 末端序列为 AATTC—G—,则能与之连接的抗病基因分子末端是—G—CATTT C.限制酶切割完成后,采用 DNA 连接酶将载体与该抗病基因连接,形成重组 DNA 分子 D.将连接得到的 DNA 分子导入农杆菌,然后用该农杆菌去感染棉花细胞,利用植物细胞具有 的全能性进行组织培养,从培养出的植株中筛选出抗病的棉花 解析:黏性末端只有互补才能连接。 答案:B 12 下图表示利用农杆菌转化法生产转基因植物的主要过程,下列说法错误的是( ) A.①是构建表达载体(目的基因与载体结合)需要用到限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶 B.②③是将重组质粒导入受体细胞 C.③是利用农杆菌转化作用将重组质粒导入植物细胞,转化前需要割伤叶片 D.整个流程中质粒作为载体能够在宿主细胞内稳定存在,目的基因随着质粒的复制而复制 解析:从题图中可以看出,目的基因已经从质粒上转移到宿主细胞的染色体 DNA 上,此时目的 基因的载体是宿主细胞的染色体,因此目的基因能够在宿主细胞内稳定存在并且得以表达。 答案:D 13 限制酶可辨识并切割 DNA 分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶 BamH Ⅰ、 EcoRⅠ、Hind Ⅲ及 Bgl Ⅱ的辨识序列及每一种限制酶的特定切割部位。 其中切割出来的 DNA 片段末端可以互补结合的两种限制酶是( ) A.BamH Ⅰ和 EcoR Ⅰ B.BamH Ⅰ和 Hind Ⅲ C.BamH Ⅰ和 Bgl Ⅱ D.EcoR Ⅰ和 Hind Ⅲ 解析:BamH Ⅰ和 Bgl Ⅱ切出的黏性末端的碱基能互补配对,互补序列都含有—GATC—。 答案:C 14 下列有关蛋白质工程和基因工程的叙述,错误的是 ( ) A.基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内,并在其中进行表达,它的产品还 是该基因编码的天然存在的蛋白质 B.蛋白质工程的产品已不再是天然的蛋白质,而是经过改造的、具有了人类所需要的优点的 蛋白质 C.蛋白质工程利用基因工程的手段,按照人类自身的需要,定向地改造天然的蛋白质,甚至于 创造出全新的蛋白质分子 D.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构 解析:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修 饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需 求。其目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质结构进行分子设计,但因为基因决 定蛋白质,因此对蛋白质的结构进行设计改造,归根到底,还需对相应的基因按要求进行修饰 加工改造,使之能控制合成人类需要的蛋白质。 答案:D 15 棉花产业在我国国民经济发展中占有举足轻重的地位,为了抵抗虫害,我国育成了拥有 自主知识产权的转基因抗虫棉,棉田生态环境得到改善。下列判断抗虫基因是否成功转入棉 花基因组的方法中,不属于分子检测的是 ( ) A.观察害虫吃棉叶是否死亡 B.检测棉花基因组 DNA 与含有目的基因的 DNA 探针能否形成杂交带 C.检测棉花基因组 DNA 转录形成的 mRNA 与含有目的基因的 DNA 探针能否形成杂交带 D.检测从棉花中提取的蛋白质能否与特定抗体形成杂交带 解析:A 项属于个体生物学水平的鉴定,不是分子检测。B、C 两项为分子检测,利用 DNA 分子 杂交技术,观察棉花基因组 DNA 及其转录形成的 mRNA 能否与含有目的基因的 DNA 探针进 行杂交,形成杂交带;D 项也为分子检测,利用抗原与抗体杂交的原理,检测从棉花中提取的蛋 白质能否与特定抗体形成杂交带。 答案:A 16 科学家已能运用基因工程技术,让羊合成并由乳腺分泌抗体,下列相关叙述正确的是 ( ) ①该技术将导致定向变异 ②DNA 连接酶把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来 ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供依据 ④受精卵是理想的受体 A.①②③④ B.①③④ C.②③④ D.①②④ 解析:基因工程可将控制特定性状的外源基因导入受体细胞,从而定向改造生物的性状,而且 此过程不受亲缘关系远近的制约,即克服远缘杂交不亲和的障碍。DNA 连接酶只能催化形成 磷酸二酯键。由蛋白质中的氨基酸序列可推知相应的 mRNA 中的核糖核苷酸序列,进而可推 测相应基因中的脱氧核苷酸序列,从而可以用化学合成方法人工合成目的基因。转基因羊的 乳腺细胞及全身所有的组织细胞均来自受精卵的有丝分裂,遗传物质都与受精卵完全相同,而 受精卵体积较大,操作较容易,也能保障发育成的个体所有细胞都含有外源基因。 答案:B 17 下列有关基因导入方式、受体细胞以及基因导入后获得个体的说法,错误的是( ) A.将目的基因导入动物细胞目前最常用的,也是最为有效的方式是显微注射技术 B.将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法 C.转基因动物的受体细胞必须是受精卵,然后由受精卵发育成转基因动物 D.转基因植物的受体细胞必须是受精卵,然后利用植物组织培养技术获得转基因植株 解析:转基因植物的受体细胞可以是体细胞或受精卵,因为植物细胞的全能性比较强,利用植 物组织培养很容易获得转基因植株。而转基因动物则必须用受精卵作为受体细胞,由受精卵 发育成转基因动物。 答案:D 18 下列说法错误的是( ) A.基因治疗是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的 目的 B.基因文库包括基因组文库、cDNA 文库等 C.基因工程的核心是基因表达载体的构建 D.外源基因插入转基因生物染色体 DNA 上后就能够表达 解析:外源基因插入染色体 DNA 上后不一定表达,所以需进行基因工程的第四步——目的基 因的检测与鉴定,来确定外源基因是否表达。 答案:D 19 采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法,正确的是( ) ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的 DNA 序列注射到棉受精卵中 ③将 编码毒素蛋白的 DNA 序列与质粒重组导入土壤农杆菌细胞中,用该细菌感染棉花体细胞,再 进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的 DNA 序列与质粒重组,借助花粉管进入棉花子房,并进 入受精卵 A.①② B.②③ C.③④ D.①④ 解析:将毒素蛋白直接注射到棉受精卵中,没有获得目的基因,子代细胞不会有抗虫性状,①错 误;将编码毒素蛋白的 DNA 序列直接注射到棉受精卵中,而没有将目的基因与载体结合,这样 目的基因是不会被保留下来的,很容易被水解掉,②错误;在植物基因工程中,可利用农杆菌转 化法将目的基因导入受体细胞,然后通过植物组织培养技术将植物细胞培养成完整植株,③正 确;在植物基因工程中,可以利用花粉管通道法将目的基因导入受精卵中,然后发育为转基因 植株,④正确。 答案:C 20 质粒之所以能作为基因工程的载体,是因为( ) A.它能够自我复制、能携带目的基因 B.它含蛋白质从而能完成生命活动 C.RNA 能指导蛋白质的合成 D.它具有环状结构而保持连续性 解析:质粒具有自我复制能力,且有一个至多个限制酶切割位点,供外源 DNA 片段(基因)插入 其中。 答案:A 二、非选择题(共 60 分) 21(12 分)回答下列问题。 (1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细 胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了 (答出两点 即可)。 (2)体外重组的质粒可通过 Ca2+参与的 方法导入大肠杆菌细胞;而体外重组的噬菌 体 DNA 通常需与 组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的 噬菌体 DNA 导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的 是 。 (3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防 止蛋白质被降解,在实验中应选用 的大肠杆菌作为受体细胞。在蛋白质 纯化的过程中应添加 的抑制剂。 解析:本题主要考查基因工程的操作步骤及应用。(1)该实例可以说明很多问题,比如体外重组 的质粒可以进入受体细胞,真核细胞的基因也可以在原核细胞中表达,真核生物和原核生物共 用同一套密码子,质粒的化学本质是 DNA 等。(2)目的基因导入细菌可以用 Ca2+处理细菌,从 而使目的基因进入受体细胞。噬菌体由 DNA 和蛋白质外壳组成,噬菌体属于细菌病毒,即其 宿主细胞为细菌,所以需要将重组噬菌体导入细菌中。(3)为了防止目的基因所表达的蛋白质 被细菌内的蛋白酶所降解,所以要选择蛋白酶缺陷型大肠杆菌,即不能产生蛋白酶的大肠杆菌 作为受体细胞。同时,在纯化蛋白质的过程中可以加入蛋白酶抑制剂,以降低蛋白酶的活性。 答案:(1)体外重组的质粒可以进入受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达 (2)转化 外壳蛋白(或答噬菌体蛋白) 细菌 (3)蛋白酶缺陷型 蛋白酶 22(10 分)在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因 afp 对提高农作物的抗寒能力有较好的应 用价值。右上图所示是获得转基因莴苣的技术流程,请据图回答下列问题。 (1)获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和 。 (2)重组质粒除了带有抗冻蛋白基因 afp 以外,还必须含有启动子、终止子和 等, 这样才能构成一个完整的基因表达载体。 (3)如果受体细胞 C1 是土壤农杆菌,则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的 , 使目的基因进入受体细胞 C2,并将其插入受体细胞 C2 中的 上,使目的基因的 遗传特性得以稳定维持和表达,形成转基因莴苣。经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因 是否表达,在分子水平上可用 法进行检测,如果出现杂交带,说明目的基因已 经表达蛋白质产品,转基因莴苣培育成功。 解析:(1)获取目的基因的主要途径有从自然界已有的物种中分离和人工合成。 (2)一个完整的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)农杆菌转化法利用的是农杆菌的转化作用,将目的基因整合到受体细胞的染色体 DNA 上, 进而使目的基因能够稳定遗传和表达。检测目的基因是否成功表达可采用抗原—抗体杂交 法。 答案:(1)人工合成 (2)标记基因 (3)转化作用 染色体 DNA 抗原—抗体杂交 23(12 分)ch1L 基因是蓝藻 DNA 上控制叶绿素合成的基因,为研究该基因对叶绿素合成的 控制,需要构建该种生物缺失 ch1L 基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示,请据图分析回答 问题。 甲 乙 (1)与真菌相比较,蓝藻在结构上最主要的特点是 ,在 功能上最主要的特点是 。 (2)构建重组质粒 B 在整个操作过程中的目的是 和 。 (3)若含有 ch1L 基因的 DNA 片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示。请回答下 列问题。 ①构建含 ch1L 基因的重组质粒 A 时,应选用的限制酶是 ,对 进行切割。 ②同时用酶 1 和酶 4 切割图乙中的质粒,则产生含有 1 800 对碱基和 8 200 对碱基的两种片段; 用图中四种酶同时切割此质粒,则产生含有 600 对碱基和 8 200 对碱基的两种片段;若换用酶 1 和酶 3 同时切割此质粒,则产生的片段是 。 解析:(1)蓝藻为原核生物,没有以核膜为界限的细胞核,其体内含有光合色素,能进行光合作 用。 (2)由题干信息“构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞”可知,构建重组质粒B的目的在于 破坏 ch1L 基因并筛选出变异株细胞。 (3)①由图乙知,要获得 ch1L 基因,需用酶 1 和酶 3 对此基因所在的 DNA 进行切割,同时对质 粒也要用同种酶进行切割处理,以便构建重组质粒 A。 ②由题意知用四种酶同时切割时,会产生 3 个含 600 对碱基的片段。若用酶 1 和酶 3 同时切 割,产生的片段有 8 200+600=8 800(对)碱基;另一片段有 600×2=1 200(对)碱基。 答案:(1)没有以核膜为界限的细胞核 能够进行光合作用 (2)破坏 ch1L 基因 操作成功后筛选出该变异株细胞 (3)①酶 1 和酶 3 质粒和含 ch1L 基因的 DNA 片段 ②含有 1 200 对碱基和 8 800 对碱基的两种片段 24(12 分)下图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性核酸内切酶 EcoR Ⅰ、 BamH Ⅰ的酶切位点,ampR 为青霉素抗性基因,tetR 为四环素抗性基因,P 为启动子,T 为终止 子,ori 为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括 EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ在内的多种酶的酶 切位点。 据图回答下列问题。 (1)将含有目的基因的 DNA 与质粒表达载体分别用 EcoRⅠ酶切,酶切产物用 DNA 连接酶进 行连接后,其中由两个 DNA 片段之间连接形成的产物 有 、 、 3 种。 (2)用上述 3 种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细 胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物 是 ;若接种到含青霉素的 培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是 。 (3)目的基因表达时,RNA 聚合酶识别和结合的位点是 ,其合成的产物是 。 (4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒自身环化,酶切时应选用的酶是 。 解析:将含有目的基因的 DNA 与质粒表达载体分别用 EcoR Ⅰ酶切,所产生的黏性末端相同, 用 DNA 连接酶处理后,不同的片段随机结合,由两个 DNA 片段之间连接可形成 3 种不同的产 物。将这 3 种连接产物导入受体菌后,可根据不同连接产物所携带抗性基因的差异选择不同 的选择培养基进行筛选。由题图和题目中提供的信息可知,同时应用 EcoR Ⅰ和 BamH Ⅰ进 行酶切可有效防止目的基因和质粒自身环化。 答案:(1)目的基因—载体连接物 载体—载体连接物 目的基因—目的基因连接物 (2)载体—载体连接物 目的基因—载体连接物、载体—载体连接物 (3)启动子 mRNA (4)EcoR Ⅰ和 BamH Ⅰ(不能只答一种酶) 25(14 分)图 1 表示含有目的基因 D 的 DNA 片段长度(bp 即碱基对)和部分碱基序列,图 2 表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有 Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ 4 种限 制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为 C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、 CCC↓GGG。请回答下列问题。 (1)图 1 的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接。 (2)若用限制酶 Sma Ⅰ完全切割图 1 中 DNA 片段,产生的末端是 末端,其产物长度 为 。 (3)若图 1 中虚线方框内的碱基对被 T—A 碱基对替换,那么基因 D 就突变为基因 d。从杂合 子中分离出图 1 及其对应的 DNA 片段,用限制酶 SmaⅠ完全切割,产物中共有 种不 同长度的 DNA 片段。 (4)若将图 2 中质粒和目的基因 D 通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用 的限制酶是 。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌, 一般需要用添 加 的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基 因 D 不能正常表达,其最可能的原因是 。 解析:(1)在一条脱氧核苷酸链上,相邻两个脱氧核苷酸之间通过磷酸二酯键相连,所以相邻碱 基之间通过脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖相连接。 (2)Sma Ⅰ识别并切割的序列为 CCC↓GGG,所以产生的末端为平末端,经 Sma Ⅰ 切割 后,DNA 片段会形成 3 个小的 DNA 片段,按切割位点算分别是 534 bp+3 bp=537 bp;796 bp-3 bp-3 bp=790 bp;658 bp+3 bp=661 bp。 (3)杂合子基因型为 Dd。用 Sma Ⅰ 切割基因 D,会形成 537 bp、790 bp、661 bp 3 种长度的 DNA 片段。题图 1 中虚线方框内 C—G 被 T—A 替换,失去了一个酶切位点,则会被切割成 534 bp+796 bp-3 bp=1 327 bp 和 658 bp+3 bp=661 bp 2 种长度的片段。所以一共会得到 4 种长度 的 DNA 片段。 (4)如果要获得完整的目的基因可用 BamH Ⅰ或 Mbo Ⅰ切割,但是 Mbo Ⅰ会破坏抗生素 A 抗性基因和抗生素 B 抗性基因,质粒会失去标记基因,无法筛选,所以只能用 BamHⅠ切割。用 BamHⅠ切割后破坏了抗生素 A 抗性基因,所以质粒上存在的标记基因是抗生素 B 抗性基因, 因此,在加入抗生素 B 的培养基上进行培养、筛选。经过同种限制酶切割后质粒和目的基因 会产生相同的末端,部分目的基因与质粒反向连接导致基因无法正常表达。 答案:(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖 (2)平 537 bp、790 bp、661 bp (3)4 (4)BamHⅠ 抗生素 B 同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因 D 与质粒反向连接