2019-2020学年生物人教版选修3同步检测：1．1　DNA重组技术的基本工具 16页

1．1 DNA 重组技术的基本工具 理一理 判一判 1.切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性识别 6 个核苷酸 序列。(×) 2．DNA 连接酶能将目的基因与载体的黏性末端通过形成氢 键而连接起来。(×) 3．E·coli DNA 连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。 (×) 4．重组 DNA 分子上的抗性基因可用于检测目的基因是否表 达。(×) ↓ ↓ 5．—CATG—和—GGATCC—序列被限制酶切出的黏性末端 碱基数相同。(√) 6．载体上的抗性基因有利于筛选含重组 DNA 的细胞和促进 目的基因的表达。(×) 7．若用家蚕作为表达基因 A 的受体，则不可选用噬菌体作为 载体。(√) 8．载体必须具备的条件之一是：具有一个至多个限制性酶切 点，以便与外源基因连接。(√) 悟一悟 1.限制酶是一类酶而不是一种酶。 2．限制酶不切割自身 DNA 的原因是该生物中不存在该酶的 识别序列或识别序列已被修饰。 3．获取目的基因和切割载体时常使用同种限制酶，其目的是 产生相同的黏性末端。也可用不同的限制酶切割，但必须能产生 相同的黏性末端。不同限制酶切出的黏性末端 ↓ ↓ 未必不同，如 GATC 和 GGATCC 序列不同，但经限制酶处理 后形成的黏性末端相同。 4．限制酶作用于磷酸二酯键，而不是氢键。获取一个目的基 因需限制酶剪切目的基因的两端、共产生 4 个黏性末端或平末端。 5．DNA 连接酶是将 DNA 双链上的两个缺口连接起来，因此 DNA 连接酶不需要模板。若为黏性末端，则两个 DNA 片段要具 有互补的黏性末端才能通过 DNA 连接酶连接起来；若为平末端， 则碱基相同且两条链序列相反才可用 DNA 连接酶连接。 6．质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核 DNA 之 外，并具有自我复制能力的很小的双链环状 DNA 分子，它是基因 工程中最常用的载体，其上的基因属于细胞质基因。 7．一般来说，天然质粒往往不能满足载体必须具备的全部条 件，目前真正被用作载体的质粒都是经过人工改造的。 感悟体会： 练一练 1.[2019·辽宁会考]将单个的脱氧核苷酸连接成 DNA 分子的主 要的酶是( ) A．DNA 连接酶 B．DNA 酶 C．DNA 解旋酶 D．DNA 聚合酶 解析：DNA 连接酶被用于将两 DNA 黏性末端间的磷酸二酯 键连接起来，常用于基因工程，A 错误；DNA 酶可以水解 DNA， 断开脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，B 错误；DNA 解旋酶用于 DNA 的复制，其作用是将 DNA 双链间的氢键断开，C 错误；DNA 复制时，需要 DNA 聚合酶等酶，DNA 聚合酶的作用是将单个的 脱氧核苷酸连接成 DNA 分子，D 正确。 答案：D 2．[2019·河南会考]下列哪项不属于基因工程的基本工具 ( ) A．DNA 连接酶 B．运载体 C．DNA 聚合酶 D．限制性核酸内切酶 解析：DNA 连接酶能够将限制酶切割的末端进行连接，是基 因工程的“针线”，A 不符合题意；运载体是基因工程的操作工 具之一，B 不符合题意；DNA 聚合酶在复制过程中可催化合成 DNA 分子，C 符合题意；限制性核酸内切酶能特异性识别特定的 核苷酸系列，并在特定的核苷酸序列处切割质粒和目的基因，是 基因工程中剪切目的基因的工具，称为基因工程的“剪刀”，D 不符合题意。 答案：C 3．[2019·湖南会考]基因工程的基本工具——基因的“针线” 是指( ) A．DNA 连接酶 B．蛋白酶 C．限制性核酸内切酶 D．运载体 解析：DNA 连接酶是基因工程的针线，A 正确；蛋白酶不是 基因工程的工具酶，B 错误；限制性核酸内切酶是基因工程的剪 刀，C 错误；运载体是基因工程中运输目的基因的工具，D 错误。 答案：A 4．[2019·江苏会考]下列关于质粒的叙述，正确的是( ) A．是细菌等细胞质中能自主复制的环状 DNA B．是细菌细胞中广泛存在的细胞器 C．携带外源基因进入受体细胞后，只能停留在该细胞内独立 复制 D．在进行基因工程操作中，被用作载体的质粒都是天然质粒 解析：质粒是双链环状 DNA 分子，能自主复制，主要存在于 细菌等原核细胞的细胞质中，故 A 正确；质粒不是细胞器，故 B 错误；质粒携带外源基因进入受体细胞后，可与受体细胞的 DNA 整合，并随着受体 DNA 的复制而复制，故 C 错误；作为基因工程 的运载体，要具有限制酶的切割位点、标记基因等条件，而天然 的质粒不会同时具有这些条件，需要经过人工改造后才能用作基 因工程的运载体，故 D 错误。 答案：A 考点一 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1.[2019·河北高二期末]基因工程操作过程中，DNA 的“手术 刀”指的是( ) A．DNA 酶 B．DNA 聚合酶 C．限制酶 D．解旋酶 解析：DNA 酶可催化 DNA 水解，不是基因工程的基本工具， A 错误；DNA 聚合酶可催化 DNA 的合成，不是基因工程的基本 工具，B 错误；限制酶是 DNA 的“手术刀”，C 正确；解旋酶可 催化 DNA 的双链打开，不是基因工程的基本工具，D 错误。 答案：C 2．[2019·陕西高一期末]在基因工程的操作过程中，利用限制 性内切酶(限制性核酸内切酶)进行( ) A．DNA 的连接 B．DNA 的剪切 C．DNA 的水解 D．DNA 的解旋 解析：限制酶能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序 列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 断裂，即限制性内切酶进行的是 DNA 的剪切。 答案：B 3．以下是几种不同限制酶切割 DNA 分子后形成的部分片段。 下列有关叙述，错误的是( ) A．以上 DNA 片段是由 5 种限制酶切割后产生的 B．若要把相应片段连接起来，应选用 DNA 连接酶 C．上述①④两个片段能进行连接，其连接后形成的 DNA 分 子是 D．限制酶和 DNA 连接酶作用的部位都是磷酸二酯键 解析：①和④的黏性末端相同，是由同一种限制酶切割产生 的，因此以上 DNA 片段是由 4 种限制酶切割而成的；DNA 连接 酶可连接切割出来的 DNA 片段；①和④片段可连接为；限制酶和 DNA 连接酶作用的部位都是磷酸二酯键。 答案：A 考点二 DNA 连接酶——“分子缝合针” 4.[2019·河北高二期末]下列关于 DNA 连接酶的说法，正确的 是( ) A．作用于 DNA 的氢键 B．都是从原核生物中分离出来的 C．都能连接平末端 D．都能连接黏性末端 解析：DNA 连接酶作用于 DNA 分子中的磷酸二酯键，A 错 误；DNA 连接酶既可以从原核生物中分离得到，也可以从病毒中 分离得到，B 错误；E·coli DNA 连接酶只能连接黏性端，不能连 接平末端，C 错误；E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶都能连接 黏性末端，D 正确。 答案：D 5．[2019·陕西高二期中]下列有关 DNA 连接酶的叙述，正确 的是( ) ①催化具有相同黏性末端的 DNA 片段之间进行连接 ②催化具有不同黏性末端的 DNA 片段之间进行连接 ③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成 ④催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成 A．①④ B．③④ C．①② D．②③ 解析：DNA 连接酶分为 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶， 这二者都能连接黏性末端，此外 T4DNA 连接酶还可以连接平末 端，但连接平末端时的效率比较低；DNA 连接酶将断开的两个 DNA 片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键。DNA 连接酶可 以催化具有相同的黏性末端的 DNA 片段之间进行连接，①正确、 ②错误；DNA 连接酶催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形 成，而两个黏性末端互补碱基间氢键的形成不需要 DNA 连接酶的 催化，③错误、④正确。因此，正确的是①④。 答案：A 考点三 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 6.[2019·河北高二期末]下列有关基因工程中的载体的说法，错 误的是( ) A．某些动物病毒也可作为载体 B．单链 RNA 也可作为目的基因的载体 C．应具有一个或多个限制酶切点 D．具有特殊的标记基因 解析：常用的运载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒， A 正确；单链 RNA 不能作为基因的载体，B 错误；基因工程的运 载体必须要有一个或多个限制酶切点，便于与目的基因连接形成 重组 DNA 分子，C 正确；基因工程的运载体必须具有特殊的标记 基因，以便检测目的基因是否导入受体细胞，D 正确。 答案：B 7．[2019·黑龙江哈尔滨三中高二期中]下列哪项不是基因工程 中经常使用的载体( ) A．细菌质粒 B．λ噬菌体的衍生物 C．动植物病毒 D．细菌拟核区的 DNA 解析：常用的运载体：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒； 质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核 DNA 之外并具有 自我复制能力的双链环状 DNA 分子。综上所述，A、B、C 不符 合题意，D 符合题意。 答案：D 8．[2019·陕西渭南市尚德中学高二期中]质粒作为基因工程的 载体，下列说法正确的是( ) A．质粒只有一个限制酶切割位点 B．质粒上有特殊的标记基因 C．质粒不能在受体细胞中自我复制 D．质粒上不含碱基 T 解析：质粒作为载体应该含有一个到多个限制酶的切割位点， A 错误；质粒上应该具有标记基因，用于检测目的基因是否导入 受体细胞，B 正确；质粒作为载体必须能在受体细胞中复制并稳 定保存，C 错误；质粒的本质是双链 DNA，含有碱基 A、T、G、 C，D 错误。 答案：B 9．[2019·东北育才学校高二期中]质粒是细菌中的有机分子， 下列对其描述，正确的是( ) A．质粒完全水解后最多可产生 4 种化合物 B．质粒能够自主复制 C．质粒中含有两个游离的磷酸基团 D．质粒是基因工程的工具酶 答案：B 解析：质粒是一种具有自主复制能力的很小的双链环状 DNA 分子，不含游离的磷酸基团，完全水解后最多可产生 6 种化合物： 脱氧核糖、磷酸、4 种含氮的碱基，A、C 错误，B 正确；质粒是 基因工程的工具——载体，而不是工具酶，D 错误。 基础达标 一、选择题(每小题 5 分，共 60 分) 1．[2019·广东实验中学高一期末]实施基因工程的最终目的是 ( ) A．定向改造生物的遗传性状 B．对 DNA 分子进行重组 C．提取完整的 DNA 分子 D．将目的基因提取出来 解析：基因工程的核心技术是 DNA 重组技术，即利用供体生 物的遗传物质，或人工合成的基因，经过体外切割后与适当的载 体连接起来，形成重组 DNA 分子，然后将重组 DNA 分子导入到 受体细胞或受体生物构建转基因生物，该种生物就可以按人类事 先设计好的蓝图表现出另外一种生物的某种性状，因此基因工程 的最终目的是定向地改造生物的遗传性状，A 正确。 答案：A 2．[2019·河北高二期末]以下经限制酶切割形成的片段中，能 通过 DNA 连接酶与片段 连接起来的是( ) 解析：根据题干信息分析，已知一个黏性末端为 ，其 露出来的碱基序列是－TTAA－，而 DNA 连接酶连接的另一个黏 性末端的碱基序列应该与之发生碱基互补配对，则另一个黏性末 端露出来的对应的碱基序列应该是－AATT－，即 ，A 正 确； 露出来的碱基序列不能与 之间发生碱基互补配 对，B 错误； 为黏性末端，而 为平末端，C 错误； 为黏性末端，而 为平末端，D 错误。 答案：A 3．[2019·福建省泉州市泉港区第一中学高二期末]下列关于限 制酶的说法，正确的是( ) A．限制酶广泛存在于真核生物中，其化学本质是蛋白质 B．不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端 C．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 D．限制酶识别的序列均由 6 个核苷酸组成 解析：限制酶主要存在于原核生物中，其化学本质是蛋白质， A 错误；不同的限制酶切割 DNA 后会形成黏性末端或平末端，B 错误；一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，且在特定的 位点打开磷酸二酯键，C 正确；切割质粒的限制性核酸内切酶均 能特异性地识别核苷酸序列，但识别的核苷酸序列不一定是 6 个 核苷酸，D 错误。 答案：C 4．[2019·北京四中高二期中]下列关于质粒的叙述，正确的是 ( ) A．细菌质粒和真核细胞 DNA 的基本结构单位不同 B．细菌质粒的复制过程是在细胞外独立进行的 C．质粒是原核细胞中蛋白质合成的场所 D．质粒是能够自主复制的小型环状 DNA 分子 解析：细菌质粒和真核细胞 DNA 的基本结构单位相同，都是 脱氧核苷酸，A 错误；有的质粒可以整合到宿主细胞的染色体 DNA 上，如 Ti 质粒的 TDNA，B 错误；原核细胞中蛋白质合成的场所 是核糖体，C 错误；质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环 状 DNA 分子，D 正确。 答案：D 5．[2019·北京四中高二期中]下列有关 DNA 连接酶的表述， 正确的是( ) A．促进脱氧核糖核苷酸之间形成氢键 B．促进脱氧核糖核苷酸之间形成磷酸二酯键 C．只能连接具有黏性末端的 DNA 片段 D．能连接经各种限制酶作用后的不同来源的 DNA 片段 解析：DNA 连接酶能连接两个脱氧核苷酸片段，形成磷酸二 酯键，使脱氧核糖核苷酸之间形成磷酸二酯键，A 错误、B 正确； E·coliDNA 连接酶、T4DNA 连接酶，这二者都能连接黏性末端， 此外 T4DNA 连接酶还可以连接平末端，C 错误；DNA 连接酶能 催化相同黏性末端的 DNA 片段之间的连接，也能连接平末端，D 错误。 答案：B 6．[2019·吉林高二期末]下图表示限制酶切割某 DNA 的过程， 从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是( ) A．CTTAAG，切点在 C 和 T 之间 B．CTTAAG，切点在 G 和 A 之间 C．GAATTC，切点在 G 和 A 之间 D．CTTAAC，切点在 C 和 T 之间 解析：依图可知，该限制酶切割的位点为 GA 之间，结合所 形成的黏性末端可知该限制酶所能识别的碱基序列为 GAATTC， 综上所述，C 正确，A、B、D 错误。 答案：C 7．[2019·福建高二期末]下列关于 DNA 连接酶的叙述，正确 的是( ) A．将单个核苷酸加到某 DNA 片段末端，形成磷酸二酯键 B．将断开的两个 DNA 片段的骨架连接起来，重新形成磷酸 二酯键 C．连接两条 DNA 链上碱基之间的氢键 D．只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端连接起来 解析：DNA 连接酶能连接两个 DNA 片段，而不是将单个核 苷酸连接到已有的 DNA 链上，A 错误；DNA 连接酶可将断开的 两个 DNA 片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键，B 正确； 两个 DNA 链中的氢键的形成不需要酶的作用，C 错误；DNA 连 接酶包括 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶，其中 T4DNA 连接 酶既能连接黏性末端，也能连接平末端，只不过连接平末端的效 率较低，D 错误。 答案：B 8．[2019·山东微山县第二中学高二月考]下图是两种限制酶识 别并切割的 DNA 分子的特定核苷酸序列。下列有关说法，正确的 是( ) A．二者的识别序列相同，切出的黏性末端相同 B．二者的识别序列相同，切出的黏性末端不同 C．二者的识别序列不同，切出的黏性末端相同 D．二者的识别序列不同，切出的黏性末端不同 解析：限制酶 BamHⅠ的识别序列为—GGATCC—，切出的黏 性末端是—GATC—；限制酶 BglⅡ的识别序列为—AGATCT—， 切出的黏性末端是—GATC—，可见二者的识别序列不同，切出的 黏性末端相同，C 正确。 答案：C 9．[2019·山东微山县第二中学高二月考]限制酶切割 DNA 时 ( ) A．专一识别特定的核苷酸序列 B．切断的是碱基对之间的氢键 C．任意切割，没有特定的核苷酸序列 D．识别多种核苷酸序列，但切口只有一个 解析：限制酶能专一识别特定的核苷酸序列，A 正确；限制 酶使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，B 错误；限制酶要识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，不能 任意切割，C 错误；限制酶切割时，能识别特定的核苷酸序列， 并在特定位点进行切割，D 错误。 答案：A 10．[2019·陕西渭南市尚德中学高二期中]下列有关限制性核 酸内切酶的说法，正确的是( ) A．主要来自真核生物 B．识别序列只含 6 个核苷酸 C．能识别 DNA 上特定的核苷酸序列 D．切割产生的均为黏性末端 解析：限制性核酸内切酶主要存在于原核生物中，A 错误； 大多数限制酶识别的序列是 6 个核苷酸组成的，也有少数限制酶 的识别序列由 4、5 或 8 个核苷酸组成，B 错误；限制酶能识别双 链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位 的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，C 正确；限制酶切割产生 的 DNA 片段末端可以是黏性末端或平末端，D 错误。 答案：C 11．[2019·陕西省黄陵县中学高二期中]质粒是基因工程中最 常用的运载体，它的主要特点是( ) ①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状 RNA ⑥环状 DNA ⑦能“友好”地“借居” A．①③⑤⑦ B．①④⑥ C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦ 解析：①质粒必须能自主复制，以保证能在宿主细胞中稳定 存在并复制，①正确、②错误；③质粒为小型环状 DNA，其结构 很小，③正确；④质粒的化学本质是 DNA，不是蛋白质，④错误； ⑤质粒为小型环状 DNA，⑤错误、⑥正确；⑦质粒必须能“友好” 地“借居”，以便于目的基因的稳定存在和复制，⑦正确。 答案：C 12．[2019·福建厦门一中高二月考]已知一双链 DNA 分子，用 限制酶Ⅰ切割得到长度为 120 kb(kb：千碱基对)的片段；用限制酶 Ⅱ切割得到 40 kb 和 80 kb 的两个片段；同时用限制酶Ⅰ和限制酶 Ⅱ切割时，得到 10 kb、80 kb 和 30 kb 的 3 个片段。据此分析该双 链 DNA 分子结构及酶切位点情况为( ) 解析：该 DNA 分子为环状 DNA，用限制酶Ⅰ切割得到长度 为 120 kb 片段，用限制酶Ⅱ切割得到 40 kb 和 80 kb 两个片段，则 说明该 DNA 上限制酶Ⅰ有 1 个酶切位点，限制酶Ⅱ有两个酶切位 点；同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割时，得到 10 kb、80 kb 和 30 kb 共 3 个片段，则说明限制酶Ⅰ的酶切位点位于限制酶Ⅱ切割后的 40 kb 片段中，选项中只有 D 符合，故 D 正确。 答案：D 二、非选择题(40 分) 13．(16 分)[2019·吉林市第五十五中学高二月考]根据基因工 程的有关知识，回答下列问题。 (1)限制酶切割 DNA 分子后产生的片段，其末端类型有： ________________和________________。 (2)质粒用 EcoRⅠ切割后产生的片段如下： AATTC……G G……CTTAA 为使载体与目的基因相连，含有目的基因的 DNA 除可用 EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有 的 特 点 是 ________________________________________________________ ________________。 (3)实际操作中，往往用 EcoRⅠ和另一种限制性内切酶同时分 别切割质粒和外源 DNA 分子，其优点在于可防止________。 (4)按其来源不同，基因工程中所使用的 DNA 连接酶有两类， 即________DNA 连接酶和________DNA 连接酶。 (5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为载体。 解析：(1)限制性内切酶切割 DNA 分子后产生两种类型的末 端，即黏性末端和平末端。(2)根据题意分析，质粒可以用 EcoRⅠ 切割，也可以用另一种限制酶切割，说明该酶切割产生的 DNA 片 段末端与 EcoRⅠ切割产生的相同。(3)根据题意分析，用不同的限 制酶同时分别切割质粒和外源 DNA 分子，可以防止质粒和含目的 基因的外源 DNA 片段自身环化，进而使得目的基因准确插入质 粒。(4)基因工程使用的 DNA 连接酶按来源分，可分为 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶。(5)基因工程常用的运载体有质粒、动植 物病毒和λ噬菌体的衍生物。 答案：(1)黏性末端 平末端 (2)切割产生的 DNA 片段末端与 EcoRⅠ切割产生的相同 (3)质粒和含目的基因的外源 DNA 片段自身环化 (4)E·coli T4 (5)动植物病毒 λ噬菌体的衍生物 14．(16 分)[2019·全国高二课时练习]为了解基因结构，通常 选取一特定长度的线性 DNA 分子，先用一种限制酶切割，通过电 泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶 对单酶水解片段进行降解，分析片段大小。下表是某小组进行的 相关实验。 (1) 该 实 验 中 体 现 出 限 制 酶 的 作 用 特 点 是 ________________________________________________________ ________________ ____________________________________________________ ____________________。 (2)由实验可知，在这段已知序列上，A 酶与 B 酶的识别序列 分别为________个和_________个。 (3)根据表中数据，请在下图中用箭头标出相应限制酶的酶切 位点。 (4)已知 BamHⅠ与 BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示， 用这两种酶和 DNA 连接酶对一段含有数个 BamHⅠ和 BglⅡ识别 序列的 DNA 分子进行反复的切割、连接操作，若干次循环后 和___________序列明显增多，该过程中 DNA 连接酶 催化____________键的形成。 解析：(1)该实验中体现出限制酶的作用特点是酶的专一性。 (2)A 酶切割后形成 3 段，所以有 2 个识别位点，B 酶切割后形成 2 段，所以有 1 个切割位点。(3)由于酶 B 只有一个限制酶切位点， 即在 2000 和 3000 之间，可以先标注出；又由于酶 A 可以将 2000 的这段切成 500 和 1500 的片段，结合酶 A 单独切割又可以标注其 切割位点，同理标出另一个切割位点，答案如下图： (4)已知 BamHⅠ与 BglⅡ的识别序列及切割位点如图所示。用 这两种酶和 DNA 连接酶对一段含有数个 BamHⅠ和 BglⅡ识别序 列的 DNA 分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后和 和 序列明显增多。DNA 连接酶催化形成的 是磷酸二酯键。 答案：(1)一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，且在 特定的位点切割 (2)2 1 (3) (4) 磷酸二酯 15．(8 分)[2019·山东高二月考]下表是几种限制酶识别序列及 其切割位点，图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切 割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题： (1) 用 图 中 质 粒 和 目 的 基 因 构 建 重 组 质 粒 ， 应 选 用 ________________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片 段，通过________酶作用后获得重组质粒。 (2)若 BamH Ⅰ酶切的 DNA 末端与 Bcl Ⅰ酶切的 DNA 末端连 接，连接部位的 6 个碱基对序列为 ________，对于该部位，这两 种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。 解析：(1)图中信息显示：质粒的四环素抗性基因和氨苄青霉 素抗性基因中都存在 BamHⅠ的酶切位点，因此不能选择 BamHⅠ 进行酶切；目的基因的两端和载体上都有 BclⅠ和 HindⅢ的酶切位 点，可见，用图中质粒和目的基因构建重组质粒时，应选用 BclⅠ 和 HindⅢ两种限制酶切割。酶切后的载体和目的基因片段，再用 DNA 连接酶进行连接。(2)根据表格分析可知，经 BamHⅠ酶切割 后产生的黏性末端为，经 BclⅠ酶切割后产生的黏性末端为，即这 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端。若 BamHⅠ酶切的 DNA 末端与 BclⅠ酶切的 DNA 末端连接，连接部位的 6 个碱基对 序列为 GGATCA CCTAGT ，这两种酶都不能识别该部位，因此都不能将该 部位切开。 答案：(1)BclⅠ和 HindⅢ (DNA)连接 (2) 都不能