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- 2021-09-28 发布
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课题3 酵母细胞的固定化
(时间:30分钟 满分:50分)
考查知识点及角度
难度及题号
基础
中档
稍难
固定化酶技术的优势及应用
1、3
6
固定化酶和固定化细胞
技术或方法
4
8
酵母细胞的固定化
2、5
7
一、选择题(每小题4分,共20分)
1.下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是
( )。
A.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显
B.固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧
C.利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件
D.利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物
解析 A项中,固定化细胞技术由于保留了细胞内原有的多酶系统,连续催化反应的优势非常明显。B项中,酶的催化受温度、pH的影响,不受氧浓度的影响;C项中,酶的降解作用不需各种营养条件;D项中,糖类的作用不只是作为反应底物,还能维持酵母细胞的渗透压,防止酵母细胞过多地吸水或失水。
答案 A
2.(2011·江苏)下图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作,图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图,下列叙述不正确的是
( )。
图1 图2
A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液
B.图1中X溶液为CaCl2溶液,其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠
C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触
D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
解析 刚溶化的海藻酸钠应冷却后再与酵母菌混合,否则温度过高会导致酵母菌死亡。
答案 A
3.细胞固定化技术与酶固定化技术相比,所具备的特点是
( )。
A.成本更低、操作更容易、不能连续性生产
B.成本更高、操作更难、不能连续性生产
C.成本更低、操作更容易、能连续性生产
D.成本更低、操作更难、能连续性生产
解析 固定化细胞操作更容易,对酶活性影响更小,且能更新,容易回收,可连续性生产,成本自然更低。
答案 C
4.制备好的凝胶珠是否符合要求,常用的检验方法有
( )。
①挤压法 ②摔打法 ③观察法 ④培养法
A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②④
解析 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。此外,还可以通过观察凝胶珠的颜色和形状来判断。
答案 A
5.下面是制备固定化酵母细胞的步骤,正确的是
( )。
①配制CaCl2溶液 ②海藻酸钠溶化 ③海藻酸钠与酵母细胞混合 ④酵母细胞的活化 ⑤固定化酵母细胞
A.①②③④⑤ B.④①③②⑤
C.④⑤②①③ D.④①②③⑤
解析 制备固定化酵母细胞的基本步骤是:酵母细胞的活化→配制物质的量浓度为0.05 mol/L的CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
答案 D
二、非选择题(共30分)
6.(10分)如图为固定化酶的反应柱示意图,请据图回答下面的问题。
(1)请在横线上填出各标号的名称。
①________,②________,③________。
(2)与一般酶制剂相比,固定化酶的突出优点是_______________;
固定化细胞的优点是______________________________________。
(3)③的作用是_____________________________________。
(4)制作固定化葡萄糖异构酶所用的方式有________或________。
(5)据图说出反应柱的作用原理。
______________________________________________________________
_______________________________________________________________。
解析 与一般的酶制剂相比,固定化酶不仅能与反应物充分接触,还能与产物分离,并且可以反复利用;与固定化酶相比,固定化细胞能催化一系列的化学反应,并且固定化细胞成本更低,操作更容易;使用固定化酶技术往往利用反应柱,反应柱下端有一个分布着小孔的筛板,酶颗粒无法通过筛板,而反应溶液却可以自由出入。
答案 (1)①反应柱 ②固定化酶 ③分布着小孔的筛板
(2)既能与反应物接触,又能与产物分离,还能被反复利用 成本更低,操作更容易,且能催化一系列的反应 (3)使酶颗粒无法通过,反应溶液却可以自由出入 (4)化学结合法 物理吸附法 (5)反应液从反应柱的上端注入,使反应物溶液流过反应柱,与固定化酶接触,得到的产物从反应柱下端流出
7.(10分)某一实验小组的同学,欲通过制备固定化酵母细胞来进行葡萄糖溶液发酵实验,实验材料及用具齐全。
(1)酵母细胞的固定采用的方法是_________________________________。
(2)该实验小组的同学制作固定化酵母细胞的过程为:
A.将干酵母与蒸馏水混合并搅拌,使酵母菌活化
B.将无水CaCl2溶解在自来水中,配成CaCl2溶液
C.用酒精灯大火连续加热配制海藻酸钠溶液
D.向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞,充分搅拌并混合均匀
E.将与酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液滴入蒸馏水中,观察凝胶珠的形成
请你改正其中错误的操作:(写出4点)
①___________________________________________________________。
②_____________________________________________________________。
③___________________________________________________________。
④____________________________________________________________。
(3)实验过程中,可能观察到的现象有:________________。
解析 (1)细胞固定常采用包埋法。
(2)配制CaCl2溶液应使用“蒸馏水”而不是“自来水”;海藻酸钠应小火间断加热且需冷却至室温后方可加入酵母细胞;海藻酸钠与酵母细胞混合后应滴入CaCl2溶液中。
(3)实验过程中会观察到CO2产生所导致的气泡,且有酒味。
答案 (1)包埋法
(2)①配制CaCl2溶液应用蒸馏水 ②溶解海藻酸钠应用小火或间断加热 ③海藻酸钠溶液冷却至室温后再加入酵母细胞 ④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入CaCl2溶液中
(3)有气泡产生,有酒味散发
8.(10分)固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法,即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接),海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶,研究固定化酶的性质,并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果(注:酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率,包括酶活性和酶的数量),分析回答下列问题。
(1)从对温度变化适应性和应用范围的角度分析,甲图所示结果可以得出的结论是
_______________________________________________________。
(2)乙图曲线表明浓度为________的海藻酸钠包埋效果最好,当海藻酸钠浓度较低时,酶活力较低原因是________________________________________
____________________。
(3)固定化酶的活力随使用次数的增多而下降,由丙图可知,固定化酯酶一般可重复使用________次,酶活力明显下降。
(4)固定小麦酯酶不仅采用海藻酸钠直接包埋,同时用戊二醛作交联剂,这是因为_________________________________________________________。
解析 本题考查分析图表的能力,由甲图可知,固定化酶在较高温度下仍然具有较高的活性;乙图显示浓度3%的海藻酸钠包埋效果最好;丙图显示固定化酶在使用3次后酶活力下降幅度较快;酶分子很小易从包埋材料中漏出,所以可以用戊二醛作交联剂。
答案 (1)固定化酶比游离酶对温度变化适应性更强且应用范围较广
(2)3% 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密,酶分子容易漏出,数量不足
(3)3
(4)酶分子很小,很容易从包埋材料中漏出