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- 2021-09-28 发布
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模块综合检测
(时间:60 分钟 满分:100 分)
1.(12 分)图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性
内切酶 EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,ampR 为青霉素抗性基因,tctR
为四环素抗性基因,P 为启动因子,T 为终止子,ori 为复制原点。已
知目的基因的两端分别有包括 EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切
位点。
(1)将含有目的基因的 DNA 与质粒表达载体分别用 EcoRⅠ酶切,
酶切产物用 DNA 连接酶进行连接后,其中由两个 DNA 片段之间连接
形 成 的 产 物 有 ____________________ 、 ____________________ 、
__________________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,
需要对这些连接产物进行________。
(2)用上述 3 种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含
四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是
____________________________;若接种到含青霉素的培养基中,能
生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________________。
(3)目的基因表达时,RNA 聚合酶识别和结合的位点是________,
其合成的产物是________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产
生的末端发生任意连接, 酶切时应选用的酶是________________。
答案:(1)目的基因—载体连接物 载体—载体连接物 目的基因
—目的基因连接物 分离纯化(其他合理答案也可)
(2)载体—载体连接物 目的基因—载体连接物、载体—载体连接
物
(3)启动子 mRNA
(4)EcoRⅠ和 BamHⅠ(不可只答一个酶)
2.(10 分)回答有关基因工程的问题:
(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割 DNA 后,
可能产生黏性末端,也可能产生________末端。若要在限制酶切割目
的 基 因 和 质 粒 后 使 其 直 接 进 行 连 接 , 则 应 选 择 能 使 二 者 产 生
________(填“相同”或“不同”)黏性末端的限制酶。
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素
基因及其启动子等,其中启动子的作用是____________________。在
用表达载体转化大肠杆菌时,常用________处理大肠杆菌,以利于表
达载体进入;为了检测胰岛素基因是否转录出了 mRNA,可用标记的
胰岛素基因片段作探针与 mRNA 杂交,该杂交技术称为__________。
为了检测胰岛素基因转录的 mRNA 是否翻译成__________,常用抗原
—抗体杂交技术。
(3)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将
目的基因插入农杆菌 Ti 质粒的________中,然后用该农杆菌感染植物
细胞,通过 DNA 重组将目的基因插入植物细胞的________上。
解析:本题考查基因工程的相关知识。限制酶切割 DNA 可以产生
黏性末端和平末端。一般用同一种限制酶切割目的基因和质粒,保证
产生相同的黏性末端。基因表达载体中启动子是 RNA 聚合酶结合并识
别的位置,驱动基因转录。用大肠杆菌作为受体细胞时,要用 Ca2+处
理,以利于表达载体进入。检测目的基因是否转录,可用 DNA 分子杂
交技术检测,检测目的基因是否表达出蛋白质,可用抗原—抗体杂交
技术检测。目的基因插入农杆菌质粒 DNA 上,然后插入植物细胞的染
色体 DNA 上。
答案:(1)平 相同
(2)提供 RNA 聚合酶特异性识别结合位点,驱动基因转录 Ca2+
DNA—RNA 分子杂交 胰岛素原(蛋白质)
(3)T—DNA 染色体 DNA
3.(8 分)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,
以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子 IX 医用蛋白,其技术路线如
图。
(1)由过程①获得的 A 为_________________________________。
(2)在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是
________________________________________。受体应选用________
期卵母细胞。
(3)进行胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发
生_____________,这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可获得无
限个转基因绵羊,这是因为___________________________________
______________________________________________________。
解析:(1)根据题意可知,要将人凝血因子 IX 基因导入绵羊胎儿
成纤维细胞,必须构建基因表达载体,所以由过程①获得的 A 为基因
表达载体。(2)为保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞,在核
移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核。受体应选用减数第二次分
裂中(MⅡ中)期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时,代孕母羊对移入子宫
的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为重组胚胎在代孕母羊体
内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克
隆,理论上可获得无限个转基因绵羊,这是因为整合有目的基因的成
纤维细胞可进行传代培养。
答案:(1)含目的基因的表达载体
(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 MⅡ中
(3)免疫排斥反应
(4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养
4.(12 分)某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题,引进了具高
产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。
(1)拟进行如下杂交:
♂A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→
C
选择 B 作为母本,原因之一是胚胎能在母体内正常___________。
若 C 中的母牛表现为适宜本地生长,但产奶量并不提高,说明高产奶
是________性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛,根据现有
类型,最佳杂交组合是________,后代中出现这种母牛的概率是
________(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。
(2)用以上最佳组合,按以下流程可加速获得优良个体。
精子要具有受精能力,需对其进行________________处理;卵子
的成熟在过程________中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖,其
作用是________________________________。为筛选出具有优良性状
的母牛,过程⑤前应鉴定胚胎的____________________。子代母牛的
优良性状与过程________的基因重组有关。
(3)为了提高已有胚胎的利用率,可采取____________技术。
解析:(1)由于胚胎能在母体内进行正常的胚胎发育,所以可选择
适宜当地生长的纯种牛做母本。用纯种高产奶牛与适宜当地生长的纯
种牛杂交,获得了 C 牛,表现为适宜当地生长,但产奶量并没提高,
这说明不适宜当地生长是隐性性状,适宜当地生长是显性性状,高产
奶是隐性性状,低产奶是显性性状。由于控制奶牛的产奶量的基因和
对本地适应性的基因分别位于不同的染色体上,说明他们在遗传时遵
循基因的自由组合定律,若控制奶牛的产奶量的等位基因为 A 和 a,
对本地的适应性的等位基因为 B 和 b,可推知雄牛 A 的基因型为 aabb,
雌牛 B 为 AABB,C 为 AaBb,可见要获得产奶量高且适宜当地生长
的母牛(aaB_),最佳的实验组合为♂A×♀C,此时后代出现所需牛
(aaBb)的概率为1
4
×1
2
=1/8。(2)精子需获能后才具备受精的能力;由于
排卵时排出的卵子只发育到 MⅡ,而减数第二次分裂形成卵细胞是在
受精过程中完成的,即卵子的成熟是在体外受精过程中完成;在胚胎
培养过程中,培养基中的葡萄糖能为胚胎发育过程提供能量;为了筛
选出具有优良性状的母牛,在胚胎移植之前需对胚胎的性别、高产奶
和适宜生长的基因进行鉴定;母牛在减数分裂过程中发生基因重组,
产生具有优良性状基因的卵细胞,子代母牛的优良性状与此有关。(3)
通过胚胎分割技术可产生遗传性状相同的多个胚胎,从而提高胚胎的
利用率。
答案:(1)生长发育或胚胎发育 隐性 ♂A×♀C 1/8
(2)获能或增强活力 ③ 供能 性别、高产奶和适宜生长的基因
②
(3)胚胎分割
5.(12 分)如图为 A、B 不同物种间体细胞杂交示意图,请回答下
列问题。
(1)去除细胞壁而不损伤细胞可用______________、________处理。
在用促融剂处理时,使用的促融剂主要有________________。
(2)融合细胞中可能包括________种类型,其中杂种细胞的遗传物
质组成是_________________________________________________。
(3)由杂种细胞经人工诱导培养,经__________分裂增加细胞数目
并不断分化,逐渐发育成 C 植株。该植株的性状与 D 亲本植物的性状
区别是__________________________________________________
______________________________________________________。
(4)整个培养过程应用了细胞工程的__________和_____________
两大技术,这种培育杂种植株的意义是________________________。
答案:(1)纤维素酶 果胶酶 PEG(或聚乙二醇)
(2)3 A 和 B 植物的遗传物质之和
(3)有丝 具有 A 和 B 两种植物的性状
(4)体细胞杂交 植物组织培养 克服生物远缘杂交不亲和的障碍
6.(10 分)克隆羊的成功轰动世界,它不仅奠定了疾病克隆性治疗
的基础又解决了器官移植中供体不足的问题,同时也给人类带来了一
些过去尚未遇到的问题。如图为人类对克隆羊技术的拓展图和应用。
请据图回答问题。
(1)图中所涉及的现代生物技术有___________和___________等。
(2)使用培养基进行胚胎干细胞培养时,通常要加入__________等
天然成分,除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中,
还需要保证细胞生活所需的____________和适宜的温度与 pH 等;早
期胚胎发育在__________阶段以前的细胞是全能干细胞。
(3)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,必须用
____________处理内细胞团,使之分散成单个细胞。干细胞形成组织、
器官时必须要进行细胞的分裂和分化。
(4)在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官?为什么?
________________________________________________________
_______________________________________________________。
解析:本题综合考查细胞核移植、胚胎干细胞等知识。(1)图中获
得重组细胞是细胞核移植技术,由重组细胞发育为早期胚胎,以及由
早期胚胎历经内细胞团培养干细胞是细胞培养。(2)使用培养基进行胚
胎干细胞培养,使用的天然成分有动物血清或血浆,培养条件是无菌、
无毒、氧气充足,以及必需的营养物质、适宜的温度和 pH,早期胚胎
发育在桑葚胚阶段以前的细胞是全能干细胞。(3)细胞培养过程中使细
胞团分散成单个细胞需要用胰蛋白酶处理。(4)胚胎干细胞培养必须要
在体内才能进行细胞分化,所以在体外培养胚胎干细胞是不能获得动
物器官的。
答案:(1)核移植 细胞培养(另外写早期胚胎培养也对)
(2)动物血清或血浆 营养物质 桑葚胚
(3)胰蛋白酶 (4)不能,胚胎干细胞在体外培养条件下可以增殖而
不发生分化
7.(12 分)2012 年诺贝尔生理学或医学奖授予英国科学家约翰·格
登和日本科学家山中伸弥。约翰·格登在 20 世纪 60 年代做过一个划
时代的实验:把美洲爪蟾的小肠上皮细胞核注入去核的卵细胞,结果
发现一部分卵依然可以发育成蝌蚪,其中的一部分蝌蚪可以继续发育
成为成熟的爪蟾。山中伸弥等科学家将四个关键基因转入小鼠的成纤
维细胞,使其变成多功能干细胞(iPS),这些干细胞可再转化成小鼠体
内任何种类的细胞。回答下列问题。
(1)约翰·格登之后,科学界利用该技术进行更多细胞核转移实验,
复制出多种哺乳类动物。在哺乳动物的核转移实验中,一般通过
__________________________(物理方法)将受体细胞激活,使其进行细
胞分裂和发育,当胚胎发育到________________阶段时,将胚胎移入
受体(代孕)动物体内。
(2)从卵巢中吸取的卵母细胞,一般要培养到________________阶
段才能用于实验。
(3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植的
原因是__________________________________________________
______________________________________________________。
(4)在山中伸弥的实验中,利用了逆转录病毒,该病毒的作用是
______________________________________________________。
(5)一般情况下,体外扩增目的基因常用的方法是___________。在
动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时,
细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的____________。要使贴壁
的细胞从瓶壁上分离下来,需要用____________处理。
(6)iPS 细胞能分化成任何种类细胞的实质是_________________
______________________________________________________。
解析:在核移植时,要用物理法或化学法(如电脉冲、钙离子载体、
乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育
进程。其中电脉冲属于物理法;当胚胎发育到桑葚胚或囊胚阶段时,
将胚胎移入受体(代孕)动物体内;动物进行正常繁殖过程中,卵母细
胞是边分裂边排出输卵管的,在输卵管中与精子结合时,卵母细胞刚
好分裂到减数第二次分裂中期,其内含有生物生长发育的全部信息及
营养,且有助于动物细胞核全能性的表达;相对于体细胞,胚胎细胞
的分化程度更低,全能性更高,所以胚胎核移植成功的可能性就大;
体外扩增目的基因常用的方法 PCR 技术;动物细胞有贴壁生长现象并
具有接触抑制的特点;iPS 细胞能分化成任何种类细胞的实质是基因的
选择性表达。
答案:(1)电脉冲(或电刺激) 桑葚胚或囊胚
(2)MⅡ中期(减数分裂第二次分裂中期)
(3)体细胞分化程度高,不容易恢复全能性
(4)目的基因的载体
(5)PCR 技术(多聚酶链式反应) 接触抑制 胰蛋白酶
(6)基因的选择性表达
8.(12 分)阅读如下材料:
材料一 科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体
型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
材料二 T4 溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码 T4
溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的 T4 溶菌酶第 3 位的异亮氨酸变
为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第 97 位的半胱氨酸之间形成了一个二硫
键,提高了 T4 溶菌酶的耐热性。
材料三 兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲
受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内,成功产出兔甲的后代,证实了
同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题。
(1)材料一属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精
卵 中 常 用 ____________ 法 。 构 建 基 因 表 达 载 体 常 用 的 工 具 酶 是
______________和______________。在培育有些转基因植物时,常用
农杆菌转化法,农杆菌的作用是
______________________________________________________。
(2)材料二中的技术属于__________工程的范畴,该工程是指以分
子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对__________
进行改造,或制造一种____________的技术。在该实例中,引起 T4 溶
菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的____________序列发生了
改变。
(3)材料三属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎
移植到________种的、生理状态相同的另一个雌性动物体内,使之继
续发育成新个体的技术。在材料三的实例中,兔甲称为______体,兔
乙称为______体。
解析:(1)基因工程中,将目的基因导入动物细胞常用显微注射法。
构建基因表达载体常用的工具酶是限制性核酸内切酶(限制酶)和 DNA
连接酶。当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合
物,吸引农杆菌移向这些细胞,农杆菌中的 Ti 质粒上的 T-DNA 可转
移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体 DNA 上,因此用农杆菌转
化法将目的基因导入植物细胞时,农杆菌的作用是将目的基因导入受
体细胞。(2)材料二中是对 T4 溶菌酶进行改造,属于蛋白质工程。蛋白
质工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,
对现有蛋白质进行改造,或制造一种新蛋白质的技术。改造后的 T4 溶
菌酶和原 T4 溶菌酶相比,第 3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸,即肽链中
的氨基酸序列发生改变。
答案:(1)显微注射 限制性内切酶 DNA 连接酶 农杆菌可感染
植物,将目的基因转移到受体细胞中
(2)蛋白质 现有的蛋白质 新蛋白质 氨基酸
(3)同 供 受
9.(12 分)阅读下列材料,回答问题。
材料一 水华是蓝藻大量死亡腐败后在水面形成的一层蓝绿色且
有腥臭味的浮沫。蓝藻一年中在水中随季节上下移动、漂浮(如下图)。
太湖蓝藻往年一般在 5 月底 6 月初发生,多见于湖区周边的小水湾等
水体流动性差的水域。
材料二 近 20 年来,化学工业是太湖地区经济发展的重要产业之
一,大小工厂遍布太湖周围地区。工业发展对劳动力的需求,使太湖
地区人口密度达到每平方公里 1 000 人左右。
材料三 城镇化的发展,使农业用地锐减,为了维持粮食总产量
的相对稳定,大量使用化肥、农药和除草剂。农村也开始大量使用抽
水马桶,但污水处理能力极其有限。
根据材料回答下列问题。
(1)蓝藻的发生和水污染有关。引起太湖水污染的主要原因是
________________、________________和____________________。这
些原因造成湖水中________等物质含量大量增加 ,导致湖水的
___________________________________________________________。
(2)有专家对太湖污水处理提出如下治理方案:把环太湖的污水集
中起来,经过预处理后,穿过南通,送到黄海边生长着芦苇植被的滩
涂,最后排入大海,请你评价该方案的优缺点。____________________
_______________________________________________________。
解析:(1)工业污水、农业污水及生活污水的排放导致水体中 N、P
等物质增多,从而引起水体富营养化,出现污染。(2)为开放型答案,
所述内容合理即可。
答案:(1)工业污水 农业污水 生活污水的排放(顺序可以改变)
氮、磷 富营养化
(2)优点:预处理的污水经过芦苇等植被的生物净化,使剩余的氮、
磷等物质被充分吸收,从根本上解决了太湖地区污水的处理和排放问
题。(必须含有生物净化的意思) 缺点:实施该项目,需要投入大量的
人力物力。政府不仅要有巨大财政投入,且要协调各方力量(含相关内
容即可)