【生物】2021届一轮复习苏教版专题23　微生物的培养与发酵工程作业（江苏专用） 19页

专题23　微生物的培养与发酵工程 ‎【考情探究】‎ 课标解读 考情分析 备考指导 考点 考向 ‎1‎ 传统发酵技术 果酒和果醋的制作 本专题所涉及的技术与人们生活密切相关,属于高考的必考点。近几年来高考题直接考查的知识点主要有:果酒和果醋、腐乳等发酵技术的原理、条件、过程及对现象的解释,微生物的实验室培养、特定微生物数量的测定方法、培养基对微生物的选择作用,通过目标微生物的筛选、纯化考查微生物的营养及代谢特点等。考查题型有选择题和非选择题两种形式,且以选择题为主。试题情境贴近生活或科技进展,但试题答案落脚于教材主干知识。预计在2021年高考中这种命题趋势还将继续存在 在复习备考时,应注意对各种技术的系统理解和横向对比,可将果酒、果醋与泡菜的制作、特定微生物的分离纯化等实践操作构建过程模型,以加深对相关技术的记忆和理解。例如:可采用列表法或流程图等对比果酒、果醋、腐乳与泡菜制作的原理和过程,采用流程图记忆培养基制作,并理解各步操作的目的,归纳微生物实验室培养的条件和影响因素,可借助示意图理解和辨析微生物分离纯化不同操作方法,并将微生物培养的知识应用到果酒、果醋发酵中,甚至是环境污染的净化方面 腐乳和泡菜的制作 ‎2‎ 微生物的培养与应用 微生物的实验室培养 微生物的分离与计数 ‎【真题探秘】‎ 基础篇 考点1　传统发酵技术 ‎【基础集训】　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2019江苏苏、锡、常、镇三模,18)许多食品的生产需要借助微生物发酵过程,下列叙述正确的是(　　)‎ A.利用乳酸菌可将含较多抗生素的牛奶制作成含有抗生素的酸奶 B.在糖源充足时,醋酸菌可以利用乙醇在无氧条件下生产醋酸 C.腐乳制作过程中加盐腌制的目的是使豆腐析出全部的水分 D.控制好温度、pH既有利于目的菌繁殖也可抑制杂菌生长 答案　D　‎ ‎2.(2019江苏泰州一模,5)下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述,错误的是(　　)‎ A.生成果酒与果醋的生化反应一定产生CO2‎ B.高品质果酒与果醋的制作一般要接种纯菌种 C.腐乳制作前期和后期发酵均有胞外酶的作用 D.制作果酒、果醋和腐乳的微生物均是异养型 答案　A　‎ 考点2　微生物的培养与应用 ‎【基础集训】　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2019江苏苏、锡、常、镇四市二模,18)研究小组利用微生物实验操作技术来探究某池塘中大肠杆菌数量,下列叙述正确的是　(　　)‎ 组别 Ⅰ 进行涂布平板操作时,将10 mL菌液滴加到培养基的表面后,再用灭菌后的涂布器推匀 Ⅱ 涂布完成后,在培养皿上盖上做标记,并将培养皿倒置 Ⅲ 重复实验获得了四个平板,其中的菌落数分别为212、381、157、183,则平均值应为184‎ Ⅳ 实验组平板上有38个菌落,空白对照组有5个,则“38-5”作为池塘中大肠杆菌数量计算的依据 A.Ⅰ B.Ⅱ C.Ⅲ D.Ⅳ 答案　C　‎ ‎2.(2017江苏苏、锡、常、镇调研二,18)下列有关菌种保藏的叙述中,错误的是(　　)‎ A.频繁使用的菌种,可用斜面培养基保藏在4 ℃的冰箱中 B.临时保藏菌种的培养基不需要定期更换 C.长期保藏的菌种,需要降低代谢和变异发生概率 D.长期保藏菌种时,可各取1 mL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中 答案　B　‎ 综合篇 提升　果酒和果醋的发酵装置的分析与应用(科学探究)‎ ‎【综合集训】　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2017江苏单科,25)如图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.改变通入气体种类,可以研究呼吸作用类型对发酵的影响 B.果酒发酵中期通入氮气,酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸 C.果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关 D.气体入口与气体出口可以交换使用 答案　ABC　‎ ‎2.(2019江苏扬州一模,16)如图甲是果酒和果醋发酵的装置图,图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列有关叙述中,正确的是(　　)‎ 甲 乙 A.甲装置可先用于果醋的制作,后用于果酒的制作 B.用甲装置制作果酒时,要加入适量的酵母菌,且一直关紧阀b C.酵母菌是嗜温菌,所以果酒发酵所需的最适温度高于果醋发酵 D.过程③和④都需要氧气的参与,但反应场所不同 答案　D　‎ 应用篇 应用　制作酸奶的微生物学原理 ‎【应用集训】‎ ‎1.关于酸奶制作,下列说法正确的是(　　)‎ A.含抗生素的牛奶更容易发酵 B.温度越高,制作酸奶需要的时间越长 C.牛奶变酸的同时,其中的糖类发生了变化 D.制作过程中需不断通入无菌空气 答案　C　‎ ‎2.酸奶不仅美味,还含有丰富的蛋白质、钙以及多种维生素等,酸奶制作也比较简单,所以广受人们的喜欢。请结合实际生活回答下列问题:‎ ‎(1)对奶牛养殖厂售岀的新鲜牛奶消毒常用　　　　　法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)某同学将超市买来的某品牌老酸奶加入鲜奶中,搅拌均匀后,放入酸奶机中,也可制作美味可口的酸奶,该同学加入适量老酸奶的目的是　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)若要分离纯化得到发酵效果相对较好的乳酸菌种,所用的培养基中要加入碳酸钙(有CaCO3的培养基不透明,无CaCO3的培养基透明),其作用除中和产生的乳酸外,还可以　　　　　　　　,分离纯化时应挑选出　　　　　的菌落作为候选菌。 ‎ ‎(4)乳酸菌菌种若要长期保存,菌液中常需要加入一定量的　　　　　,并在-20 ℃的环境中存放。 ‎ 答案　(1)巴氏消毒　在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少　(2)接种　(3)鉴别乳酸菌　透明圈大　(4)甘油 ‎【五年高考】‎ 考点1　传统发酵技术　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2018江苏单科,16,2分)某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究,下列叙述错误的是(　　)‎ A.夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理 B.乙醇为挥发性物质,故发酵过程中空气的进气量不宜太大 C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压 D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵 答案　B　‎ ‎2.(2017江苏单科,10,2分)下列关于“腐乳的制作”实验,叙述正确的是(　　)‎ A.控制发酵温度的主要目的是腐乳调味 B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D.成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生 答案　B　‎ ‎3.(2016江苏单科,7,2分)下列关于中学“腐乳的制作”实验,叙述正确的是(　　)‎ A.加盐主要是为了调节水分,利于毛霉生长 B.加料酒主要是为了灭菌,避免腐败变质 C.发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌 D.实验室制作的腐乳不宜直接食用 答案　D　‎ ‎4.(2015江苏单科,17,2分)关于“腐乳的制作”实验,下列叙述错误的是(　　)‎ A.将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高,影响毛霉生长 B.腐乳坯若被细菌污染,则腐乳坯表面会出现黏性物 C.勤向腐乳坯表面喷水,有利于毛霉菌丝的生长 D.装坛阶段加入料酒,可有效防止杂菌污染 答案　C　‎ ‎5.(2015江苏单科,24,3分)如图为苹果酒的发酵装置示意图,下列叙述错误的是(多选)(　　)‎ A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快 B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2‎ C.发酵过程中酵母种群呈“J”型增长 D.若发酵液表面出现菌膜,最可能原因是发酵瓶漏气 答案　ABC　‎ ‎6.(2017课标全国Ⅱ,37,15分)豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素,某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀,再将两者置于适宜条件下进行发酵,并在32 h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题:‎ ‎(1)该实验的自变量是　　　　、　　　　　　。 ‎ ‎(2)如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌是　　　　　。 ‎ ‎(3)如果在实验后,发现32 h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系,则无法确定发酵的最佳时间;若要确定最佳发酵时间,还需要做的事情是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)从大豆到豆豉,大豆中的成分会发生一定的变化,其中,蛋白质转变为　　　　　　　,‎ 脂肪转变为　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)菌种　发酵时间　(2)好氧菌　(3)延长发酵时间,观测发酵效果,最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间　(4)氨基酸和肽　脂肪酸和甘油 ‎7.(2016课标全国Ⅱ,39,15分)苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题:‎ ‎(1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段,在酵母菌细胞的　　　　　　　中进行,其产物乙醇与　　　　试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验;过程③在酵母菌细胞的　　　　中进行。与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌的增殖速度　　　　。 ‎ ‎(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程,根据醋酸杆菌的呼吸作用类型,该过程需要在　　　　条件下才能完成。 ‎ ‎(3)在生产过程中,第一阶段和第二阶段的发酵温度不同,第一阶段的温度　　　　(填“低于”或“高于”)第二阶段的。 ‎ ‎(4)醋酸杆菌属于　　　　核生物,其细胞结构中　　　　(填“含有”或“不含有”)线粒体。 ‎ 答案　(1)细胞质基质　重铬酸钾　线粒体　快　(2)有氧　(3)低于　(4)原　不含有 ‎8.(2016天津理综,10,12分)天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。‎ 淀粉类 原料成熟 酒醅成熟 醋醅 ‎(1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度,这是因为酶　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)在酒精发酵阶段,需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高　　　　的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。 ‎ ‎(3)在醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵30天。工艺如下。‎ ‎①发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如图。据图分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是　　　　　　　　　　　　　,由此推测,影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是　　　　　　　　　　。 ‎ ‎②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵缸中　　　　　　　　　　　　　　　　　　　‎ 层的醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。 ‎ ‎③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少,主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的改变,加剧了不同种类乳酸菌的　　　　,淘汰了部分乳酸菌种类。 ‎ 答案　(12分)(1)在最适温度条件下催化能力最强　(2)酵母菌　(3)①先快速增长后趋于稳定　氧气、营养物质、pH　②颠倒前的B层和颠倒后的A(或不翻动,或下)　③竞争 考点2　微生物的培养与应用　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎9.(2019江苏单科,12,2分)下列关于微生物实验操作的叙述,错误的是(　　)‎ A.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌 B.接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧 C.接种后的培养皿要倒置,以防培养污染 D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基 答案　A　‎ ‎10.(2019江苏单科,19,2分)下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述,不合理的是(　　)‎ A.筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养 B.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌 C.在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力 D.用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值 答案　A　‎ ‎11.(2016江苏单科,25,3分)漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品 B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化 D.斜面培养基中含有大量营养物,可在常温下长期保存菌株 答案　BC　‎ ‎12.(2015江苏单科,19,2分)做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是(　　)‎ A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖 B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上 C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上 答案　D　‎ ‎13.(2018江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,‎ 这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:‎ ‎(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的　　　　,及时对培养基进行分装,并进行　　　　　　　　灭菌。 ‎ ‎(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约　　　　(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。 ‎ ‎(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有　　　　　　　。 ‎ a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌 b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落 c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量 d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株 ‎(4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和　　　　供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000 倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5 个中格中的细胞数,理论上　　　　色细胞的个数应不少于　　　　,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。 ‎ 答案　(8分)(1)pH　高压蒸汽(湿热)　(2)50 ℃　(3)a、b、d　(4)氧气　无　30‎ ‎14.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:‎ ‎(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有　　　　　　　。 ‎ ‎(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐　　　　,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步　　　　　　,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加　　　　。 ‎ ‎(3)如图为连续划线法示意图,在图中　　　　(填图中序号)区域更易获得单菌落。 ‎ ‎(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)‎ 检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为　　　　　　　　。 ‎ 管号 ‎1‎ ‎2‎ ‎3‎ ‎4‎ ‎5‎ ‎6‎ 苯酚浓度(mg/L)‎ ‎1‎ 如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释　　　　(填序号:①5　②10　③20)倍后,再进行比色。 ‎ 答案　(7分)(1)蛋白胨、苯酚　(2)增加　稀释涂布　凝固剂　(3)③　(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8　③‎ ‎15.(2019课标全国Ⅱ,37,15分)物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。‎ ‎(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是　　　　。 ‎ ‎(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌,应该选择　　　　菌落进一步纯化,选择的依据是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期结果和结论,即　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,请完善相关内容。‎ ‎①在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加　　　　,三处滴加量相同。 ‎ ‎②一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明　　　　　　　　　　　;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)W　(2)乙　乙菌落周围出现透明圈,说明乙菌能降解W　(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上,若细菌能生长,则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源　(4)①缓冲液　②缓冲液不能降解W　酶E与天然酶降解W的能力相近 ‎16.(2019课标全国Ⅰ,37,15分)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。‎ Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。‎ Ⅱ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(15 g/L)。‎ Ⅲ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(45 g/L)。‎ 回答下列问题。‎ ‎(1)在Ⅰ号培养基中,为微生物提供氮源的是　　　　　　。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是　　　　。 ‎ ‎(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会　　　　,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供　　　　　　　　　和　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)牛肉膏、蛋白胨　X　(2)下降　不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖　(3)稀释涂布平板法　(4)能量　合成其他物质的原料 ‎17.(2017课标全国Ⅰ,37,15分)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:‎ ‎(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生　　　。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出两点即可)。 ‎ ‎(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择　　　(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出两点即可)。 ‎ 答案　(1)脲酶　分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物　为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料　(2)尿素　其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用　(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定 教师专用题组　　　　　　　　　　　　　 　　　　　 ‎ ‎1.(2014江苏单科,24,3分)某同学设计了如图所示的发酵装置,下列有关叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.该装置可阻止空气进入,用于果酒发酵 B.该装置便于果酒发酵中产生的气体排出 C.去除弯管中的水,该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸 D.去除弯管中的水后,该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似 答案　ABD　‎ ‎2.(2013江苏单科,14,2分)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是(　　)‎ A.酵母菌是嗜温菌,所以果酒发酵所需的最适温度较高 B.先供氧进行果醋发酵,然后隔绝空气进行果酒发酵 C.与人工接种的发酵相比,自然发酵获得的产品品质更好 D.适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖 答案　D　‎ ‎3.(2012江苏单科,21,3分)下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述,合理的是(多选)(　　)‎ A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长 B.条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸 C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小 D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时,底层和近瓶口处需加大用盐量 答案　ABC　‎ ‎4.(2010江苏单科,7,2分)下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程,下列叙述正确的是(　　)‎ A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下 B.过程①和③都发生在酵母细胞的线粒体中 C.过程③和④都需要氧气的参与 D.过程①~④所需的最适温度基本相同 答案　C　‎ ‎5.(2013江苏单科,18,2分)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是(　　)‎ A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线 C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次 答案　B　‎ ‎6.(2019北京理综,3,6分)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后,若细菌能分解淀粉,培养平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈(如图),实验结果见下表。‎ ‎　　　　　　　　‎ 菌种 菌落直径:C(mm)‎ 透明圈直径:H(mm)‎ H/C 细菌Ⅰ ‎5.1‎ ‎11.2‎ ‎2.2‎ 细菌Ⅱ ‎8.1‎ ‎13.0‎ ‎1.6‎ 有关本实验的叙述,错误的是(　　)‎ A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B.筛选分解淀粉的细菌时,菌液应稀释后涂布 C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外 D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异 答案　C　‎ ‎7.(2014江苏单科,30,8分)为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题:‎ ‎(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　;为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)如图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙指示的依次是　　　　　　。(填序号) ‎ ‎①安全阀、放气阀、压力表 ‎②放气阀、安全阀、压力表 ‎③安全阀、放气阀、温度表 ‎④放气阀、安全阀、温度表 ‎(4)为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在3块相同平板上划线,结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长,最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(5)为增加β-胡萝卜素提取量,在研磨酵母细胞时,添加石英砂的目的是　　　　　　　　　　;研磨时　　　　(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)干热灭菌和湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)　用牛皮纸(报纸)包扎器皿 ‎(2)抑制细菌(放线菌)生长 ‎(3)①‎ ‎(4)接种环温度过高,菌被杀死 ‎(5)有助于研磨充分　不需要　β-胡萝卜素较耐酸 ‎8.(2015江苏单科,31,8分)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,‎ 并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:‎ ‎(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是　　　　(填序号)。 ‎ ‎①酒精灯　②培养皿　③显微镜　④无菌水 ‎(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的　　　　　　有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是　　　　(填图中序号)。 ‎ ‎(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见图,推测菌株　　　　更适合用于人工瘤胃发酵,理由是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)③‎ ‎(2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果 ‎(3)避免培养基污染棉塞 ‎(4)量与活性　①‎ ‎(5)J4　发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高 ‎9.(2019课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与细菌培养相关的问题。‎ ‎(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是　　　　(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。硝化细菌在没有碳源的培养基上　　　　(填“能够”或“不能”)生长,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)用平板培养细菌时一般需要将平板　　　　(填“倒置”或“正置”)。 ‎ ‎(3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过　　　　处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。 ‎ 答案　(1)蛋白胨　不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同　能够　硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源　(2)倒置　(3)在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征　(4)灭菌 ‎10.(2018课标全国Ⅰ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。‎ 回答下列问题:‎ ‎(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制　　　的生长,加入了链霉素的培养基属于　　　培养基。 ‎ ‎(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有　　　　　　(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有　　　　　　　　(答出两点即可)。 ‎ ‎(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是　　　,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:‎ 甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;‎ 乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。‎ 有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是  　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)细菌　选择　(2)碳源、无机盐　蛋白质、核酸 ‎(3)碘液　淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈　(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差 ‎11.(2018课标全国Ⅱ,37,15分)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。‎ 回答下列问题:‎ ‎(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具　　　　(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。 ‎ ‎(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能　　　　　　　　　。在照射前,适量喷洒　　　　　　　,可强化消毒效果。 ‎ ‎(4)水厂供应的自来水通常是经过　　　　(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。 ‎ ‎(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)可以　(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少　(3)破坏DNA结构　消毒液　(4)氯气　(5)未将锅内冷空气排尽 ‎ ‎12.(2018课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:‎ ‎(1)分离培养酵母菌通常使用　　　　　　　(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用　　　　　　灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进　　　　　　　(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进　　　　　　(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。 ‎ ‎(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)麦芽汁琼脂　高压蒸汽　由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体　(2)菌体快速增殖　乙醇产生　(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软 ‎【三年模拟】‎ 时间:40分钟　分值:55分　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ 一、选择题(每小题2分,共26分)‎ ‎1.(2019江苏南通、连云港等七市三模,18)下列关于果醋、腐乳制作的叙述,错误的是(　　)‎ 下列关于果醋、腐乳制作的叙述,错误的是(　　)‎ A.都需要原核生物作为菌种进行发酵 B.都需要控制温度、氧气等发酵条件 C.都需要通过相关操作控制杂菌污染 D.都需要对实验结果进行评价 答案　A　‎ ‎2.(2018江苏扬、通、泰、连、徐、淮、宿三模,18)下列有关腐乳制作的叙述,错误的是(　　)‎ A.材料选择:豆腐含水量在70%左右、切小块有利于接种毛霉孢子 B.毛霉生长:发酵温度控制在15~18 ℃,菌丝呈淡黄色时终止发酵 C.加盐腌制:随豆腐小块层数增加而增加盐量,析出豆腐中全部水分 D.配制卤汤:卤汤中酒含量控制在12%左右,含量过低容易导致豆腐腐败 答案　C　‎ ‎3.(2019江苏南通、连云港等七市二模,19)在腐乳制作的过程中,需要(　　)‎ A.选择含水量超过70%的豆腐并利用蒸煮法灭菌 B.将豆腐小块整齐摆放并提供毛霉生长的最适温度 C.将长满毛霉的豆腐投入到装有卤汤的瓶中密封 D.控制卤汤中酒的含量以防止腐乳成熟过慢或腐败变质 答案　D　‎ ‎4.(2019江苏泰州一模,19)下列关于无菌操作技术的说法,正确的是(　　)‎ A.消毒仅能杀死物体表面的芽孢和孢子 B.液态的牛奶可用巴氏消毒法消毒 C.培养皿、胶头吸管可用干热灭菌法灭菌 D.高压蒸汽灭菌时间达到后立即排气降温 答案　B　‎ ‎5.(2020届江苏苏州常熟中学模拟,20)下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述,正确的是(　　)‎ A.在果酒、果醋和腐乳制作全过程中,都需要严格灭菌 B.果酒发酵、果醋发酵过程中温度分别控制在30 ℃、20 ℃‎ C.果醋发酵过程中,要适时通过充气口充气 D.利用酵母菌酿酒时,密封时间越长,产生的酒精量就越多 答案　C　‎ ‎6.(2020届江苏南京一模,19)下列关于微生物培养和利用的叙述,错误的是(　　)‎ A.接种前要了解固体培养基是否被污染可接种蒸馏水来培育检测 B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释获得单个菌落 C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 D.利用刚果红培养基上是否形成透明圈可筛选纤维素分解菌 答案　A　‎ ‎7.(2020届山东等级考模拟,13)在实验室中可利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒,下列说法正确的是(　　)‎ A.葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内被分解 B.制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖 C.制作过程中酵母菌始终处于碱性环境 D.酵母菌的发酵产物不会抑制自身的代谢活动 答案　B　‎ ‎8.(2020届山东等级考模拟,20)生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类,研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板,然后在平板上划分数区,将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域,培养结果如图所示。下列说法正确的是(多选)(　　)‎ A.倒成平板后直接培养可判断有无污染 B.倒成平板后需要进行灭菌处理 C.图示结果表明该菌需要生长因子为乙或丙 D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选 答案　AD　‎ ‎9.(2020届江苏扬州中学月考,16)下列关于传统发酵技术应用的叙述,正确的是(　　)‎ A.利用乳酸菌制作酸奶过程中,先通气培养,后密封发酵 B.家庭制作葡萄酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵 C.果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低,果酒制作过程中情况相反 D.毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵 答案　B　‎ ‎10.(2020届江苏扬州中学月考,22)如图中甲、乙、丙依次表示果酒、果醋和腐乳三者的制作,①②③④表示相同之处,下列对各相同之处的叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.①表示两者的主要菌种都是单细胞生物 B.②表示两者的主要菌种都属于真核生物 C.④表示三者制作过程的温度相同 D.③表示两者的主要菌种都能进行有氧呼吸 答案　ABD　‎ ‎11.(2019江苏六合高级中学月考,25)如图为纤维单胞菌(能产生纤维素酶)的获取过程。下列有关叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.①②③④培养基(液)都应以纤维素为唯一碳源 B.图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法 C.④所用的接种方法可对培养的微生物进行计数 D.可用刚果红染料鉴定,看菌落周围是否出现透明圈 答案　ABD　‎ ‎12.(2019江苏苏、锡、常、镇四市二模,19)制作葡萄酒时,在部分发酵液中加入果胶酶处理一段时间后,得到如表所示结果,相关叙述错误的是(　　)‎ 指标 Ⅰ组:加果胶酶 的葡萄酒 Ⅱ组:不加果胶酶 的葡萄酒 透光率/%‎ ‎87.3‎ ‎82.2‎ pH ‎4.3‎ ‎3.9‎ 还原糖含量(g/L)‎ ‎4.3‎ ‎3.3‎ 果胶含量/%‎ ‎7.3‎ ‎11.6‎ A.果酒制作时一般将温度控制在18~25 ℃‎ B.葡萄酒的澄清度随果胶含量减少而下降 C.果胶酶在酸性条件下仍具有催化活性 D.Ⅰ组中还原糖含量高主要是因为有更多的多糖被分解 答案　B　‎ ‎13.(2019江苏南京、盐城二模,25)下列有关微生物培养的叙述,错误的是(多选)(　　)‎ A.涂布接种时,需将涂布器沾酒精后在酒精灯外焰上引燃,冷却后再使用 B.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养 C.分离计数时,可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离 D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征 答案　BD　‎ 二、非选择题(共29分)‎ ‎14.(2019江苏南师附中、天一、海门、淮阴四校联考,32)(15分)牛奶是微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测自制酸奶是否被杂菌污染,进行图1所示操作。请回答下列问题。‎ 图1‎ ‎(1)牛奶用巴氏消毒的好处是　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)图中所用培养基在灭菌过程中,需用到高压蒸汽灭菌锅。下面是关于高压蒸汽灭菌锅使用过程中的操作,正确操作的先后顺序是①②　　　　　　　　⑨。(有的操作可以重复) ‎ ‎①装入待灭菌物品　②加盖　③加热灭菌锅　④打开排气阀　⑤关闭排气阀　⑥切断电源　⑦压力表的压力降到零　⑧打开盖子　⑨取出灭菌物品 ‎(3)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,应选择的工具是图2中的　　　　。 ‎ 图2‎ ‎(4)图1中所示方法为稀释涂布平板法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养,设置了3个培养皿,菌落数分别为65个、63个、64个,则可以推测酸奶中每毫升含细菌数为　　　　个,运用这种方法统计的结果往往较实际值　　　　(偏大/偏小),如果培养基上出现　　　　的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。 ‎ ‎(5)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,要进一步分离纯化乳酸菌采用图3所示的划线分离操作,正确的是　　　　,在此正确操作过程中,培养基在划线时划线工具至少要灼烧　　　　‎ 次。 ‎ 图3‎ 答案　(1)牛奶的营养成分不被破坏(营养成分没有损失)　(2)③④⑤⑥⑦④⑧　(3)B　(4)6.4×108　偏小　(形状、大小、颜色、光泽度)不同　(5)B　5‎ ‎15.(2019江苏扬州一模,30)(14分)“手机上的细菌比马桶上的还多?”央视和北京卫视的记者都通过实验对手机和马桶上的细菌数量进行了调查,调查结果如下。请回答下列问题:‎ ‎(1)该实验需制备培养基,制备培养基的操作顺序是　　　　　　　　　　　。(用下列字母和箭头排序) ‎ a.倒平板　　b.计算　　c.熔化　　d.称量　　e.灭菌 ‎(2)根据图中结果可知,两电视台展示的实验均采用　　　　　　　法进行接种,该方法使用的接种工具是　　　　　。 ‎ ‎(3)通过观察菌落的　　　　　　　　　　　等(至少两项),可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。 ‎ ‎(4)两电视台实验操作无误且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因可能是　。 ‎ ‎(5)实验员按图中方法取样,测定某手机屏幕的细菌数量,从10 mL菌悬液中取出1 mL,稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为35、36和37,则该手机屏幕的细菌约为　　　　　　个/cm2,该方法计数的结果往往比实际结果偏　　　　(填“高”或“低”)。 ‎ 答案　(1)b→d→c→e→a　(2)稀释涂布平板　涂布器　(3)形态、大小、颜色、隆起程度、边缘特征　(4)两实验所取样本不同(取样部位不同或取样时间不同) (5)1.44×104　低