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- 2021-09-28 发布
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ZHUAN TI YI | 专题 1 基因工程
1.1 DNA 重组技术的基本工具
课堂知能验收
对应学生用书 P001
1.下列有关基因工程诞生的说法,不正确的是( )
A.基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础
上发展起来的
B.工具酶和载体的发现使基因工程的实施成为可能
C.遗传密码的破译为基因的分离和合成提供了理论依据
D.基因工程必须在同物种间进行
答案 D
解析 基因工程可在不同物种间进行,它可打破生殖隔离的界限,
定向改造生物的遗传性状,D 错误。
2.下列关于限制性核酸内切酶的说法错误的是( )
A.限制性核酸内切酶主要是从微生物细胞中分离提纯的
B.限制性核酸内切酶不能将目的基因连接到不同的载体上
C.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸
D.限制性核酸内切酶既可切割链状 DNA 也可切割环状 DNA
答案 C
解析 限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离出来的,A 正
确;把目的基因连接到载体上使用的酶是 DNA 连接酶,B 正确;通常
一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,C 错误。
3.限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割 DNA 分子上特定的
核苷酸序列。如图所示为四种限制酶 BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及
BglⅡ的识别序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两
种限制酶所切割出来的 DNA 片段末端可以互补黏合并且正确的末端
互补序列是( )
A.BamHⅠ和 EcoRⅠ;末端互补序列—AATT—
B.BamHⅠ和 HindⅢ;末端互补序列—GATC—
C.EcoRⅠ和 HindⅢ;末端互补序列—AATT—
D.BamHⅠ和 BglⅡ;末端互补序列—GATC—
答案 D
解析 限制酶 BamHⅠ与 BglⅡ虽然识别的核苷酸序列不同,但切
割后露出的黏性末端相同,故末端序列可以进行碱基互补配对。
4.“分子缝合针”——DNA 连接酶“缝合”的部位是( )
A.碱基对之间的氢键
B.碱基与脱氧核糖
C.双链 DNA 片段间的磷酸二酯键
D.脱氧核糖与脱氧核糖
答案 C
解析 相邻的两个脱氧核苷酸之间由磷酸和脱氧核糖形成的磷酸
二酯键连接,DNA 连接酶连接的是此化学键。
5.(2017·石家庄一中月考)基因工程载体必须具备的条件中,错误
的是( )
A.能在受体细胞中复制并稳定保存
B.具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
C.能进入受体细胞中并控制其新陈代谢过程
D.在限制酶切点外必须含有标记基因,便于筛选
答案 C
解析 作为基因工程的载体必须能够在受体细胞内复制并稳定保
存,有多个限制酶的切点,具有某些标记基因,A、B、D 正确;载体
的存在与否对受体细胞生存没有决定性作用,即不影响宿主细胞的正
常代谢活动,C 错误。
6.质粒之所以能作为基因工程的载体,是由于它( )
A.含蛋白质,从而能完成生命活动
B.能够自我复制
C.是 RNA,能够指导蛋白质的合成
D.具有环状结构,能够携带目的基因
答案 B
解析 质粒是一种小型环状 DNA 分子,不含蛋白质,A、C 错误;
质粒在受体细胞中能够自我复制,从而保持连续性,B 正确;质粒具
有环状结构,但不是作为基因工程载体的必备条件,D 错误。
7.下列是基因工程的有关问题,请回答:
(1)限制性核酸内切酶可以识别双链 DNA 分子中的特定核苷酸序
列 , 并 可 以 使 每 条 链 中 特 定 部 位 的 两 个 核 苷 酸 之 间 的
______________(填化学键名称)断裂,形成的末端总体可分为两种类
型,分别是____________________。
(2)目的基因和载体重组时需要的工具酶是______________,与限
制性核酸内切酶相比,它对所重组的 DNA 两端碱基序列________(填
“有”或“无”)专一性要求。
(3)如图表示的是构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限
制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和
切点是—↓GATC—。
分析可知,最好选择限制酶________切割质粒,限制酶________
切 割 目 的 基 因 所 在 的 DNA , 这 样 做 的 好 处 分 别 是
____________________________________________________________
____________、
________________________________________________________
________________。
答案 (1)磷酸二酯键 黏性末端和平末端
(2)DNA 连接酶 无 (3)Ⅰ Ⅱ 限制酶Ⅰ切割质粒不会把两个
标记基因都破坏 目的基因两端均有限制酶Ⅱ的识别序列
解析 (1)限制性核酸内切酶作用的化学键是磷酸二酯键。限制性
核酸内切酶切割 DNA 分子后形成平末端或黏性末端。
(2)目的基因与载体连接需要用 DNA 连接酶,它连接的是两个核苷
酸之间的磷酸二酯键,对所重组的 DNA 两端的碱基序列无专一性。
(3)限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识
别序列和切点是—↓GATC—,目的基因的两端皆有限制酶Ⅱ的识别序
列,用限制酶Ⅰ切割质粒只会破坏一个标记基因,用限制酶Ⅱ切割质
粒则会将两个标记基因全部破坏。
8.啤酒酵母菌是啤酒生产上常用的典型的发酵酵母菌,除用于酿
造啤酒及其他的饮料酒外,还可发酵面包,菌体维生素、蛋白质含量
高,可作食用、药用和饲料。科学家将大麦细胞的 LTP1 基因植入啤酒
酵母菌中,获得的啤酒酵母菌种可产生 LTP1 蛋白,并酿出泡沫丰富的
啤酒。基本的操作过程如下:
(1)该技术定向改变了啤酒酵母菌的性状,这在可遗传变异的来源
中属于________。
(2)为了将 LTP1 基因导入酵母菌细胞内,所用的载体是________。
(3)要使载体与 LTP1 基因连接,首先应使用________进行切割。假
如载体被切割后,得到的分子末端序列为 AATTC—
G—
,则能与该载
体连接的目的基因分子末端有(多选)________,其中与
AATTC—
G—
是同一种限制酶切割的是________。
A. —G
—CTTAA B. AATTT—
A—
C. AATTG—
C— D. TTAAG—
C—
(4)将 LTP1 基因片段与载体“缝合”起来,需要________酶,常用
的有________________、________________,它们连接的化学键是
________,其中能“缝合”两个双链 DNA 片段的平末端的酶是
________。
答案 (1)基因重组 (2)(大肠杆菌的)质粒
(3)限制酶 ABC A (4)DNA 连接 E·coliDNA 连接酶 T4DNA
连接酶 磷酸二酯键 T4DNA 连接酶
解析 (1)由图可知该技术属于基因工程,该变异属于基因重组。
(2)据图可以看出,载体来自大肠杆菌,一定是质粒。
(3)与 AATTC—
G—
具有相同黏性末端的是 A、B、C,它们能相
互连接,但与其来自同一种限制酶切割的是 A。
(4)不同来源的 DNA 片段结合需要的酶是 DNA 连接酶,常用的有
E·coliDNA 连接酶、T4DNA 连接酶,它们连接的化学键是磷酸二酯键,
而起到“缝合”平末端作用的连接酶是 T4DNA 连接酶。