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- 2021-09-28 发布
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2020 届高中生物人教版选修 1 实验专练:(5)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1、欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌,下列实验操作中不正确的是( )
A.将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
B.同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板
C.可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照
D.用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌
2、在做分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从对应 106 倍培养基上筛选出大约 150 个菌落,
而其他同学只选择出大约 50 个菌落。下列有关叙述,出现科学性错误的是( )
A.甲同学出现这种结果的原因可能是土样不同,也可能是操作过程出了问题
B.可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以证明培养基是
否受到污染
C.如果其他同学用与甲同学一样的土样进行实验,结果与甲同学一致,则可以证明甲同学无
误
D.B、C 项的实验思路都遵循了实验的对照原则
3、下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图,有关叙述错误的是( )
A.在配制步骤②、③ 的培养基时,应先调 pH 值后高压蒸汽灭菌
B.步骤③ 纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落
C.步骤③ 采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D.步骤④ 挑取③ 中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力
4、关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是( )
A.培养基应以尿素为唯一氮源,该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B.选择菌落数在 30~300 间的所有平板进行计数,以平均数为实验结果
C.对 10mL 土样稀释 106 倍后,取 0.1mL 该溶液进行重复的涂布实验,测得的菌落数分别为 18、
234、276,则该 10mL 土样中分解尿素的细菌数为 2.55×108 个
D.应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰,提高可信度
5、下列能选择出分解尿素的微生物的培养基是( )
A.NaCl、K2HPO4、葡萄糖、尿素、琼脂糖、水、酚红
B.NaCl、K2HP4、葡萄糖、琼脂糖、水、酚红
C.NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂糖、水
D.NaCl、K2HPO4、牛肉膏、酵母提取物、琼脂糖、水
6、下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )
A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
7、下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述错误的是( )
A.土壤取样时应选取距地表约 3~8cm 的土壤层
B.为方便计数,应采用稀释涂布平板法进行接种
C.土壤中的细菌能分解尿素,是因为它们能合成脲酶
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂可以鉴定出分解尿素的细菌
8、下列可以鉴定分解尿素的细菌的方法是( )
A.在加入尿素及其他氮源的培养基中加入酚红指示剂
B.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
C.在加入尿素及其他氮源的培养基中加入伊红—美蓝试剂
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入伊红—美蓝试剂
9、从土壤中分离以尿素为氮源的细菌,下列实验操作不正确的是( )
A.将土壤用无菌水稀释,制备 103~105 稀释倍数的土壤稀释液
B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上
C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌
D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株
10、土壤中的细菌能分解尿素,是因为它们能合成一种( )
A.尿素酶 B.脲酶 C.蛋白
酶 D.肽酶
11、关于用涂布平板法培养和计数土壤中仅以尿素为氮源的微生物的实验,以下操作不正确
的是( )
A.需制备系列浓度梯度的土壤悬液
B.所选用的培养基中,尿素为唯一氮源
C.接种时从浓度最低的土壤悬液开始,每个浓度设置 3 个重复
D.涂布平板上形成的每个菌落,都是由样品中的单个个体形成的
12、【生物一选修 1 生物技术实践】
尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,则不能更好地被植物利用。研究发现,
尿素可被土壤中某些微生物分解,下面是从土壤中筛选出的能分解尿素的细菌的相关知识。
请回答下列问题
(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有水、无机盐、碳源和氮源四类,该实验所用的
选择培养基只能以 作为唯一的碳源。其原因 。
(2)配制培养基时各成分在溶化后分装前必须进行 ,接种前一般要对配制好的
培养基进行高压蒸汽灭菌,其中“高压”是为了 。
(3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用________法接种,根据土壤样品的稀释倍数
和接种稀释液的体积,统计平板上的________就能大约推测出样品中活菌数。
(4)一同学在纯化该类生物时,发现涂布的培养基上菌落连成一片,最可能的原因
是 ,应该采取 措施避免出现此现象。
13、牛等牲畜的瘤胃中生活着许多以尿素作唯一氮源的微生物。某同学从刚宰杀的牛的瘤胃
中取样,获得菌液,并对能分解尿素的细菌进行分离、计数和鉴定。回答下列问题:
(1)为从混杂的菌液中分离菌种,常用_____和_____方法,在固体培养基上接种,使细菌在固
体培养基上形成单个_____,从而获得纯菌株。
(2)为了测定细菌含量,将稀释度为 103 与 104 的菌液均按 0.1mL 的用量,各接种 3 个平板,在
无氧条件培养一段时间后,103 的稀释度下平板上长出的菌落数分别为 45、56、37,而 104 的
稀释度下平板上长出的菌落数分别为 26、14、17,则每升菌液的活菌数约为_____。与活菌
的实际数目相比,该方法测得的结果往往偏低,主要原因是_______________。
(3)为了鉴定该菌种,在以尿素为唯一氮源的培养基需添加_____作指示剂,目的菌在生长过
程中会产生_____酶,催化尿素分解并产生 NH3,使 pH 升高,指示剂变红。
答案以及解析
1 答案及解析:
答案:D
解析:为防止土壤浸出液浓度过高,不能获得单茵落,要将土壤用无菌水进行一系列的梯度
稀释,A 正确;
同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板,防止偶然因素对实验结果的影响,B 正确;
可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照,以判断培养基灭茵是否彻底,C 正确;
可筛选出分解尿素的细菌的培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基,D 错误。
2 答案及解析:
答案:D
解析:甲同学获得的菌落数目远大于其他同学,可能是由于所取的土样不同,也可能是操作过
程中培养基被污染,A 正确;污染可能是培养基灭菌不彻底, 或操作过程没有保证无菌操作,
将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,可以验证培养基是否受
到污染,B 正确;若是土样不同造成的,让其他同学用与甲同学一样的土样进行实验,如果结
果与甲同学一致,则可以证明甲同学操作正确,C 正确;B 选项的实验思路遵循了实验的对照
原则,C 选项的实验思路遵循了实验的重复性原则,D 错误。
3 答案及解析:
答案:C
解析:在配制步骤② 、③ 所用的培养基时,应先调 pH 后高压蒸汽灭菌,A 正确;步骤③ 纯
化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落,B 正确;要筛选出能高效
分解尿素的细菌,所选用的培养基要以尿素为唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮,因此
步骤③ 所用的培养基不能是牛肉膏蛋白胨培养基,C 错误;步骤④ 挑取③ 中不同种的菌落
分别接种,比较细菌分解尿素的能力,D 正确。
4 答案及解析:
答案:D
解析:分离土壤中分解尿素的细菌的培养基应以尿素为唯一氮源,硝化细菌是自养菌,其碳源
为二氧化碳,故二者利用的碳源不同,A 错误;选择菌落数在 30~300 间的平板进行计数,舍去
数据相差较大的数据,以平均数为实验结果,B 错误;对 10 mL 土样稀释 106 倍后,取 0.1 mL 该
溶液进行重复的涂布实验,测得的菌落数分别为 18、234、276,则该 10 mL 土样中分解尿素
的细菌数为(234+276)/2×10×10×106=2.55×1010(个),C 错误;分离微生物时,需要设置不
接种的培养基与实验组一起培养做空白对照,设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对
实验结果的干扰,D 正确。
5 答案及解析:
答案:A
解析:
6 答案及解析:
答案:A
解析:酚红指示剂只能用来检测尿素分解菌,A 正确;二苯胺试剂常用来进行 DNA 的鉴定,B
错误;苏丹Ⅲ试剂可以用来检测脂肪,C 错误;双缩脲试剂可以用来检测蛋白质,D 错误。
7 答案及解析:
答案:D
解析:一般选取距地表约 3~8cm 的土壤层来进行土壤取样,A 正确;为方便计数,应采用稀释
涂布平板法进行接种,B 正确;能够分解尿素的细菌细胞内能够合成脲酶,C 正确;鉴定分解尿
素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养能够分解尿素的细菌
后,pH 升高,指示剂将变红,D 错误。
8 答案及解析:
答案:B
解析:分离分解尿素细菌的培养基只能以尿素为唯一氮源,然后在培养基中加入酚红指示剂,
若指示剂变红,则说明这种细菌能分解尿素。
9 答案及解析:
答案:C
解析:从土壤中分离以尿素为氮源的细菌时,将土壤用无菌水稀释,制备土壤将不同浓度的土
壤稀释液涂布于不同平板上,用加入酚红指示剂的鉴别培养基可以鉴别分解尿素的细菌。从
周围出现红色环带的菌落中挑职能够分泌脲酶的菌株。
10 答案及解析:
答案:B
解析:本题考查细菌的相关知识。土壤中的细菌能分解尿素,是因为它们能合成一种脲酶,
脲酶能将尿素分解,故选 B
11 答案及解析:
答案:D
解析:
12 答案及解析:
答案:
(1) 尿素只有能利用尿素的微生物才能正常生长繁殖
(2) PH 调整 杀死培养基中的细菌芽孢
(3) (稀释)涂布平板 菌落数目
(4) 菌液浓度过高 增大稀释倍数
解析:
13 答案及解析:
答案:(1)平板划线法;稀释涂布平板法;菌落
(2)4.6×108 个;两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落
(3)酚红;脲
解析: