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- 2021-09-29 发布
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限时规范训练四
1.下列有关自养型微生物的营养的叙述中,错误的是( )
A.NaHCO3 可提供两类营养物质
B.N2 在一般条件下可成为氮源
C.含 C、H、O、N 的物质可提供碳源、氮源
D.自养型微生物需五类营养物质
答案 B
解析 只有固氮微生物才能利用 N2 作氮源。
2.有关培养基配制原则表述正确的是( )
A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子
B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素
C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到 pH、氧、渗透压等的
影响
D.营养物质的浓度越高越好
答案 C
解析 培养自养型微生物时不需要添加碳源,培养固氮菌时可以不加
氮源;一般来说,培养基中含量最多的是水;配制培养基时要合理控
制营养物质的浓度,必须考虑微生物对渗透压的耐受能力。
3.下表所示为某微生物培养基的配方,有关叙述错误的是( )
成分 含量 成分 含量
NaNO3 3 g FeSO4 0.01 g
K2HPO4 1 g (CH2O) 30 g
琼脂 15 g H2O 1 000 mL
MgSO4·7H2O 0.5 g 青霉素 0.1 万单位
A.依物理性质划分,该培养基属于固体培养基;依用途划分,该培养
基属于选择培养基
B.由培养基的原料可知,所培养微生物的同化作用类型是异养型,培
养的微生物可以是酵母菌或毛霉
C.本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要
求
D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌,应除去青霉素和 NaNO3,并
应加入尿素
答案 C
解析 由培养基中含有琼脂可推测其为固体培养基,由培养基中含有
青霉素可推测其为选择培养基。培养基中含有有机碳源,故所培养微
生物的同化作用类型是异养型;由于青霉素能抑制细菌的生长而不抑
制真菌的生长,故能培养酵母菌或毛霉。若用该培养基分离能分解尿
素的细菌,则应以尿素为唯一氮源,即应除去 NaNO3,同时还应除去
青霉素以防止其抑制目的菌的生长。
4.做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是( )
A.高压蒸汽灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开
启锅盖
B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
C.为了防止污染,接种环经火焰灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上
答案 D
解析 在高压蒸汽灭菌的操作过程中,加热结束后应让灭菌锅内温度
自然下降,待压力表的指针回到零时,打开放气阀,旋松螺栓,打开
盖子。倒平板时,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不
是完全取下放到一边。接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后,
再用其挑取菌落。在微生物的培养中,一般在皿底上用记号笔做标记。
5.下列有关平板划线法操作的叙述,错误的是( )
A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培
养物
B.每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残
留的菌种
C.在每一区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液
D.划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污
染环境和感染操作者
答案 C
解析 在用平板划线法分离菌种的实验中,接种环取菌种前灼烧的目
的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;以后每次划线前灼
烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种;从第二次划线开始,每
次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端;划线结束后仍
需灼烧接种环,是为了避免细菌污染环境和感染操作者。
6.右图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为 1、2、
3、4、5,下列说法正确的是( )
A.操作前要将接种环放在火焰旁灼烧灭菌
B.划线操作必须在火焰上进行
C.在 5 区域中才可以得到所需菌落
D.在 1、2、3、4、5 区域划线的前后都要对接种环进行灭菌
答案 D
解析 在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法是
在火焰的外焰灼烧,接种时划线操作是在火焰旁的无菌区进行的。在
5 个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。
7.现有菌液 10 mL,按下图进行系列稀释,在最后一个试管中测得细
菌数为 20 个,则未稀释前的试管中有细菌( )
A.600 个 B.1 200 个
C.2×107 个 D.2×106 个
答案 C
解析 由题图可知,每次稀释 10 倍,总共稀释 6 次,即稀释 106 倍,
最后一个试管中有 20 个细菌,即原来菌液中应该有细菌 2×107 个。
8.(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑
________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构
简单、变异类型容易选择、________、________等优点,因此常作为
遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养
皿进行________(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需要进行清
洗和________(填“消毒”或“灭菌”);空气中的细菌可用紫外线杀
灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能______________。
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计
值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀
释的________。
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征
对细菌进行初步的________。
(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固
体培养基应采用的检测方法是________________________________
__________________________________________________________
__________________________________________________________
_____。
答案 (1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短
(2)灭菌 消毒 损伤 DNA 的结构
(3)比例合适 (4)鉴定(或分类)
(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基
上是否有菌落产生
解析 (1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易
培养、生活周期短等优点,培养过程中,除考虑营养条件外,还要考
虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)为防止操作过程中杂菌污染,
培养基和培养皿应进行灭菌处理,操作者的双手需要进行清洗和消
毒。紫外线能使蛋白质变性,还能损伤 DNA 的结构。(3)涂布平板时
要先将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂
布到琼脂固体培养基的表面进行培养,操作中应保证样品稀释的比例
合适。(4)对获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对
细菌进行初步的鉴定。(5)检测固体培养基是否被污染的方法是将未
接种的培养基在适宜条件下进行培养,观察是否有菌落形成。
9.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许
多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染。请分析下列操作,其中错
误的是( )
①煮沸消毒可以杀死微生物细胞和一部分芽孢
②接种操作要在酒精灯火焰附近进行
③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌
④培养基要进行高压蒸汽灭菌
⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌
A.①② B.②④
C.②⑤ D.③⑤
答案 D
解析 无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的有植物的外植体
及操作人员的双手等,需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示
剂或染色剂)等。煮沸可以杀死微生物细胞和一部分芽孢,属于消毒;
为防止空气中杂菌污染,接种时要在酒精灯火焰附近进行;家庭制作
葡萄酒时所利用的微生物是葡萄皮表面的野生型酵母菌,故不能对葡
萄进行灭菌;培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法;故③⑤操作错误。
10.接种微生物的方法很多,平板划线法是最常用的一
种。如图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。
操作方法中错误的是( )
A.划线操作时,将沾有菌种的接种环插入培养基
B.平板划线后培养微生物时要倒置培养
C.不能将第④区域的划线与第①区域的划线相连
D.在②~④区域中划线前后都要对接种环进行灭菌
答案 A
解析 将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,不
能插入培养基;用平板培养基培养微生物时,为防止水蒸气凝集滴入
培养基造成干扰或污染,应将平板倒过来放置培养;划线时要避免最
后一区的划线与第一区相连,如果相连则有可能影响单个菌落的分离
效果;在②~④区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌,保证每次
划线的菌种来自上一区域的末端,划线结束时灼烧接种环是为了防止
菌种污染环境和感染操作者。
11.某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理,下列叙述正
确的是( )
A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
答案 B
解析 在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板;转换划线角度后要
对接种环进行灼烧灭菌,杀灭接种环上残留的菌种,再进行划线;接
种后的培养皿应放置在恒温培养箱中培养;微生物生长、繁殖较快,
在培养过程中一般要隔天观察一次。
12.科学家通过实验发现了细菌的快速进化过程。人们发现,用肉汤
培养假单胞杆菌,如果肉汤保持不动,不久后,在肉汤的不同部位,
如表面、底部或其他部位,细菌的形态发生了如图所示的变化,出现
一定数量的变异株。下列有关说法错误的是( )
A.这个实验说明了细菌在不同的小环境中发生了进化
B.细菌的生命周期短,繁殖速度快,容易受到外界环境影响而发生变
化
C.用静置的肉汤培养 FS 细菌,其菌落形状将趋于一致
D.用不断摇动的肉汤培养 SM 细菌,不会出现 FS 细菌和 WS 细菌
答案 C
解析 由题意可知,最初的 SM 细菌在静置的肉汤表面繁殖,一段时
间后,有一部分在肉汤底部繁殖,这部分可能向厌氧方向进化,故细
菌在不同的小环境下可发生进化。细菌生命周期短,繁殖速度快,容
易受外界环境因素(如温度、氧气)的影响。用静置的肉汤培养 FS 细
菌,该细菌也有可能向不同方向进化,如进化成 WS 细菌。不断摇动
肉汤,肉汤中的溶氧会抑制厌氧型的 FS 细菌;不断摇动肉汤,容器
与肉汤无固定接触面,WS 细菌无法附着生长繁殖。
13.下面为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表,据此回答:
成分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl H2O
含量 0.5 g 1 g 0.5 g 100 mL
(1)蛋白胨在培养基中的作用是_______________________________
______________________________________________。
(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基,还需添加的成分是
________。
(3)确定表中各成分含量依据的原则是________________________
_________________________________________________。
(4)培养基配制好后,分装前应进行的工作是___________________
_____________________________________________________。
(5)从配制培养基直到培养完成,所采用的预防杂菌污染的方法有
__________________________________________________________
__________________________________________________________
____________________________。
(6)在培养基凝固前要搁置斜面,其目的是_____________________
_________________________________________________________。
答案 (1)提供碳源、氮源、生长因子(特殊营养物质)
(2)琼脂(或凝固剂)
(3)所培养微生物对各营养成分的需要量
(4)调整 pH
(5)对培养基进行高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉擦手、在酒精
灯火焰旁接种、在酒精灯火焰旁迅速用棉塞塞住试管口
(6)扩大接种面积
解析 蛋白胨中含有大量的蛋白质降解而成的多肽类物质等,因而蛋
白胨在培养基中的作用是提供碳源、氮源和生长因子(特殊营养物
质)。细菌菌落是在固体培养基上形成的。确定各营养成分含量要依
据所培养的微生物对各营养成分的需要。培养基配制好后,首先要调
整 pH,然后再分装,整个操作过程都要保证无杂菌污染。
14.在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,
这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。实验基本步骤如下:
配制培养基 ―→ 灭菌、倒平板 ―→ 培养 ―→ 观察
请回答下列有关问题:
(1) 配 制 培 养 基 时 , 各 成 分 含 量 确 定 的 原 则 是
________________________。不论何种培养基,在各种成分都溶化后
分装前,要进行的是________。
(2)倒平板的适宜温度是 50 ℃左右,原因是__________________
_________________________________________________________
______________________。待平板冷凝后,要将平板倒置,这样既可
使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止
__________________________________________________________
______________。
(3)纯化菌株时,若使用稀释涂布平板法进行接种,应选择的涂布工
具是图中的________;若使用平板划线法进行接种,应选择的接种工
具是图中的________。
(4)划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满
了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。
造成划线无菌落可能的操作失误有____________________________
_________________________________________________________。
(5)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过
________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
答案 (1)所培养微生物对各营养成分的需要量 调整 pH
(2)温度过高会烫手,过低培养基又会凝固 皿盖上的水珠落入培养
基,造成污染
(3)B A
(4)①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始
(5)灭菌
解析 培养基中各成分含量要根据微生物的生长需要来确定。微生物
生长需要一定的 pH,所以培养基装瓶前需要调节 pH。由图可知,A
为接种环,B 为涂布器,C 为胶头滴管,D 为接种针,稀释涂布平板
法应选择的涂布工具是 B,平板划线法应选择的接种工具是 A。第一
划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一
条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成此现象的原因可能有两个:
一是接种环灼烧后未冷却,菌种接触到高温的接种环而死亡;二是划
第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。根据微生物实验室
的安全规定,使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢
弃,以防止培养物的扩散。
15.(2018·长沙模拟)苹果干腐病是一种由茶蔍子葡萄座腔菌引起的
疾病。病菌通常由枝条伤口入侵引起感染,在伤口处形成溃疡。某中
学的科研小组计划分离出该真菌,并进行药物防治实验,为苹果干腐
病的防治提供合理的建议。经过查阅资料,确定了分离时所用的 PDA
培养基配方,如表所示:
物质 马铃薯 葡萄糖 自来水 氯霉素
含量 200 g 20 g 1 000 mL 0.3 g
该真菌在上述 PDA 培养基上生长时有特定的形态特征:辐射状白色匍
匐菌丝,绒毛状。
(1)要获得菌落,则上表中还应添加的成分是________。氯霉素的作
用是_____________________________________________________
___________________。
培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、________、倒平板。待平
板冷却凝固后,将平板________,以防止冷凝水污染培养基。
(2)用剪刀从染病枝条溃疡处剪取 1×1 cm2 的患病组织,并用质量分
数为 0.1%的氯化汞进行消毒,置于培养基中心,在合适条件下进行
培养,共培养五组。待菌落形态特征稳定后,用________法将该致病
菌分别转移至含有等量 0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的上述 PDA
培养基中进行抗药性实验,并每隔 24 h 记录一次最后划线区域的菌
落数目:
①选取____________的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足
而导致菌落数目遗漏。
②记录结果如下:
小组 0.5%苦水碱剂 40%福美砷 清水
菌落数目/个 2 8 17
从结果分析可知,____________能很好地抑制该真菌的生长,适合防
治苹果干腐病。
答案 (1)琼脂(或凝固剂) 抑制细菌等杂菌的生长 灭菌 倒置
(2)平板划线 ①菌落数目稳定 ②0.5%苦水碱剂
解析 (1)要获得菌落,需要使用固体培养基,所以培养基中需加入
琼脂,氯霉素是抗生素,可抑制细菌等杂菌生长。培养基的制备步骤
包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,待平板冷却凝固后,将平板
倒置,以防止冷凝水污染培养基。(2)进行抗药性实验时,可用平板
划线法将致病菌转移到实验培养基上。应选取菌落数目稳定时的记录
作为结果,从而防止在统计菌落数目时出现遗漏。由表格可知,含
0.5%苦水碱剂的平板上菌落数最少,表明 0.5%苦水碱剂能很好地抑
制该真菌生长。