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- 2021-09-30 发布
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阶段评估检测(七)(选修1)
(30分钟 100分)
1.(12分)(2019·青岛模拟)生物兴趣小组自制了泡菜,对其中的微生物进行了筛选,并对有害物质的含量进行了测定,请回答相关问题:
(1)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行______________的过程。乳酸菌中含有多种蛋白质,利用凝胶色谱法分离提取部分乳酸菌蛋白质时,等样品完全进入凝胶层后,加入pH为7.0、浓度为20 mmol/L的______________到适当高度进行洗脱,结果先洗脱出来的是______________的蛋白质。
(2)兴趣小组还用伊红美蓝培养基检测泡菜汁中大肠杆菌的含量。从物理性质看,该培养基属于______(填“液体”或“固体”)培养基,伊红美蓝对大肠杆菌起到______(填“选择”或“鉴别”)作用。在某次计数操作过程中,发现培养基上的菌落连成一片,为避免此种现象发生,正确的操作方法是______________________________。
(3)培养大肠杆菌时,在接种前通常需要检测培养基是否被污染,检测方法是______________________________。
(4)测定泡菜中NaNO2的含量,依据的原理是在____________条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成__________色染料。
【解析】(1)泡菜的制作离不开乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸的过程。利用凝胶色谱法分离提取蛋白质时,由于相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,因此先洗脱出来的是相对分子质量较大的蛋白质。(2)在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的菌落呈现黑色,起到鉴别作用,从物理性质看,该培养基属于固体培养基。对菌液进行梯度稀释(加大稀释倍数),可避免培养基上的菌落连成一片。(3)检测培养基是否被污染,方法是将未接种的培养基在适宜的条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落出现。(4)测定亚硝酸盐含量的原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料,将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较,可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
答案:(1)无氧呼吸 磷酸缓冲液 相对分子质量较大 (2)固体 鉴别 对菌液进行梯度稀释(加大稀释倍数) (3)将未接种的培养基在适宜的条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落出现 (4)盐酸酸化 玫瑰红
2.(14分)微生物在自然界中无处不在,随着人类对微生物认识的加深,
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对其利用越来越广泛。请回答下列问题:
(1)生活中人们利用酵母菌、醋酸菌分别酿制果酒、果醋,与酵母菌相比,醋酸菌在结构上最明显的特点是______________。给予适宜的条件,即使没有经过严格的灭菌过程,也能够获得果酒、果醋,这是因为___________________________
___________________。
(2)在制作腐乳时,需将长满毛霉的豆腐用盐腌制,其作用是__________和__________。
(3)在工业生产中,可从被石油污染的土壤中分离出能分解石油的细菌。在分离时需用__________作唯一碳源的培养基培养土壤中提取的细菌,可采用的接种方法是________________________________________________。
(4)经分离得到的菌种,通常再进行______________处理才可能得到更高效分解石油的微生物。为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力__________________________________。
【解析】(1)酵母菌为真核生物,醋酸菌为原核生物,醋酸菌在结构上最明显的特点是无核膜包被的细胞核。酵母菌、醋酸菌的发酵产物会抑制其他微生物的生长,因此给予适宜的条件,即使没有经过严格的灭菌过程,也能够获得果酒、果醋。(2)将长满毛霉的豆腐用盐腌制,其作用是析出豆腐中的水分和防止微生物的生长。(3)需要分离出能分解石油的细菌,因此应将细菌在以石油为唯一碳源的培养基上进行培养。接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。(4)为了获得更高效分解石油的微生物,可对菌种进行诱变处理,使其发生基因突变,然后从众多的菌种中选择出能高效分解石油的微生物,筛选过程中可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力强。
答案:(1)无核膜包被的细胞核 酵母菌、醋酸菌的发酵产物会抑制其他微生物的生长 (2)析出豆腐中的水分 防止微生物的生长 (3)石油 稀释涂布平板法和平板划线法 (4)诱变 强
3.(14分)(2020·淄博模拟)饮料酒在生产过程中会产生少量尿素,酒体呈酸性。尿素能与酒精反应生成有害物质,脲酶能分解酒体中的尿素。请回答下列问题:
(1)对土壤溶液中酸性脲酶菌进行富集培养(初筛)时,培养基的氮源应选用______________,与固体培养基相比,液体培养基更适于富集培养的原因是____________________________________________。
(2)复筛酸性脲酶菌的培养基为中性固体培养基,以酚红为指示剂。经接种、培养后,发现平板上有的菌落周围出现红色圈,有的没有。在挑选时,应选择______________(填“有”或
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“无”)红色圈的菌落。
(3)从酸性脲酶菌中提取脲酶后,不宜直接将脲酶加入酒体中,原因是__________________________________。将酸性脲酶和海藻酸钠混合,用注射器滴入凝结液中形成珠粒,这种固定化酶的方法称为__________。研究发现海藻酸钠浓度过高时脲酶的活性偏低,原因是___________________________________
____________。
(4)工业化处理酒体中的尿素时,若酒体在一次流经酸性脲酶凝胶反应柱后,尿素含量仍高于产品标准,在不增加柱高的前提下,改进生产工艺流程的措施是______________________________________________。
【解析】(1)脲酶能够分解尿素,因此筛选土壤溶液中酸性脲酶菌时,培养基中应该以尿素为唯一氮源;液体培养基能够与菌体充分接触,菌体繁殖快,因此更适于菌体的富集培养。(2)脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高,酚红指示剂将变红。复筛酸性脲酶菌,而培养基为中性固体培养基,因此酸性脲酶菌中的脲酶无法分解尿素,在菌落周围不会形成红色圈,因此在挑选时,应选择无红色圈的菌落。(3)由于酒中的酶难以回收,不能再次利用;且酶混合在酒体中,会影响产品质量,所以从酸性脲酶菌中提取脲酶后,不宜直接将脲酶加入酒体中;将酸性脲酶和海藻酸钠混合,用注射器滴入凝结液中形成珠粒,该方法为包埋法;海藻酸钠浓度过高时,反应底物和产物不易扩散,导致脲酶的活性偏低。(4)工业化处理酒体中尿素时,若酒体在一次流经酸性脲酶凝胶反应柱后,尿素含量仍高于产品标准,则在不增加柱高的前提下,应该通过减慢流速、多次流入的方法加以改善。
答案:(1)尿素 液体培养基与菌体接触充分,菌体繁殖快 (2)无 (3)酒中的酶难以回收,不能再次利用;酶混合在酒体中,影响产品质量 包埋法 反应底物和产物不易扩散 (4)减慢流速、多次流入
4.(12分)乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。乳糖酶的制备步骤如下:
(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用____________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是作______________。从功能上讲,这种培养基属于____________。
(2)培养微生物L前,宜采用______________方法对接种环进行灭菌。
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(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其相对分子质量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其相对分子质量越____________________。
【解析】(1)已知乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用乳糖作为培养基中的唯一碳源,培养基中琼脂的作用是作凝固剂,从功能上讲,这种培养基属于选择培养基。(2)为了避免杂菌污染,在培养微生物前,对接种环应采用灼烧灭菌。(3)用电泳法纯化乳糖酶时,若在相同条件下分离带电荷相同的蛋白质,则其相对分子质量越小,电泳速度越快。
答案:(1)乳糖 凝固剂 选择培养基
(2)灼烧 (3)小
5.(15分)近些年,选用手工皂进行沐浴、洁面成为一种时尚,手工皂是使用天然油脂与碱液人工制作而成的肥皂,可依据个人的喜好与目的,加入各种不同的精油使手工皂具有不同的芳香。请回答下列问题:
(1)植物芳香油的主要成分是______________________,主要的提取方法有____________________________________________________三种。
(2)向手工皂中加入玫瑰精油可使手工皂具有玫瑰香味,利用玫瑰精油__________________的性质,可以用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油。向蒸馏后的乳浊液中加入氯化钠的目的是____________________________________,为了除去油水混合物中的水分,应进行的操作是_______________________________
_______________。
(3)向手工皂中加入橘皮精油可使手工皂具有橘子香味,用压榨法提取橘皮精油前,用石灰水浸泡橘皮的目的是__________________________________,压榨液的处理过程中,为了除去橘皮精油中少量水和果蜡,需在_________________
_________,使杂质沉淀。
(4)不用蒸馏法提取橘皮精油的原因是________________________________。
【解析】(1)植物芳香油的主要成分是萜类化合物及其衍生物,主要的提取方法有蒸馏、压榨、萃取三种。
(2)玫瑰精油化学性质稳定、难溶于水、能随水蒸气一同蒸馏,因此可以用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油。向蒸馏后的乳浊液中加入氯化钠可以增加盐的浓度,使油水分层。分层后用分液漏斗除去水层,油层中再加入无水Na2SO4吸收剩余水分。
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(3)用石灰水浸泡橘皮的目的是破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率。为了除去橘皮精油中少量水和果蜡,需在5~10 ℃下静置5~7 d,使杂质沉淀。
(4)提取橘皮精油时,若采取水中蒸馏的方法会导致原料焦糊、有效成分水解等问题,因此选择压榨法提取橘皮精油。
答案:(1)萜类化合物及其衍生物 蒸馏、压榨、萃取
(2)化学性质稳定、难溶于水、能随水蒸气一同蒸馏 增加盐的浓度,使油水分层 用分液漏斗除去水层,油层中再加入无水Na2SO4吸收剩余水分
(3)破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率 5~10 ℃下静置5~7 d
(4)有效成分易水解和原料易焦糊
6.(12分)(2020·西安模拟)利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌,未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长,菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β-胡萝卜素流程,请回答下列问题:
(1)用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是__________________________。为选出高产突变菌种,还应在培养基中添加________________,在接入菌种前,应对培养基进行________________________,以避免杂菌污染。
(2)某同学进行正确的接种操作后,平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________________________________;由于____________________________________________,所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。
(3)进行③过程时,应选取________色的菌落接种至液体培养基。过程⑥是__________,用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品。
(4)将萃取的胡萝卜素粗品与β-胡萝卜素标样层析后进行比对,结果如图丙,
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从图中分析可知,色带______________为β-胡萝卜素。
【解析】(1)用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是诱导其发生基因突变;由于未突变菌不能在含有一定浓度的β-紫罗酮的培养基上生长,因此在选取高产突变菌种时,还应在培养基中添加一定浓度的β-紫罗酮;在接入菌种前,应对培养基进行高压蒸汽灭菌,以避免杂菌污染。
(2)图乙固体平板培养基中菌落均匀分布,该同学的接种方法是稀释涂布平板法;由于基因突变频率低,因此只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖。
(3)菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色,因此③过程选择β-胡萝卜素含量高的菌株时,应选取橙红色的菌落接种至液体培养基;过程⑥是浓缩。
(4)据图分析,将萃取的胡萝卜素粗品与β-胡萝卜素标样层析后进行比对,样品与标准样品中一样的色带即为β-胡萝卜素,即色带Ⅰ为β-胡萝卜素,色带Ⅱ、Ⅲ为提取的胡萝卜素中含有的杂质。
答案:(1)诱导其发生基因突变 一定浓度的β-紫罗酮 高压蒸汽灭菌
(2)稀释涂布平板法 基因突变频率低,只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖
(3)橙红 浓缩
(4)Ⅰ
7.(12分)(2020·泸州模拟)从香辛料中提取有效成分作为食品的天然防腐剂具有广阔的前景。某实验小组分别从五种香辛料中提取精油(编号为A、B、C、D、E),并用这些精油对四种微生物进行了抑菌能力的实验研究,所得数据如表所示。请回答:
精油种类抑菌圈直径/mm菌种
A
B
C
D
E
大肠杆菌
21.1
26.0
15.1
24.0
23.2
白葡萄球菌
14.7
22.0
19.1
12.0
29.1
黑曲霉
24.6
33.0
26.0
24.5
49.6
青霉
25.3
38.2
24.3
25.1
42.8
(1)上表中,与制作泡菜的主要微生物结构相似的微生物是______________________________。
(2)在探究精油对微生物的抑菌能力时,实验用的培养基中__________(填“需要”或“不需要”)加入琼脂,应采用__________法进行接种,判断精油的抑菌能力大小的指标是______________________________。
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(3)实验结果表明,精油E对细菌的杀伤作用________(填“大于”或“小于”)对真菌的杀伤作用。
(4)从香辛料中提取精油常用萃取法,萃取的效率主要取决于萃取剂的__________,同时还受温度和时间长短等条件的影响。若要探究精油含量最高时的最佳萃取时间,请写出简要思路:__ _________________________________。
【解析】(1)制作泡菜的菌种是乳酸菌,属于原核生物,而表格中的四种微生物中,大肠杆菌和白葡萄球菌都属于原核生物。
(2)根据题意分析,该实验需要观察抑菌圈的大小,用的是固体培养基,因此培养基中需要加入琼脂作为凝固剂;该实验采用的接种方法是稀释涂布平板法,观察到的抑菌圈的直径大小可以作为判断精油的抑菌能力大小的指标。
(3)根据以上分析可知,5种精油中,精油E对白葡萄球菌、黑曲霉、青霉的抑菌效果都较好,但是黑曲霉和青霉的抑菌圈更大,说明精油E对细菌的杀伤作用小于对真菌的杀伤作用。
(4)采用萃取法提取精油时,萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量;若要探究精油含量最高时的最佳萃取时间,自变量是萃取的时间,根据实验设计的基本原则设计实验如下:将萃取材料平均分成多组,在其他条件相同且适宜的情况下,分别进行不同时间的萃取,测定精油含量,达到最大精油含量所用的最短时间即为最佳萃取时间。
答案:(1)大肠杆菌和白葡萄球菌
(2)需要 稀释涂布平板 抑菌圈直径大小
(3)小于
(4)性质和使用量 将萃取材料平均分成多组,在其他条件相同且适宜的情况下,分别进行不同时间的萃取,测定精油含量,达到最大精油含量所用的最短时间即为最佳萃取时间
8.(9分)(2020·泸州模拟)回答与淀粉酶有关的问题:
(1)与用葡萄酿酒相比,利用大米酿酒,需增加________的过程。为筛选胞外淀粉酶分泌型菌种,一般可从________(填“果园树下”“米酒厂周围”或“枯树周围”)获得土样,用无菌水稀释,涂布到含淀粉的选择培养基上培养,一段时间后在培养基表面滴加碘液,可在某些菌落周围观察到透明的水解圈,从培养基上挑选若干个________比值大的菌落作为酶活性较高的菌种。
(2)如想让淀粉酶能反复利用,宜采用化学结合法进行固定化,可通过检测固定化淀粉酶____________确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括________、________、离子吸附法及交联法等。
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(3)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,现通过基因工程方法得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵一段时间后,接种________菌的发酵罐需要先排气,其原因是__________________。
【解析】(1)利用大米酿酒,需要先将大米中的淀粉水解成葡萄糖。寻找目的菌株时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。因此应从米酒厂周围的土壤中筛选胞外淀粉酶分泌型菌种。水解圈直径与菌落直径比值越大的菌落,其淀粉酶的活性越高。(2)固定化酶要经检测其活性来确定应用价值。酶的固定化方法包括包埋法、物理吸附法、化学结合法等。(3)工程酵母菌利用淀粉能力更强,通过细胞呼吸产生CO2速率更快,因此需要先排气。
答案:(1)将淀粉水解成葡萄糖(糖化) 米酒厂周围 水解圈直径与菌落直径
(2)(酶)活性[或(酶)活力] 包埋法 物理吸附法
(3)工程酵母 工程酵母菌利用淀粉能力更强,产生CO2速率更快
【加固训练】
为了探究啤酒酵母固定化的最佳条件,科研人员研究了氯化钙浓度对固定化酵母发酵性能的影响,结果如图。请回答:
(1)与利用游离酵母生产啤酒相比,利用固定化酵母的优点有_______________
______________________。
(2)本实验结果表明,随氯化钙浓度的增大,凝胶珠机械强度增大,完整率____________________。
(3)结合发酵性能分析,制备凝胶珠适宜的氯化钙浓度为__________________。当氯化钙浓度过高时,发酵液中的糖度升高,酒精度下降,发酵受到影响,原因是______________________________________。
(4)用海藻酸钠作为载体包埋酵母细胞,溶解海藻酸钠时最好采用______________的方法,以防发生焦糊。溶化好的海藻酸钠溶液应________后,再与已活化的酵母细胞充分混合。若海藻酸钠浓度过低,会导致__________________,固定效果大大降低。
【解析】(1)固定化酶或细胞的优点是可重复使用、便于产物分离、提高产品质量等。(2)
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由曲线知,随着氯化钙浓度的增大,凝胶珠的完整率增加。(3)氯化钙浓度为2.0 mol/L时,发酵产生的酒精度最高;当氯化钙浓度过高时会使凝胶珠机械强度过大,影响凝胶珠的通透性,从而影响糖进入颗粒内部。(4)为防止发生焦糊,溶解海藻酸钠最好采用小火或间断加热的方法;为保护活化的酵母细胞的活性,溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却到室温后再与酵母细胞混合。
答案:(1)可多次使用、便于产物分离、提高产品质量等 (2)增加 (3)2.0 mol/L 凝胶珠机械强度过大,通透性降低,影响糖进入颗粒内部 (4)小火或间断加热 冷却至室温 酵母细胞从颗粒中漏出
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