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- 2021-10-11 发布
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专题 5 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定
课下提能
一、选择题
1.在混合物中提取 DNA 分子的基本思路是( )
A.根据各种大分子的理化性质的差异
B.根据各种大分子的理化性质的共性
C.根据各种大分子在细胞内的功能
D.根据各种大分子的结构和在细胞内的位置
解析:选 A 在混合物中提取 DNA 分子的基本思路是根据各种大分子的理
化性质的差异,A 正确。
2.在采用鸡血为材料对 DNA 进行粗提取的实验中,若需进一步提取杂质
较少的 DNA,可以依据的原理是( )
A.在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中 DNA 的溶解度最小
B.DNA 与二苯胺在沸水浴的条件下反应呈现蓝色
C.DNA 不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精
D.质量浓度为 0.1 g/mL 的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用
解析:选 C 在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中 DNA 的溶解度
最小,提取的 DNA 含有的杂质较多;DNA 与二苯胺在沸水浴的条件下反应呈现
蓝色是鉴定 DNA 的原理;由于 DNA 不溶于酒精溶液,而细胞中的某些蛋白质
则溶于酒精溶液,因此向含有杂质的 DNA 中加入体积分数为 95%的冷酒精溶液
能进一步提纯 DNA;质量浓度为 0.1 g/mL 的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用,其
目的是防止血液凝固,而不是提取杂质较少的 DNA。
3.在蛋白质和 DNA 的混合液中,要想得到较纯的 DNA,可采用的方法有
( )
①向混合液中加入足量的蒸馏水
②向混合液中加入 DNA 水解酶
③向混合液中加入冷却的体积分数为 95%的酒精
④向混合液中加入蛋白酶
A.①② B.③④
C.①③ D.②④
解析:选 B DNA 分子在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低,在冷却的
酒精中可析出,据此可将 DNA 和蛋白质分离;DNA 水解酶能将 DNA 水解成脱
氧核苷酸,而蛋白酶则将蛋白质水解成可溶性的多肽,从而将蛋白质与 DNA 分
离。
4.在 DNA 的粗提取过程中,先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是
( )
A.稀释血液;冲洗样品
B.使血细胞破裂;降低 NaCl 的浓度使 DNA 析出
C.使血细胞破裂;增大 DNA 的溶解量
D.使血细胞破裂;提取含杂质较少的 DNA
解析:选 B 在 DNA 的粗提取过程中,将血液静置,上清液去掉后,向血
细胞液中加入蒸馏水,使血细胞吸水涨破,使细胞核内的遗传物质释放;第二次
是向溶有 DNA 的物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中缓缓加入蒸馏水,使
NaCl 溶液物质的量浓度降至 0.14 mol/L,析出 DNA。
5.在 DNA 的粗提取和鉴定实验中,有两次 DNA 的沉淀析出,其依据的原
理是( )
①DNA 在 NaCl 溶液物质的量浓度为 0.14 mol/L 时溶解度最低 ②DNA 在
冷却的体积分数为 95%的酒精溶液中能沉淀析出
A.两次都是①
B.两次都是②
C.第一次是①,第二次是②
D.第一次是②,第二次是①
解析:选 C 第一次沉淀析出是利用浓 NaCl 溶液溶解核内 DNA 之后,加
蒸馏水稀释 NaCl 溶液至物质的量浓度为 0.14 mol/L,使 DNA 溶解度最低而析出;
第二次沉淀析出是用冷酒精溶液使 DNA 凝集并溶解非 DNA 物质,达到提纯
DNA 的目的。
6.DNA 粗提取实验中,应尽可能避免 DNA 断裂和降解,下列相关操作可
达到此目的的是( )
A.以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进 DNA 溶解
B.向 DNA 溶液中迅速加入蒸馏水,使 DNA 快速析出
C.以血液为实验材料时,可加入柠檬酸钠
D.向 DNA 溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌
解析:选 D 适当加热不会促进 DNA 溶解,A 错误;在 0.14 mol/L 的 NaCl
溶液中,DNA 的溶解度最低,因此用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L,
可使 DNA 析出,B 错误;以血液为实验材料时,可加入柠檬酸钠,以防止血液
凝固,但这并不能避免 DNA 断裂和降解,C 错误;DNA 不溶于酒精,因此可向
DNA 溶液中加入体积分数为 95%的冷酒精,并沿同一方向缓慢搅拌析出 DNA,
D 正确。
7.(2019·泰州检测)下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是
( )
A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度
B.将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝
C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取
D.加入冷却的酒精后用玻璃棒快速搅拌滤液会导致 DNA 获得量增多
解析:选 C 洗涤剂能瓦解细胞膜,但是并不能增加 DNA 在 NaCl 溶液中
的溶解度,A 项不正确;鉴定 DNA 时,须先将 DNA 丝状物溶于 2 mol/L 的 NaCl
溶液中,再加入二苯胺试剂并沸水浴加热,冷却后变蓝,B 项不正确;菜花匀浆
中含有 DNA 水解酶,常温下其活性较高,可催化 DNA 水解从而影响 DNA 的提
取,C 项正确;加入冷却的酒精后应用玻璃棒缓慢地并沿一个方向搅拌滤液,否
则会导致 DNA 丝状物断裂进而使获得量减少,D 项不正确。
8.在利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是
( )
A.用蒸馏水将 NaCl 溶液的物质的量浓度调至 0.14 mol/L,滤去析出物
B.调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质
C.将丝状物溶解在物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中,加入二苯胺试
剂即呈蓝色
D.用植物替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同
解析:选 B 用蒸馏水将 NaCl 溶液物质的量浓度调至 0.14 mol/L,可使 DNA
析出,A 错误;调节 NaCl 溶液的物质的量浓度至 2 mol/L,过滤可除去不溶于其
中的杂质;直接加入木瓜蛋白酶也可水解蛋白质,去除部分杂质,B 正确;在沸
水浴的条件下,DNA 遇二苯胺试剂呈蓝色,C 错误;如果实验材料是植物细胞,
需要先用洗涤剂溶解细胞膜,D 错误。
9.下图是利用鸡血粗提取 DNA 的基本操作,下表中操作目的不能实现的
是( )
选项
烧杯甲中
的试剂
烧杯乙中的液
体或物质
操作目的
A 蒸馏水 鸡血细胞液
使鸡血细胞
吸水涨破
B 蒸馏水
含 DNA 的浓
NaCl 溶液
除去不溶于低浓度
NaCl 溶液中的杂质
C 冷却的酒精
含 DNA 的
浓 NaCl 溶液
除去溶于酒
精中的杂质
D
2 mol/L
NaCl 溶液
纱布上的
黏稠物
除去不溶于 2 mol/L
NaCl 溶液中的杂质
解析:选 B 在 DNA 粗提取实验中,鸡血中加入蒸馏水的目的是使血细胞
吸水涨破,A 项正确;将烧杯甲中的蒸馏水加入到含 DNA 的浓 NaCl 溶液(2 mol/L)
的烧杯乙中,其目的是使 NaCl 溶液的浓度降低至 0.14 mol/L,此时 DNA 在 NaCl
溶液中的溶解度最小,从而使 DNA 析出,B 项错误;DNA 不溶于酒精溶液,细
胞中的某些蛋白质可溶于酒精,因此,将冷却的酒精加入到含 DNA 的浓 NaCl
溶液中,可除去溶于酒精中的杂质,C 项正确;将烧杯甲中的 2 mol/L 的 NaCl
溶液加入到烧杯乙中,纱布上的黏稠物中的 DNA 会溶解在 2 mol/L 的 NaCl 溶液
中,可除去不溶于 2 mol/L 的 NaCl 溶液中的杂质,D 项正确。
10.(2019·泰州检测)甲、乙两图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验中涉及的
两个操作装置图。相关叙述正确的是( )
A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为 NaCl 溶液,但两者浓度不同
B.图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝,另一支
试管中的溶液不变蓝
C.图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使 DNA 析出,并缠绕在玻璃棒上
D.图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果
解析:选 D 图甲烧杯中为冷酒精溶液,图乙试管中为 NaCl 溶液,A 错误;
图乙试管需要在沸水中加热 5 min,B 错误;图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,
卷起丝状物,C 错误;图乙操作中所用的二苯胺最好现配现用,否则二苯胺会变
成浅蓝色,D 正确。
二、非选择题
11.如图是“DNA 粗提取与鉴定”的相关实验步骤。请据图分析回答下列
问题。
(1) 鸡 血 细 胞 是 进 行 该 实 验 较 好 的 实 验 材 料 , 这 是 因 为
________________________ 。 从 鸡 血 细 胞 中 释 放 出 核 物 质 的 处 理 方 法 是
_________________________________________________________。
(2)图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取__________(填“滤
液”或“析出物”)进行下一步实验;图 B 表示的相关操作过程中,加入 2 mol/L
NaCl 溶液的作用是______________;图 C 表示在滤液中加入冷却的 95%的酒精,
其目的是_________________________________________________________。
(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA,可滴加________溶液,结果
丝状物被染成绿色。
(4)图 D 中 a 试管为对照组,b 试管为实验组。
①a 试管现象________________________;b 试管现象________________。
②在沸水中加热的目的是________________,同时说明 DNA 对高温有较强
的________。
③a 试管在实验中的作用是________。
④b 试管中溶液颜色的变化程度主要与____________有关。
解析:图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程,纱布上的过滤物主要是细
胞膜、核膜的碎片等杂质,而 DNA 主要存在于下面的滤液中,所以过滤后应取
滤液进行下一步实验。DNA 不溶于冷酒精,而其他一些物质可以溶于冷酒精,
从而可进一步提纯 DNA。甲基绿为比较常用的细胞核染色剂,染色后细胞核中
染色体呈绿色,可以用来鉴定 DNA。
答案:(1)鸡血细胞核中 DNA 含量丰富,材料易得 向鸡血细胞溶液中加入
蒸馏水并搅拌 (2)滤液 溶解 DNA 分子 提取杂质更少的 DNA(或去除脂溶性
杂质) (3)甲基绿 (4)①溶液不变蓝 溶液变蓝 ②加快颜色反应速度 耐受
性 ③对照 ④加入 DNA(丝状物)的多少
12.以下是有关 DNA 粗提取实验的阅读材料:
A.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。
但柠檬酸钠溶液对 DNA 具有保护作用。
B.DNA 核蛋白在 1 mol/L NaCl 溶液中溶解度很高,但在 0.14 mol/L NaCl
溶液中的溶解度很低;而 RNA 核蛋白溶于 0.14 mol/L NaCl 溶液。
C.用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在 DNA 溶液中加入
2.5 倍体积、体积分数为 95%的酒精,可将 DNA 分离出来。
D.DNA 在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺酸
性溶液反应,能生成蓝色化合物。
E.实验材料与器械:柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14 mol/L NaCl 溶液、1 mol/L
NaCl 溶液、蒸馏水、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、
烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。
F.实验步骤:研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释 6 倍→离心处理得沉淀
物→沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上清液→提取出 DNA→DNA 鉴定。
请根据以上材料回答下列问题:
(1)研磨时,取 10 g 花椰菜,加适量的石英砂、__________________
______和__________________。
(2)将滤液稀释 6 倍,其目的是_____________________________________。
(3)取沉淀物,置于 2 mL 1 mol/L NaCl 溶液中,使 DNA 核蛋白再次溶解,
再加 2 mL 苯酚充分振荡后静置,待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是
除去_________________________________________________________。
(4)将剩余溶液中的 DNA 提取出来的方法是
_________________________________________________________
_________________________________________________________。
(5)证明提取物确实是 DNA 分子的方法是
_________________________________________________________
_________________________________________________________。
解析:(1)在研磨时加入少许石英砂是为了增大摩擦力,加快研磨的速度。
加入 1 mol/L NaCl 溶液是为了溶解 DNA 核蛋白,而加入柠檬酸钠溶液是为了保
护 DNA 不被破坏。(2)在 0.14 mol/L NaCl 溶液中,DNA 核蛋白的溶解度最低,
所以要将 1 mol/L NaCl 溶液稀释,使 DNA 核蛋白析出。(3)前一步提取的是 DNA
核蛋白,而需要的是 DNA,因此需要把 DNA 核蛋白进一步提纯。用苯酚处理,
可使蛋白质变性,且留在苯酚层内,用这样的方法可以去除蛋白质。(4)根据题
中所给信息,在 DNA 溶液中加入 2.5 倍体积、体积分数为 95%的酒精,可将 DNA
分离出来,可用玻璃棒搅成团取出。(5)DNA 在强酸环境下,水解产生脱氧核糖
等小分子物质。它与二苯胺酸性溶液反应,能生成蓝色化合物。用此种方法可以
鉴定所提取的物质是否为 DNA。
答案:(1)1 mol/L NaCl 溶液 柠檬酸钠溶液 (2)使 DNA 核蛋白的溶解度逐
渐降低 (3)蛋白质 (4)向下层 DNA 溶液中加 2.5 倍体积、体积分数为 95%的酒
精,并用玻璃棒沿一个方向搅拌,在玻璃棒上的成团物即是 DNA (5)用适量的
浓硫酸处理提取物,再滴加二苯胺酸性溶液试剂数滴,反应后有蓝色出现即可证
明提取物是 DNA
13.如图表示以鸡血为实验材料进行 DNA 的粗提取与鉴定的操作程序,请
分析回答下列问题:
(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入________并搅拌,可使鸡血细胞破裂。
(2)步骤二中,过滤后收集含有 DNA 的________。
(3)步骤三、四的操作原理是
_________________________________________________________
_________________________________________________________。
步 骤 四 通 过 向 溶 液 中 加 入 ______ 调 节 NaCl 溶 液 的 物 质 的 量 浓 度 至
______mol/L 时,DNA 将会析出,过滤去除溶液中的杂质。
(4)步骤七:向步骤六过滤后的________中,加入等体积的冷却的________,
静置 2~3 min,溶液中会出现________色丝状物,这就是粗提取的 DNA。
(5)步骤八:DNA 遇____________试剂,沸水浴 5 min,冷却后,溶液呈
________色。
解析:红细胞应用蒸馏水,使之吸水涨破。DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中
溶解度不同,在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中 DNA 溶解,在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液
中 DNA 析出。可通过加入蒸馏水将 2 mol/L NaCl 溶液稀释为 0.14 mol/L 的 NaCl
溶液使 DNA 析出。DNA 不溶于冷酒精,遇二苯胺沸水浴加热呈蓝色。
答案:(1)蒸馏水 (2)滤液 (3)DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同,
通过控制 NaCl 溶液的浓度去除杂质 蒸馏水 0.14 (4)滤液 酒精 白 (5)二
苯胺 蓝
14.DNA 的粗提取与鉴定实验中,A、B、C、D、E 五个小组除下表中所列
处理方法不同外,其他操作步骤均相同且正确,但实验结果却不同。请回答下列
问题:
组别
实验
材料
提取核物质时
加入的溶液
去除杂质时
加入的溶液
DNA 鉴定时
加入的试剂
A 鸡血 蒸馏水
体积分数为 95%
的酒精(25 ℃)
二苯胺
B 菜花 蒸馏水
体积分数为 95%
的酒精(冷却)
双缩脲
C 人血浆 蒸馏水
体积分数为 95%
的酒精(冷却)
二苯胺
D
人血
细胞
2 mol/L 的
氯化钠
0.14 mol/L 的氯化
钠
双缩脲
E 鸡血 蒸馏水
体积分数为 95%
的酒精溶液(冷却)
二苯胺
(1)实验材料选择错误的组别是__________,其原因是
_________________________________________________________
_________________________________________________________。
(2) 若 实 验 步 骤( 不 包 括 实 验 材 料 )均 正 确 , 但 得 不 到 DNA 的 组 别 是
__________。
(3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是
_________________________________________________________;
蓝色较淡的是______,其原因是
_________________________________________________________
_________________________________________________________。
(4)B 组实验不成功的最主要原因是
_________________________________________________________
_________________________________________________________。
解析:(1)人的血浆中没有细胞结构,人成熟的红细胞没有细胞核,在这些
材料中不能得到 DNA 或得到的 DNA 很少。(2)血细胞中有少量的白细胞,其中
有 DNA,所以只有 C 组人血浆中没有 DNA。(3)冷却的酒精溶液对 DNA 有较好
的凝集效果,而 A 组中为 25 ℃的酒精溶液。(4)菜花细胞外有细胞壁起保护作用,
在蒸馏水中不会破裂,所以不能得到 DNA。
答案:(1)C、D 人的血浆中没有细胞结构,人成熟的红细胞中没有细胞核,
选用这些材料得不到 DNA 或得到的 DNA 很少 (2)C (3)A、E A 冷却的酒
精溶液对 DNA 的凝集效果较佳,而该组使用的是 25 ℃的酒精溶液 (4)菜花细
胞具有细胞壁,在蒸馏水中不能被破坏,得不到 DNA(应采用研磨的方法)