【生物】2021届一轮复习苏教版专题24　细胞工程与胚胎工程作业（江苏专用） 18页

专题24　细胞工程与胚胎工程 ‎【考情探究】‎ 课标解读 考情分析 备考指导 考点 考向 ‎1‎ 细胞工程 植物细胞工程 细胞工程与胚胎工程是现代生物工程技术的重要内容,其中的核移植技术、动物细胞融合及应用如单克隆抗体制备、胚胎移植等是本专题的高频考点,命题时常结合实例分析考查原理、关键步骤及结果等,有的试题兼顾考查动物细胞培养、细胞核移植、基因工程、胚胎移植等技术的综合运用。本专题在高考命题中难度一般,重视核心概念和技术原理的考查。植物组织培养技术和制备单克隆抗体技术、胚胎移植与人们生产、生活日益密切,预测将来也可能会作为热点在高考题中出现 在复习备考时,学会通过建模理解植物组织培养技术的操作方法和原理及获得的结果,在此基础上同样借助模型图解学习植物体细胞杂交技术,利用比较法理解动物细胞融合与植物体细胞融合的不同点,并借助教材中的示意图理解单克隆抗体制备的方法及过程,通过建立核移植的流程图理解核移植操作过程,通过体内受精和体外受精的比较理解体外受精与培养所需的条件等,综合细胞核移植技术、基因工程技术理解胚胎移植是这些技术的最后一道工序等;另外,在掌握了基础知识的基础上,通过综合性试题训练以提高知识的整合和迁移能力 动物细胞工程 ‎2‎ 胚胎工程 体内受精与早期胚胎 胚胎移植、胚胎分割与胚胎干细胞培养 ‎【真题探秘】‎ 基础篇 考点1　细胞工程 ‎【基础集训】　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2019江苏泰州一模,24)如图为植物组织培养过程示意图,下列叙述正确的是(多选)(　　)‎ 外植体→①→②→试管苗 A.外植体可以是植物体细胞、卵细胞或花药 B.②→试管苗过程的基础是细胞的分裂、分化 C.将①包上人造种皮即可获得人工种子 D.赤霉素和脱落酸也可用于植物组织培养 答案　ABD　‎ ‎2.(2019江苏南京、盐城二模,24)科学家将番茄和马铃薯细胞利用图示技术获得了“番茄—马铃薯”植株。下列有关叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.图示技术涉及的原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性等 B.过程②可用电激、聚乙二醇或灭活的病毒诱导原生质体融合 C.过程④⑤需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等 D.f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同 答案　ACD　‎ ‎3.(2018江苏扬、通、泰、徐、淮、宿二模,16)2018年1月国际顶尖学术期刊《Cell》杂志报道,我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆出两只猕猴。相关叙述错误的是(　　)‎ A.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性 B.研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体 C.培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同 D.克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能 答案　A　‎ 考点2　胚胎工程 ‎【基础集训】　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2019江苏如东一模,19)下列关于胚胎发育和胚胎工程的叙述,正确的是(　　)‎ A.在动物的饲料中添加一定量的促性腺激素能促使超数排卵 B.滋养层细胞发育成胎儿的胎膜和胎盘等结构发生在囊胚期 C.若在囊胚期进行胚胎分割,内细胞团需均等分割,滋养层则不必 D.从动物体内获取的精子能直接与卵细胞结合完成受精过程 答案　C　‎ ‎2.(2018江苏苏、锡、常、镇调研一,16)将鼠胚胎干细胞(ES细胞)种植于饲养层细胞上,添加干细胞因子、血小板生成素及动物细胞培养液,培养六天后,检测发现86%的细胞形态与结构特征呈现出造血干细胞样细胞(CD‎34‎‎+‎细胞)的特点。下列有关叙述错误的是(　　)‎ A.从早期胚胎中分离出来的细胞就是ES细胞 B.干细胞因子等物质可促进ES细胞分化形成CD‎34‎‎+‎细胞 C.ES细胞形成CD‎34‎‎+‎细胞的根本原因是基因的选择性表达 D.本实验结果尚不能支持“动物细胞具有全能性”的观点 答案　A　‎ 综合篇 提升　植物细胞工程与动物细胞工程的比较 ‎【综合集训】　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2019江苏南京、盐城三模,16)下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述,错误的是(　　)‎ A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖组织培养可获得脱毒植株 D.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物 答案　B　‎ ‎2.(2019江苏六合中学2月月考,24)下列有关细胞工程叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂 B.乳腺癌细胞比乳腺细胞更容易进行离体培养 C.生产单克隆抗体需要利用动物细胞培养技术 D.动物细胞融合和植物体细胞杂交都能形成杂交个体 答案　BC　‎ 应用篇 应用　世界首例体细胞克隆猴——萌萌哒“中中”和“华华”在中国诞生啦!‎ ‎【应用集训】‎ ‎　2018年1月中国科学家宣布,克隆猕猴“中中”和“华华”诞生,并已经分别健康生活了数周。这是世界上第一次采用和克隆羊多利相同技术手段获得的灵长类动物,将推动中国发展出基于非人灵长类疾病动物模型的医药研发,加速新药研发进程。请回答:‎ ‎(1)克隆猕猴“中中”和“华华”采用的核心技术是　　　　　　　、早期胚胎培养和胚胎移植。 ‎ ‎(2)由于猕猴是单胎动物,卵细胞的数量也限制了这项技术的成功。为了获得代孕猕猴和多个卵母细胞,需要对雌性猕猴进行的共同处理是　　　　　　　。 ‎ ‎(3)克隆猕猴采用的供体细胞是猕猴胎儿成纤维细胞,而不是成年个体成纤维细胞的原因是猕猴胎儿成纤维细胞分裂次数少,传代在10代以内,能保持正常的　　　　　　。当卵母细胞培养至　　　　　　　期时,可以用微型吸管同时吸出卵母细胞中的　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)为了选择雌性胚胎进行移植,需要对体外培养的胚胎进行性别鉴定,采用的方法是取囊胚期胚胎的　　　　　　　(滋养层细胞/内细胞团细胞)进行DNA分析性别鉴定。 ‎ ‎(5)在培养“中中”和“华华”的供体细胞时,观察到成纤维细胞由扁平梭形变成球形时,表明细胞正在发生　　　　。 ‎ ‎　答案　(1)体细胞核移植　(2)同期发情处理　(3)二倍体核型　MⅡ中(减数第二次分裂中)　细胞核和第一极体　(4)滋养层细胞　(5)癌变 ‎【五年高考】‎ 考点1　细胞工程　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2019江苏单科,20,2分)为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力,某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是(　　)‎ A.过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中 B.过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化 C.过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生 D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性 答案　D　‎ ‎2.(2019江苏单科,23,3分)如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-),在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长。下列叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合 B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长 C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产 D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础 答案　ACD　‎ ‎3.(2018江苏单科,8,2分)花药离体培养是重要的育种手段。下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图,下列叙述正确的是(　　)‎ A.为了防止微生物污染,过程①所用的花药需在70%乙醇中浸泡30 min B.过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化 C.过程③逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体 D.过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上 答案　C　‎ ‎4.(2018江苏单科,22,3分)如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去分化再诱导融合 B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现 C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关 D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因 答案　BC　‎ ‎5.(2016江苏单科,9,2分)下列有关细胞工程的叙述,正确的是(　　)‎ A.PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合 B.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂 C.骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体 D.核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体 答案　D　‎ ‎6.(2015天津理综,6,6分)2015年2月3日,英国议会下院通过一项历史性法案,允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。‎ 据图分析,下列叙述错误的是(　　)‎ A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D.三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术 答案　C　‎ ‎7.(2019课标全国Ⅱ,38,15分)植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。回答下列问题。‎ ‎(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比,这种微型繁殖技术的特点有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。 ‎ ‎(2)通过组织培养技术,可把植物组织细胞培养成胚状体,再通过人工种皮(人工薄膜)包装得到人工种子(如图所示),这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是　　　　　　　　　　　　　。人工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质,因此应含有植物激素、　　　　　　　和　　　　等几类物质。 ‎ ‎(3)用脱毒苗进行繁殖,可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗,可以选取植物的　　　　进行组织培养。 ‎ ‎(4)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(用流程图表示)。 ‎ 答案　(1)能保持植物原有的遗传特性,繁殖速度快　(2)有利于胚状体进行呼吸作用　矿质元素　糖　(3)茎尖　(4)含目的基因的细胞愈伤组织小植株 ‎8.(2019课标全国Ⅲ,38,15分)培养胡萝卜根组织可获得试管苗,获得试管苗的过程如图所示。‎ 回答下列问题。‎ ‎(1)利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株,这是因为植物细胞具有　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)步骤③切取的组织块中要带有形成层,原因是　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的　　　　过程,最终可形成试管苗。 ‎ ‎(4)步骤⑥要进行照光培养,其作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(5)经组织培养得到的植株,一般可保持原品种的　　　　　　,这种繁殖方式属于　　　　繁殖。 ‎ 答案　(1)全能性(或答:形成完整植株所需的全部基因)‎ ‎(2)形成层容易诱导形成愈伤组织 ‎(3)诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同　分化(或答:再分化)‎ ‎(4)诱导叶绿素的形成,使试管苗能够进行光合作用 ‎(5)遗传特性　无性 ‎9.(2016课标全国Ⅱ,40,15分)如图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。‎ 回答下列问题:‎ ‎(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为　　　　。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用　　　　的方法。②代表的过程是　　　　。 ‎ ‎(2)经过多次传代后,供体细胞中　　　　的稳定性会降低。因此,选材时必须关注传代次数。 ‎ ‎(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(15分)(1)XX或XY　显微操作　胚胎移植 ‎(2)遗传物质 ‎(3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 ‎(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性 考点2　胚胎工程　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎10.(2018江苏单科,10,2分)下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述,正确的是(　　)‎ A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理 B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植 C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应 D.利用胚胎分割技术,同卵多胎较同卵双胎成功率更高 答案　A　‎ ‎11.(2017江苏单科,11,2分)牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是(　　)‎ A.H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B.应选用原肠胚做雌雄鉴别 C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D.用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体 答案　D　‎ ‎12.(2017江苏单科,14,2分)下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述,错误的是(　　)‎ A.精子在获能液中于37 ℃、5%CO2条件下培养的目的是使精子获能 B.小鼠在特定光控周期条件下饲养,注射相关激素有促进超数排卵的作用 C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质,因此发育成的个体没有形态学差异 D.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育 答案　C　‎ ‎13.(2016江苏单科,11,2分)印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物,通过胚胎工程技术,可以让家猫代孕而繁育,主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是(　　)‎ A.步骤甲、乙分别是指精子获能、胚胎分割 B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞 C.受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于培养液 D.步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分基本相同 答案　B　‎ ‎14.(2015江苏单科,3,2分)下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述,正确的是(　　)‎ A.乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养 B.细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行 C.采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的 D.培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质 答案　C　‎ ‎15.(2015重庆理综,8,20分)某课题组为解决本地种奶牛产奶量低的问题,引进了含高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。‎ ‎(1)拟进行如下杂交:‎ ‎♂A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C 选择B作为母本,原因之一是胚胎能在母体内正常　　　　　　　　　　　　。若C中的母牛表现为适宜本地生长,但产奶量并未提高,说明高产奶是　　　　性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛,根据现有类型,最佳杂交组合是　　　　　　,后代中出现这种母牛的概率是　　　　(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。 ‎ ‎(2)用以上最佳组合,按以下流程可加速获得优良个体。‎ 精子要具有受精能力,需对其进行　　　　　　　　处理;卵子的成熟在过程　　　　‎ 中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖,其作用是　　　　。为筛选出具有优良性状的母牛,过程⑤前应鉴定胚胎的　　　　　　　　　　　　　　　。子代母牛的优良性状与过程　　　　的基因重组有关。 ‎ ‎(3)为了提高已有胚胎的利用率,可采用　　　　技术。 ‎ 答案　(20分)(1)生长发育或胚胎发育　隐性　♂A×♀C　1/8‎ ‎(2)获能或增强活力　③　供能　性别、高产奶和适应生长的基因 ‎②　(3)胚胎分割 ‎16.(2015山东理综,36,12分)治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如图:‎ ‎(1)过程①采用的是细胞工程中的　　　　技术,过程②采用的是胚胎工程中的　　　　技术。 ‎ ‎(2)体细胞进行体外培养时,所需气体主要有O2和CO2,其中CO2的作用是维持培养液(基)的　　　　。 ‎ ‎(3)如果克隆过程中需进行基因改造,在构建基因表达载体(重组载体)时必须使用　　　　　　　　　　　　和　　　　　　　　　两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外,还需有　　　　基因,以便选出成功导入基因表达载体的细胞。 ‎ ‎(4)胚胎干细胞可以来自囊胚中的　　　　。在一定条件下,胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体　　　　(填“A”或“B”),则不会发生免疫排斥反应。 ‎ 答案　(1)(体细胞)核移植　(早期)胚胎培养　(2)pH(或:酸碱度)　(3)限制性(核酸)内切酶(或:限制酶)　DNA连接酶(注:两空可颠倒)　标记　(4)内细胞团　B 教师专用题组　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2014江苏单科,19,2分)杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点,被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示,相关叙述正确的是(　　)‎ A.为了获得更多的卵母细胞,需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理 B.从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精 C.为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应,应注射免疫抑制剂 D.为了进一步扩大繁殖规模,可通过胚胎分割技术获得同卵双胎 答案　D　‎ ‎2.(2013江苏单科,11,2分)某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植,可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能选用的是(　　)‎ A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗 B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗 C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上 D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养 答案　B　‎ ‎3.(2013江苏单科,13,2分)软骨发育不全为常染色体显性遗传病,基因型为HH的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者,希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是　(　　)‎ A.首先经超排卵处理后进行体外受精 B.从囊胚中分离细胞,培养后检测基因型 C.根据检测结果筛选基因型为hh的胚胎 D.将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫 答案　D　‎ ‎4.(2012江苏单科,9,2分)通过胚胎移植技术,可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是(　　)‎ A.对供体和受体母牛都要进行相同激素处理 B.受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行 C.对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植 D.胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低 答案　D　‎ ‎5.(2011江苏单科,16,2分)下列有关植物组织培养的叙述,正确的是(　　)‎ A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得 答案　D　‎ ‎6.(2011江苏单科,14,2分)关于现代生物技术应用的叙述,错误的是(　　)‎ A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育 答案　B　‎ ‎7.(2011江苏单科,18,2分)下列关于胚胎工程的叙述,错误的是　　(　　)‎ A.体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精 B.受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植 C.早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清 D.试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术 答案　B　‎ ‎8.(2010江苏单科,16,2分)下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述,错误的是(　　)‎ A.对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理 B.人工授精后的一定时间内,收集供体原肠胚用于胚胎分割 C.利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎 D.一次给受体母羊植入多个胚胎,可增加双胞胎和多胞胎的比例 答案　B　‎ ‎9.(2009江苏单科,8,2分)下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述,正确的是(　　)‎ A.卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B.胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C.胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D.胚胎干细胞是一类未分化细胞,可从早期胚胎中分离获取 答案　D　‎ ‎10.(2015四川理综,2,6分)精子内的顶体由溶酶体特化而来。精卵识别后,顶体膜与精子细胞膜融合,释放溶酶体酶使卵子外层形成孔洞,以利于精卵融合形成受精卵。下列叙述正确的是　(　　)‎ A.顶体内储存的溶酶体酶是在精子的溶酶体中合成的 B.精子游向卵子所需的能量来自线粒体和细胞质基质 C.顶体膜和精子细胞膜融合体现生物膜的选择透过性 D.受精卵中的遗传物质一半来自父方另一半来自母方 答案　B　‎ ‎11.(2014江苏单科,29,9分)为了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题:‎ ‎(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为　　　　。 ‎ ‎(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。细胞干重在12 d后下降的原因有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　;培养液中蔗糖的作用是　　　　、　　　　。 ‎ ‎(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经　　　　处理,会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目,压片前常用纤维素酶和　　　　酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后,观察到染色体数为8n的细胞,合理的解释是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　、　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)为了更好地获得次生代谢产物,生产中采用植物细胞的固定化技术,其原理与酵母细胞固定化类似。下列说法正确的有　　　　(填序号)。 ‎ ‎①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋 ‎②必须在光照条件下培养 ‎③培养过程中需通空气 ‎④固定化后植物细胞生长会变慢 答案　(1)脱分化　(2)蔗糖浓度下降,pH降低　提供能源　调节渗透压　(3)秋水仙素(低温)　果胶　经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期　经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期　(4)①③④‎ ‎12.(2012江苏单科,31,8分)某研究组对籼稻开展了组织培养及相关研究,请回答下列问题:‎ ‎(1)2,4-D常用于籼稻愈伤组织的诱导,对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化,在配制分化培养基时需　　　　(填“升高”“保持”或“降低”)2,4-D的浓度。 ‎ ‎(2)当籼稻愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时,出现具有分生能力的绿色芽点,但不能继续出芽,通常在培养基中添加　　　　　　　,以促进幼苗形成。 ‎ ‎(3)研究中用显微镜可以观察到的现象是　　　　(填下列序号)。 ‎ ‎①绿色芽点细胞排列松散 ‎②刚融合的籼稻和稗草杂交细胞发生质壁分离 ‎③胚状体细胞中有叶绿体 ‎④分化的愈伤组织内各细胞的形态大小一致 ‎(4)经组织培养筛选获得的籼稻叶绿素突变体,其叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照,叶绿素总量不变。某同学用　　　　(填序号:①绿色②红色③蓝紫色④黄色)光照射突变体和对照叶片,检测到两者光合放氧速率差异不大。若取等量色素提取液进行层析,会发现突变体第　　　　条色素带(自上而下)窄于对照组。 ‎ ‎(5)胚乳(3n)由一个精子与两个极核受精发育而成。若用籼稻种子的胚乳诱导愈伤组织,培育三倍体,需适时剔除胚,以免胚的存在影响愈伤组织细胞的　　　　,还可避免再生苗中混有　　　　　　。 ‎ 答案　(8分)(1)降低　(2)适量的生长素　(3)③　(4)①④　4　(5)增殖与分化　二倍体幼苗 ‎13.(2018课标全国Ⅱ,38,15分)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5'末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。‎ 启动子 L1基因 GFP基因 终止子 ‎　 　　　　　　↑E1　　　　↑E2　　↑E3　↑E4‎ 回答下列问题:‎ ‎(1)据图推断,该团队在将甲插入质粒P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是　　　　。使用这两种酶进行酶切是为了保证　　　　　　,也是为了保证　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了　　　　和　　　　过程。 ‎ ‎(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的　　　　　　‎ 移入牛的　　　　　　　　中、体外培养、胚胎移植等。 ‎ ‎(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的　　　　(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。 ‎ 答案　(1)E1和E4　甲的完整　甲与载体正确连接　(2)转录　翻译　(3)细胞核　去核卵母细胞　(4)核DNA ‎14.(2018课标全国Ⅲ,38,15分)2018年《细胞》期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题:‎ ‎(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,核移植是指　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。通过核移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目　　　　(填“减半”“加倍”或“不变”)。 ‎ ‎(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度　　　　(填“大于”或“小于”)体细胞核移植,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)在哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常,所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目　　　　(填“相同”或“不同”),性染色体组合　　　　(填“相同”或“不同”)。 ‎ 答案　(1)将动物的一个细胞核,移入一个已去掉细胞核的卵母细胞　不变　(2)小于　胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易　(3)相同　不同 ‎【三年模拟】‎ 时间:40分钟　分值:50分　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 ‎ 一、选择题(每小题2分,共26分)‎ ‎1.(2019江苏苏、锡、常、镇三模,14)研究发现,经水浴处理后再组织培养获得的草莓幼苗脱毒效果更好。下列叙述错误的是(　　)‎ 小叶尚未展开 的匍匐茎1 cm40 ℃水浴 4 h剥取 茎尖接种 培养脱毒苗 A.病毒在植物体内的分布是不均匀的 B.40 ℃水浴可能有利于减慢病毒增殖扩散速度 C.剥取的茎尖需要进行无菌处理 D.脱毒苗具有病毒抗性,不会再感染病毒 答案　D　‎ ‎2.(2019江苏南通、连云港等七市二模,17)在单克隆抗体制备中,关于杂交瘤细胞制备的叙述,正确的是(　　)‎ A.可利用电激等物理方法直接诱导两个细胞的融合 B.可利用细胞中染色体的数目和形态筛选出杂交瘤细胞 C.利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理 D.用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体 答案　A　‎ ‎3.(2020届江苏苏州常熟中学模拟,18)如图为科研人员培育克隆猴“中中”的流程图。下列有关叙述正确的是(　　)‎ A.e的性状表现不受来源于b中的基因控制 B.图中涉及的技术有动物细胞培养、核移植、胚胎移植等 C.d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件 D.e诞生实验体现了a细胞的全能性 答案　B　‎ ‎4.(2019江苏扬州一模,18)通过细胞工程技术,可利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势,培育高产耐盐的杂种植株,实验流程如图所示。有关说法错误的是(　　)‎ A.①是纤维素酶和果胶酶,②是融合的原生质体 B.②到③过程中高尔基体活动明显增强 C.将愈伤组织包埋在人工种皮中,就形成了人工种子 D.④长成的植株需要选择的原因是有耐盐高产和耐盐不高产两种 答案　C　‎ ‎5.(2019江苏盐城中学模考,17)科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响,结果如图。相关叙述错误的是(　　)‎ A.培育脱毒苗所依据的原理有基因突变和细胞全能性 B.培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段 C.实验结果表明茎尖越小脱毒率越高,成苗率越低 D.根据本实验,培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.27 mm 答案　A　‎ ‎6.(2019江苏南通、连云港等七市三模,19)下列关于胚胎移植的叙述,错误的是(　　)‎ A.有利于提高良种母畜繁殖力,加快育种进程 B.是克隆两栖类动物必需的最后一道“工序”‎ C.有利于优良物种在不同国家和地区间的交换 D.人工辅助生殖的技术之一,为不孕不育夫妇带来福音 答案　B　‎ ‎7.(2020届山东等级考模拟,14)下列关于单克隆抗体制备的说法,正确的是(　　)‎ A.将特定抗原注射到小鼠体内,可以从小鼠血清中获得单克隆抗体 B.经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外培养时可分泌单克隆抗体 C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,发生融合的细胞均为杂交瘤细胞 D.筛选出杂交瘤细胞后,需利用特定抗原再次筛选分泌单克隆抗体的细胞 答案　D　‎ ‎8.(2020届江苏南京高三第一次学情调研,18)如图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图,有关叙述正确的是(　　)‎ A.此图表示桑椹胚,可作为胚胎移植的材料 B.此图中细胞还没有分化,图中①为透明带 C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D.进行胚胎分割时,一般取③中的细胞做性别鉴定 答案　C　‎ ‎9.(2019江苏南京、盐城二模,18)如图是利用奶牛乳腺生产血清白蛋白的过程。下列有关叙述错误的是(　　)‎ A.将牛组织置于清水中并加入一定量的胰蛋白酶处理可得到单细胞 B.图中涉及基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等技术 C.选用未受精的卵母细胞作为受体细胞是因为其具有让细胞核全能性得到表达的环境 D.若要获得同卵双胎或多胎,分割囊胚时需将内细胞团均等分割 答案　A　‎ ‎10.(2019江苏苏、锡、常、镇四市二模,16)组培苗在移栽前,一般需要炼苗,目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性。如图是不同炼苗方式组合对白兰地红枫组培苗移栽存活率的影响,以下叙述正确的是(　　)‎ A.炼苗初期应创设与室外环境相同的条件,促使组培苗适应环境 B.闭盖炼苗期间应控制的环境条件为:无菌、无光,并保持一定的湿度 C.白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖炼苗6 d后,再开盖炼苗3 d D.白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖炼苗时间的增加先升高后降低 答案　D　‎ ‎11.(2019江苏南京、盐城三模,24)下列有关动物细胞工程和胚胎工程的叙述,错误的是(多选)(　　)‎ A.动物细胞培养时,需对细胞进行一次脱分化和两次胰蛋白酶处理 B.适宜条件下进行动物细胞培养,细胞周期的长短不随细胞培养进程而改变 C.胚胎工程中常对桑椹胚或囊胚进行二分割,可以获得基因型完全相同的两个胚胎 D.为了防止早期胚胎培养过程中发生微生物污染,应将培养箱抽成真空以消毒、灭菌 答案　ABD　‎ ‎12.(2019江苏苏、锡、常、镇四市二模,24)先天性肾上腺皮质增生症是一种单基因遗传病,图为该病的某家系图,这对夫妇为了避免再次妊娠患儿,胚胎植入前进行了遗传学检测(PGD),检测结果如表,以下叙述正确的是(多选)(　　)‎ ‎　‎ 胚胎编号 PGD检测结果 EA1‎ 携带母源致病基因 EA2‎ 无致病基因 EA3‎ 携带母源致病基因 EA4‎ 携带母源致病基因 EA5‎ 携带父源致病基因 EA6‎ 致病基因纯合 EA7‎ 单细胞扩增失败 A.检测时应选择内细胞团的少许细胞 B.该过程中可能用到的技术有核移植、胚胎移植等 C.该技术可能会引发一定的伦理争议 D.EA1~EA5均可以作为植入的胚胎 答案　CD　‎ ‎13.(2019江苏苏、锡、常、镇四市二模,25)下列有关哺乳动物核移植技术的叙述正确的是(多选)(　　)‎ A.受体细胞常用处于减数第二次分裂中期的卵母细胞 B.注入受体细胞的既可以是细胞核,也可以是细胞 C.用物理或化学方法激活移植后的细胞,使其完成减数分裂过程 D.核移植技术的成功率很低,仍有很多问题需要研究 答案　ABD　‎ 二、非选择题(共24分)‎ ‎14.(2020届江苏启东中学期中,32)(14分)利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株,已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,技术人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力,再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,流程如图。‎ 据图回答下列问题。‎ ‎(1)该过程用到的工程技术有　　　　　　和　　　　　　。 ‎ ‎(2)过程①所需的酶是　　　　　　　　　,过程②PEG的作用是　　　　　　　　,经过②操作后,需筛选出融合的杂种细胞,显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体存在,可作为初步筛选杂种细胞的标志。 ‎ ‎(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是　　　　　　　　　　。原生质体经过细胞壁再生,进而分裂和脱分化形成　　　　。 ‎ ‎(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和双亲植株的根尖,制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的　　　　;将杂种植株栽培在含有　　　　的环境中,可筛选出具有高抗性的杂种植株。 ‎ 答案　(1)植物体细胞杂交　植物组织培养　(2)纤维素酶和果胶酶　促进原生质体的融合　(3)保持原生质体完整性　愈伤组织　(4)形态和数目　黑腐病菌 ‎15.(2019江苏无锡期末)(10分)为更快的提高肉羊生产效率和羊肉品质,某地种羊场引进德国特克塞尔羊。因引进数量有限,决定采用胚胎移植技术进行纯种扩群。‎ ‎(1)采卵前,选用特克塞尔纯种羊作为　　　　　　羊,注射激素FSH和LH诱导羊进行超数排卵,这两种激素都属于　　　　激素。另使用激素PGF使其发情,然后每间隔12 h输入经　　　　处理的精子一次,直至发情结束。 ‎ ‎(2)选用该种羊场饲养的东北半细毛羊作为　　　　羊,并利用如表所示的方法进行同期发情处理。‎ 两种同期发情方法的同期化结果比较 方法 处理羊数/只 处理48 h后发情羊的比例 方法1(PGF法)‎ ‎9‎ ‎56%‎ 方法2(孕酮+PGF法)‎ ‎9‎ ‎67%‎ 特克塞尔纯种羊和东北半细毛羊进行同期发情处理的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。与方法1相比,方法2的优点是　　　　　　。 ‎ 答案　(1)供体　促性腺　获能　(2)受体　为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境　同期发情率高