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- 2021-10-11 发布
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专题 4 酶的研究与应用
课题 3 酵母细胞的固定化
1.下列关于使用固定化酶技术生产高果糖浆的说法,正确的是
( )
A.高果糖浆的生产需要使用果糖异构酶
B.在反应柱内的顶端装上分布着许多小孔的筛板,防止异物进入
C.将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,果糖从反应柱下端流出
D.固定化酶技术复杂,成本较高
解析:生产高果糖浆时所用的酶应为葡萄糖异构酶,将这种酶固
定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子
底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔,而
反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上
端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转
化成果糖,从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年,大大降低
了生产成本。
答案:C
2.下列对固定化酶和固定化细胞的说法,正确的是 ( )
A.固定化酶的优势在于能催化一系列生化反应
B.固定化细胞技术一次只能固定一种酶
C.固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可以反复使用
D.固定化酶和固定化细胞都能反复使用,但酶的活性几乎不变
解析:某种固定化酶只能催化一种生化反应,其优势是酶可以反
复使用;固定化细胞技术一次能固定多种酶;固定化酶和固定化细胞
都能反复使用,但酶的活性下降。
答案:C
3.酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛应用于生产实践的各
个领域,下列有关叙述正确的是( )
A.用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶,但嚼服后
会失去疗效
B.固定化酵母细胞的常用方法是吸附法,这种方法对酵母细胞活
性影响最小
C.固定化酶的应用中,要控制好 pH、温度、溶解氧和营养条件
D.加酶洗衣粉中的酶常用特殊的化学物质层层包裹,这属于固定
化酶
解析:肠溶多酶片中的酶在胃液内会被胃蛋白酶消化,因此嚼服
会失去疗效,A 正确;固定化酵母细胞通常采用包埋法,因为细胞体
积较大,吸附法难以固定酵母细胞,B 错误;固定化酶的应用中,要
控制好 pH、温度等条件,以保证酶的活性,但是不一定需要营养条件,
C 错误;加酶洗衣粉中的酶常用特殊的化学物质层层包裹,目的是将
酶与洗衣粉的其他成分隔离,防止表面活性剂等影响酶的活性,这是
直接使用酶制剂,不属于固定化酶,D 错误。
答案:A
4.下列关于固定化酶技术中用到的反应柱,理解正确的是( )
A.反应物和酶均可自由通过反应柱
B.反应物和酶均不能通过反应柱
C.反应物能通过反应柱,酶不能通过反应柱
D.反应物不能通过反应柱,酶能通过反应柱
解析:反应柱下端有分布着小孔的筛板,反应物能过,酶不能过,
选 C。
答案:C
5.下图为固定化酶的反应柱示意图,请据图回答:
(1)请在横线上填出各标号的名称。
①________;②________;③______________。
(2)与一般酶制剂相比,固定化酶的突出优点是______________
_____________________________________________________。
固定化细胞的优点是__________________________________
________。
(3)③的作用是______________________________________
_____________________________________________________。
(4)制作固定化葡萄糖异构酶所用的方法有________、________或
________。
解析:(1)使用固定化酶技术要用到反应柱,下端有分布着小孔的
筛板,反应柱中填装固定化酶。(2)与一般的酶制剂相比,固定化酶不
仅能与反应物充分接触,还能与产物分离,并且可以反复利用。但是
与固定化细胞相比,固定化酶不能催化一系列的化学反应,并且固定
化细胞成本更低,操作更容易。(3)酶颗粒无法通过筛板,而反应溶液
却可以自由出入。(4)制作固定化葡萄糖异构酶的方法有将酶相互连接
起来(化学结合法),将酶吸附在载体表面上(物理吸附法)或将酶包埋在
细微网格中(包埋法)。
答案:(1)反应柱 固定化酶 分布着小孔的筛板
(2)既能与反应物接触,又能与产物分离,能被反复利用 成本更
低,操作更容易
(3)使反应溶液自由出入而阻碍酶颗粒通过
(4)化学结合法 物理吸附法 包埋法
[A 级 基础巩固]
1.对固定化细胞的叙述,正确的是( )
A.催化效率高,低耗能,低污染
B.对环境的条件非常敏感,容易失活
C.既能与反应物充分接触,又能与产物分离
D.成本低,操作简单,但反应效果可能很低
解析:参照固定化细胞的优点。
答案:C
2.固定化细胞对酶的活性影响最小,根本原因是( )
A.避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程
B.固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用
C.催化反应结束后,能被吸收和重复利用
D.细胞结构保证了各种酶在细胞内的化学反应中有效地发挥作用
解析:细胞内部环境稳定,利于各种酶发挥催化作用。
答案:D
3.关于固定化酶技术的说法正确的是( )
A.固定化酶技术就是固定反应物,使酶依附着载体围绕反应物旋
转的技术
B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应
C.固定化酶中的酶无法重复利用
D.固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术
解析:固定化酶是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的
技术。其优点是酶被固定在一定装置内,可重复利用;不足是无法同
时解决一系列酶促反应。
答案:D
4.下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( )
A.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显
B.固定化酶的应用中,要控制好 pH、温度和溶解氧
C.利用固定化酶降解水体中的有机磷农药,需提供适宜的营养条
件
D.利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物
解析:固定化细胞可连续催化多步反应;应用固定化酶需控制好
温度和 pH,无氧参与的反应不需控制溶解氧;利用固定化酶降解有机
磷农药,农药是反应底物,不需另外提供营养;利用固定化酵母细胞
发酵,糖类既作为反应底物,又作为酵母细胞生命活动的能源物质。
答案:A
5.大分子反应物应采用的固定化技术和理由是( )
A.固定化酶技术;可应用化学结合法或物理吸附法对酶固定,利
于大分子和酶的接触
B.固定化酶技术;可应用包埋法对酶固定,利于大分子和酶的接
触
C.固定化细胞技术;一般应用化学结合法或物理吸附法对细胞固
定,利于大分子和细胞的接触
D.固定化细胞技术;一般应用包埋法对细胞固定,利于大分子和
细胞的接触
解析:大分子反应物应采用的固定化技术是固定化酶技术,理由
是:一般用化学结合法或物理吸附法对酶固定,和包埋法相比,化学
结合法或物理吸附法有利于反应物与酶的接触。如采用固定化细胞技
术,则一般用包埋法对细胞固定,由于大分子颗粒比较大,反应物难
以进入包埋细胞的网格或颗粒,不利于反应的进行。
答案:A
6.下列关于固定化酶技术与固定化细胞技术之间关系的叙述中,
正确的是( )
A.固定化酶技术是固定化细胞技术的基础
B.固定化细胞技术是固定化酶技术的基础
C.固定化酶技术与固定化细胞技术是同时发展起来的
D.固定化细胞技术先于固定化酶技术
解析:固定化细胞技术是在固定化酶技术的基础上发展起来的,
解决了固定化酶不能催化一系列反应的问题,因此固定化酶技术先于
固定化细胞技术。
答案:A
B 级 能力训练
7.某实验小组进行固定化酵母细胞的制备,并开展游离酵母和固
定化酵母发酵产酒酒精度的比较。请回答下列问题:
(1)下图中钙离子的作用是使胶体聚沉,海藻酸盐起________的作
用。
凝胶珠
(2)该小组将制备好的固定化酵母与游离酵母分别放在一定的条件
下发酵,定时记录发酵液中酒精度的变化。
产酒酒精度的比较
时间/d 游离酵母 固定化酵母
0 0 0
2 1.0 2.5
4 2.1 4.2
6 3.2 5.0
8 3.9 5.4
10 4.3 6.0
12 4.6 6.4
① 实 验 过 程 中 的 “ 在 一 定 的 条 件 下 发 酵 ” 的 条 件 是
________________,要求条件相同是为了确保________。
②由表可知,固定化酵母和游离酵母发酵都能产生酒精,但固定
化 酵 母 在 发 酵 前 期 的 延 迟 期 比 游 离 酵 母 发 酵 前 期 的 延 迟 期 要
________。
解析:(1)海藻酸盐起载体的作用,用于包埋酵母细胞。
(2)酵母菌酒精发酵过程是细胞内酶的催化过程,需要在适宜的温
度、pH 等条件下进行。两组实验的条件相同,才能够确保无关变量相
同,即遵循单一变量原则。由表可知,在 12 天的发酵时间里,固定化
酵母发酵产酒酒精度从 0 度到 6.4 度,游离酵母发酵产酒酒精度从 0
度到 4.6 度,而且固定化酵母发酵产酒精度在第 4 天即达到 4.2 度,这
就表明固定化酵母的延迟期短。
答案:(1)包埋酵母细胞(或载体)
(2)适宜的温度、pH 等 单一变量 短
8.下图为酵母细胞固定化及其应用的相关图解,请据图回答问题。
(1)某实验小组利用海藻酸钠制备固定化酵母细胞,应使用图甲中
的方法[ ]________(填出号码及名称)。而制备固定化酶不宜用此方
法,原因是______________________________________________。
部 分 同 学 实 验 制 得 的 凝 胶 珠 如 图 乙 , 其 原 因 可 能 有
______________________、______________________等。
(2)某实验小组用图丙所示的装置来进行葡萄糖发酵。a 是
________,b 是________。从上端漏斗中加入反应液的浓度不能过高
的原因是________________________________________________
_____________________________________________________。
为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复利用,实验过程
一定要在________条件下进行。装置中长导管的作用是___________
______________________________________________________。
解析:酶的固定化适宜用化学结合法和物理吸附法;酵母细胞的
固定化适宜用包埋法。如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明
海藻酸钠的浓度偏高或混合液滴加速度过快(或针筒口离 CaCl2 溶液液
面距离过近)。
答案:(1)③ 包埋法 酶分子很小,容易从包埋材料中漏出 海
藻酸钠浓度过高 混合液滴加速度过快(或针筒口离 CaCl2 溶液液面距
离过近)
(2)固定化酵母细胞 反应柱 葡萄糖溶液的浓度过高会使酵母细
胞因失水过多而死亡 无菌 释放 CO2 并防止空气中的杂菌进入反应
柱
9.固定化酶是 20 世纪 60 年代迅速发展起来的一种技术。东北农
业大学科研人员利用双重固定法,即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连
接),海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶,研究固定化酶的性质,并
对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果(注:酶活
力为固定化酶催化化学反应的总效率,包括酶活性和酶的数量),分析
回答下列问题。
(1)从对温度变化适应性和应用范围的角度分析,由甲图所示结果
可以得出的结论是:_______________________________________
______________________________________________________。
(2)乙图曲线表明浓度为____________的海藻酸钠包埋效果最好,
当海藻酸钠浓度较低时,酶活力较低的原因是________________
_____________________________________________________。
(3)固定化酶的活力随使用次数的增多而下降,由丙图可知,固定
化酯酶一般可重复使用________次,之后酶活力明显下降。
(4)固定小麦酯酶不仅采用海藻酸钠直接包埋,而且用戊二醛作交
联剂,这是因为___________________________________________
______________________________________________________。
答案:(1)固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强且应用范
围较广 (2)3% 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密,酶分子容易漏出,
数量不足 (3)3
(4)酶分子很小,很容易从包埋材料中漏出
10.下面是制备固定化酵母细胞的实验步骤,请回答:
酵母细胞的活化→配制 CaCl2 溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸
钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
(1)在________状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于休
眠状态的微生物重新恢复____________状态。活化前应选择足够大的
容器,因为酵母细胞活化时________。
(2)影响实验成败的关键步骤是___________________________
______________。
(3)如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目
________。
(4)观察形成凝胶珠的颜色和形状,如果颜色过浅,说明_______;
如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明___________________
______________________________________________________。
(5)固定化酶技术一般不采用包埋法固定化,原因是__________
______________________________________________________。
解析:微生物一般在缺水干燥环境中进入休眠状态,活化就是让
处于休眠状态的微生物恢复正常生活状态。因为酵母细胞活化时体积
会增大,所以活化前应选择足够大的容器。在此实验中,配制海藻酸
钠溶液是影响实验成败的关键步骤。如果海藻酸钠浓度过低,形成凝
胶珠包埋酵母细胞数目就会减少;观察形成凝胶珠的颜色和形状,如
果颜色过浅,说明固定化酵母细胞数目较少,如果形成的凝胶珠不是
圆形或椭圆形,说明海藻酸钠浓度偏高,制作失败,需要重新配制;
因为酶分子很小,容易从包埋材料中漏出,所以制备固定化酶一般不
宜用包埋法。
答案:(1)缺水 正常的生活 体积增大 (2)配制海藻酸钠溶液
(3)少 (4)固定化酵母细胞数目较少 海藻酸钠浓度偏高,制作失败
(5)酶分子很小,容易从包埋材料中漏出
11.某一实验小组的同学,欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄
糖溶液发酵实验,实验材料及用具齐全。
(1)酵母细胞的固定采用的方法是________。
(2)请完善该实验小组的同学在制备固定化酵母细胞过程的步骤:
①配制 CaCl2 溶液时应用蒸馏水。
②海藻酸钠溶液应用______________加热。
③海藻酸钠溶液必须______________才能加入酵母细胞。
④注射器中的海藻酸钠和酵母细胞的混合物应滴入____________
中形成________。
(3)该实验小组用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵。
①为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复运用,实验过
程中,一定要在________条件下进行。
②加入反应液后的操作是关闭__________________________。
③装置的长导管起到什么作用?__________________________
____________________________________________________。
(4)试分析下图中,与用海藻酸钠作载体制备的固定化酵母细胞相
似的是( )
解析:由于细胞过大,难以被吸附或结合,因此多采用包埋法进
行固定化。操作过程中,必须等海藻酸钠溶液冷却后才能将其与酵母
细胞混合,否则酵母细胞会在高温下死亡。酵母菌利用葡萄糖的发酵
过程中会产生 CO2,为减小装置中的压力,应及时将其排出。
答案:(1)包埋法 (2)②小火或间断 ③冷却至室温 ④氯化钙溶
液 凝胶珠 (3)①无菌 ②活塞 1 和活塞 2 ③释放 CO2,减小反应
柱内压力并可防止其他微生物污染 (4)D