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- 2021-10-11 发布
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专题测试卷(五)
(时间:60分钟 满分:100分)
一、选择题(共 15小题,1~10小题每小题 3分,11~15小题每小
题 5分,共 55分。每小题只有一个选项符合题意。)
1.下列关于 DNA 和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的是
( )
A.都要用猪血细胞来做实验
B.提取细胞中的 DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞
C.在蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的 DNA
D.蛋白质和 DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化
解析:猪血细胞中不含 DNA,所以不能用于提取 DNA,A错误;
提取 DNA时,如果是用动物的细胞需要用蒸馏水涨破,如果用植物细
胞则不需要,而是用洗涤剂溶解细胞膜,B错误;在蛋白质提取和分
离过程中进行透析可以去除溶液中的小分子杂质,而 DNA属于大分子
物质,C错误;电泳法是常规分离纯化的方法,蛋白质和 DNA都可以
用电泳的方法进行分离纯化,D正确。
答案:D
2.如图表示细胞内 DNA复制和细胞外 PCR扩增两个过程,两反
应过程的条件中相同的是( )
A.模块 B.原料 C.酶 D.能量供应
解析:细胞内的 DNA复制和细胞外的 PCR扩增过程,需要的原
料相同,都是四种脱氧核苷酸。
答案:B
3.下列关于血红蛋白的提取和分离的叙述中,错误的是( )
A.红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关
B.凝胶柱中适量气泡的存在会提高分离的效果
C.凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方
法
D.判断纯化的蛋白质是否达到要求可以采用电泳法
答案:B
4.通常用哺乳动物的血液来提取和分离血红蛋白,下列叙述中正
确的是( )
A.实验时向新鲜的血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血红蛋白变
性
B.洗涤红细胞的目的是避免细胞粘连在一起
C.分离红细胞时要进行较长时间的高速离心
D.分离后血红蛋白还要通过凝胶色谱法将样品进一步纯化
解析:A错误,实验时向新鲜的血液中加入柠檬酸钠的目的是防
止血液凝固;B错误,洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白;C错误,分
离红细胞时要低速短时间离心;D正确,分离后血红蛋白还要通过凝
胶色谱法将样品进一步纯化。
答案:D
5.在 DNA粗提取与鉴定实验中,将第二次过滤获得的纱布上含
有的 DNA的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下:
序号 操作过程
① 放入 2 mol/L的 NaCl溶液,搅拌后过滤
② 再加 0.14 mol/L的 NaCl溶液,搅拌后过滤
③
再加入冷却的、同体积的 95%酒精溶液,用玻璃棒沿一个方向
搅拌,卷起丝状物
上述操作过程正确的是( )
A.①② B.①②③
C.①③ D.②③
解析:第二次过滤后纱布上的是粗提取的 DNA,此 DNA还含有
杂质,因此将其溶于 2 mol/L的 NaCl溶液中,再进行过滤,以除去不
溶于 2 mol/L的 NaCl溶液的杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却
的 95%酒精即可析出 DNA。然后挑出 DNA进行鉴定。答案为 C。
答案:C
6.在 PCR反应中一个 DNA片段在 6次循环后大约有多少个这样
的片段( )
A.8个 B.16个
C.32个 D.64个
解析:聚合酶链式反应(PCR)技术是在人为条件下进行的 DNA分
子复制技术,而 DNA复制为半保留方式,经过 6个循环即复制 6次,
则合成 26个 DNA 拷贝,原先有 1 个 DNA,则最终可得到 1×26=64
个 DNA分子拷贝。
答案:D
7.PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的 DNA
片段的核酸合成技术,如图表示合成过程。下列说法错误的是( )
A.甲过程高温使 DNA变性解旋,该过程不需要解旋酶的作用
B.丙过程用到的酶在高温下失活,因此在 PCR扩增时需要再添
加
C.如果把模板 DNA的两条链用 15N标记,游离的脱氧核苷酸不
做标记,循环 3次后,在形成的子代 DNA中含有 15N标记的 DNA占
25%
D.PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变
解析:PCR中解旋是通过高温进行的,故甲过程高温使 DNA 变
性解旋,该过程不需要解旋酶的作用,A正确;丙过程用到的酶为耐
高温的 DNA聚合酶,在高温下不会失活,因此在 PCR扩增时不需要
再添加,B错误;如果把模板 DNA的两条链用 15N标记,游离的脱氧
核苷酸不做标记,循环 3次后,形成的 DNA分子为 8个,而含有 15N
标记的DNA分子为 2个,故在形成的子代DNA中含有 15N标记的DNA
占 25%,C正确;PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变,D正
确。
答案:B
8.SCAR 标记技术即特异性序列扩增 DNA,是目前在育种应用
中首选的基因分子标记技术。下列有关 SCAR标记技术说法正确的是
( )
A.SCAR标记技术的原料是核糖核苷酸
B.SCAR标记技术反应的场所与转录的场所相同
C.SCAR标记技术反应的催化酶与转录的酶不同
D.SCAR标记技术无法应用于植物抗性育种
解析:由于合成 DNA片段,SCAR标记技术中的原料是脱氧核苷
酸,A 错误;SCAR 标记技术反应的场所与转录的场所不同,SCAR
标记技术进行的场所是体外进行的,B错误;SCAR 标记技术反应催
化的酶是 DNA聚合酶,转录的酶是 RNA聚合酶,故 SCAR标记技术
反应的催化酶与转录的酶不同,C正确;SCAR标记技术可以筛选出
目的基因应用于植物基因工程育种,D错误。
答案:C
9.利用 PCR技术扩增目的基因的过程中,需加入( )
A.耐高温的解旋酶以保证 DNA双链完全解开
B.2种已知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸
C.4种足量的核糖核苷酸以保证目的基因的扩增
D.一定量的盐酸和氢氧化钠溶液以维持 pH的稳定
解析:PCR技术中,采用高温使 DNA解旋,并没有使用解旋酶,
故 A错误;利用 PCR技术扩增 DNA的过程中,需要 2种已知核苷酸
序列的引物以保证核苷酸链的延伸,故 B 正确;PCR 技术的原理是
DNA复制,需要 4种足量的脱氧核糖核苷酸作为原料,故 C错误;利
用 PCR 技术扩增 DNA 的过程中,需要一定量的缓冲溶液以维持 pH
的稳定,因为 PCR 反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,故 D 错
误。
答案:B
10.在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,下列叙
述正确的是( )
A.用蒸馏水将 NaCl溶液浓度调至 0.14 mol/L,滤去析出物
B.调节 NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质
C.将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中,加入二苯胺试剂即呈
蓝色
D.由于 DNA对高温耐受性较差,故需向 DNA 滤液中加入冷酒
精
解析:DNA 在浓度为 0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度最低,因
此用蒸馏水将 NaCl溶液浓度调至 0.14 mol/L,DNA析出,应该去除
滤液,A错误;根据 DNA和蛋白质的溶解度以及对酶的耐受性不同,
调节 NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质,B正确;
将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂后要经过沸水
浴才能呈现蓝色,C错误;由于 DNA不溶于酒精,蛋白质溶于酒精,
因此需向 DNA滤液中加入冷酒精以进一步纯化 DNA,D错误。
答案:B
11.下列关于有关科学方法的叙述,错误的是( )
A.分离各种细胞器用差速离心法
B.叶绿体中色素提取用纸层析法
C.血红蛋白的提取和分离时用凝胶色谱法、电泳法
D.验证 DNA半保留复制用同位素标记法和密度梯度离心法
解析:由于各种细胞器的质量和密度不同,所以运用差速离心法,
可以将细胞中各种细胞器相互分离开来,A正确;叶绿体中色素分离
用纸层析法,B错误;分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法,也用电
泳法等,C正确;验证 DNA半保留复制时可用同位素标记法和密度梯
度离心法,D正确。
答案:B
12.将经处理破裂后的红细胞混合液以 2 000 r/min 速度离心 10
min后,离心管中溶液分为 4层,血红蛋白位于从下至上的( )
A.第一层 B.第二层
C.第三层 D.第四层
解析:分离血红蛋白溶液时,将搅拌好的混合液转移到离心管中,
经过中速长时离心后,可明显看到试管中溶液分为 4层,从上往下数,
第 1层为甲苯层,第 2层为脂溶性物质的沉淀层,第 3层为血红蛋白
水溶液,第 4层为杂质沉淀层。因此,血红蛋白位于从下至上的第二
层。
答案:B
13.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质,其分子大
小、电荷的性质和数量情况如图所示。下列叙述正确的是( )
A.将样品以 2 000 r/min的速度离心 10 min,若分子戊存在于沉
淀中,则分子甲也一定存在于沉淀中
B.若五种物质为蛋白质,则用凝胶色谱柱分离时,甲的移动速度
最快
C.将样品装入透析袋中透析 12 h,若分子乙保留在袋内,则分
子甲也保留在袋内
D.若五种物质为蛋白质,用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样
品中的蛋白质分子,则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远
解析:A.由于甲的分子量小于戊,将样品以 2 000 r/min的速度离
心 10 min,若分子戊存在于沉淀中,则分子甲不一定存在于沉淀中,
A错误;B.由于甲蛋白质分子量最小,最容易进入凝胶内部的通道,
路程最长,移动的速度最慢,B错误;C.分子量大小是甲<乙,透析
时分子乙保留在袋内,则分子甲不一定保留在袋内,C错误;D.SDS
-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子本身的大小,由于
甲和戊的分子量差距最小,因此二者之间的电泳带相距最近,D正确。
答案:D
14.利用 PCR技术将某 DNA分子扩增 n 代的过程中,下列叙述
错误的是 ( )
A.引物越短,PCR出来的非目标 DNA就越多
B.在适温延伸过程中,需要提供 ATP
C.引物中 G/C含量越高,复性温度越高
D.共有 2n-1对引物参与子代 DNA分子的合成
解析:在适温延伸过程中,不需要提供 ATP。
答案:B
15.蛋白质的提取和分离分为哪几步,依次是( )
A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化
C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定
D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定
解析:蛋白质的提取和分离的程序分为:样品处理、粗分离、纯
化、纯度鉴定四步。A项描述的是实验操作过程中的技术。
答案:C
二、非选择题(共 5小题,共 45分)
16.(8分)如右图是利用鸡血粗提取 DNA的基本操作,据图分析回
答:
(1)若乙为鸡血细胞液, 则甲为________, 该操作的实验目的
是__________________________________________________。
(2)若乙为含 DNA的浓 NaCl溶液,则甲为________,该操作的实
验目的是去除________(填“不溶”或“可溶”)性杂质。
(3)若该操作玻璃棒上能卷起白色丝状物,则甲为______________。
解析:(1)向鸡血细胞液中加蒸馏水,其目的是使鸡血细胞吸水涨
破释放出 DNA。
(2)向含 DNA的浓 NaCl 溶液中加入蒸馏水,DNA 溶解度降低会
析出,从而去除可溶性杂质。
(3)DNA和杂质分子在95%的冷酒精溶液中溶解度存在差异,DNA
不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精溶液,故可去除溶
于酒精溶液的杂质,向烧杯内溶解有 DNA的 NaCl溶液中加入 95%的
冷酒精溶液,可用玻璃棒卷起白色丝状物(DNA)。
答案:(1)蒸馏水 使鸡血细胞吸水涨破释放出 DNA
(2)蒸馏水 可溶
(3)95%的冷酒精溶液
17.(9分)用基因工程技术从分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮
基因,然后进行 PCR扩增。表 1和表 2分别表示用 PCR扩增固氮基
因的反应体系及反应条件。
表 1
PCR反
应体系
缓冲
液
脱氧核苷
酸
引物A 引物B
DNA聚
合酶
模板
DNA
50 μL 50 μL 0.5 μL 50 μL 0.5 μL 0.5 U 1~2 μL
加去离子
水补足至
50 μL
表 2
反应
条件
复性 延伸 30次循环后 保温
温度 55 ℃ 72 ℃ 适宜 4 ℃
时间 30 s 1 min 5~10 min 2 h
(1)从表 1和表 2中可得出,PCR技术与 DNA复制相比较,主要
区别之一是________。此外,从反应条件看,所使用的 DNA聚合酶应
具有________的特点。
每次循环都需要 2种引物的主要原因是__________________。
(2)在对固氮基因产物的生产研究中,需要从复杂的细胞混合物中
提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的
相关原理。
图甲 图乙
①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过
程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质,
原因______________________________________________。
②图乙所示实验模拟电泳现象,U型管左侧的颜色逐渐变深,原
因是__________________________________________________。
解析:PCR的含义是多聚酶链式反应;PCR技术反应的条件:稳
定的缓冲溶液环境、DNA 模板、合成引物、四种脱氧核苷酸、DNA
聚合酶、温控设备;PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易
于操作;TaqDNA聚合酶的特点是:耐高温。(1)从表 1中可得出,PCR
技术与 DNA复制相比较,不需要 ATP(或需要加入引物,或不需要解
旋酶等)。PCR技术中 DNA聚合酶应具有耐高温的特点。每次循环都
需要 2种引物的主要原因是DNA聚合酶只能从 3′端开始延伸DNA链。
(2)①因为蛋白质相对分子量较大,被排阻在凝胶颗粒外面,在颗粒之
间迅速通过,所以试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较
大的蛋白质。②Fe(OH)3胶体带正电荷,在电场作用下,向阴极移动,
导致 U型管左侧的颜色逐渐变深。
答案:(1)不需要 ATP(或需要加入引物,或不需要解旋酶等) 耐
高温 DNA聚合酶只能从 3′端开始延伸 DNA链
(2)①相对分子质量较大的蛋白质,从凝胶颗粒之间的间隙穿过凝
胶柱,路程短,移动速度较快,最先洗脱出来 ②Fe(OH)3胶体带正电
荷,在电场作用下,向阴极移动
18.(12分)在遗传病及刑侦破案中常需要对样品 DNA进行分析,
PCR 技术能快速扩增 DNA 片段,在几个小时内复制出上百万份的
DNA拷贝,有效地解决了因为样品中 DNA含量太低而难以对样品进
行分析研究的问题。据图回答相关问题。
a链 5′—G—G……T—C—3′ 5′—G—G—OH(引物Ⅰ)
b链 3′—C—C……A—G—5′ ________(引物Ⅱ)
95℃↓
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
55℃↓
5′—G—G—OH
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
72℃↓
________________ __________________
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ,并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置
于合适的位置。
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的 DNA分子。
(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用 32P标记,请分析循环一次
后生成的 DNA分子的特点:________,循环 n 次后生成的 DNA分子
中不含放射性的单链占总单链的比例为________。
(4)PCR反应过程的前提条件是________,PCR技术利用了 DNA
的________原理解决了这个问题。
(5)在对样品 DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要
去除这些组蛋白可加入的物质是________。
答案:(1)5′—G—A—OH(或 HO—A—G—5′)
55℃↓
HO—A—G—5′ 5′—G—G—OH
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
(2)3′—C—C……A—G—5′ 5′—G—G……T—C—3′
5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′
(3)每个 DNA分子各有一条链含 32P 1
2n
(4)DNA解旋 热变性 (5)蛋白酶
19.(8分)回答有关蛋白质分离和纯化的问题:
(1)要获得血清蛋白的粗制品,必须将含有柠檬酸钠的血液进行
________处理,然后将________装入透析袋中除去________。
(2)要获得血红蛋白,应如何破碎红细胞?________________。
(3)下图为血清蛋白通过醋酸纤维薄膜的电泳图谱,你认为含量最
多的蛋白质是________,含负电荷最多的球蛋白是________,相对分
子质量最大的球蛋白是________。
(4)电泳是目前应用最为普遍的________蛋白质的方法。
答案:(1)离心 上清液 小分子物质 (2)加蒸馏水使其胀破 (3)
清蛋白 α1球蛋白 γ球蛋白 (4)(分离)纯化
20.(8分)下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
(1)图中实验材料 A可以是________等,研磨前加入的 B应该是
_____________________________________________________。
(2)通过上述所示步骤得到滤液 C后,再向滤液中加入 2 mol/L的
NaCl溶液的目的是________,再过滤得到滤液 D,向滤液 D中加入蒸
馏水的目的是________________________________________。
(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,将含有一定杂质的 DNA
丝状物分别放入体积为 2 mL的 4种溶液中,经搅拌后过滤,获得如表
所示的 4种滤液,含 DNA最少的是滤液________。
1 B液中 研磨搅拌后过滤 滤液 E
2 2 mol/L NaCl溶液 搅拌后过滤 滤液 F
3 0.14 mol/L NaCl溶液 搅拌后过滤 滤液 G
4 冷却的 95%的酒精溶液 搅拌后过滤 滤液 H
(4)DNA鉴定的原理是_______________________________
_____________________________________________________。
解析:(1)用洋葱、菜花等破碎细胞时,加入一定量的洗涤剂和食
盐,洗涤剂可以溶解细胞膜,有利于 DNA 的释放,食盐主要成分是
NaCl,有利于 DNA的溶解。(2)在含有 DNA的滤液中,加入 2 mol/L
的 NaCl溶液,可以使 DNA溶解而杂质析出;在滤液 D中加入蒸馏水,
当 NaCl浓度为 0.14 mol/L时,DNA溶解度最小而析出。(3)在滤液 E
中,只是除去了部分杂质,则含 DNA 较多;在滤液 F 中,除去了较
多的蛋白质等,则含 DNA 最多;在滤液 E 中,因 DNA 析出,则含
DNA较少;在滤液 H中,因 DNA不溶于体积分数为 95%的冷酒精,
则含 DNA最少。(4)DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
答案:(1)洋葱(菜花等) 洗涤剂和食盐 (2)使 DNA 溶解 使
DNA(溶解度下降而沉淀)析出 (3)H
(4)在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色