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- 2021-10-11 发布
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课后分层检测案 7 动物细胞培养和核移植技术
[基础巩固练]
1.在将动物组织块分散成单个细胞时,可以使用胰蛋白酶。由此
不能推测出来的是( )
A.动物细胞之间可能依靠蛋白质相互联系
B.处理时一定要注意处理时间、加酶量
C.胰蛋白酶一定不会对动物细胞造成损伤
D.动物细胞培养液的 pH 应该与胰蛋白酶作用的适宜 pH 基本一
致
2.在动物细胞培养过程中,下列处理中不恰当的是( )
A.培养液和培养用具要进行无菌处理
B.提供种类齐全的营养物质
C.提供纯氧以保证细胞的呼吸作用
D.保证提供适宜的温度和 pH
3.动物细胞培养包括原代培养和传代培养,下列有关说法正确的
是( )
A.原代培养前要用胰蛋白酶处理,传代培养前不需要
B.目前使用的正常细胞通常是 10 代以内的细胞
C.当细胞培养到大约 50 代时进行传代培养
D.原代培养和传代培养所需要的培养液成分不同
4.下列关于动物体细胞核移植技术的叙述,不正确的是( )
A.用核移植技术得到克隆动物的过程体现了动物细胞的细胞核具
有全能性
B.动物体细胞核移植过程中用到了动物细胞培养和细胞融合技术
C.用于核移植的供体细胞一般都选用传代 10 代以内的细胞
D.用动物体细胞核移植方法生产的克隆动物是对核供体动物进行
100%的复制
5.某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性,准备对某
种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙
述正确的是( )
A.制备肝细胞悬液时,可用胃蛋白酶处理肝组织块
B.恒温培养箱中的 CO2 浓度维持在 5%左右,以促进细胞呼吸
C.为了保证细胞培养所需的无毒环境,需大量添加各种抗生素
D.本实验应设置对照实验,以检测药物对甲、乙细胞的毒性大小
6.从母羊甲的体细胞中取出细胞核,移植入母羊乙的去核卵母细
胞中,融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入另一只母羊丙的子
宫内,下列有关说法正确的是( )
A.生出小羊的性状与甲羊完全相同
B.一般来说生出小羊的核基因型与甲羊完全相同
C.生出小羊的遗传物质由甲、乙双亲共同决定,所以该过程为有
性生殖
D.生出小羊的性状由甲、乙、丙 3 个亲本的基因型与环境共同决
定
7.下列属于动物细胞培养与植物组织培养的区别的是( )
A.动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞培养过程中可发生基因重组,而植物组织培养不能
D.植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性
8.下列哪一项不属于克隆( )
A.利用 PCR 技术扩增目的基因
B.利用核移植技术培育出克隆绵羊
C.利用植物体细胞杂交技术培育出杂种植株
D.利用胡萝卜茎尖组织经植物组织培养得到脱毒苗
9.某研究小组进行药物实验时,以动物肝细胞为材料,测定药物
对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿
瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题。
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液
及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数
量________。
(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原
因是______________________。细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养箱
中进行,CO2 的作用是______________________。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长
________。药物实验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙
细胞可以传代的次数更________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞
悬液,需要用______________处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量
的__________。
[能力提升练]
10.实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下
列叙述错误的是( )
实验小鼠 ――→甲 皮肤组织 ――→乙 皮肤细胞 ――→丙 细胞培养 1
――→丁 细胞培养 2
A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒
B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C.丙过程得到的细胞核型发生变化
D.丁过程得到的细胞可能具有异质性
11.如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中 B、
E 两点表示经筛选、分装后继续培养。下列判断错误的是( )
A.B 点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养
B.接触抑制现象主要发生在 AB 段和 DE 段
C.分瓶后的每个培养瓶中的细胞群称为一个克隆
D.E 点后的细胞大多数具有异倍体核型,可连续传代
12.人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下,可分化为脂肪、肝、
神经等多种组织细胞。下图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程。
下列有关叙述错误的是( )
A.人脐带间充质干细胞属于专能干细胞
B.通过离心除去上清液可以除去胰蛋白酶
C.过程①通常用胰蛋白酶处理
D.出现接触抑制前,培养瓶中的细胞数量有可能呈“J”型增长
13.科学家培育克隆羊时,使用了三种细胞核的供体细胞,分别
将这些细胞核移入去核卵细胞的细胞质中,形成重组细胞,发育成重
组胚胎,这些重组胚胎的发育情况如下:
细胞核的供体细胞
类型
妊娠数/受体母
羊数
乳腺上皮细胞 1/13
胚胎成纤维细胞 4/10
早期胚胎细胞 14/27
据此分析不正确的是( )
A.早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高
B.克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全相同
C.体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植
D.重组细胞发育与去核卵细胞的细胞质有关
14.如图是某克隆羊培育过程模式图,试分析获得该克隆羊的生
殖方式、该克隆羊的基因型以及该克隆羊发育成熟时所分泌的主要性
激素依次是( )
A.无性生殖、Aa、雌性激素
B.无性生殖、aa、雄性激素
C.有性生殖、aa、雄性激素
D.有性生殖、AA、雌性激素
15.科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白
转基因克隆猪。基本流程是:从荧光水母中获取目的基因,与有关载
体重组,将其导入猪胚胎的成纤维细胞,经培养后再将成纤维细胞核
植入去核的卵母细胞中,最后培养出转基因克隆猪。
(1)成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时,就会停止分裂,
这种现象叫做细胞的__________。若将成纤维细胞进行传代培养,操
作时首先用__________________处理成细胞悬液。
(2)作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在________期。供
体细胞注入去核的卵母细胞中,常通过________(物理方法)激活重组细
胞,使其完成细胞分裂和发育进程。
(3)培养重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格
配制而成的培养基称为________培养基,但通常在培养基中还需要加
入适量的________等天然成分。细胞培养应在含 5%的 CO2 的恒温培养
箱中进行,CO2 的主要作用是________________。为了防止细胞培养
过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的________。
[素养养成练]
16.研究人员利用成年鼠嗅黏膜制备的嗅鞘细胞,在添加不同浓
度血清的培养基中培养并测量其细胞生长(增殖)情况,实验结果如图所
示。请据图分析回答:
(1)将获取的嗅黏膜用剪刀剪碎,并用某种酶处理一段时间,该操
作 的 生 物 学 意 义 是
____________________________________________________________
____________,
以便制成细胞悬液。该过程中,所使用的酶主要是________。
(2)将获得的细胞悬液及时离心,将分离得到的细胞加入适量的培
养基,摇匀后再离心获取细胞,这样操作的意义主要是去除________,
以免其对细胞正常的生命活动造成影响。将获得的细胞用特定培养基
置于培养箱内培养。进行原代培养时,细胞增殖的方式是________。
(3)据实验结果可知,当培养基中血清浓度为 40%~80%时,随血
清浓度升高,对细胞生长的促进作用不断________。
课后分层检测案 7
1.解析:在动物细胞培养时,胰蛋白酶可以将细胞间的蛋白质水
解,使细胞分散。使用时应把握好浓度、温度和时间,以免对动物细
胞造成损伤。
答案:C
2.解析:动物细胞培养过程中要保证无菌、无毒,需要对培养液
和培养用具进行无菌处理,A 正确;培养液中营养成分充足,以满足
细胞增殖的需要,B 正确;动物细胞培养过程需要的气体环境应为 95%
的空气和 5%的 CO2 的混合气体,空气中的 O2 保证其代谢所用,CO2
维持培养液的 pH,C 错误;细胞体外培养需要适宜温度和 pH,其中温
度一般与动物体温接近,D 正确。
答案:C
3.解析:在原代培养和传代培养之前均需要胰蛋白酶处理,A 错
误;目前使用的正常细胞通常为 10 代以内的细胞,B 正确;原代培养
是最初的细胞培养,即还没有进行分瓶的培养,分瓶后的培养称为传
代培养,C 错误;原代培养和传代培养所需的培养液成分相同,D 错
误。
答案:B
4.解析:用核移植技术得到克隆动物的过程体现了动物细胞的细
胞核具有全能性,A 正确;动物体细胞核移植过程中用到了动物细胞
培养和细胞融合技术,B 正确;传代 10 代以内的细胞能够保持正常的
二倍体核型,遗传物质没有发生改变,故一般都选传代 10 代以内的细
胞用作核移植的供体细胞,C 正确;通过动物体细胞核移植方法生产
的重组细胞的细胞质中的遗传物质主要来自卵母细胞,故用动物体细
胞核移植方法生产的克隆动物不是对核供体动物进行 100%的复制,D
错误。
答案:D
5.解析:在利用肝组织块制备肝细胞悬液时,常用胰蛋白酶,不
能使用胃蛋白酶,因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用,A 错
误;细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养箱中进行,CO2 的作用是维持
培养液的 pH,B 错误;抗生素是用来杀菌的,不是杀病毒的,C 错误;
本实验应设置对照实验,用添加药物的培养液分别培养甲、乙细胞,
根据死亡细胞占培养细胞的比例,以检测药物对甲、乙的毒性大小,D
正确。
答案:D
6.解析:核移植获得克隆动物的生殖方式是无性生殖,遗传物质
中甲羊的和乙羊的都有,因此认为生出的小羊性状完全同甲羊是不正
确的,应是主要性状与甲羊相同,核基因型一般与甲羊完全相同,因
此 B 正确。
答案:B
7.解析:动物细胞培养与植物组织培养的主要区别有:①培养基
的成分不同;②培育所得结果不同,植物能得到植株,动物不能得到
个体。
答案:A
8.解析:克隆也可以理解为复制、拷贝等,就是从原型中产生出
同样的复制品。利用 PCR 技术扩增目的基因属于分子水平的克隆;利
用核移植技术培育出克隆绵羊属于个体水平的克隆;利用植物体细胞
杂交技术培育出杂种植株遗传物质改变产生的不是复制品,不属于克
隆;利用植物组织培养获得脱毒苗,属于个体水平的克隆。
答案:C
9.解析:癌细胞具有无限增殖的特点,故相同培养条件下,肝肿
瘤细胞数量多于正常肝细胞数量。动物细胞培养需提供无菌环境,如
向培养液中加入适量的抗生素可防止细菌的污染;需提供一定的营养,
如向培养基中加入适量血清,以便补充合成培养基中缺乏的物质;需
提供一定的气体环境,如向恒温培养箱中加入 5%的 CO2,目的是维持
培养液的 pH。
答案:(1)多 (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培
养液的 pH (3)停止 多 胰蛋白酶 (4)抗生素
10.解析:获取动物组织进行动物细胞培养,为了避免杂菌污染,
取材之前要对实验小鼠进行消毒,A 正确。对皮肤组织用胰蛋白酶或
胶原蛋白酶处理,使组织分散成单个细胞,B 正确。丙过程为原代培
养,细胞前 10 代有丝分裂,核型未发生变化,C 错误。丁过程表示通
过选择或纯化从细胞系中获得具有特殊性质的细胞株的过程,细胞具
有异质性,D 正确。
答案:C
11.解析:人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养,
分瓶后的培养称为传代培养;当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,
细胞就会停止分裂增殖,即会发生接触抑制现象如 A~B 段;B 点之后
细胞继续生长,可见 B 点之后进行了传代培养,A 正确;在 AB 段和
DE 段细胞几乎生长停滞,可能发生了接触抑制,B 正确;细胞克隆的
最基本要求是必须保证分离出来的是一个细胞而不是多个细胞,C 错
误;已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系,称连续细胞系或无限细
胞系,无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,D 正确。
答案:C
12.解析:根据题意可知,人脐带间充质干细胞可以分化为脂肪、
肝、神经等多种组织细胞,故属于多能干细胞,A 错误;离心后由于
细胞沉淀在底层,胰蛋白酶在上清液中,B 正确;将剪碎的人脐带组
织块用胰蛋白酶分散成单个细胞,C 正确;出现接触抑制之前,细胞
数量的增长可能接近“J”型,D 正确。
答案:A
13.解析:分析表格数据可知,早期胚胎细胞作为细胞核的供体
细胞妊娠成功率最高,A 正确;克隆羊的培育用到了核移植、胚胎移
植技术,克隆羊的细胞核遗传信息来自细胞核的供体,细胞质的遗传
信息来自卵细胞的供体,因此,克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细
胞不完全相同,B 错误;对比表格中的数据可知:体细胞核移植成功
率低于胚胎细胞核移植成功率,即体细胞核移植难度高于胚胎细胞核
移植,C 正确;核移植中做受体细胞的都是卵细胞,可见重组细胞发
育与去核卵细胞的细胞质有关,D 正确。
答案:B
14.解析:克隆羊是利用了细胞核移植技术,其生殖方式为无性
生殖;该克隆羊继承了 B 羊的全部的细胞核基因和 A 羊的细胞质基因,
因此其基因型为 aa;由于 B 羊为雄性,因此该克隆羊亦为雄性,故该
克隆羊发育成熟时所分泌的主要性激素是雄性激素。
答案:B
15.解析:(1)细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时,就会停止分
裂,这种现象叫做细胞的接触抑制。若将成纤维细胞进行传代培养,
操作时首先用胰蛋白酶处理成细胞悬液。(2)选取处在 MⅡ中(减数第二
次分裂中)期的去核卵母细胞作为受体细胞;通过电脉冲(或电刺激)激
活重组细胞,使其完成减数分裂和发育进程。(3)将细胞所需的营养物
质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为合成培养基。动物细胞
所需的营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,
还需加入血清、血浆等天然物质。细胞培养应在含 5%的 CO2 的恒温培
养箱中进行,CO2 的主要作用是调节培养基的 pH。为了防止细胞培养
过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素。
答案:(1)接触抑制 胰蛋白酶
(2)MⅡ中(减数第二次分裂中) 电脉冲(或电刺激)
(3)合成 血清(或血浆) 调节培养基的 pH 抗生素
16.解析:(1)用剪刀将组织剪碎,并将剪碎的组织用酶处理一段
时间,使细胞充分分散开来;实验中通常选用胰蛋白酶或胶原蛋白酶
来处理动物组织。(2)细胞膜和细胞内部都含有蛋白质,如果将动物细
胞长期接触胰蛋白酶(或胶原蛋白酶),可能会造成动物细胞结构被破
坏;原代培养中,动物细胞进行的是有丝分裂。(3)当培养基中血清浓
度为 40%~80%时,血清对细胞生长仍有促进作用,但随着血清浓度
的升高,对细胞生长的促进作用不断下降。
答案:(1)使细胞分散开来 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (2)胰蛋白
酶(或胶原蛋白酶) 有丝分裂 (3)下降