复习资料：认识高中生物试剂 8页

一、高中生物常用试剂或药品的用途1．NaOH溶液：用于吸收CO2或改变溶液的pH。2．Ca(OH)2溶液（澄清石灰水）：鉴定CO2，用于研究光合作用和呼吸作用。能够破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨是滑脱，提高出油率。3．Ca2+、CaCl2溶液：用于基因工程，将受体细菌细胞用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性。4．HCl溶液（盐酸）：①配制解离液：体积分数为95%酒精+质量分数为15%盐酸（解离液用于细胞有丝分裂的实验中解离根尖）体积分数为95%酒精+体积分数为15%盐酸（低温诱导染色体数目加倍的实验中解离根尖）（解离的目的：使组织中的细胞相互分离开）②改变溶液的pH：如探究pH对酶活性的影响③质量分数为8% HCl：（观察DNA和RNA在细胞的分布的实验）质量分数为8% HCl的作用：a.改变细胞膜的通透性，使染色剂迅速进入细胞；b.使染色体中DNA与蛋白质分离，利于DNA与染色剂的结合。5．NaHCO3溶液：光合作用时提供CO2，用于研究光合作用；作为酸碱缓冲剂。6．0.1g/mL 的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防止血液凝固7．酸碱缓冲剂（Na2CO3／NaHCO3，Na2HPO4／NaH2PO4）：用于调节溶液pH。8．NaCl溶液：①质量分数为0.9%NaCl（配制生理盐水）：观察DNA和RNA在细胞的分布、观察线粒体等。质量分数为0.9%NaCl的作用：与细胞内液渗透压基本相同，维持细胞内水的含量，从而保持口腔上皮细胞正常形态。②0.05g/ml 的氯化钠：比植物细胞液的浓度大，均可用于质壁分离实验。③用于提取DNA：0.14mol/L——溶解度最低，2mol/L——溶解度高，0.015mol/L——溶解度高。9．酒精：①体积分数为70%酒精：酒精能渗入细菌体内，使组成细菌的蛋白质凝固。（皮肤及器械的消毒）（对小动物进行固定并防腐）②体积分数为50%酒精：洗去浮色③体积分数为95%的冷酒精：提纯DNA。④体积分数为95%的酒精：Ⅰ.提取绿叶中的色素（体积分数为95%的酒精+适量的无水碳酸钠）Ⅱ.配制层析液（体积分数为95%的酒精；或9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合）Ⅲ.叶片脱色（德国植物学家萨克斯实验）Ⅳ.配制解离液（体积分数为95%酒精+质量分数为15%盐酸；或体积分数为95%酒精+体积分数为15%盐酸）、Ⅴ.冲洗卡诺氏固定液（低温诱导染色体数目加倍的实验中）⑤无水乙醇：Ⅰ.提取绿叶中的色素Ⅱ.配制卡诺氏固定液（3份无水乙醇与1份冰醋酸混合均匀）10．蔗糖溶液：配制蔗糖溶液（0.3g/mL），测定植物细胞液浓度或观察植物细胞质壁分离。若用0.1g/mL的硝酸钾溶液代替0.3g/mL的蔗糖溶液，先发生质壁分离，后自动复原。11．清水：①用于制作临时装片和使已经发生质壁分离的细胞复原。\n②用于观察叶绿体的实验12．二苯胺试剂：用于DNA的鉴定。DNA遇二苯胺（沸水浴）会显蓝色。13．甲基绿试剂：检测（鉴定）DNA，呈绿色（常温）。14．吡罗红试剂：检测RNA，呈红色。吡罗红甲基绿染液（取A液20mL、B液80mL配成染色剂，使用时现配。A液：取吡罗红甲基绿粉1g，加入100mL蒸馏水溶解，放入棕色试剂瓶备用。B液：取乙酸钠16.4g，用水稀释至1000mL。再取稀释的乙酸钠30mL和乙酸20mL，加蒸馏水50mL，配成pH为4.8的溶液。）甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA的亲和力强，使DNA呈现绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现红色。用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。实验过程中先用甲基绿再滴加吡罗红是不合理的，因为这两种染料有竞争作用，如果先单独使用甲基绿染色，RNA也会亲和一些甲基绿，从而干扰实验现象。15．苔黑酚乙醇溶液：用于鉴定RNA 。RNA 在浓盐酸中与苔黑酚试剂共热显绿色16．质量分数为20%新鲜肝脏研磨液，马铃薯块茎，体积分数为3% 的过氧化氢，质量分数为3.5% 的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+ 的催化效率。（质量分数为20%新鲜肝脏研磨液，马铃薯块茎：含有H2O2酶，可促进H2O2分解产生O2。）17．质量分数为3% 的可溶性淀粉溶液、质量分数为3% 的蔗糖溶液、质量分数为2% 的新鲜淀粉酶溶液：用于探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。18．斐林试剂（甲液：0.1g/mL NaOH、乙液：0.05g/mLCuSO4）和班氏试剂：都可以鉴定可溶性还原性糖（50~60℃温水浴加热，砖红色沉淀Cu2O）。向2mL待测液中加入1mL斐林试剂（甲液和乙液等量混合均匀后再加入），50~60℃温水浴加热2~3min。若有砖红色沉淀，则待测液中存在还原糖。班氏试剂常用于尿糖的鉴定（砖红色沉淀）。19．双缩脲试剂（A液：0.1g/mL NaOH、B液：0.01g/mLCuSO4）：用于蛋白质的鉴定（紫色）。向2mL待测液中先加2mL试剂A液（0.1g/mL NaOH溶液），振荡摇匀，再加3~4 滴试剂B液（ 0.01g/mLCuSO4），摇匀，若待测液中存在蛋白质，则呈现紫色。组织液+先A液1mL+摇匀+后B液4滴+摇匀。20．苏丹Ⅲ染液和苏丹Ⅳ染液：用于脂肪鉴定，苏丹Ⅲ染液遇脂肪显橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇脂肪红色。21．碘液：用于鉴定淀粉，变蓝色。22．龙胆紫溶液或醋酸洋红液：碱性染料，用于染色体染色。龙胆紫溶液的配制方法：将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成。醋酸洋红液的配制方法：将体积分数为45%的醋酸100mL煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50oC过滤即可。龙胆紫溶液使染色体呈紫色，醋酸洋红液使染色体呈红色。23．焙花青铬矾溶液：将花粉细胞核染成蓝黑色。24．改良苯酚品红染液：检测染色体，红色。25．健那绿（JanusgreenB）染液：将活细胞中线粒体染色的专一性染料（活体染色剂），检测线粒体，使线粒体染呈现蓝绿色。新配制的质量分数为1%的健那绿染液：将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中，加温到30~40oC，使其充分溶解。26．重铬酸钾溶液：检测酒精，在酸性条件下，酒精使橙色的重铬酸钾变成灰绿色27．溴麝香酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄28．卡诺氏（Carnoy）固定液：3份无水乙醇与1份冰醋酸混合均匀。\n用于细胞有丝分裂根尖的固定。可保存最佳时期的花药和根尖。29．解离液：质量分数为15%盐酸和体积分数为95%酒精按1：1的比例配成，或体积分数为95%酒精+体积分数为15%盐酸按1：1的比例配成。解离液的作用：溶解细胞间质，使组织中的细胞相互分离开来。30．丙酮：用于提取叶绿体中的色素。31．层析液：用于提取绿叶中的色素。主要类型：①20份石油醚（在60～90oC下分馏出来的）（石油醚并不是醚类化合物，而与汽油煤油类似，是具有一定碳链长度的烷烃混合物）、2份丙酮和1份苯混合而成；②93号汽油③体积分数为95%的酒精④9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合；⑤汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。层析液作用：绿叶中的色素都能溶解在层析液中。在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随着层析液在滤纸扩散得快，反之则慢。32．二氧化硅：有助于研磨充分33．碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止研磨时叶绿体中的色素受破坏34．秋水仙素：用于多倍体育种、单倍体育种。其作用机理：作用于正在分裂的细胞（用于萌发中的种子或幼苗），能够抑制纺锤体的形成，导致染色体不能移向细胞两极，从而引起细胞内染色体数目加倍。 （它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶，有剧毒，使用时应特别注意。）35．滤纸：过滤或纸层析。36．纱布、尼龙布：过滤（尼龙布：过滤提取绿叶中的色素研磨液），遮光37．云母片：阻止生长素传递 38．琼脂：激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基。38．胰蛋白酶：①分解蛋白质（蛋白质消化）②可用于动物细胞培养，使组织细胞分散成单个细胞39．台盼蓝染剂：死细胞染成蓝色，活细胞不着色。（ 鉴定植物细胞是否死活：还可用质壁分离，或用大分子染料如红墨水来验证生物组织细胞膜的选择透过性或检验细胞的死活 ）40．冰块或循环冷水：降温。41．聚乙二醇（PEG ）：为诱导剂，诱导原生质体融合。42．亚硝酸、硫酸二乙酯：处理生物，能使生物发生基因突变。43．对氨基苯磺酸溶液：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应。44．N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，与N-1萘基乙二胺二盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。45．酚红：pH升高，指示剂将变红。用于鉴定尿素为唯一氮源的培养基中，细菌能否分解尿素。46．伊红美蓝：鉴定大肠杆菌的试剂47．刚果红：与纤维素形成红色复合物，不与纤维二糖和葡萄糖发生反应。可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。48．质量分数为0.1%氯化汞溶液、质量分数为1%次氯酸钙溶液、饱和漂白粉溶液、体积分数为20%次氯酸钠溶液：实验材料消毒\n49．纤维素酶和果胶酶：分解植物细胞壁50．海藻酸钠：用于包埋法固定化细胞51．肝素和Ca2+A78132：精子获能处理52．百里酚蓝(麝香草酚蓝)：测定溶液酸碱度二、实验方法归纳（一）实验结果的显示方法 1、光合速率：净光合速率：O2的释放量，CO2的吸收量，有机物的积累量真正光合速率：O2的产生量，CO2的固定量，有机物的制造量 2、呼吸速率： O2的吸收量，CO2的释放量，有机物的消耗量3、原子转移途径：放射性同位素示踪法 4、细胞液浓度大小：质壁分离 5、细胞是否死亡：质壁分离、染色剂染色 6、甲状腺激素作用：动物耗氧量、发育速度等（甲状腺激素多，耗氧量多，提前发育）7、胰岛素作用：动物活动状态（胰岛素多，昏睡）8、生长激素作用：生长速度（体重变化、身高变化） （二）实验条件的控制方法 1、增加水中氧气：泵入空气、或吹气、或放入绿色植物 2、减少水中氧气：容器密封、或油膜覆盖、或用凉开水 3、除去容器中的CO2：NaOH溶液或KOH溶液 4、除去叶片中原有淀粉：置于黑暗环境一昼夜 5、除去绿叶中的色素：酒精加热， 酒精要隔水加热（水浴）6、避免光合作用对呼吸作用的干扰：（测呼吸速率时）：植株遮光 7、如何得到单色光：棱镜色散或彩色薄膜滤光（如绿色大棚主要透过绿色光，其他光被吸收，叶绿素对绿光吸收最少，绿色大棚光合效率最低） 叶绿素主要吸收：蓝紫光和红光；胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光 8、血液抗凝：加入柠檬酸钠 9、各种细胞器的提取：细胞匀浆，差速离心 10、酶促反应：水浴保温11、还原糖的鉴定：水浴加热；12、用二苯胺试剂鉴定DNA：水浴煮沸加热；13、细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养。\nⅥⅦⅧ⑥2．教材部分实验中的变量实验自变量因变量无关变量比较过氧化氢酶和Fe3＋的催化效率催化剂的种类(过氧化氢酶、Fe3＋)催化效率的高低(以点燃但无火焰的卫生香燃烧的猛烈程度表示或以气泡产生速度表示)试管等用具的洁净度、环境温度、相同材料的量、各种试剂的量、反应时间等探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用底物的种类(淀粉、蔗糖)淀粉酶将淀粉水解(处理后加斐林试剂，水浴加热出现砖红色沉淀)，但不能水解蔗糖(处理后加斐林试剂并水浴加热，无砖红色沉淀出现)淀粉与蔗糖溶液的量、水浴的温度与处理时间、斐林试剂的使用量与加热时间、操作程序等植物向性运动的实验设计和观察①是否黑暗、单侧光照、均匀光照②改变幼苗空间位置以接受重力影响①幼苗弯曲状况②根的弯曲方向幼苗的种类、生长状况、环境温度、培养条件、处理的部位及装置的合理性等观察植物细胞的质壁分离和复原外界溶液的浓度(即高渗及低渗溶液)质壁分离(液泡失水缩小、颜色变深、原生质层与细胞壁分离)；质壁分离复原(液泡恢复原状、颜色变浅、原生质层恢复原状)分离与复原现象的观察时间；装片的洁净度及临时装片的制作；材料的选择等温度对酶活性的影响温度(60℃热水、沸水、冰块)加碘液后溶液颜色的变化试管的洁净度、淀粉溶液的量、不同温度处理时间的长短、操作程序、碘液的加入量等设计实验观察生长素或生长素类似物对植物生长发育的影响生长素(或生长素类似物)的不同浓度①扦插枝条的生根状况的差异②果实发育状况的差异③落花落果状况在使用前后的差异实验材料的一致性、激素浓度的准确性、处理时间的一致性等\n⑦酸碱指示剂(291～298K)--------------------------------------------------------------------------------溶液的组成变色pH范围颜色变化溶液配制方法甲基紫(第一变色范围)0.13～0.5绿1g·L-1或0.5g·L-1的水溶液苦味酸0.1.3无色～黄色1g·L-1水溶液甲基绿0.2.0浅蓝0.5g·L-1水溶液孔雀绿(第一变色范围)0.13～2.0浅蓝～绿1g·L-1水溶液甲酚红(第一变色范围)0.1.8黄0.04g指示剂溶于100mL50％乙醇中甲基紫(第二变色范围)1.1.5蓝1g·L-1水溶液百里酚蓝(麝香草酚蓝)(第一变色范围)1.2.8黄0.1g指示剂溶于100mL20％乙醇中甲基紫(第三变色范围)2.3.0紫1g·L-1水溶液茜素黄R(第一变色范围)1.3.3黄1g·L-1水溶液二甲基黄2.4.0黄0.1g或0.01g指示剂溶于100mL90％乙醇中甲基橙3.4.4橙黄1g·L-1水溶液溴酚蓝3.4.6蓝0.1g指示剂溶于100mL20％乙醇中刚果红3.5.2蓝紫～红1g·L-1水溶液茜素红S(第一变色范围)3.5.2紫1g·L-1水溶液溴甲酚绿3.5.4蓝0.1g指示剂溶于100mL20％乙醇中甲基红4.6.2黄0.1g或0.2g指示剂溶于100mL60％乙醇中溴酚红5.6.8红0.1g或0.04g指示剂溶于100mL20％乙醇中溴甲酚紫5.6.8紫红0.1g指示剂溶于100mL20％乙醇中溴百里酚蓝6.7.6蓝0.05g指示剂溶于100mL20％乙醇中中性红6.8.0亮黄0.1g指示剂溶于100mL60％乙醇中酚红6.8.0红0.1g指示剂溶于100mL20％乙醇中甲酚红7.8.8亮黄～紫红0.1g指示剂溶于100mL50％乙醇中百里酚蓝(麝香草酚蓝)(第二变色范围)8.9.0蓝参看第一变色范围酚酞8.10.0无色～紫红(1)0.1g指示剂溶于100mL60％乙醇中(2)1g酚酞溶于100mL90％乙醇中百里酚酞9.10.6无色～蓝0.1g指示剂溶于100mL90％乙醇中茜素红S(第二变色范围)10.12.0淡黄参看第一变色范围\n茜素黄R(第二变色范围)10.12.1淡紫1g·L-1水溶液孔雀绿(第二变色范围)11.13.2蓝绿～无色参看第一变色范围达旦黄12.13.0红1g·L-1水溶液卡诺氏固定液适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖、花药等的固定.它有极快的渗透力,它的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,此外还能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色的效果不定根（adventitiousroot）是植物的茎或叶上所发生的根。大多数情况下，不定根的发生是由于植物器官受伤或激素、病原微生物等外界因素的刺激，因此表现为植物的再生反应。不定根的发生扩大了植物的根系，使植物和细胞具有了再生能力，在植物器官扦插和组织培养中广泛使用。蕨类根即为不定根。转运-信使RNA（Transfer-messengerRNA）(abbreviatedtmRNA,alsoknownas10SaRNAandbyitsgeneticnameSsrA)转让信使RNA是一种细菌的RNA分子有双类似tRNA和信使RNA类似物业。tmRNA的形成一个核糖核蛋白复杂（tmRNP）的小蛋白B（市邮政局），伸长因子Tu（EF-Tu的），核糖体蛋白S1。在反式翻译，tmRNA的相关蛋白结合细菌核糖体在蛋白质生物合成的中间已经停滞不前，例如，当到达终点的信使RNA，已经失去了它的终止密码子。tmRNA的用途十分广泛，它回收停滞的核糖体，以及蛋白水解诱导标记为未完成的多肽，并有利于异常的信使RNA的降解。在大多数细菌进行这些功能均由一个标准单一块tmRNAs。在其它的细菌菌种，置换SSRA基因产生的两件式的tmRNA的接合，其中两个独立的RNA链通过碱基配对。核糖体是活细胞的蛋白质制造工厂，它们以细胞中核苷酸的遗传密码子进行蛋白质的生产，当然，信使RNA（mRNA）提供蛋白质翻译的遗传密码，核糖体缠绕在信使RNA分子，通过识别起始和终止信号进行蛋白质的生产。如果一个信号缺失，蛋白质的生产就不能完成，这样一来，核糖体的生产模式就会被阻塞。直到现在，我们并不清楚核糖体是如何克服这种蛋白质生产过程中的阻塞的，在修复过程中，即反式翻译过程中，一种额外的核酸分子（tmRNA）可以将mRNA分子和转移RNA分子（tRNA）联合起来，在蛋白质产生的过程中，转移RNA分子可以将正确的氨基酸分子转移到mRNA上，在蛋白质产生过程中，如果信号终止，tmRNA分子能够偷偷窜进来，解除蛋白质合成的封锁。但是tmRNA分子是如何穿过核糖体将其信息运输到mRNA上的，目前研究者并不清楚。目前，此过程可以用低温电子显微镜进行记录，这种方法可以记录单一大分子组分之间的空间和时间上相互作用，这都可以通过速冻核糖体在负192摄氏度的液态乙烷中完成，而且数以千计的蛋白颗粒二维投影可以被反投影成其三维结构。运用低温电子显微镜技术，研究者可以详细记录核糖体、tmRNA、特殊蛋白SmbP和延伸因子G之间的相互作用。在mRNA通道中，tmRNA可以悄悄地提供确实的信号信息，该通道径直穿过核糖体的中间，在小核糖体亚基的头部和身体结构域之间。研究者通过进行结构分析展示了核糖体和tmRNA之间在修复过程中的相互协作和相互作用。相关研究刊登在了近日的国际杂志Nature上。\n