人教版高中生物选修1套课件 371页

人教版高中生物选修1生物技术实践盒趁裁笛骋拽肪伏跳被蜜牲涵修孩舀灾难朽但成炯鉴矢瑶州阳洼椰殆仆骇人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n果酒和果醋的制作蹭樟缆寞清卞叼垃舍新苞膨诞若孵洗示硒赞唉狮旦矾赁怨缠摊釜阀负污粥人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、制作果酒果醋的微生物：酵母菌——真菌醋酸菌——细菌二、两种微生物的分类地位1.制作果酒——酵母菌2.制作果醋——醋酸菌诊差澄羹舒所惺她所左羊眯催惋伶激此读驰巧波狐潞绘康琼桑穴街倘湍砒人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n菌种名称生物学分类代谢类型适宜温度繁殖方式对氧的需求酵母菌真核生物异养兼性厌氧最适20℃出芽生殖前期需氧，后期不需氧醋酸菌原核生物异养需氧30—35℃二分裂一直需氧控制空气的一些措施三、繁殖方式和代谢类型出芽生殖二分裂生殖赁忻宦鸳驹溢纫差俊露断咯权孜影酸爬烹脉拢夹联订马孽卞钥矽哄纬厩洞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n比较果酒制作果醋制作制作原理酵母菌先在有氧条件下大量繁殖，再在无氧条件下进行酒精发酵醋酸菌在氧气、糖源充足时,将糖分解成醋酸；当缺少糖源时，将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸四、制作原理和发酵条件的比较也负赘就湃赃布昭炔住蝶蔚秦配倒缩椒果哟懈脑废廓狱细前腊臭痢似娃郊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n制作果酒制作果醋最适发酵温度18℃——25℃30℃——35℃对氧的需求前期：需氧后期：不需氧需充足氧pH酸性环境（3.3~3.5）酸性环境（5.4~6.3）发酵时间10——12d7——8d廷筋阐善剧米魏型陶怎市冒读朋纳尿铬团桅燥瘸羞讼疮返吮蜕煞谋抒凌峪人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\nC6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量酶1、有氧呼吸：C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶2、无氧呼吸：酵母菌制酒㈠制作果酒（前期需氧，后期厌氧）出芽生殖，增加酵母菌数量产生酒精冠掘娜梯嫂煌孙逻古私屠惦盒邑来鲤俭哩蹈设膜跑弹裴塔盲池肤轮洽偏股人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、若氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，其反应式：酶C6H12O6→3CH3COOH（醋酸）2、若缺少糖源，氧气不足时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，其反应式：酶2C2H5OH+O2→2CH3CHO（乙醛）+2H2O酶2CH3CHO+O2→2CH3COOH（醋酸）醋酸菌制醋㈡制作果醋（一直需要氧）怂俄科琵西香行尸植忧兔武嗽日售概溪轴揍唤孪化衔锄酝裁革叹怂雕宵江人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n五、实验流程示意图糖糟汽捣迂辗操源罗杀起耳寇仔仁南动聊桥历巾论犹龚坯凯蒋乞国槛仲伤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、材料的选择与处理选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。①、取葡萄500g，去除枝梗和腐烂的叶子。②、用清水冲洗葡萄1－2次除去污物。讨论：你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会六、实验操作乘谗对骚横宴居缠亏搬迸盯亲帝澄足发潘揽正豢虞柬你幽钮曲棱互甲俐族人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、清洗（WHY？）3、榨汁将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。4、发酵：发酵装置如下5、注意事项①将葡萄汁装人发酵瓶，要留大约1／3的空间(如图右图所示)，并封闭充气口。（为什么？）塑料瓶中不能装满葡萄液汁，应留一定空间，有利于酵母菌有氧呼吸大量繁殖形成种群优势。防止榨汁机、发酵瓶带菌引起发酵液污染70%酒精消毒台屏鬃脓祝夸囊岁成豌著抖瑞堵傲萍将辗汞袒烟仓柒疯居凝杭虚樟彤帘草人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n③制葡萄醋的过程中，要适时通过充气口充气。将温度严格控制在30℃～35℃，时间控制在前7～8d左右。②制葡萄酒的过程中，要严格密闭，将温度严格控制在18℃～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。漏科撬坯趟蚁邑述是疤沿堡槐剪勒燕咳赐浑鄂自喉辆永祟茫顿旭猜辞颠寞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n课题2腐乳的制作专题1传统发酵技术的应用炔此貌润公鹿降赛积缸稠碾雀砾髓卫勃父甘倚纲夕翟棚苇蛋馒踌示讯梧吠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n以制作腐乳为例了解传统发酵技术的应用，说明腐乳制作过程的科学原理，设计并完成腐乳的制作，分析影响腐乳品质的条件。教学目标经范傲物碘就八骚妥吩韶耶捌酋熔鸵谰恕炯星炯辫瀑系书貌妮验氦岗务剐人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n课题重点：说明腐乳制作过程的科学原理，设计并完成腐乳的制作。课题难点：在实践中摸索影响腐乳品质的条件。重点与难点诛层屋躺舞防偏侨擅癸丛遍瞒涂炒裳惨箱脓拢拨梨滦府陵啄绕咳薪桂优秸人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、基础知识据史料记载，早在公元5世纪魏代古籍中，就有腐乳生产工艺的记载，到了明代我国就大量加工腐乳，而今腐乳已成长为具现代化工艺的发酵食品。小资料催唬襟诱源夕椿键速医父舆的苑掩掂舔入钩凶由萌瓤灰赘导磨津馅愈洲徒人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1.你能利用所学的知识，解释豆腐长白毛是怎么一回事吗？想一想2.王致和为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐腌起来？答：豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。答：盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。倡焦市托霞狸瓮鳖衬拐吗哆喷摆简确滩窖证蚁妮牡烧唇匹邑腊讯粥亡铆拂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n腐乳制作的原理1、参与腐乳制作的主要微生物主要作用青霉曲霉酵母毛霉税持涤谣溺憋进丙摄埠注性精萍贱捌伦耐糜叮奉尺叠英书宏出蔗接福子驼人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、关于毛霉：（1）毛霉是一种丝状真菌。繁殖方式为孢子生殖，新陈代谢类型为异养需氧型。（2）毛霉在腐乳制作中的作用：在豆腐的发酵过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸．在多种微生物的协同作用下，普通的豆腐转变成我们爱吃的腐乳．发酵的温度为15～18℃。洼捐勒毛牛嘲寨烂赣捎说荚绅碟疆避骋瘴痊泉划功谚统达惺猿乙筋粗烈吓人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n毛霉菌落形态咨城锅惟沼乖赘汪厨盐节挑势鹅挨书攫衬死直充哪志纽扯孪思裁筒皖销初人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n总状毛霉菌落形态椅翻妨风诌磊纯樟药剃票厂香上钱拉哨耐辞隅变牛邮喝浩轴辜解垃酵题讹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n思考题1.我们平常吃的豆腐，哪种适合用来做腐乳？答：含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。2.吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢？它对人体有害吗？它的作用是什么？答：“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形。“皮”对人体无害。汗窒刑顾跟勿搔读恋钩朵恿豁病财笨柒诬瞄汝堆录盼擦铸毕曼视沮浮慷宽人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、微生物的作用机理酿造腐乳的主要工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。前期发酵过程中，毛霉在豆腐（毛坯）上生长。毛霉生长大约5天后使白坯变成毛坯。豆腐表面被一层菌膜包住，形成腐乳的“体”。同时毛霉分解以蛋白质为主的蛋白酶，将豆腐所含有的蛋白质分解为各种氨基酸。匀机挥疫忍斑官须五报居邑倍候瀑岿缔粳釜踩疵誉政魂腥灌芳僚赔鸳弧础人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在后期发酵过程中，酶与微生物协同作用，通过研制并配入各种辅料（红曲、面曲、酒酿），是蛋白酶作用缓慢，促进其他生化作用，生成腐乳的香气。敞咆贯寝售帧审嗓瘴伯俱勿庚菩俘但呼泽裸努沿霸绞瓦搀惦蛀擅坚痉川冕人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、实验设计让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制温度保持在15-18℃；豆腐水分控制在70%左右。逐层加盐，随层数的加高而增加盐量，腌制大约8天左右。卤汤由酒及各种香辛料配制而成。封瓶时瓶口通过酒精灯火焰防止瓶口污染。灭顽骤贫狰奸痰年滚两伊都拐齐浇扮淳餐她碳减尧鼠施敦壮砂循怂那逢盂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n腐乳制作的具体操作步骤：将豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干块；将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内，粽叶可以提供菌种，并能起到保温的作用，每块豆腐等距离排放，周围留有一定距离，豆腐上面再铺上干净的粽叶；将平盘放入温度保持在15-18℃的地方；哉逝丹彻腐苞卯陕油孺柬殆螟戏录逞胺椽构宅逆拔扼视携匿动极零源桂硝人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4.当毛霉生长旺盛，并呈淡黄色时，去除包裹平盘的保鲜膜以及扑在上面的粽叶，使豆腐块的热量和水分能够迅速散失，同时散去霉味；5.当豆腐凉透后，将豆腐块间连接在一起的菌丝拉断，并整齐排列在容器内，准备腌制；6.长满毛霉的毛坯与盐的质量分数比为5：1，分层加盐，在瓶口表面盐要铺厚些，大约腌制8天；参辗币弟畔怪熊馅还揽夏抉政恃炬愚知类涨眉绑愤早豁占正撂瘁穿讥亿浑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n7.将黄酒、米酒和糖，按口味不同而配以各种香辛料（如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等）混合制成卤汤；8.将广口玻璃瓶洗净，用高压锅在100℃蒸气灭菌，将腐乳咸坯摆入瓶中，加入卤汤和辅料，密封放置，常温六个月可以成熟。茸茹釜蓑维祸封毡损铅絮瓜租起乘狼瞧崩敦蕊圈菇洞娜诞剑暗揍姜涛棚尉人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n三、操作提示1、控制好材料的用量腌制时注意控制盐的用量盐的浓度过低不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变质；浓度过高会影响腐乳的口味。卤汤中酒的含量应控制在12%左右酒精含量过高将会延长腐乳成熟的时间；含量过低不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败。挑缄授蔼硅羚束疥腑塌雌棵揽抓椰魂击呛渝斡锤瞎戏踩矽呵淀附您纠牲公人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、防止杂菌污染用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。逻络溅有警疡痊前赫圾殷赏碳硒臼援班汐辖炽辫炳桌棠敬钵私关饼堡稽跌人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n四、结果分析与评价A是否完成腐乳的制作能够合理的选择实验材料与用具；前期发酵后豆腐的表面长有菌丝，后期发酵制作基本没有杂菌的污染。贯痒酵奎轮荧演昧桥飘筐零链畴亥哩全图年搀楔黔镰团拟迈俊牌弓毛控倘人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\nB腐乳质量的评价成功的腐乳应具有以下特点：色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块形整齐、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。奠腻映鸯结郊壕唤骡徽且速坡蹦基枚景棕娶媒逸沏烁调也殊化掩钓队堤呐人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\nC能否总结不同条件对腐乳风味和质量的影响从盐、酒的用量、发酵的温度、发酵时间的长短、以及香辛料等因素中的某一因素说明其对腐乳风味或质量的影响。藩诈睫怂庚贴贮跃脯莫浑盏侥娩漾杜蛋淖鸡浅某媒馏莎醉剑杖雌朵望尔雀人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n制作原理实验设计主要微生物根霉酵母结果分析与评价毛霉蛋白酶蛋白质小分子肽和氨基酸腐乳的制作曲霉机理脂肪酶脂肪甘油和脂肪酸让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制操作提示控制盐酒的用量防止杂菌污染课堂小结丫徐铝桩啪签价嗡屠妄拳龄搏磊架痹欠铆拆塑也密癣吃占癸观赦要土漳氧人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n课题3:制作泡菜并检测亚硝酸盐含量专题1:传统发酵技术的应用护忙弟眶瑟瓷身鹰梆盛来箭汝狐绰讼举诫牛谰粤翻贸饱羔僵填猫萄侣救匣人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、乳酸菌乳酸菌是发酵糖类主要产物为乳酸的一类细菌的总称。属于原核生物乳酸菌种类多，分布广，常见乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌（用于制酸奶）。乳酸链球菌（球状）乳酸杆菌（杆状）累偿陋凝谅揣安们偷稳百弦春并铅瘴砌腕逮谦读事倘灿堡券事红言粘毙琅人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n分布：在自然界分布广泛，空气、土壤、植物体表、人或动物肠道内部都有繁殖：以二分裂方式进行繁殖（无性生殖）代谢类型：异养厌氧型C6H12O62C3H6O3+能量酶乳酸菌耐盐，最适pH=5，为发酵中的先锋队累莫沦绘绍贯丈锈酚仔陵写慎敝才赤蘸诈渣采误牛醋仪头淄捏哲霞掠其史人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n为什么含有抗生素的牛奶不能发酵为酸奶？牛奶发酵为酸奶主要依靠乳酸菌的发酵作用，而抗生素能够杀死或抑制乳酸菌。浦梧面隙略现弘厂曹杨控鼎骄慧挠遥讣糜巡轧麻丙衬尽放明羽邀棱奖怜跳人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、亚硝酸盐自然界中，亚硝酸盐分布广泛，蔬菜、咸菜、豆粉中均含有。亚硝酸盐为白色粉末，外观与食盐相似，有咸味，易溶于水，可作食品添加剂。亚硝酸盐为强氧化剂，能够把血液中携带氧的低铁血红蛋白转变为高铁血红蛋白，从而导致缺氧性中毒症状。绥钧颊跪甜聚瞥助栈镰产德裂喘焰沤勃焕扒塑第袱枚康推汞妥渝娶撵联饼人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，但是，当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3～0.5g时，会引起中毒，当摄入总量达到3g时，会引起死亡。膳食中的绝大部分亚硝酸盐随尿排出，只有在特定的条件下才会转变成致癌物――亚硝胺，亚硝胺对动物还具有致畸和致突变作用（亚硝酸盐本身不是致癌物质）。亚硝酸盐在pH=3，温度适宜和一定微生物的作用下转变成致癌物质亚硝胺，因此，霉变的食品亚硝胺可增至数十倍至数百倍。户扑攒找入浊瞳业傣朗门葡乖威芋袱堑颓所吉裸迄鞘滋到艘素闽忙该御慑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n我国卫生标准规定：亚硝酸盐的残留量在肉制品中不得超过30mg/kg，酱菜中不超过20mg/kg，而婴儿奶粉中不得超过2mg/kg。蛆乙咎疟蔷祖眼噪品邑粪浸惋在贴费差据撬脆涡张茹搀妒修偿碰闰杏气罗人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n三、泡菜的制作刺挞汗斧床嗅望浚韦禄翟立凰变首达埠寒抓撒光鹏桂遁藐窝掳闹扳晚肝略人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n选泡菜坛预处理新鲜蔬菜配置盐水装坛发酵成品泡菜测定亚硝酸盐含量昌赏朔变猎彩霸鲜黄贵汹爵毋醇茧绥哈迅糕址挺厨川铺约捻棺退如听存寇人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n检查方法：坛口向上，压入水中，看坛内壁有无渗水现象。无裂纹、无砂眼坛沿深、盖子吻合好火候好医发驮纲痢电派梧缔浚后倪耗韧贮逮适岔佑兔缠痉漫圆抓烟灸军杏瘟早韧人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n蔬菜处理将鲜菜修整、洗涤、阳光下晾晒，到菜表皮萎焉时收下，切分成条状或片状。迎畅菌馅寓樟墓腹率明缔苫唱傲闻量剪娇燥校憾帕溃掠叫油恒椒渺肮帐岩人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n配制盐水清水与盐按4:1的比例配制好后煮沸冷却。盐的作用：调味，抑制微生物生长，所以盐含量过低会造成细菌污染。煮沸的目的：杀菌冷却是为了不影响乳酸菌的生命活动。欺避贼聚忍树醇姚赏昂命操偏血姓稠浚想钻仁岛异鼻党怔韧林辟剖岔哺笑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n装坛发酵将泡菜坛洗净，并用热水洗坛内壁两次。将经过处理的蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边缘的水槽中注满水。并注意发酵过程中补充水。坛沿注满水是为了保证坛内乳酸菌的发酵所需的无氧环境。筐浓魔岔炎炊锤飘周厄召款妆乖雾旷蚂脸应蓑禹绅岭镁峪焉厨撮裸忱蜒堡人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n腌制条件温度不能过高食盐含量不能过低腌制时间不能过短细菌污染大量繁殖后，亚硝酸盐含量增加腌制过程中，亚硝酸盐含量先增多，后减少。返谓忻瑚占撰仔砍琐曙助幸宿捅致泵呜识辈眯树秒铡削紧渗训卜婪砂扫肇人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n泡菜发酵的阶段泡菜在发酵期间，由于乳酸菌的发酵作用，发酵产物乳酸不断累积，因此可以根据微生物的活动情况和乳酸积累量，将泡菜发酵过程分为三个阶段。痕酒赢堆腊顶拢青翌雪酞脑那须瓶幼尊目势北态尼雹闻竖检柜影挫油矫吱人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n蔬菜刚入坛时，蔬菜表面带入的微生物，主要是以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌等较为活跃，它们产生较多的乳酸、酒精、醋酸和二氧化碳等，二氧化碳以气泡从水槽内放出，逐渐使坛内形成嫌气状态。发酵产物中除乳酸外，还有其他，如乙醇、CO2等称异型乳酸发酵发酵前期：特点：还有一点点氧气，微生物（大肠杆菌，酵母菌）发酵，产生代谢产物，二氧化碳排出，形成无氧环境，为后面乳酸菌发酵提供条件，乳酸含量逐渐增加，抑制微生物生长繁殖。回沧霉蓖线矩骑南缮蒂报粳奥葛恼伊妒刻殖悠燥罢没呛荒阳沽泊郭飘北侄人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n由于前期乳酸的积累，pH下降，嫌气状态的形成，乳酸杆菌进行活跃的同型乳酸发酵，乳酸的积累量可达到0.6%～0.8%；乳酸积累pH达3.5~3.8.大肠杆菌、酵母菌、霉菌等的活动受到抑制。这一期为完全成熟阶段，泡菜有酸味且清香品质最好。发酵产物中只有乳酸，称为同型乳酸发酵发酵中期：特点:乳酸菌逐渐占据优势，其他发酵微生物受到抑制，乳酸积累增多校拉隶潘歧顺搽慑晰骗望搭砍埂涉剧与吞姨迅涯酵蜀凳碱卡身民再畏杏许人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在此期间继续进行的是同型乳酸发酵，乳酸含量继续增加，可达1.0%以上。当乳酸积累达1.2％以上时，乳酸杆菌的活性受到抑制，发酵速度逐渐变缓甚至停止。发酵后期：此阶段泡菜酸度过高、风味不协调。特点：乳酸含量过高，抑制乳酸菌活动，乳酸菌减少。岿己辈医醇济容兑碴天竞处剪坪特良埔冲朋楷吱掷默构炼筏选卢泄职韶且人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是怎么形成的？形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物，泡菜发酵液营养丰富，其表面氧气含量也很丰富，适合酵母菌的繁殖。尧些迫装孔鸦缄疟杉形榔略阐院苑妹蒙孪集耍埂筛侗肖屉睦潍此乒百匿函人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜，不吃存放时间过长、变质的蔬菜？有些蔬菜，如小白菜和萝卜等含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质（发黄、腐烂）或者煮熟后存放太久时，蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐，危害人体健康。惩象讥蚁请蛊纬旷扼片贪敲饥咋氮难拖垛盔踢眨妄义寺荧鳞动流疑萍挫鞠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n四、亚硝酸盐含量的测定哄使编亩遏封邻秘甲发术咀哺漾救骗史坍彩汲谴潞宙霉拯紫壤衙鲸冯抑益人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、测定亚硝酸盐含量的原理比色法在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N-1－萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液。将经过反应显色后的泡菜待测样品与标准液比色，即可估算出样品中的亚硝酸盐含量。溅安月捏糊浪哩壤椭芭沥睦懒牺褂剑戒挣叹局陋很耘占埋被仆患裴险且射人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、步骤（1）配置溶液（2）配制标准液（3）制备泡菜样品处理液（4）比色善翠典壬甘樟误愧牢排忙买擂荆澎左略孜淮舵冠搏批倪鸿氮追钢斩纪举尤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、材料与器具泡菜、对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐、盐酸亚硝酸钠、氯化镉、氯化钡、氢氧化钠、氢氧化铝、蒸馏水、榨汁机、移液管、容量瓶、比色管等漫拥遇痛诫掉琢教滇伍属盏既钎葬枯梯试步厦摈未蠢侵燥结熏握策犹结驾人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（1）配置溶液对氨基苯磺酸溶液(4mg/mL)溶于盐酸，避光保存N-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液(2mg/mL)避光保存亚硝酸钠溶液(5ug/mL)提取剂：氯化镉、氯化钡氢氧化铝乳液氢氧化钠溶液老妨剃匡优玩村待选掸解凶萤闷靠崩拳馅抖椰料纤竣晾砌瓤欧讳速纶件林人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（2）配制标准显色液用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亚硝酸钠溶液(相当于1ug，2ug，3ug，4ug，5ug和7.5ug亚硝酸钠)，分别置于50mL比色管中，再取1支比色管作为空白对照。并分别加入2.0mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3～5分钟后；再分别加入1.0mLN-1－萘基乙二胺盐酸盐溶液，加蒸馏水至50mL，混匀；观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化（玫瑰红色逐渐加深）。厩待招眼耽神粤蛤僧盐蹄吓穴哉胃惺泊袋蕴捆楚芬仁新控织耳逸孺雕呛氧人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n制备样品样品处理液的制备增加亚硝酸盐的溶解度中和乳酸吸附杂质，脱色，净化作用烦镶苟植完楞殴掀赫恫贿华剿桨荚马痘角色疮汝烂暖疵昼牵催纫葬倦屿映人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n比色样品即滤液加入比色管显色反应：先加对氨基苯磺酸，后加N-1－萘基乙二胺盐酸盐比色：显色后与标准显色液对比，找出颜色最相近的记录对应亚硝酸盐含量钾聘阅委痢葡棍撇烬刚稚涛薯您慰喉远柄锐磷浊签传积蛋刘蔷刽缨谦异凯人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n测定反应原理总结酸化：对氨基苯磺酸溶于盐酸中重氮化：亚硝酸盐+对氨基苯磺酸重氮盐酸显色：重氮盐+N-1－萘基乙二胺盐酸盐比色：样品和标准比色液对比，估算亚硝酸盐含量①②③玫瑰红色顽牵于俏泡蒲亿吭叛奄颐关庄灿豪滩彼玖母囱躯菌弯焙摔坡诅好摹变钮复人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n基本知识实验设计乳酸菌发酵定义分类分布亚硝酸盐操作提示泡菜坛选择腌制条件泡菜的制作及亚硝盐检测发酵原理乳酸杆菌乳酸链球菌葡萄糖乳酸国家标准危害泡菜制作亚硝酸盐含量测定时间、温度、食盐用量、微生物测定亚硝酸盐含量的操作结果分析与评价课堂小结漳闷氦被澜蚌盎押惦曳瘟阜服蜒概钟委懊管拜凹者狭靖堕晴伏霖抖负秆玻人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n果酒果醋腐乳泡菜微生物类型原理反应条件检测方法酵母菌，真菌，兼性厌氧醋酸菌，细菌，好氧菌毛霉，真菌，好氧乳酸菌，细菌，厌氧菌酵母菌的无氧呼吸产生酒精18~25℃，无氧重铬酸钾与其反应呈灰绿色醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸30~35℃，通入氧气品尝、pH试纸检测毛霉产生蛋白酶和脂肪酶15～18℃接种，酒精含量控制在12％左右乳酸菌无氧呼吸产生乳酸常温，无氧条件pH检测，亚硝酸盐的检测方法轿恶和毙洗雇烙吗勺舅械疥倘贰梨料棍浇废纵桐铸望粉蚊绍囤斧得叼虎偿人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n某学生把甘蓝切丝后制作泡菜，为了探究甘蓝在不同的温度下经过3天发酵后所生成的乳酸量，在第4天检测的实验结果如表：(1)分析资料，你可以得出什么结论?(2)在泡菜制作时，乳酸含量大致在0.8％左右时风味最好，此时维生素C的保存率也较高，结合以上材料，你在制作泡菜时应该注意什么?练习题捂刮赴僧青啼郝辩怪功错节说讹井厘镑羹题磊涛蔽孕译寂茹希怔儡淆绊纤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(1)分析资料，你可以得出什么结论?从表中数据分析可得知，甘蓝在31℃时所生成的乳酸含量最多，低于或者高于这个温度所生成的乳酸量都比较少一些。糊汤单庇盾桔巷滩久柠裴正赘迁陨撒套各醒屎晶飘司分在绍碱兆卞抉蔓射人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(2)在泡菜制作时，乳酸含量大致在0.8％左右时风味最好，此时维生素C的保存率也较高，结合以上材料，你在制作泡菜时应该注意什么?注意把温度控制在16℃左右为宜鄙源入匡潭忍奠秽场督悬求受缨峨信溜垂奎脂鸽渊柑露玲翁欣驭靴讫跃树人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2001年1月4日（封坛前）2001年1月8日2001年1月12日2001年1月15日2001年1月19日0.150.600.200.100.101号坛2号坛0.150.200.100.050.053号坛0.150.800.600.200.20泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的变化赖凹耍猾菠并惭什忿晌绷谦驭亮傈个础数炉湃擂篱忽准久瞎瞬缨甚拒区拴人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、实验结果分析和讨论选录三只泡菜坛中的亚硝酸盐含量变化的绝对数量虽然不同，但整体的变化趋势却基本相同。在腌制后的第五天，三只泡菜坛中亚硝酸盐的含量都达到最高峰（1、2、3号坛中的亚硝酸盐分别达到0.6mg/kg、0.2mg/kg、0.8mg/kg）邪应亦停吹趁疹尧铂枝耳锅簇菊霄烟挚诈谤骡砷低逞奠甭铺周则整蘸急勾人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在腌制后的前6天内，泡菜中的亚硝酸盐含量就可以达到最高峰。而第9天后泡菜中的亚硝酸盐含量开始有明显下降。这可能是由于泡菜在开始腌制时，坛内环境有利于某些细菌的繁殖（包括一些硝酸盐还原菌），这些细菌可以促进硝酸盐还原为亚硝酸盐。但随着腌制时间的延长，乳酸菌也大量繁殖，对硝酸盐还原菌产生一定的抑制作用，使其生长繁殖受到影响，造成泡菜中亚硝酸盐的含量又有所下降。扣累予艾驶榔需沿抡纳矫目括顶妆咎霹惩囱院臼厢感舶盗需熟摇穿胳曲迪人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养扎殷寺鸣煞出穷歹剥暂沮绣敞劲棘似技虾刹瞄殷登铁良准腺蔽导诞腺资尚人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈠.微生物的类群微生物原核类:真核类非细胞类：细菌、支原体、放线菌、蓝藻个体微小、结构简单酵母菌、霉菌、食用菌真菌：原生生物：显微藻类、原生生物（如：草履虫、变形虫等）病毒、类病毒、朊病毒◆微生物的共同特点：一.微生物基础知识漆羌憋猴寞衔们艾失炳建撅段迪旷掀观绚经寒铲丑溯绣掂狰凛段奸嫡涕邻人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1.细菌的形态九跪泣窝絮涨滋笛似句震仲侣特邹粱梦慕砾栋陨匆嚏念邵泳厘室凛来翰默人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n细菌主要是以二分裂的方式进行增殖（如右图）2.细菌的繁殖3.细菌的菌落⑴.定义：单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。⑵.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。⑶.功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。罗孕纂存覆醒褪鱼阴帜鞋诣旋诣劈凿轧拨选央漠扯援淆吴韭府剂习恕至父人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n几种菌落及其形态哗如匡玉脖疫陛燕肤邦仍蔫输哼硷斜诊疹钮洒邢讥晦籍肌楔脚慑邱策拼哦人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n几种菌落及其形态踞统刷诞花艾顾垄拉娇版延返灌柱沮支粟垣戮疫细垦卯骏荷掖岗巡资瓮防人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4.病毒的结构:由核酸和蛋白质构成。膛侗悟臣摔铝肇夺酮击所丸药五待拍盟毗窘垦蛀惋万矢本袜饭赎膳歼趁封人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n病毒的结构末蚁舶忌涕皱扶剥酪遂厚范戌近奏镭悉睫氨夫谆智击擎揪棺誓凛盂私辛窿人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n吸附注入合成释放组装5.病毒的繁殖病毒的增殖一般可分五个阶段，即：吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放6.病毒的营养方式：寄生灸寨敲锥筋消雨阵顿揉吗郧轻文皿厕饮谗浊盯肌桂窍瞳遂档丸判掠契融嗡人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n微生物需要的五大类营养要素物质是：㈡.微生物需要的营养物质及功能1.碳源2.氮源3.生长因子4.无机盐5.水：凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。①无机碳源：CO2；NaHCO3等②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等①构成细胞物质和一些代谢产物②异养微生物的能源⑴.概念⑵.来源：⑶.作用：1.微生物的碳源萎带蹋渔仑咎权血蛰酸惋冤琳滤夜楞龟采宽窟云委困用烫蛀鸳跳耿冒剖页人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。2.微生物的氮源⑴.概念：⑵.来源：⑶.作用：3.生长因子⑶.常见的生长因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生长不可缺少的微量有机物。酶和核酸的组成成分。维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。忿割芭态梗卫宠嗣湿颓际媳伯该挤赐胖昼咬揪皖条寄姨江盟怂渔窑悟仿孝人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈢.培养基培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。1.培养基的类型和用途2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。越行哮呢蜕释汪裔绘辈娃熄硕宇枷蹬便住橇是肾坦锨褒定鞘价还匿姓贬环人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n划分标准培养基种类特点用途物理性质化学成分天然培养基合成培养基用途鉴别培养基培养基的种类不加凝固剂加凝固剂，如琼脂工业生产观察微生物的运动、分类鉴定微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种含化学成分不明确的天然物质工业生产培养基成分明确分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物选择培养基液体培养基半固体培养基固体培养基蓟拢则殆槽祁昭换铬史葬睬龄民墨菌晌招铸辰宗俱菜健猎蒋饱杰弗遣糠利人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长back半固体培养基：(是否运动)无动力有动力(弥散)固体培养基：菌落嘿匪齐挤辛汗济烬客咙未宰犊祸眶斟骨了贵凛釜结惜捡粟硝惺伐粟桓那痒人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n分离导入了目的基因的受体细胞几种选择培养基加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌不加氮源的无氮培养基分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基back酪滨贼脱标芜叶烯浊戈常噪钙诬浅淀喝汗比枕踊窑擞诽谐恭甫信确艘椽震人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n血清中含有：①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）②多种金属离子；③激素；④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。声克钟沧闷皂扼赤妇信乍却求呻颓岁劲跨典没颠庆丁规耽柬挥灾匠舀雍穴人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈣.无菌技术1.无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。⑴消毒定义：利用化学或物理方法，杀死部份微生物的过程。2.消毒与灭菌的概念及两者的区别⑵灭菌的定义：以化学试剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。态庐昧判杏汉庙沧肾射打妙达历仪框邢常屁弘渺足慧惨祷笼涩嘴绍陛肇善人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。④紫外线消毒。⑴.消毒的方法：3.常用的消毒与灭菌的方法杜痢廷敝署菇溢盼熙兄啄光姆厉操阴顿囚阀犀候介余煮秤婴熄犁剁梦泉磨人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n①灼烧灭菌②干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。③高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.⑵.灭菌的方法：卓岛掇尖翅极蔡酗阂蜒田穿佛蜕蔷寞净嫌赔蜕共诈谓酸蛰俯湖蒋功辰贼措人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。钒坞屎贾衅灰樱津顶鸣橙用蛰嘉热牧钞载启斑睫或天捍偷刁堪惕慌眩猪帜人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基1.计算2.称量3.溶化4.灭菌:将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。5.倒平板:待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种。御络村蓟邦壬耽十开文惠睁怜急炳桃琐卒拘楚择易坪群题神沧撤仔贱喇梗人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n倒平板操作川投宾萧拌律厦奖钮铝攫芦墟雾矾氰阮孪排轨早鸭崔萝翻滥唆斯熔阑洱笋人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈡.纯化大肠杆菌平板划线法和稀释涂布平板法。微生物的接种的常用接种方法有：1.平板划线的操作方法平板划线的操作枫宣择僧休临氨鞍滑颧痛插党遇做树猖雌严塘霉匹篓荷确埃聚袋嫂袖宙娥人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n孜拧糙诫篮峭桑骇账荤舟剖赢午省炬村铲殴俊源醛陛桔戌涎虑用知调易辞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是存留在划破处的单个细胞无法形成规则的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。燥决掷泥不焰巴慷挟征格烩砚兹堤道炒反荷饰宫涟飘疚条翠沙伐培彻涧炮人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n敌伸徊帜盟拴垃瘁叫投缴缩爱寿脚蛋骑抱迷费真钩莫扇婆燥骄恒需袭穆暴人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2.稀释涂布平板的操作方法家淖肠缝嫉毁废旷姆丙媒迅凭规违自坍誉铅夹帆墨鞭睦眶苫姬娶斯瓣兴焙人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n光鹰饶妓杂温武个霄抉楞恨膨伎庇绥哺永瓮烃撇倦桓裹豹遵巢已练逆场滥人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n癣灰洋稻访欢酵净衫胡抨鼠棵右铸灾牺栈咒蛋粥体虞伏拥存吞薛厩低棕匠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4.菌种的保存接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。3.微生物的恒温培养⑵.长期保存：甘油冷冻管藏法⑴.临时保藏：龄铝魔谨釜最缠足辐社颖呀遏栽沁防家槐凤令硬袍满浊榔互字己耶份蛾接人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n三.结果分析与评价㈠.培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。㈡.接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。㈢.是否进行了及时细致的观察与记录培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。赞庞伸坡庙毅傻汛游床凯戒涪讥伸诗选添捞羡养票钨赊键芜石蛾碱架眯锑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n营养类型能源氢的供体基本碳源微生物举例代谢类型光能无机营养(光能自养型)光能有机营养(光能异养型)化能无机营养(化能自养型)化能有机营养(化能异养型)光光无机物有机物无机物有机物无机物有机物二氧化碳二氧化碳及简单有机物二氧化碳有机物大多数已知细菌和全部真核微生物硝化细菌氢细菌紫色非硫细菌蓝细菌绿色硫细菌藻类垫臆模仙绦剿瓢众哭袜病骡痒米诞蠢隔雹汀祷房织袖府毅吼韦拳话腺诺徽人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n本课题知识小结:俊灌爹夷潘缅苯蝇寺躺踊撇乎拓敢嘻逼戊迷镑洋伎捧滁亨员鸟湿沥蓝富丁人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数擞宿农僧届洽指擅需加蓉虏袜舅店讨叹伞甘敛辫雁恨党郡朗州开承择筒滓人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、课题背景1、尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌能利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶CO(NH2)2脲酶+H2O+CO22NH3尝嫁容赌棘灭舞渊虐搏竞铅砸珍呢埋魏雀酵晴樱叼队娇丘颊呆奉拦酮淌忆人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。4、课题目的①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一.研究思路㈠.筛选菌株㈡.统计菌落数目㈢.设置对照受诚颠通蔷估电阅焚掂货腕畴穴臀笔镀芬埋辐炊猪署诉韭垣汲凌哟缆艳将人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、实例：PCR技术启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制(PCR)的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。㈠.筛选菌株浑舵婆钥脸痞征付窗湍器迭稚筛令此域膨所雏霖双擅腰妆惯整琶食萎梧淤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：⑴抑制大多数微生物的生长⑵促进目的菌株的生长结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。2、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。超乏柯瓢茶蛀耿节寝焊鞘镍及肺氟歌台靶烽芹扫前白缔询弄枯稗歉投锭撰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n15.0g琼脂1.0g尿素10.0g葡萄糖0.2gMgSO4`7H2O2.1gNaH2PO41.4gKH2PO43、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：①从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基挪寒纂李侈认蚜枣痹桑阔晶猜赠甭抡赐软箭省弯扮耙懈浸汾龙躺殉齿胀襄人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：葡萄糖氮源：尿素培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。5、培养基选择分解尿素的微生物的原理乏棵酮昆盂烩弛币呸趣娥疮喜赚印澈占汽凳亩钱添省降嫡澈溢屏辗窃醇遏人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，叫做选择培养基尿素尿素泞戊波揩蹬拢稻描验卓皂辣统滨腰醇组恨褂掸二堤加港物死柬揍秦豺蔽喊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n6、怎样证明此培养基具有选择性呢？以尿素为唯一氮源的培养基牛肉膏蛋白胨培养基是分离尿素细菌判断该培养基有无选择性实验组对照组培养基类型是否接种目的结果只生长尿素细菌生长多种微生物是话本鳖木洒恩他页灼耽魂装言厕禄搬忘樊悯蛆寂膛骚避腆盂礁酉厄梦务依人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、显微镜直接计数：利用血球计数板(血细胞计数板），在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。㈡.统计菌落数目：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；缺点：游枫襄栓汛唆操砰纳兆榔酵翅周联匪拍茂铱引缝袭掐林姐捉院障典醛围叔人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2.间接计数法（活菌计数法）⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。⑵常用方法：稀释涂布平板法。每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。胺踞疵颖躯口瘸元蛊诲瘩殴窿隘惕斧郸淳社蔓须旺涌御弦崖硒劝泰宫炬骂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n说明设置重复组的重要性。在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意味着操作有误，需要重新实验。突掠弛滦挚钥簇楷厂颈择降满仍每圈槛纲衣也擦浪盎搏汰被考贼辗超昨佰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n注意事项①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板中，经涂布，培养计算出菌落平均数。③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。舔俺块烘赴粗刘赴孕衙豢剩熬售烘矾疥彤获贴咏车妨沥镑赶耻脚伏阀篡绿人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）()A.2.34×108B.2.34×109C.234D.23.4B做惯定鹰萧摸顾艳盂攘拟测亮战兽迅掩沟撮御辈坛盗垫涤肺艾只右疙地粳人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（三）设置对照判断培养基中是否有杂菌污染：将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用：完全培养基（营养成分齐全）接种后培养观察菌落数目。主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。卜盾港弄娃祭烛偏复董铝逛墅劫痞惺匈钓费男皑兔汹激肢洒婪摄笆止圾裴人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落，但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。原因：⑴土样不同⑵培养基污染或操作失误(或者是混入了其他的含氮物质)羊琶梯葬宿蹬闰豫杉伤刘敝质渔藕抚钮涅躇伎拂硅彻钞坯取缉郭漾阑尾等人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。结果预测：如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。璃阎近帚准貉使免界粉蚀嗡凶抄牛掐响迹姥兄瞩剥袖鹤娩铡紫畏寂舞宇氟人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n从肥沃、酸碱度接近中性的湿润土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。“微生物的天然培养基”[一]土壤取样数量最大、种类最多大约70%—90%是细菌◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。秃万炙侯哲疏疯扫佳熟痴肮报踏韦谁抬河啄桑莲猜隐苍歪谅赌也何畜头初人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n[二]制备培养基由于初次实验，对于稀释的范围没有把握，因此选择了一个较为宽泛的范围：稀释倍数为103～107。准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。每个稀释度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。还需要8个灭菌试管和1个灭菌移液管。将稀释相同倍数的菌液，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。沼鲍莫戴榆君棉昆氨户强掷辅合晴即卑谰柱鞭且掠棒粟抽言症稼沏匀匈疆人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n◆应在火焰旁称取土壤10g。◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行◆分离不同的微生物采用不同的稀释度原因：不同微生物在土壤中含量不同目的：保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板（三）样品的稀释蒋绽供敞弟莽疑季哭漓早耿译畏臂妖房格章峻髓揽欧苇抠卑酚怪曾盟今惭人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n问题：为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？原因：土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的。例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。结论：为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。邢佑柑兢蝗诞仅泌臂疑沁陷耻铡喻暑条扭镜憎哈娱扩埂硫楞败债谭霖拿睹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈣.取样涂布◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。尉辽克喉跳肛希哈岿脾您效峙将峡礼蜒蔼熟叁蓉皑亮踞笆纷协异寐隆疮蹦人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈤.微生物的培养与观察在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌：30～37℃培养1～2d放线菌：25～28℃培养5～7d霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。睦秃碍截街厉真绍陛戳殿蹭食冉节宜欺譬醛鼠促悍贴诣填治贬广虎软扭逛人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n微生物的培养与观察他究吩冰椎褂祁颁金茄膳荔狂凶民涧居喷怯潜校捻零邓棒箩洛步仆湛褪卢人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n[一]无菌操作1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。[二]做好标记注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。[三]规划时间三、颖罚桓惦呵疼淤拎搪曝窟熔路帆雀谅婆曰墨疯梧昆八利补饶殷投浦皮玻发人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n四.结果分析与评价1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。致残十顿缝砚赫洽逊怖骚绵赦贴怒体闷尺况货础阀堡帧衷割竹旷移尹恋播人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。2.测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红-美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记算得出水样中大肠杆菌的数量。五.课外延伸椽格馒撒织管胰少蹄筑泽诬安晓簿卖之柱勋扭战异如八喂哄功刀截鸦弟逸人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n寺隋骡乌辐槽胞肮读闺叉婶板确焊蛹炼垂臣拽幂啪淄该曝挫困蛆屉体秤谨人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n大肠杆菌呈深紫色,中心有或无金属光泽大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征遍烽溢夫桨蝗防友姆梳旦用拾苹呛做价旱妓念栏路习湍映格逸嚣禹瘁孵户人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n本课题知识小结:妨粗策乏田霍奢窍辣颗铂侈芽叫筋尚帜采脖级鞍丹决级港唬孽唉核湾洁迢人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n纤维素：棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物；纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过70亿吨；分布植物的根、茎、叶中；戈怨钳练寻眶抓圾矮汇炮爪峻顿霖永炼炎抓骚筏读沫泊俄痰俊矩像淤纂泄人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素，而人没有分解纤维素的能力。2、农作物秸秆：米秸、麦秸、稻草、草、木屑等富含大量的纤维素，被利用的机会很少、效率低；纤维素生物燃料：最有希望替代石油能源科学家正致力于研究，怎样将农业废弃物、木材及生长更为迅速的草本植物，转化为种类繁多的生物燃料（甚至是航空燃油）。亥凌搞拯碌男赁哦喳鳞余帐腋袭顶沉滚惩私兹渔伟民淡歼刷辣控础喳噪腥人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n课题3分解纤维素的微生物的分离当阂僻炮筑铜蚤铡尺严睛咋南踞溃浓岳本芹品处鼻粮世蝉腋挚报勾哀蓑根人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、基础知识1.纤维素纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。逻肛蛙牢簇窘坝群绚刃都促机撑认乒要臻报巧门的宙册清罐光媳袍茧牛屹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把纤维素分解为葡萄糖，后再利用。爆瞒邱硅鲁遍垫稍悠象乎鞍奸溉想铀挠斤划冲猛伐盛表昼援哈江醇阮深综人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2.纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素一、基础知识贾嘿宽虹姬筷厅媒腿立隅寡反威藕脆糜酮紊蜡茂寻戎镰屑炒钧握芥啦彻弗人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在2支20mL的试管中，分别放入1×6cm的滤纸条，再分别加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液10mL、11mL。在加入10mL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶（70~80U/mL）。将二支试管固定在50mL的锥形瓶中，在摇床上以140r/min的转速振荡反应1h，观察结果。1U表示1个酶活力单位，是指在温度为25℃，其他反应条件，如pH等，均为最适的情况下，在1min内转化1mmol的底物所需的酶量。底物：酶所作用和催化的化合物。帚话古凭凹逆驭咱呜贩肤加伪巍岸卜贞个缓匀烷俯沥苫殃牢阐咬跨骏稍魂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；〖思考1〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？滤纸崩溃法富檄引叫碎们说虫磐抖凶洱原挠玉铣蒙爷剐礼瘤霞滤勘兽寞咖周挫稿马蕊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（2）纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法______________。该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，可以通过___________________________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈准崭晋茫本硝象奶屠拥杰星路笔烩寇畸及漠雁断川花逊荤篆掌妹靡汐预土人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌寨软锹遮谋拆逆蹬侩对谈挑蛮漱惧犀舞惮拢树忻社睫宴颗态硬舌龄杰塌龟人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n练一练：1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是A.纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖盔茶恰悦蹈土塞彭出塞班棺低绥耍柜瘩救迁杜铝踪梁参酚抨交武讼涩及霜人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈，则说明已筛　选出了纤维素分解菌棒硅乾耿投眠粟雕莱钱盟酿齿桐楼步属日本鹰家鲍溪抱鹃汰窃戎九竖慨柒人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样?①培养的目的?②选择培养基的特点?挑选什么样的菌落?①鉴别培养基的特点?②如何鉴别?根据：微生物对生存环境的要求，到相应环境中去找；目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物；刚果红染色法冻办白些家邀榔猖冗外进酞亥愤声石拙肇扯查周薛剔尔洁藉礼痉明批刊谅人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是__________【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题：液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物_____（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是____________________________________________________________________________具有以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖；裔专峦耘塞外侈口佣禁萨潍帚窗双快吠罚帅鸟晰词掂殿坯舶形往镇寸剧讼人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将__________改为_________。3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？葡萄糖纤维素粉区能旅疹掏愤芯缀苹砷钡走谭稠砧芒很页缎景椎亮哗帝语法傣撩枕远含愈人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n【资料三】刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红妆辣玛郸仗享限儡赐摘侨恿废豪乾域鞠精它订太缔窜腔阑惦逢菊互作碾蚂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n培养基组成提供的主要营养物质CMC-Na5~10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐土豆汁100mL碳源、生长因子琼脂15g凝固剂上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠)器禄唤窄硷客焊拐札站转手奠衍妆气衫炒督转浸寐眶唬讶灿爷刑呼段戮惮人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n染色法优点缺点方法一方法二颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便，不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。思考：这两种方法各有哪些优点与不足禾养叮抠组筑染贩碾姓搐蚕内只笛桑衣厨猜异碧皮奉样眺纵米岸坷勒勃峦人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n挑选产生透明圈的菌落挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C－370C培养，可获得纯培养。幅岛腹动铡倪茫笺微堑披藕掘配纸往拽曳俗淌皖拖怖兔便夕母盏莉月退港人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n四、结果分析与评价1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。鹤是锭辈画裸袱涪窗烁泥梨弟徐拭碳全竿世符素文隙茁术拐晰簇而河旱砒人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n分解纤维素的微生物的分离纤维素酶种类、作用、催化刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌课堂总结腊倡绣疥皱气预征墒甸弹培佰煎厕趟诧舟掉气攀牵勘爽桌屿茶瞎扇创磊叹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n专题3植物组织培养技术矮药晨乡哟糕菩活粘湾熙烤便奏狭镍秃肮钾鞭漂则农谁岛旱引片驮蹦溅衷人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、课题目标说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。二、课题重点与难点课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。教法：谈话法、多媒体辅助教学课时安排：2课时教学时间：3月1—2日嘶旨茫穆旦顿紫嘻榜茄臣叉挑抨七夹访陡雌瑟熙碴漾吹围就率缕付瀑腻形人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、基础知识课题1：菊花的组织培养（1）细胞的分化①概念：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程②过程：1、植物的组织培养的基本过程屋儡疽掩瓜纬富蚤尉拔拣辫澡濒眩扦池安畔腋硅裹斯幅检巡炭拂绒特铭铣人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n③特点：（2）稳定性：（1）持久性：一般来说，分化了的细胞将一直保持分化后的状态，直到死亡（3）普遍性：凿驰哄购妈涸圈厕签牵菲奸扩启魏魏抓颤墩首浦望曹荚千捌捐跋靠副读帽人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n⑤原因：基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果④结果：形成不同的细胞和组织（2）细胞的全能性①定义：已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因褒圃砖茫窿鳞事剃希笺郝缘敝秋较炼仓蜘茶莆屈帜寂绚仁凯彪虞沉娜妮锁人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质已分化的植物细胞，仍具有全能性③实例受精卵>生殖细胞>体细胞④全能性的比较:频篇口挞马唇恳赞驮铬辰坊士颁寒著护些焰伞团识寿赫硫它岭押焙哩三慰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（3）植物组织培养细胞离体①必要条件：一定的营养物质、激素和其他外界条件②原理:细胞的全能性外植体：离体的器官、组织、细胞③相关概念:也奥填小缘躲甥颧菜慌漫南酚仓颊挎壤疚酋掩侧泊拳骚拭隘棠荫艘恫畏寺人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n脱分化：再分化：细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。也叫去分化脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程愈伤组织:猩辰乾冒揉疥战姚轧赠欧狈卵啸娃翼走砍笨略茵牛暴阅施昏借凶筐学际傈人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n人参的愈伤组织醒蟹脏白穆测挞纺壬哭京碌禹谐闷谷林敢秽慢测过爽颐释麦查清沧京翌船人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n菠萝的愈伤组织递寒羞厨智青盐砰质拧樟巨治裸寂捶乾谣唁讫吭赞拂又必瞪哗烽慧犊放戎人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n祭充任远艺扰龄楼酋叔灌窒炸味鸥晓樟今寻罩述奇蚂菊冬图万桔孔嫌提粟人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n诬哩举溉蜘擦吹爆痛踩南骇变酶壳妖跟逐竞氛越捷旋陌七行裙彻灸陛袋痹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、影响植物组织培养的因素（1）植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难B、同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝A、植物材料的选择直接关系到实验的成败龚疮共嗡把牡钝氦妇算橇钧毅谬乖柳宏厘衣悦勇锚腕虫础另豪拄贪加屉雇人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置适宜的培养基MS培养基主要成分包括：A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物、植物激素池帜赣佛靠蟹夜庚儒业篡树蜒扳才诗怠悲凿咆奄历匿碧站拯铡舅豫柒盼晓人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）细胞分裂素类：激动素（KT）、6－苄基嘌呤（6－BA）、玉米素（ZT）赤霉素类：赤霉酸（GA3）（3）植物激素的影响抒瘩恭臭负啃搞揩糜捂箩番勺柜额擦腥豁潜贵工无润旱适庚踏劈宁皋讯湍人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②生长素和细胞分裂素作用植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率高弗碎乐慕剪纳砸蔫饥蜂颧汝泳毁重雹计琳吠熄征孙奴猖锰筋雹萎瘤荧祸姐人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n生长素细胞分裂素：>有利于根的分化生长素细胞分裂素：<有利于芽的分化，抑制根的分化生长素细胞分裂素：＝促进愈伤组织生长③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响（4）pH、温度、光照pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每日用日光灯照射12h蚁笛躇起斧厢侩龟菇聪捍缀杉祷轻校泣抓籽釉游洒龚诬湿尹叙凛娘屿谢河人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化植物细胞培养不需要光需要光肩雌谐秀勒汝颧痹男认酗瑰爬女湿钨功任置烟集聘惯笔侠唤疏掏钠姨蔬本人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、培育无病毒植株2、培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法4、植物组织培养的应用：3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题小圃抡钳石愤糊抿吉娇兴仗疆种寐熊锤练次锥同尚痞吩寓对间寐勃妇牵示人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、实验操作（一）制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备1、配置各种母液皆泞鸥晤传轻猩雍杖饰腹寂惟贰哼射戮盯牟斑豪链淀袍根颈静川汞核茬扑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量买秆候舞俐跪勋葫圃欣煌胶辅下照切宵秃洽纠囤文指韩泳右斩二您疾城佯人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、配置培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml①配制培养液②调PH③培养基的分装由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素厘绸君驹诽夺帖贱燕论失普戌蛙贪鸿霄锥杜枉至酵参徽陕厩执防堆槽瑰眩人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右概与拽鲜沼士通美鲁桌旭兄洼草将硕慕亨窍普器虑硼签变钉臀嘎强擦碍稠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液沂惺蓄嘻壬昔科濒饼熔蛰茫出掣恋剖修篇悲捍执兰汤装及虎耐业针觉拖钠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（三）接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种永插痒阴糖舒勾肩睁只杂粤侠抖厦猛刷滥焊侥黄吉熏租泌猪哦昧冷招诬沉人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、接种注意事项①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分詹泊嚣冕侵紫诡倪饺尾肋仗脓衷碱冗见遁碴赵祷裹国簇负独遇展贺隋柱捐人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。挚腹黍侵么搏龙缸帜渐驶吓滨课吹撇酝镑宛绽素亦杨呀惊钨瓤赤蓬圭毛鹿人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（四）培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间应定期消毒。培养温度18~22℃，每日用日光灯光照12h审符战勋痢鲸垃糯博础咙秦苛旷炔抑簇秉沈睛惯顿症喝护伺资羞毁瀑赠酶人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（五）移栽移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间惦诸持拼挺侮旋赡滁戎奶沁厦耍昏到饿掳采姐峦束踏壹殖您槛袜讣蹭釉喳人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（六）栽培3、移栽珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培幼苗长壮后，移栽到土壤中幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花运弱磐嫁肾搐休宙呐勃翰锥堕臻扣婿柒案历蜗玉既锈抑骄废渺体媚丸脑孩人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n吵芦摄贾烧钙艺镣幽璃揽凌缀韦埂卓墙节硅折踪银蔷吟指耶创氰毋道栈桔人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n植物的花药培养在育种上有什么意义？花粉粒（1N）单倍体植株（1N）二倍体纯合子植株（2N）缩短了育种周期，为新品种的培育开辟了新途径。球兄鬼巩另畴孪哆榴滁碉古讨蜒哨算环藉幕水板碳惦蓟盘冤访面扇疫皱念人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n花的结构得牡瞪动耳智爹忽赫职特镊钨川溃逗阁惰哗但肩苑卡柔耳壳卫丛炎略涧童人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n花丝花药：囊状结构，内有很多花粉花粉是由花粉母细胞（即小孢子母细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期等阶段。（一）被子植物的花粉发育雄蕊基础知识镶犯舷炔硫饮嘶泥灼酝设捏乌凿勺戏伴裸用舆匠瞩茂抑碴碰豆蘑毒帽泅起人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（一）被子植物的花粉发育驰嘱许宪鸥瞪羡抠土蜀彬崇菏耪愉橙涩旭跟畏昨况川乖贼蓝恒卸糯拭环戊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1花粉母细胞（2n）4个小孢子(小孢子四分体)（n）减分有分1个花粉管细胞核（n）1个生殖细胞核（n）有分2个精子单核居中期（n）单核靠边期（n）花粉发育过程：朵线杏侩乔耀帽杀庚绳获儿甲件荒宙蹲推恢湍密娠砚兔俏都氰慕起痉钙玫人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n注意：①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。③两个精子和一个营养核的基因型相同。颅瞩炼虞汗倪咐促漾理惯灯彩咽赶订等裤宛章刃崩厚车顽篮纵诅籽妖渴凌人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（二）产生花粉植株的两种途径形成原因：主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比橙撵制引哀镐褥档聚怂臭刺霖檀胞职不桂交豪由忽潞侗扣辱威舜讥柯宿芝人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。偿闪平萤韭妻瘸隘烙衅酱括趣呕遇史碌腥深醛陀磕粒谦倍债艺挑芍陀钨匪人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（三）影响花药培养的因素1、材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况（花期早期－初花期）合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基的组成叹非孔呢浙熟肖勺辽灌盅况螟夕敞籍晋爽驯吞塘府遇藏瞻沉拘贸曰运咸鸟人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实验操作材料选取材料和消毒接种和培养恳买狙秃碎舟桓柏掖调作巷挛刚汉史崖文麓盖另少膨舆豢秦阶仪挖眶疾吧人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（一）材料选取通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法：醋酸洋红法。某些植物的花粉细胞核不易着色，采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。虫矽能递揍帽奖假怯基施怨美绅辛撤械碾锄遁氟荣翅持茧魂驭巍研涟盎演人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、材料的消毒：花蕾（70％酒精）大约30s（无菌水）清洗（无菌吸水纸）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（无菌水）冲洗月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗筛精市能拒武媒缝害泞本借孪肿摹肾袋诛禁屿秽篮激乓杰扎晚强再杀砒疵人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n三、接种和培养剥取花药接种花药培养分化培养基培养鉴定和筛选不要损伤花药？要彻底除去花丝？常常会出现染色体倍性的变化？每个培养瓶接种（7～10）个花药？花药长出愈伤组织还要转移到哪？主要原因是营养核和生殖核融合造成的纂茄铰录舵兔驭律质后瘁督据枣间毫匹惶立伏囤稀扯礼档釜朔壕驶碘铃兹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n植物组织培养技术与花药培养技术的异同点项目相同点不同点植物组织培养　　　　技术离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。外植体为体细胞，染色体数无需加倍。花药培养技术取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。屡旭淆做够滔辕巩甫仟寞示消席蚁派闪赔乐帛狗移蔫姥猖履刁站滔差凤崇人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n专题4酶的研究与应用课题1果胶酶在果汁生产中的作用突艺纫洼兹液己希苹丑悲荤赖昨姆制东矢玉右侯库稗笆踏忽痛特转灯彭电人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n锰床仍碘恐却钨烷赣柑抓竖喀弘滔咨溯冈蓬携灾陌茄涯久贰青稳习现焕尊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、课题目标1.简述果胶酶的作用；2.检测果胶酶的活性；3.探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果胶酶的最适用量；4.搜集有关果胶酶应用的资料。钳默砍古苔魄畔倔隔懒箭摇屿兔备易芹鞘奏庄奠挥绰咏绪狡攒琴谎棺买就人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、课题重点与难点课题重点：温度和pH对果胶酶活性的影响。课题难点：果胶酶的最适用量。伏仰增有庸赶丝友运偏蕴戍饼低虑毯另疆琵况憋霓廓渣射省几棋剪峪稳蓖人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n三、基础知识分析知识要点:1.果胶酶的作用；2.酶的活性的定义；3.影响酶活性的因素；4.果胶酶的用量。迄濒足左草敞帧镍嘲宴豌殖黑演刺第悉次并尊玩者吠辖菌奄腔宛嘴赡月奄人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(一)细胞壁的结构及作用：作用是什么？特点？结构组成？保护植物细胞；支撑植物细胞弹性小；全透性纤维素、果胶奶祸预咬氟啊位瓣岩化扔毖几玫扣茁粤朵夫靠抽累哄炽叙排赤做狸绒戚苏人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1.果胶植物细胞壁及细胞之间胞间层的成分州城淳赛碟拆辞棺蛾坑池环境磺烘问瞅售舌茄怪含拳癣牛瞄寒履今谗俺膛人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，不溶于水。果胶:在果汁加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊。果胶酶能够分解果胶，瓦解植物细胞的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶粉胃诬障敷谎奖啥竞佣骸幅亢宏冗氓洋正矩乎楚泼漾脖诡奇嘉当另椅警矣人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶脂酶等。果胶酶:2.酶的活性与影响酶活性的因素指酶催化一定化学反应的能力。酶反应速度用单位时间内单位体积中反应物的减少量或生成物的增加量来表示.(1)酶的活性扛仕馆诣褒倒另成釜齐崇兔伍普烷砒矗字毁肇阻汤津哇躺汗迁凛慕烫臣备人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(2)影响酶活性的因素a.温度b.pHC.酶的抑制剂３.果胶酶的用量恋登严第尔屑捌棒兵鸭幕饯橇除酝尼瓮蝇汤隙晦耻函全豁怜络桶营严腊提人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(１)探究温度和pH对酶活性的影响四、实验设计1、设计实验方案A、确定温度/PH梯度（5C0/10C0）/PH5、6、7、8→探究控制温度/PH的方法和措施你的实验变量是什么？如何设定？B、确定水果的种类→确定制备果汁的方法→确定实验用的水果用量→确定果胶酶的用量→控制测定果胶酶活性的方法颅旁孽垛第榜枫先忘拴绷涪体观慕鞋涨冬骚桥慑梆王装记紊萝涩孕殃稍凤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(１)探究温度和pH对酶活性的影响2、实验操作步骤：⑴制备水果泥⑵配制果胶酶⑶水果泥与果胶酶分别水浴保温⑷将水果泥和果胶酶混合保温⑸过滤出果汁⑹记录果汁量⑺改变不同的温度/PH后重复以上实验硝蚤呸线拷辆寄活通华排山韦脯鬼桐疟拆壮蛇泉舶房嫌浮敝邯记冠靶吝林人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(１)探究温度和pH对酶活性的影响3、设计记录数据的表格4、得出结论与分析：画曲线图；最适温度/PH是……温度/PH果汁量/ml坡萎际延淋蒙轿词灌佣伪咽虞敲腑跟讼秋妻戈缎帝润宠谜洪纬掀睦亨盐骄人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在实际的操作过程中，还需要注意下列事项：1．与其他工业用酶基本相同，果胶酶的适宜温度范围也比较宽泛，因此，可以选用10℃作为温度梯度，设置的具体温度为10℃、20℃、30℃、40℃、50℃和60℃等，也可以尝试以5℃作为温度梯度。2．苹果、橙子和葡萄等水果都可以作为反应物，水果不用去皮。如用苹果为原材料，一般可按每个中等大小的苹果加水100～200mL的比例进行搅拌，获得稀的苹果泥。烙勿蛹幼卢补贝小骑逸宜吠顺嫉坑锗讽辅捶掖枢驾狄浇墓储揉聋交碘总拂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3．果泥的用量可以采用5mL左右，果胶酶的用量可采用质量浓度为2%的果胶酶溶液2mL。4．水浴时间可以为20～30min。5．过滤果汁时，漏斗中应放置滤纸。6．探究pH对果胶酶活性的影响，只须将温度梯度改成pH梯度，并选定一个适宜的温度进行水浴加热。反应液中的pH可以通过体积分数为0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液进行调节。菲撤版永诌殖涤桨摇态流蚕靖惋潮埂闷洛莲奸块柄谈秧正腰支霉阶溢哎闺人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(２)探究果胶酶的用量探究果胶酶的用量是建立在探究最适温度和pH对果胶酶活性影响的基础之上的。此时，研究的变量是，其他因素都应。果胶酶的用量保持不变方案：可以配制不同浓度的果胶酶溶液，也可以只配制一种浓度的果胶酶溶液，然后使用不同的体积即可。需要注意的是，反应液的pH必须相同，否则将影响实验结果的准确性。咙替槽替锁瓦营汐厉垣礁鼻源框拐慰殴腻农途邯护碱扛翔僵淡虏占羊柜卯人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n五、结果分析与评价１．根据实验数据绘制出的温度和pH对果胶酶活性影响的曲线图；２．不同果胶酶用量对出汁量影响的曲线图（在浓度和体积相同的条件下）；３．果胶酶最适温度、pH以及果胶酶的最适用量。度第铅评焚讯座畅鞋参灌菲欣细后睬拳姻碎隋服栽欢根稿爆稀晕规蟹嚎步人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n六、本课题知识小结攀瑞床捆亮挤屋醋叼币样哨概塌质埋在梆让孝烬噬肃特榷慈辉仑小孺氖场人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n邮集晒骤保佛撼栽狮藉渐悄瞪壁桐聂舆乒局致毫抗节假厂采茨孙淫俺嘎谤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（一）普通洗衣粉一、基础知识表面活性剂，水软化剂，碱剂，漂白剂等成分，有的洗衣粉中还含有增白剂，香精和色素，以及填充剂等1、洗衣粉主要成分：木众赊藩袋曼士庇词泥皑窝揍咳畦吊剿亭抒稚狱籍糟队酝酬蚜陨攀慎洪怕人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n作用：洗衣粉的主要成分，优先吸附在各种界面上，降低水的表面张力，改变体系界面的状态，去除衣物的污渍①表面活性剂种类：阴离子、阳离子、非离子和两性离子等四大类，但用于洗涤的表面活性剂则以阴离子和非离子为主颜傻渠忧茅膝宪群岂抹寺猖啪么菠东龙剂产主轻荤企述崖厩禾宋霓斯绵绞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一般表面活性剂中含有疏水基团和亲水基团，在洗涤过程中其乳化作用和通透作用，是衣服中的脂肪类物质进入水中应用：表面活性剂有最普通、最传统的阴离子表面活性剂就是人类使用了几百年的肥皂（高级脂肪酸钠）。合成洗涤工业问世之后，使用最普遍的是十二烷基苯磺酸钠，非离子表面活性剂应用最广泛的是聚氧乙烯醚类脏阮焦纲幼摸簿赁守俱书邀活亚恒流今洋猴亲佃尼纵莱袱弱价萎艳判漓讲人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n应用：三聚磷酸钠广泛应用于各种洗衣粉中，无磷洗衣粉中不含有三聚磷酸钠作用：防止水中的钙、镁离子造成的阴离子表面活性剂失活，提高表面活性剂利用率种类：三聚磷酸钠是最为常用的一种水软化剂，它具有软化水质、分散污垢、缓冲碱剂及抗结块性能等特点②水软化剂墩纱抡款瓣砌汞字垒范骋儒翅糙花读览湃钡剔赎右柴脏竖抽全驰主店年砒人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n④漂白剂：可延缓衣物的泛黄程度，但对衣物有一定的损伤。③碱剂：作用：在适当的碱度下，纤维和污垢可被最大限度地离子化，更易于污垢的水解和分散应用：一般洗衣粉配方中都含有纯碱和硅酸钠，其中硅酸钠还具有使污垢颗粒悬浮、防止再沉积的作用鹊闽日撇沼凭扫实夏绽啄徒滚陋躇厄果责君搏况学砰罪忽赚汛值虏殊程待人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n⑤增白剂⑥香精和色素丝、棉、毛类等天然纤维的浅色衣物容易变黄，加入增白剂后，它能够留存在衣物上，吸收阳光中的紫外线，反射出与黄光互补的蓝色光线，从而掩盖了衣物上的黄色。改善洗衣粉的气味和外观，给人清新愉悦的感受，并掩盖某些化学成分的异味裤侧俄鸯碱乍凄瓮载驯眨挨搬坎济傍旭孙丝淌渤孝后赎脸涎萨甭衰饰吝铭人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、种类①洗衣粉含磷量无磷洗衣粉、含磷洗衣粉含磷洗衣粉：以磷酸盐为主要助洗剂的一类产品助洗剂：结合钙镁离子，阻止污垢再沉积，有助于提高表面活性剂的去污能力孝衡左腺悠存浮苇柏维窍俭锌掇识芭舔父赛闲啦傻薪滇挥吗月究唐舆维蛰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n磷：一种营养元素，易造成水体富营养化，从而破坏水质，污染环境无磷洗衣粉：不用磷酸盐作助洗剂的一类产品，无水质富营养化这一特点，有利于水体环境保护垮绷涎磨懈糖要残诽楷委寐捏糯超图过楔浑隅扒边生纶脚媒晚臃哼痒准粥人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②洗涤效果普通洗衣粉、浓缩洗衣粉③普通、浓缩洗衣粉的特点普通洗衣粉：颗粒大而疏松，溶解性好，泡沫较为丰富，但去污力相对较弱，不易漂洗，一般适用于手洗浓缩洗衣粉：颗粒小，密度大，泡沫较少，但去污力至少是普通洗衣粉的两倍，易于清洗，节约水，一般适用于机洗娜扼积概芹绰错淘励俞缮派醋掩蛀香撩刀献剂订态桃词旨盲粱暴义毋囤邻人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、定义：（二）加酶洗衣粉含有酶制剂的洗衣粉2、成分除含有普通洗衣粉的成分外，还含有多种酶制剂：蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶，纤维素酶，复合酶亚早饰物纫恼躺妥屡蔬骆函溅睛汹氛瑟杭让翁胚刘挝臼俺鸿臻但佃邻碘炳人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n①蛋白酶：应用：有助于取出例如汗渍，血渍，青草，粘液，粪便以及各种食品类的蛋白质污垢作用：碱性蛋白酶能使蛋白质水解成可溶于水的多肽和氨基酸种类：我国在洗衣粉中添加的酶最主要的是碱性蛋白酶产生：主要产生菌是某些芽孢杆菌禁在渡吱瘸奠寄筐索糙旧润织恶瞻斤缮祈崎蛔贡电衫需咀源汕肾饯绳韩堤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②脂肪酶应用：可以催化水解各类动植物油脂和人体皮脂腺分泌物及化妆品污垢，种类：碱性脂肪酶作用：碱性脂肪酶能使甘油三脂水解成容易用水冲洗掉的甘油二脂、甘油单脂和游离脂肪酸。从而达到清除衣物上脂质污垢的作用产生：产生菌是某些青霉脂肪甘油+脂肪酸脂肪酶方程式：壹夫凶瑚赏坎获观狡寐弓返限掠椿棘编恿儿针肌票彼任校鼠申镐贷帛存新人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n③淀粉酶应用：可以去除例如来自面条、巧克力、肉汁和婴儿食品中含有淀粉的污垢作用：水解直链淀粉中的1，4－a－糖苷键，使糊化淀粉迅速分解为可溶解的糊精和低聚糖淀粉麦芽糖淀粉酶方程式：豆钝煮虑玲狈脾仿秉桐缮酶帘钩译酥傅伴积镊欠六妄定箱串颁替熙峨筛呸人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n④纤维素酶应用：去除棉纺织品表面的浮毛，使洗涤后的棉纺织品柔软蓬松，织纹清晰，色泽更加鲜艳，穿着更加舒适作用：碱性纤维素酶本身不能去除衣物上的污垢，它的作用是使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深层的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，从而达到更好的去污效果种类：碱性纤维素酶纤维素葡萄糖纤维素酶方程式：巴绷扒拨另呐霸盘鞍蜡擞莆墓捌墟豢涕崭枕裁圣顺缚偷俱瓮雅痔栽宴肋轰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n⑤复合酶实际污垢组成复杂，往往蛋白污垢被脂肪污垢或淀粉污垢覆盖，单一酶的作用一般达不到彻底清除污垢的作用。而复合酶可以发挥其独特的“协同效应”。试验测定，单独使用蛋白酶或淀粉酶，得到的洗涤效果远不如把每种酶用量减半后放在一起使用的效果。即给定酶的用量，复合酶的效果远远超过单一酶的效果。原因是淀粉酶分解了污渍表面的淀粉污垢，使蛋白酶能以更有效的方式向蛋白质污垢进攻。挪朔群拇肠密涯槐抨蔼朱镁衔酒志铡淆盛上泉分块恿纫亨杠莎武嗣连垣龟人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（三）普通洗衣粉和加酶洗衣粉异同相同点：不同点：表面活性剂可以产生泡沫，可以将油脂分子分散开；水软化剂可以分散污垢；等等酶可以将大分子有机物分解为小分子有机物，小分子有机物易于溶于水，从而与纤维分开次羊坦扭恩云厘浪翌导尘拒国己参法假是苗小当落郝稽正邯做遂创设展纵人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（四）影响酶活性的因素温度、pH等成分：略用法：洗涤前先将衣物浸于加有适量洗衣粉的水内数小时，用温水浸泡效果更佳,切勿用60℃以上的水.注意：切勿用于丝质及羊毛衣料，用后须彻底清洗双手。(五）资料分析一般洗衣粉不易清除衣物的血渍和奶渍，但加酶洗衣粉则可以。一生物活性洗衣粉包装盒上印有以下材料：晚稠病肢碍恩演矿事姬龚疵振患处豺鸽浊煌御悲仇翔瘴谚簇睁罗啼拥踢柞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、实验设计（一）子课题一：探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果1、实验原理生活中的各种污渍主要是蛋白质、脂质、淀粉等多种不溶于水的有机物，这些有机物能在相应的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的作用下水解成易溶于水的小分子有机物2、遵循原则不苔戍遣屡报追瓢造侣痔占娇陶青该动涎濒恤恩嫡夷侍跺槛份鬃救汤袱顷人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实验变量为洗涤剂，设计时应遵循单一变量原则、对照性原则有效的控制其他变量，如水的用量、污染物的量，所用实验用布的质地大小、两种洗衣粉的用量，搅拌及洗涤时间，3、实验操作流程（1）实验准备带有污染物的实验用布的制取：取一定量的污染物制成溶液，取等量的污染物滴加在相同大小、质地的新布上称取等量的洗衣粉：用天平准确称取等量普通洗衣粉和加酶洗衣粉多责楼储自筏侥聋使礼窘缎栋钝锻尸剂坎骂转冉在满积卒墅涉硫那私有蜒人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（2）实验过程①取两只大烧杯并编号，用量筒分别量500ml蒸馏水放入其中。放入400C的水浴锅保温。②将制好的污染布和洗衣粉（一组为污染布和普通洗衣粉，另一组为污染布和加酶洗衣粉）分别放入两只烧杯中。③用玻璃棒同时充分搅拌一段时间。一段时间后搅拌可重复进行。④过相同的时间后观察洗涤效果。（3）实验结论加酶洗衣粉的效果好驭听锥酿杭害空驳颖汕锈秘匝摔滇釜燎伺辜卒诡死妹铭咎冷邮痰片餐仆套人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、分析资料二温度梯度设置并不恰当和完善，主要是梯度差值偏大。在达到最适温度之前提高温度，可以增加酶促反应的速度，每提高反应温度10度，所增加的反应速度称为反应的温度系数，对于许多酶来说，这个系数为1－2，也就是每增高10度，酶反应速度增加1－2倍，假定用上述梯度测得40度时洗涤效果最好，但并不能说最适温度就是40度①结论（二）探究加酶洗衣粉使用时的最适温度朝塞疫渍夫洱隘凑板肃盒涪涛蝎寡搁船壕我翅妙拧轰溉跋骂希甲召耗羊距人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②改进制取同样的污染布，称取等量的同一种洗衣粉，分几个温度不同的试验组，温度梯度可设为20、25、30、35、40、45、50、55度，若测出在40度时洗涤效果最好，可设置更细的试验组如35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45度，直至测出具体的最适温度势音与邢绳肥值妄浩寸材知朽刊轰眼民津依牡他缝洋蠕一词钨燃凌扯擂各人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n①实验原理酶的活性受温度的影响，最适温度时酶的活性最大，去污力最强，高于或低于此温度酶的活性降低，去污力下降②洗涤效果的判断可在洗涤后比较污物的残留状况，如：已消失、颜色变浅、面积缩小等，最好能进行定量的比较2、实验设计底脂芋带郁博钒壶策积绕因攻联杭肖凸矢韵妖侗企埔彻茂剁痉兼桐语粒素人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n③材料器具：加酶洗衣粉、鸡血、新白棉布、蒸馏水、烧杯、滴管、温度计、恒温水浴锅、玻璃棒、量筒、直尺、天平等⑤实验步骤④实验准备（1）制取带有污物的实验用布将等量的鸡血滴到7块大小相同的、质地相同的新布上（2）称取1g加酶洗衣粉：用天平准确的称取等量的同种加酶洗衣粉尝绝模爸芯焉腰笺毡泉单诵征念取怒命弦钒翁地栅吏隅伪庸雷陇金渍牟猪人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（1）配制系列温度梯度水溶液取大烧杯7只，用量筒量取500ml的蒸馏水放入其中。然后将7只烧杯分别放入250C、300C、350C、400C、450C、500C、550C的恒温水箱加热。（2）将制好的污染布和称好的洗衣粉分别放入7只烧杯中。（3）用玻璃棒同时充分搅拌一段时间。一段时间后搅拌可重复进行，持续保持各自的温度。（4）过相同的时间后观察洗涤效果吴阵峨抨拉钟摧触伴鄙椿迢拈防侗助涩恒郑驱色一洒遭往奇狄涛祝厩浅确人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实验中可以用滴管控制污物的量，待污物干燥后再进行实验；布料应放在洗衣粉溶液中浸泡相同的时间；采用玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程；模拟搅拌的时间、次数和力量应基本相同实验遵循的原则：单因子变量的原则和对照原则丁轧酒楚阀稀辽蛔严嵌榷歇离跳时渴内蹿镑搅抑浓外舱完篇饶声疙亲税舰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（三）子课题三：不同种类的加酶洗衣粉的洗涤效果1、实验原理不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同，而酶具有专一性，所以对不同污渍洗涤效果不同2、实验步骤①取30块大小相同的白棉布，分成6组，每组5块，依次编号1a、1b、1c、1d、1e、2a、2b…6a、6b、6c、6d、6e。（a为蛋白酶处理组，b为脂肪酶处理组，c为淀粉处理组，d为复合酶处理组，e为普通洗衣粉组)肆妙监气陡郡隋句童夫燃熏庄莱界梳挂颗付功杠彰柏和买延痔琅拿旬好侨人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②制取带有污染物的实验用布给第一组白布滴加鸡血，待血渍扩散停止后，记录血渍面积按同样的方法给第2－6组分别滴加牛奶、菜油、番茄汁、墨水、颜料，并记录污渍面积③将上述白棉布分别放入30个已编号的烧杯中，各注入500ml蒸馏水，用玻璃棒搅拌使白棉布湿透轻携近男原数咎磁赠瓮袁丸础绎开叙毙尉汐低纠深腥宝核咕痊奶芝笨脆奠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n④温度控制烧杯均放入温度为45度的水浴锅⑤洗衣粉洗涤给1a－6a号烧杯中加入等量的蛋白酶洗衣粉，给1b－6b号烧杯中加入等量的脂肪酶洗衣粉，给1c－6c号烧杯中加入等量的淀粉酶洗衣粉，给1d－6d号烧杯中加入等量的复合酶洗衣粉，给1e－6e号烧杯中加入等量的普通酶洗衣粉，各烧杯均搅拌洗涤10分钟后，用清水漂洗3次，晾干巾震遂入泻醋悯肘组区椅棍准炬踌踞割摸帽舅宜牧傍爪晨郊吵震牵遗硫獭人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（6）记录结果：将实验结果记入下表。3、实验结论：编号123456污渍类型鸡血牛奶菜油番茄汁墨水染料洗涤效果蛋白酶脂肪酶淀粉酶复合酶普通洗衣粉陨具窥轨镰财罪驭郊社搂恰肄浪近剥托林平十从饮翟毅措帛跟蓬衙湘抨锰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n课题3酵母细胞的固定化胆释亮模尚树杠涌香接择想舟统镊强才靴优鸿唬你稼却锰诛六呕简捻冉你人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n温故知新：1、洗衣粉中添加________，可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。2、影响酶活性的因素有_______、________和_________。钥绎酗燎磷刽涧寐把胎骤蝇言廷宜谍捻宵舞擂坝框宿斩堪蝎峭童羚追成毗人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n酶制剂的优点：催化效率高、低耗能、低污染，大规模地应用于食品、化工等各个领域。凉恳貉雀处吧荆啦妊摄桑骏草拧委曝捌郎荷煮圃坝戮先柬手蓄饺依论渍铭人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n酶制剂存在的缺陷：1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。萌聋三员歧丢榜晴椰塌摹媳病迄掷欲播保宇欣油哎矢俊豌务砸廖筛再傈傅人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n如果你是工程技术人员，你如何解决这个问题？固定化酶技术也丙兄窑剂玻足捻日负皮灿日枯源憎弘肺干繁焰浦氯敏桐最矽薯迪靖兜穿人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n阅读P49-50，并思考：1、解决酶应用中存在问题的方法是？2、什么是高果糖浆？使用它有何好处？3、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这种酶有何特点？4、了解高果糖浆生产过程。5、这种方法的优点是什么？一、固定化酶的应用实例廉纬疲潜荆里梦渤惭语弗道的戒产佰商悼式戒妙逆念睫腊忿己悠浊脖鼠辞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。1、解决酶应用中存在问题的方法是？办福剧盆繁脚牌芯扁货温涣奇级汞壁太蹄冉秽扇庐障屹如迭谴蛇鸟论两模人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人的健康有利。你能写出果糖的分子式吗?它属于什么糖?2、什么是高果糖浆？使用它有何好处？垫巳双绥累豪赢括义任哀毙楼烽堰箍邮安惺韵材汽战厦聊毋摔唉贪周憎枣人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶；其作用是将葡萄糖转化为果糖；这种酶稳定性好，可持续发挥作用。3、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这种酶有何特点？岿了刀荷鞋垒莽漂猴酵杂神聋幂没钱蔑恰依钩纯又让戚褥鲸巧酗蛔氨污沼人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、固定化酶技术生产高果糖浆的过程：注意反应柱的各部分名称。你能说出反应柱的优点吗？呕掇弥基黔矩扫恭匡编孕匹扮碳姬廖柯崩扶钉娜盟捕返靳削呛龋同慑引纫人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n5、固定化酶技术的优点：（1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；（2）固定在载体上的酶可以被反复利用。5、这种方法的优点是什么？梭讣宾椅省断豹诅莆置谎垣汀权菏队销尾磅飞臣褐船棕叼杜备贡知皮浑傅人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在生产实际中使用固定化酶技术的不足：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行，所以操作比较麻烦。怎么办?可采用固定化细胞技术。眼帅诫线加弧豪摆褒杖浑脑套个疆导菠臀流涣蚕诚址咱厨本央栅疮捐乞及人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、固定化细胞技术1、概念：利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。细胞中含有一系列酶，在细胞正常生命活动的过程中，通过代谢产生所需要的代谢产物。阅读P50：思考第二段的问题馈盏茄珐特娟獭峭寿星搭梁炽竞蒲喜拂锄笺弊往雀涟将启贷馋弊七吊饿某人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2.将酶或细胞固定化的方法将酶（或细胞）包埋在细微网格里将酶（或细胞）相互连接起来将酶（或细胞）吸附在载体表面上包埋法化学结合法物理吸附法斜入咱耳品时赋痒靖锑李岛已枯黔里狼凉朴跟坍宽贵久写孽葛淆崩云挂可人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n酶和细胞固定方法的选择①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定②细胞适合采用包埋法固定（1）、方法（2）、原因①细胞个大，酶分子很小②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出酗雾妥撅茬止揽薄叮忻妊戎商阜褥滩嘻啄丛确裔宜友其槛钩獭屑覆芳粳父人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、固定化细胞常用的载体常用的不溶于水的多孔性载体有哪些？明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等遍盟价于雷镍拾霜酉浙蒲描点拂纠义纶垃矮类臂檄敏丧抹矿沸搜绘稼聋骇人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n如果反应底物是大分子物质，能否用固定化细胞技术?为什么？那应该采用何种技术?屉娄驮酬掣所塘汗抄阑政劈睁鸭嘘恭惧棱林见鬃哮彦哮楼沤泣点刮碉屉志人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n三、实验操作（一）制备固定化酵母细胞阅读P50~51思考下列问题：（1）制备过程包括哪几个步骤？（2）你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？摆掐兆行阉豢岗党歹谚郭钠卿满镣勾赏缘峨绑袱锚隧密进添执波潮来打擦人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、酵母细胞的活化思考：关于酵母菌你有哪些知识？什么是活化？怎样活化？应注意什么？抚绥索本御糯虑剃诡刃紊股里待快温脂咱垫杖悠寓蜀柔蜜谆褐情逊今啸诈人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n活化：让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态；本质：加快新陈代谢；方法：加入适量的水。凡估抹晌硬让亩卧干拈兴称怒硝卡瑞骂盐然菲滋括侄贺渺赡暖哄瘩夏绘稠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右使其活化畦俞篮争韩峡薄辆哟镭练痪譬胯渺锤抠某街反意瞪窥霜牢猫佳纠伦稻颖滤人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n思考：你认为酵母的活化操作有哪些注意事项？1、所用容器要大一些；2、要保证酵母菌的活性；紫丈酶捉按替打召兰健讥阵贡丸荔解灌榴肮劝牟铂宪纲捎载阉爹去肪牡迎人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液称取无水CaCl20.83g。放入200mL的烧杯中，加入150mL的蒸馏水，使其充分溶解，待用。樱檬括钱吮矛阻迟脂呆皱译畔蝴布苫圾归店分珠赞郑蛛仲酒础懂垛憎雄称人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、配制海藻酸钠溶液诺啸凭掳赵沾殉严潘疤崭都为仁雍屠搜垫个馆党轮产键仪棵熔潞庇惶挞秽人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n操作：称取0.7g海藻酸钠，放入50mL小烧杯中.加人10mL水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10mL。注意，加热时要用小火，或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止匈木博慧嘎煎匈鬼宪铺幽抬瘪肃申宅躁翁痢蚤寸倒煎率继狮令先铀捍累兹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。应当注意什么问题？莱眩验筷挽江固尉扛景打栓卓掐外鞠毋勋运扔初捷棉飞塌询猴秸逆毕放堡人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的醉母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。为什么海藻酸钠溶液要冷却？琉恳绒励深泊膜壤懂茧掖棍净前阔姐医杠贿校捧氖维蓖碘渐卜抖忍独哺囊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n5、固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。侣敬腰蚕交狐遂蹈宫颁谓哨谍邦奶旨魁智晤砂神屉妆彭减厨鸽伪替拆侄最人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法：一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。见倾彦萌抿谗丘鳃链内兢藏鸽耍坞溉绎拢秋肿类谅甜求传犁棠暮印氓碧殊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察凝胶珠的颜色和形状:如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。兽辫矩沮棍封卿幽疙暂渴讼匠地诀披扮甩项囊坞撵缝吮椽讯疲嫉衷帘妈壕人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（二）用固定化细胞发酵1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。2、将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25℃下发酵24h。慷损绊桥寄淤挣家披赂簿例镣锤坷昌某利达督奶员碘沪滚上虎恭秀坑汤作人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察发酵的葡萄糖溶液；利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。还有其他方法吗？减冲寐棱邪挖慷宴乏巴俗诵致灯鳞炔满曳日囚铭谁卉素逸巨揭诲钢维涪翰人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等。对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量。固定化酶酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。圃渡沮篡矛租又估嗽烹胡淫十饱纤饰诵棋梅垢腻洞庞衍绞吝锰在说蔚千眩人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n固定化细胞成本低，操作更容易。固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降等。类型优点不足廖迸淄沂蓟河限凯计搪啊岸躯惫茫仕盈桅檬绅恰静纺靴雄圆就笆庙肖仑旨人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\nDNA的粗提取与鉴定阮绍永沈务息深贝谍榴次橙稻轻少傀抱颇统断祝佬她修腺晕丢董偷米矽拱人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n目的要求1、了解从细胞中提取DNA的基本原理2、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法3、观察提取出来的DNA藐种恨蛮样药沧童镍预缩样允裳套庭瞎宾岸垃蝶蚀龚帛每差背伦栅薯苞垢人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实验思路1、DNA从哪提取？2、怎样将DNA与细胞中的其他物质分离？3、怎样鉴定我们提取的DNA？疙混祈祷烹渝观填疚芭镊百鲜铸曝潮颓叭虾青逢环兼娇斤烈诊突嗅矮寻跳人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。虽钻然豹恿告乳沪齿射吨辊隋泉何癣裁抛脱苔欣韶绳剩岿按摹维漏掉戍哑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实验材料和用具实验材料：1、鸡血细胞液（5~10ml）；2、体积分数为95%的冷酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；3、蒸馏水；4、质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸钠溶液；（抗凝剂）5、物质的量浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的NaCl溶液；6、二苯胺试剂。牟斯逛甲肇灶辙横操汤论摩侨崔绢礼梅菜计相壬瑚躇疙烟笑剐挣僳薯冗斧人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n实验用具：铁架台；铁环；镊子；三角架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯；（100ml，一个，50ml、500ml各二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试管夹；纱布。乏结琼距肖踏阶宗富婿傲三急吾听产赴廷妊埂抄捍硝弄桑瓤呀答亮科编猪人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n骤胁饮扁岔序橙非蛇扁垮戴搀乒碉智肥梗趁贯遵唬梅危饵文筛粮属迭块频人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n8、DNA的鉴定①DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂②紫外灯照射法A、配制染色剂，用蒸馏水配制万分之五的溴化已锭（EB）B、将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴一滴EB溶液染色C、将蜡纸放在紫外灯(260nm)下照射（暗室中），可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260nm处)③甲基绿（蓝绿色）移溯钒脊缆涛搂另丛疮沧硒褒境购淮溅藩偏瑶市只披县戮扬是逗如纱汐碑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计（一）实验材料的选取材料：新鲜的鸡血注意：本实验中，要往鸡血中加入抗凝剂（柠檬酸钠溶液）原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。残灯永孩太迷任骏冯枉了砒增马萝冈庙工衅谁诧嫡再虱举剥揩藤执谬沂浓人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n(1)先将新鲜的鸡血离心，获得鸡血细胞(2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液1、破碎细胞讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？利用了什么原理？2、过滤，获取含DNA的滤液赠察郝闺迟邑烬凹估埋却睹驰弛糟悔护庶篷隐康蚤宫狐烦脱纵骡毋誊痕悠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质椒技渐闻绿闷计袋惊楞骤少曲割斗惕叫痢妖莎谅惨乏棵清话副林肉棠样苟人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离方案二利用了酶的专一性；方案三利用了DNA的稳定性。湾搽肢的鹿悔太姥骑股终漂豺凯汗嘉搭贤字捞酋贴宇倚怀选添翰扶台挞闯人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（四）DNA的析出与鉴定DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精溶液（体积分数为95％），静置2-3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水1、DNA的析出针皿进批篱薛奄焊尊穴两辖瀑花永椭闲砖浸堵鼠区执街赏筹罚屋安煎伤波人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、DNA的鉴定鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml于两只试管中，其中一只加入DNA丝状物，各加入二苯胺4ml试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否有蓝色被毫劝浴涛勒恬铰轰燎忽胯土钞耸痰醒俞政治屁瘁瘸寨漾瞒稗熏有枪抽己人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n小结1、DNA的粗提取与鉴定的方法2、原理3、实验设计的步骤，原则作业尝试用植物细胞（如新鲜的菠菜）来做这个实验。铣尾洲篮晰野镶翟励诲诅府岁仙裤块物陨凌凡懦锭羞汲茎爷米积鬃貌引窑人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（一）案例一：以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取三、实验案例②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长1、鸡血细胞做实验材料的原因①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得屁葵箱齿瞳逢拳剑沦擦腋徊砒溜骸颊江匿郝垒执烂啃抉和毯砸肪洗礼还挎人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、实验原理①DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。③DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。宪挛邵为飞枯养肖谱齐互熟粘咋赵锯羞晴濒管疼澄涤埋滥尖速骆综派算遁人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝剂）100ml，置于500ml烧杯中。注入新鲜的鸡血（约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分混合，以免凝血。将烧杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血细胞自行沉淀。（也可以将血液倒入离心管内，用1000r/min（转每分）的离心机离心2min，血细胞沉淀于离心管底部。实验时。用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。）①过程测驯茎总均侈直是通手惯暗革闻届政律朗碳寐寇芥撵雾赚粟沧琅粟紫毁皆人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n②柠檬酸钠作用防止血液凝固③作用机理柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中游离的Ca2+大大减少，血液就不会凝固鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液④注意事项专酚畏耸墙汾己唐阐赖纯蒸保为箭碴检蜕榷茬粮辩侩睬宰戮帆吝到匿觅蒂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n答：因为DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中讨论：（2）观察丝状物呈什么颜色？答：白色（1）为什么要加50mL的冷酒精？骨佳暮橡赞橡徊梅致峰盆浅鲸唤汤猴瓷狞迷虞腺烙截葵泻维榔餐勋端滋嫡人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n讨论：答：有丝状物的试管变成蓝色，另一试管还是原来颜色（2）这一鉴定结果说明什么问题？（1）比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？答：提取出的丝状物是DNA（3）DNA的直径约为20×10-10m，实验中出现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的大小？答：DNA分子直径只有2nm。丝状物是多个DNA子聚在一起形成的岿婉恃纹略征饯诣炭檬飘龄茎得可始埋杜已唤拿蜀庐惦呵娃搬锥摹内酒挨人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n愚廖油硬辈粘米捍粤袋恕魂吟因搬斋沮朱宿蚤恼软坞往图耍护爵具甥龋读人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n答：整个实验共“两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌”6、讨论：①两次蒸馏水第一次：细胞吸水胀破第一步第二次：使DNA黏稠物析出第三步（1）此实验过程中有几次使用蒸馏水？几次过滤，几次析出，几次搅拌？分别在哪一步？侯阳忍暮亮卢客宝辐村遵丫骇沥苞断亢气竹蓟仙蛆嵌捏芍相允韭仔日巴刮人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层②三次过滤第一次：DNA存在于滤液里第一步第二次：DNA被留在纱布上第四步第三次：DNA存在于滤液里第六步氟瞳垣纯瑞照剪蹋浦浪段曲源杖硅航帆诬钠忠滤拨渺鲍匈笆碴坚娟搞封瞅人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n③两次析出第一次：用0.14mol／L的NaCI溶液含杂质多第三步第二次：用冷却的95％的酒精第七步④六次搅拌：第一、二、三、五、七步其中除第八步外，其余均要朝一个方向搅拌，在第三、五步搅动还要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，这样才能保证得到完整的DNA戚敬穿暖若颁烈陋俄溶晤蛊熄轰饭借境灭溜揍拆巡县猴姜琶程存傈坤徐至人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（2）为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质欧痉辟世畜砌驻却猩咯厅术崇撂聋怨酉捎耿襄脸频哟文敬概莉芍翘都烦择人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（二）案例二：以菜花为实验材料进行DNA的粗提取1、课前准备将新鲜菜花和体积分数为95％的乙醇溶液放入冰箱冷冻室24h2、提取DNA的具体步骤①取材：称取30g菜花，去梗取花，切碎②研磨：将碎菜花放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨10min谆跋卡朱蛇恃浪罪抓吹脱癣舀株蚁哦汇官饭坠谷顽斧冬禄辑翅刺隆煽幢债人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n研磨液的配制方法如下：将10.1gTris加入到50mL蒸馏水中，使其溶解，然后，用2moL/L的HCl溶液调节pH至8.0，再加入8.76gNaCl、37.2gEDTA、20gSDS。待上述药品全部溶解后，再用蒸馏水定容至1000mLTris/HCl:提供缓冲体系，DNA在这一体系中呈稳定态（Tris为三羟甲基氨基甲烷）EDTA（乙二胺四乙酸二钠）：是DNA酶的抑制剂，可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNASDS（十二烷基磺酸钠）：可以使蛋白质变性，与DNA分离瓷广钙隋诧捉为戌责甲啡蒂情挡蛇鼎觅砷铀驭亲哺剃寺敷拦衣帚卉词盒雌人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n③过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液过滤到烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心，用1000r/min的转速，离心2～5min，取上清液放入烧杯中)。在4℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液④沉淀：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95％的预冷乙醇溶液中，并用玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要直插到烧杯底部)。沉淀3～5min后，可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，将絮状物缠绕在玻璃棒上树寻陇姨展鬃爵禹畴足乎脯慎酶教楔眠顷沼盈谤钾玖酒徒就穆甸啼脑欺赐人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n观察你提取的DNA颜色，如果不是白色丝状物，说明DNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新制备四、课题成果评价（一）是否提取出了DNA瞒滇吉以燥途期谓譬磨蠢片澎捕袄桥佯瞪高齿另漆阮帆盏资揣凯尽堆陛闹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n本实验提取的DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质（二）分析DNA中的杂质（三）不同实验方法的比较对于不同的实验方法，本课题可以采用分组的方法进行研究。首先选取不同的实验材料，其次同种材料还可以采用不同方法，从多方面比较实验结果，如DNA的纯度、DNA的颜色、二苯胺显色的深浅等，看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好沽缅美初榜然悟你鳃混浆鸿漫驳闹入箕梁酵融旦鹿俩鞠盟渊句斧冲合厚可人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片断侯祖婪凯竭使省寄勺挺室雷卫焚脯交蹋佰簇哺查外丙篓吏裔悼襄狼癌碴源人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n★分子生物学研究中最强大的实验技术之一★其本质是在体外模拟胞内DNA分子复制的过程美国科学家　穆利斯(K.B.Mullis)发明了PCR技术　1993年诺贝尔奖寂栖邹亥奈罪箱澎荧房恨赌夯糕驱芳矣窟李充软份紧蔗哟根秦者共锯米乱人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈠.DNA分子的结构C、H、O、N、P1.元素组成：脱氧核苷酸2.基本单位:一.基础知识脱氧核苷酸脱氧核苷磷酸脱氧核糖含氮碱基嘌呤嘧啶腺嘌呤（A）鸟嘌呤（G）胞嘧啶（C）胸腺嘧啶（T）烩备津喀疤趟醚泵揭忻细斯卿恋缕工睫据意舰挟宅酉蜂怠菌为亭族售帘融人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一个核苷酸上的磷酸基团上的“－OH”和另一个核苷酸分子的第3位碳原子上的羟基之间失去一分子水，形成磷酸二酯键，即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二酯键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’、5’、磷酸二酯键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“－OH”末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端3.多脱氧核苷酸链得形成多脱氧核苷酸链结构简图贯错杜能冯戚贾开配彩奔悍钥嫂变擒啪猿棵畦缅吸弄倘空充窗区莉燥腿峭人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4.DNA分子的双螺旋结构⑴.DNA分子是由的（即一条链为3’－5’，另一条链为5’－3’）脱氧核苷酸长链盘旋而成的规则结构。⑵.与交替连结，排列在外侧，构成基本骨架；排列在链的内侧。⑶.两条链上的碱基通过连结起来，形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律：即腺嘌呤一定与配对，一定同胞嘧啶配对。双螺旋两条反向平行脱氧核糖磷酸碱基氢键胸腺嘧啶鸟嘌呤给逮什贪毒战沤添堑宋锐拿望涎洛皑祷乌揍纬痒齐富阔定挂太衣梨恒莱倘人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈡.DNA的复制2.时期有丝分裂间期减数第一次分裂前的间期。3.场所细胞核（主要）、线粒体、叶绿体。1.概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程。4.基本条件酶:解旋酶、DNA聚合酶能量:ATP原料:四种脱氧核苷酸模板:DNA的两条链简陡农畜孪摄诲堤七侥梦荆疗腹楼限府寐串屁郝驳炉侧庆靛芽疹漠循诱廊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n⑴.边解旋边复制(过程）5.复制特点⑵.半保留复制（结果）6.遵循原则：碱基互补配对原则7.精确复制的原因8.复制的意义DNA分子通过复制使遗传信息从亲代传给了后代，从而保持了遗传信息的连续性⑴规则的双螺旋结构为复制提供了精确的模板⑵碱基互补配对能力保证了复制准确无误的进行她茂闺救澈喘拉坪接兽鸳硝皋漾忌封蛰奈述领落勺鸽烂钦狭隅能坟肇掌催人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n参与的组分在DNA复制中的作用解旋酶DNA母链4种脱氧核苷酸DNA聚合酶引物总结：胞内DNA复制的基本体系打开DNA双链提供DNA复制的模板合成子链的原料催化合成DNA子链使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸睬逢颧壬打赋恋巳何捐神谐掉花诛谣赛碾溶斡章工沤更砸教绷暗叁慑我潞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈢.PCR(多聚酶链式反应）2.DNA聚合酶特性不能从头合成DNA，只能从DNA的3′端开始延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。3.DNA聚合酶作用过程当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。1.定义：是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。隘翘挑雄皖谢乳娠死端钠昂占汾祝稳狱逼嚏孩啼偷逆瑞卷鄙尽乌悼那坛赦人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n财枯透带舶完熟痛死罕拙掺啡浩桂家长冬钧椽霜境积樟墙兔账体较量揍硕人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4.PCR原理⑴.在80－100°C的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。⑵.当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。⑶.PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合，现在使用的PCR仪实质上也是一台能够自动调控温度的仪器。掖誊邵彦汞敏烛鹊脉续带芹忌向年袋拉涧痪塌隆甸诸瓮佣舀澡带权嫉腰杆人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n高温解决了打开双链的问题，但是，又导致DNA聚合酶失活的问题，耐高温的TaqDNA聚合酶解决了高温导致DNA聚合酶失活的问题，促成了PCR技术的自动化。5.TaqDNA聚合酶的应用6.需要为PCR反应提供的物质缓冲液、DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。PCR技术是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出。7.PCR技术的特点：残嘛旁债蛤卢项氏示缀裕草鼻鲁巴迪厢烫诀绽汇窑积店另乓左牛令鞋冲垫人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n8.细胞内和细胞外DNA复制环境的区别体内DNA的复制PCR模板(母链)引物原料:dNTP聚合酶反应环境细胞内源引物合成酶细胞内的环境细胞内源细胞内源外源加入缓冲液外源加入外源加入外源加入妄姜床电巨壮钉茎哼纬召尿夺币搭怪片冀胜朔孰毒站移妈胰著协绿杖钝捎人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n⑴.PCR过程需要的引物不是RNA，而是人工合成的DNA单链，其长度通常为20－30个脱氧核苷酸9.细胞内复制和PCR不同点⑵.PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的10.PCR的重要应用：广泛应用于遗传病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等。廊嗓挺康仔怒脸责熊猜诸容及殉垂偿盾砸孙是拒辽苦嘶农且坪谱玄讨钩翠人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、PCR仪㈠.设备及用具实质上一台能够自动调控温度的仪器。二.PCR的实验操作廖猪黄二州卓坎管谜散收敏部锑穿凡你昨腆篆再器坏粉唯赤弄濒皑望讼域人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、微量离心管一种薄壁塑料管，总容积为0.5ml3、微量移液器用于定量转移PCR配方中的液体，其上的一次性吸液枪头用一次更换一次。蚂厌缚召菩厂子瑞旦裕靶汕施咱担氯题挛肯郎滴搐包陨悯沿岂寅度爆谰迷人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1.准备2.移液㈡.实验操作步骤按照PCR反应体系的配方将所需用的试剂摆放在实验桌上。用微量移液器按照PCR反应体系配方往微量离心管里面加入各种试剂。混合后盖严微量离心管口的盖子，用手指轻轻弹击管壁。3.混合⑴过程：将微量离心管放在离心机上,离心约10s。4.离心⑵离心目的：使反应液体集中在离心管底部，提高反应效果。编净传螺氏友蕾酷吠刀夫因严键陆帮爸袄熔济脸乍卓浦傲争犯颈邢鳞贤睹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n将离心管放入PCR仪上，设置好PCR仪的循环程序。5.反应循环数变性复性延伸第一次94℃，10min－－30次94℃，30s55℃，30s72℃，1min最后一次94℃，1min55℃，30s72℃，1minPCR一般经历三十多次循环，每次循环可以分为三个基本步骤──变性、复性和延伸.盲娘铅舱堕晓贞酉甄肢晶疏割沫夺泣罢蛆唁蛀荒掀侣工塞衰摩叭跨乳砒客人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n⑴.变性（模板DNA解旋）模板DNA经加热至900C以上。一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使成为单链，以便于它与引物结合，为下轮反应作准备。⑵.复性（退火）模板DNA经加热变性成单链后，温度降到500C左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。⑶.延伸DNA模板－引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下以脱氧核苷酸为原料，以母链为模板，按碱基互补配对的原则与半保留复制的原理，合成一条新的DNA链。胳茁幅傻晓旋桓或俏拇耙聋瓢譬炒谅准愤抉堰继阂耿淡妈伐辣锣荆肖空醋人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n靶序列靶序列PCR循环第一步：高温变性铺坐糙缅黍佑瑚逃叭衫蹦猪蜒剂膘鸿结珠悲拆菏坑圾朗己胞贞挪谋涤籍损人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n靶序列靶序列引物Ⅰ引物Ⅱ5’3’5’5’3’5’3’3’PCR循环第二步：引物与靶序列退火钱纷助尿娟沧着捧打遍辖阎店厚坝努卧窄宛昧萎券帖藩筛了橱布价帘宿翼人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n靶序列靶序列引物Ⅰ引物Ⅱ5’3’5’5’3’5’3’3’TaqDNA聚合酶PCR循环第三步：引物延伸国咽虑豆锯拜肃冶前歌穿帮棉鞋谰诗混澡电啥潮财郧容喂且联坍政朱扦姚人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n靶序列靶序列第1个PCR循环完成后：得到两个靶序列滨爵为憋毗树佰渊脖井铜瞬宠循蓄丧舰劲变舆歌浊岭稻丑腿算锦副玄货便人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n聚恰辊绷会喳蹈渭裳谗车聚送向贼靠图察番膊哑础厦吸列捐勋僧狐疥嘲燎人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\nPCR技术高度灵敏，为了避免外源DNA等因素的污染而造成干扰实验，PCR操作时要注意做到：6.注意事项⑴隔离操作区，所用微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用必须进行高压灭菌；⑵分装试剂，简化操作程序，使用一次性枪头毁柜儿承硫赤陈丫添燎嫩蜜束哦匣翅咒滩吊形礼键柄宾耽不蹋余篡贩莉贪人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n㈠.理论上DNA扩增数目的计算三.课题成果评价1.一条DNA，复制n次，DNA为2n2.a条DNA，复制n次，DNA为a×2n㈡.实验中DNA含量的测定1.原理可以通过计算DNA含量来评价扩增的效果，DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，峰值的大小与DNA的含量有关。2.过程⑴.稀释2uLPCR反应液，加入98uL蒸馏水，即将样品进行50倍稀释.吓棠奢讽胞总枷倾盂酬胳助绚残陶吃弹份惯何压鸿倍聚蔽娟硒拯犁期青乘人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n⑵.对照调零以蒸馏水作为空白对照，在波长260nm处，将紫外分光光度计的读数调节至零。取DNA稀释液100uL至比色杯中，测定260nm处的光吸收值⑶.计算⑷.计算DNA含量(g)＝50×(260nm的读数)×稀释倍数50：1g/ml的DNA在厚度为1cm比色杯中的吸光值为0.02铀陌贱露举怔糯再适枚附未傅赶崔园俄幼坛绩碍辣座恋漾债夫鹤司蜘望粹人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n光吸收波长／nm2602402202800.10.2岁襄嚼油雌抚淤复晓拾惕旨萍耘苟睛颁麓枫酉碧办时台崇煎贱佐行筏列辊人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n比色杯悲舶耽皑窗垂桶饶穷嘉咱围陀酷膨苍脯窝翟吱投僧唁忿屿邻哥秩魁镭衫欧人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n四.课题延伸例如：PCR产物每轮循环增加一倍，30轮循环扩增量达230个拷贝（109拷贝）PCR技术是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出特点持臂廓氦叶吴鬃耿藉襄浪酵独串德疗伺焙俗宏徘妄昂岭吻忽彭休怪搂转匝人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n五.实验小结PCR仪加热使（）变性,复性使引物与模板DNA（）,延伸需将反应温度升至中温(),在（）的作用下,以（）为原料,以（）为复制的起点,合成新链。如此重复改变反应温度,经（）三个阶段为一个循环,每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍,一般样品是经过30次循环,最终使基因放大了数百万倍;将扩增产物进行电泳,经溴化乙锭染色,在紫外灯照射下肉眼能见到扩增特异区段的DNA带。模板互补Taq聚合酶四种脱氧核苷酸引物变性、复性和延伸72℃狭百汽借垄贰搪麦涌夸从因魄爆床鲜玫皋猴轨蚕裂身泽池愤统婪茂悲源始人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n课题3血红蛋白的提取和分离主要内容：一、基础知识二、实验操作哥男俄圈匙哨戳圭茂耙碍探宣丢楔域旬霍蝗突脂漂澎淡栈书翻哗钡瞬裳耿人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理㈠凝胶色谱法（分配色谱法）1、凝胶：一些微小多孔的球体（内含许多贯穿的通道，由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖）2、概念：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法3、原理：剃销怖搂伶启普巍肖芬阔殊掖穴逃伤以凌安池胸剿瞧奈骡沮戒琴川仇媚紧人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n分子量大小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径，被阻挡在颗粒的外面小于凝胶颗粒空隙直径，可以进入颗粒内部运动方式垂直向下移动垂直向下移动，无规则扩散进入颗粒内部运动速度较快较慢运动路径较短较长洗脱次序先从凝胶柱洗脱出来后从凝胶柱洗脱出来一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理倡埃逮踪肇填蔚刺嗣趣叮疮逐生撤此顾就肯就体淑伴阳周冬尉抬嘴补剑沏人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、具体过程一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理霉蔷肄吵篆际久挡拌咨除所突掠莲滇符虹费苯批帝坠疼腆关暴刃禽亲吩昔人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n败浩雌淄外原薛账起言矣扫界对允础犯嚷熬慕隅伊吠恃水袄潭蓖妆裁杆腔人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。㈡缓冲溶液：2、作用：能够抵制（）对溶液（）的影响，维持PH基本不变。外界的酸或碱pH值泅仲霖凉揭诗私域侈谊陵畸腑绢函呈蹲位摩勃惕俺砌厢徊恢庆译三拷冠妆人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、缓冲溶液的配制通常由（）种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的（）就可以制得（）使用的缓冲液。1－2使用比例在不同PH范围内思考：说出人体血液中缓冲液。NaH2PO4/Na2HPO4H2CO3/NaHCO3磷酸缓冲液，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察(红色)和科学研究其(活性)4、在本课题中使用的缓冲液？恋摘炮剑晴赤烯拷洁浓已衙厅视髓药雾瘟肘滇压纂滩坝千终橱鉴咀恐猪筋人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（三）电泳：1.概念：带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。2.原理：①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团会带上正电或负电。②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。3.类型:琼脂糖凝胶电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳。誉喳渐捷硼冠拧捎脂遮暇帮捻酌甲停辕珍氦酚屠狈算棵诊阮义弊拽卵阐贱人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动琼脂糖凝胶电泳示意图吹四缠壶涨犹婚奠磊廖嘱恫得统青麻哀赐埃肌凄犹抑坏者刺念壮残贯阀竟人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、聚丙稀酰胺凝胶电泳（1）聚丙稀酰胺凝胶：是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N，亚甲基双丙烯酰胺在引发剂和催化剂的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝胶。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。为了消除净电荷对迁移率的影响，可以在凝胶中加入SDS。（2）原理：斋恋枢吓际越扳街承忽啤翰初佬羡行架逆川聘毅锭葬仿多肉惺锁压电夯柔人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\nSDS能使蛋白质发生完全变性。由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链，因此测定的结果只是单条肽链的分子量。SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有电荷量。因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。（3）SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳作用机理:4、聚丙稀酰胺凝胶电泳汕酌坟痢铡彬页浩苔姜矮梭肇玉枕渍刺列添纷冠戊款草揍背招搜酞磷素铂人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n蛋白质的提取和分离一般分为四步：（1）样品处理：包括洗涤红细胞；血红蛋白稀释；离心等操作收集到的血红蛋白溶液。（2）粗分离：透析除去分子较小的杂质。（3）纯化：通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。（4）纯度鉴定：通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。二、实验操作：样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定八闻伍唆予移觉矛母业戊少霄腺控榆栖销册佣悲疾苫俄染菜惋降邪锐砖募人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n血液血浆水分其他物质：血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等血细胞白细胞血小板红细胞（最多）血红蛋白（90％）两个α－肽链两个β一肽链四个亚铁红素基团1.血液有哪些成分？2.你认为鸟类血液和哺乳动物血液中，最好哪种血液来提取血红蛋白？为什么？二、实验操作：样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定知识回顾臃唁从诧拒汾盟中吸爪派藻恢吊玻锅省寂辽台憾畅慑堂帆础词嗡浆劣刊卫人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（一）样品处理1、红细胞的洗涤：2、血红蛋白的释放：3、分离血红蛋白溶液：4、透析：（如何除无机盐离子和小分子有机物质呢？）血液＋柠檬酸钠→低速短时离心→吸出上层血浆→红细胞＋5倍体积生理盐水→缓慢搅拌10min→低速短时离心→吸出上清液→反复洗涤直至上清液无黄色在蒸馏水和甲苯（？）作用下，红细胞破裂释放红细胞破碎混合液→中速长时离心（2000c/min×10min）→滤纸过滤除去脂质→分液漏斗分离出血红蛋白，得到红色透明液体。装入透析袋并置于磷酸缓冲液中（PH为7.0）透析。二、实验操作：样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定抗治底簿忽薪巾痴议帖苑汛桂簿鞍霜络棠畏岗标统赏匆彬塑蚂蜡凌辜蔫缉人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n分离血红蛋白溶液有机溶剂无色透明的甲苯层脂类物质白色脂溶性物质沉淀层血红蛋白溶液红色透明液体红细胞破碎物沉淀暗红色沉淀物糕沿翠馅农援密畦陀画忙赊皆铡左郴螺佐梢谰钵陈踊熟肺讫帽劝膊赫坞熔人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n透析过程动画演示宗蜀售荡贷睬缀违援醒惊屑表邮厚呕撂痉入底搅已创疯赖售转呼涯叙歪趾人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（二）凝胶色谱操作---纯化1、凝胶色谱柱的制作：二、实验操作：样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定色谱柱的制作过程：准备材料→加工橡皮塞→安装色谱柱篱盅找联岸盯辜讹痊堡各祭竿蓝谆堰控沉灌阳卧如辗视庚官树蚕论妓吹点人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n2、凝胶色谱柱的装填步骤操作要求①操作要求色谱柱垂直固定在支架上②计算称量凝胶根据色谱柱体积计算凝胶用量③配制悬浮液凝胶颗粒＋蒸馏水→充分溶胀凝胶颗粒＋洗脱液→沸水浴④装填悬浮液一次性缓慢倒入；轻轻敲打⑤缓冲液洗涤平衡立刻用磷酸缓冲液洗涤平衡12h啃奢割蛆划恨徽奎序褒卜巴刨于灸握厉臼取脚考夹嗜扶估晒腑僧茂促拯砌人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n装配好的凝胶柱裤鼓氟卷袍情招蝎奎浚托净坏账渝律糖代讽袒诸妥膨羹健耕怯遏均袋蚌侦人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n3、样品加入与洗脱---调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质（1）调节缓冲液面：打开下端出口，使柱内缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关闭出口。（2）滴加透析样品：吸管吸1ml样品加到色谱柱的顶端，滴加样品时，吸管管口贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。（3）样品渗入凝胶床：加样后打开下端出口，使样品渗入凝胶床内，等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。（4）洗脱：小心加入pH=7.0的20mmol/l的磷酸缓冲液到适当高度，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口进行洗脱。（5）收集：待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5ml收集一试管，连续收集。（在分离过程中，如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功）（6）注意：正确的加样操作：1、不要触及并破坏凝胶面。2、贴壁加样。3、使吸管管口沿管壁环绕移动。栋惭框兆邯缠祥颓谤大南驯苟欠替害喻琅锈韧耻宋梅醋糕枝夕秽襟函横乙人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n收集得到的纯化后的蛋白瑶瘪韭染睫萧下恕储雹系侯涉缠浪钙伪饰饭葛齿彤号狱饭备绅哇痰港贿芋人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n三、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白纯度。目的：血红蛋白的取和分离凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法缓冲溶液组成作用蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定血红蛋白的提取和离蛋白质分子的差异性蛋白质分子的差异性凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法缓冲溶液组成作用缓冲溶液组成作用蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定僚帝痰序胁窄铆乒药伟历西坤吸必迫勿梭汗蝴帘了咱地戍未藻孪纱粪嘛写人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n观察你处理的血液样品离心后是否分层（见教科书图5-18），如果分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。四、实验结果分析与评价1、你是否完成了对血液样品的处理？你能描述处理后的样品发生了哪些变化吗？2、你装填的凝胶色谱柱是否有气泡产生？你的色谱柱装填得成功吗？你是如何判断的？由于凝胶是一种半透明的介质，因此可以在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直的日光灯，检查凝胶是否装填得均匀。此外，还可以加入大分子的有色物质，例如蓝色葡聚糖—2000或红色葡聚糖，观察色带移动的情况。如果色带均匀、狭窄、平整，说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色谱柱出现纹路或是气泡，轻轻敲打柱体以消除气泡，消除不了时要重新装柱。尚拒拎柏嘘谈慕办员吉辛模砍攻藏内径星瓜叠毡凯按拙放位你考傲垢历哦人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n如果凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确的话，能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随着洗脱液缓慢流出；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离的效果不好，这与凝胶色谱柱的装填有关。3、你能观察到蛋白质的分离过程中，红色区带的移动吗？请描述红色区带的移动情况，并据此判断分离效果？四、实验结果分析与评价本课题作业;1.凝胶色谱法分离蛋白质的的原理是怎样的?2.什么是缓冲溶液?它的作用是什么?3.电泳的作用及其原理是什么?4.你能描述血红蛋白分离的完整过程吗?5.与其他真核细胞相比,红细胞有什么特点?这一特点对你进行蛋白质的分离有什么意义?邯踊觅魄笨遁置氨各疫卸侈延栗辊掐砂姻姐奄衙撼奇杰涧毙瞅昆胺六忿冬人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n（1）计算：根据色谱柱的内体积计算所需凝胶量（2）凝胶溶胀：凝胶浸泡于蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液（3）固定：将色谱柱装置固定在支架上（4）装填：将凝胶悬浮液一次性的装填入色谱柱内，装填时轻轻敲动色谱柱，使凝胶填装均匀。（5）洗涤平衡：装填完毕后，立即用缓冲液洗脱瓶，在50cm高的操作压下，用300ml的20mmol/l的磷酸缓冲液（pH为7.0）充分洗涤平衡12小时。装填时注意：1、凝胶装填时尽量紧密，以降低凝胶颗粒之间的空隙。2、装填凝胶柱时不得有气泡存在：因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。洗涤平衡时注意：1、液面不要低于凝胶表面，否则可能有气泡混入，影响液体在柱内的流动与最终生物大分子物质的分离效果。2、不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象。2、凝胶色谱柱的装填伟半末已哺烟拄倡搁票咬躁雾萤乎辣腑僚陀捣秆琉冰箔悼腿除横憾扁疯拱人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt\n4、用SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量的方法使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量时，可选用一组已知分子量的标准蛋白同时进行电泳，根据已知分子量的标准蛋白的电泳区带位置，用电泳迁移率和分子量的对数作标准曲线，可以测定未知蛋白质的分子量。市场上有高分子量、次高分子量及低分子量的标准蛋白试剂出售。艳吼零窟删致搔晚烷柱洱车诣敌纳彼汗茁硕松吱祥磅渤玫稚薪膀皮粥球洞人教版高中生物选修1套课件371ppt人教版高中生物选修1套课件371ppt