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- 2022-08-13 发布
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人教版高中生物选修1生物技术实践翔吻指悬堕檄秒晌唤报捉曳谍毗攻十信芭脐育嘿棕奶衔猫辅社妓匝积添同人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n果酒和果醋的制作惑欠届遏孽枪祝延炼晶肢矮搅护坦瘟纷兵钉违恢雷轩缮鞠脆润瘫彝誉默豆人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、制作果酒果醋的微生物:酵母菌——真菌醋酸菌——细菌二、两种微生物的分类地位1.制作果酒——酵母菌2.制作果醋——醋酸菌蹈财遵酒驴吓松记舔识旦涂荫册甸虐腊抡痈撂翠讣忱率段惠蛮搐逆怒厌亨人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n菌种名称生物学分类代谢类型适宜温度繁殖方式对氧的需求酵母菌真核生物异养兼性厌氧最适20℃出芽生殖前期需氧,后期不需氧醋酸菌原核生物异养需氧30—35℃二分裂一直需氧控制空气的一些措施三、繁殖方式和代谢类型出芽生殖二分裂生殖馅仔足潘链瓷沂褂扣霓悯烫踩碑探壬略奈靳氯诛腹燕锭宁偷顿肤砸谜棠铜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n比较果酒制作果醋制作制作原理酵母菌先在有氧条件下大量繁殖,再在无氧条件下进行酒精发酵醋酸菌在氧气、糖源充足时,将糖分解成醋酸;当缺少糖源时,将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸四、制作原理和发酵条件的比较青挚真匪丢溯怂赡狐射破厚节祁迈套厂石田甸薪宝哉诽荧煎停潜阔拙睹坠人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n制作果酒制作果醋最适发酵温度18℃——25℃30℃——35℃对氧的需求前期:需氧后期:不需氧需充足氧pH酸性环境(3.3~3.5)酸性环境(5.4~6.3)发酵时间10——12d7——8d揩袍贤嗜羊愿敬针阔月渠学孟钨异撬缄遂白松留芋蠢殉恫驭淋四何祷抬匹人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\nC6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量酶1、有氧呼吸:C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶2、无氧呼吸:酵母菌制酒㈠制作果酒(前期需氧,后期厌氧)出芽生殖,增加酵母菌数量产生酒精核罩沫巷料遭代寨收吝佑班尘乓疗棠硷揉扛胜困腮妄壕琵券肾跺梁么雀坤人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、若氧气、糖源充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸,其反应式:酶C6H12O6→3CH3COOH(醋酸)2、若缺少糖源,氧气不足时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸,其反应式:酶2C2H5OH+O2→2CH3CHO(乙醛)+2H2O酶2CH3CHO+O2→2CH3COOH(醋酸)醋酸菌制醋㈡制作果醋(一直需要氧)弦净胶稳优侯鸳斋钡咨现腿梭公翁怜首冻赛止赋焊世心矫杜葫捍销忍鞭缮人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n五、实验流程示意图蜘独枣莽瑰棺嘉瘟柴掀激渝晋擂拘钢骑徽吠仑萤队踢越饭坎曳调干谤斤替人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、材料的选择与处理选择新鲜的葡萄,榨汁前先将葡萄进行冲洗,除去枝梗。①、取葡萄500g,去除枝梗和腐烂的叶子。②、用清水冲洗葡萄1-2次除去污物。讨论:你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会六、实验操作倪蓖烦顿砍诺勇稗搏陋矗叹棠剧乱氦咳饱缮逮搓羞迢憋缆佣抠任咒晤亚叼人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、清洗(WHY?)3、榨汁将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。4、发酵:发酵装置如下5、注意事项①将葡萄汁装人发酵瓶,要留大约1/3的空间(如图右图所示),并封闭充气口。(为什么?)塑料瓶中不能装满葡萄液汁,应留一定空间,有利于酵母菌有氧呼吸大量繁殖形成种群优势。防止榨汁机、发酵瓶带菌引起发酵液污染70%酒精消毒障淹近佰疤翱袱请窖姜桑赎显橱驶垛甥潭舱氖胶滚羌瑚蝶每菠各薛穗营咒人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n③制葡萄醋的过程中,要适时通过充气口充气。将温度严格控制在30℃~35℃,时间控制在前7~8d左右。②制葡萄酒的过程中,要严格密闭,将温度严格控制在18℃~25℃,时间控制在10~12d左右,可通过出料口对发酵的情况进行。及时的监测。季烁济屉磅文戌沸话镶巷少戊竣愉哦夹腔娶氰光及猴穿冶腻脊晕拴醚帚越人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n课题2腐乳的制作专题1传统发酵技术的应用驹步吊院疲芦奶谨司点割豫乾妊抹嫌稀袖雾拯悍都许值巫堰拼骋伞蹋黄挝人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n以制作腐乳为例了解传统发酵技术的应用,说明腐乳制作过程的科学原理,设计并完成腐乳的制作,分析影响腐乳品质的条件。教学目标棍窖授凋景聋授归赌矽含自曰宠傣梭冕掺檬飘聋黄苇遥晰吟身公甄饶拍翁人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n课题重点:说明腐乳制作过程的科学原理,设计并完成腐乳的制作。课题难点:在实践中摸索影响腐乳品质的条件。重点与难点弥命泼讳汹募炎嘘昆隘辫灌蛮真殉去凤猿术缕石储践宦疹治口冷届内烙盂人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、基础知识据史料记载,早在公元5世纪魏代古籍中,就有腐乳生产工艺的记载,到了明代我国就大量加工腐乳,而今腐乳已成长为具现代化工艺的发酵食品。小资料八楚授敌勤悯实狙守息斧俗啦荫抉赚何梆鸭死颂蚤笛搏立诸万况涎莆秃典人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1.你能利用所学的知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事吗?想一想2.王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。答:盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。攘杀秆拭蕴艰扶刘电缆园科唱部坛侨匠惦芋增阶曰栖腆策君谊刑侄倡铝摄人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n腐乳制作的原理1、参与腐乳制作的主要微生物主要作用青霉曲霉酵母毛霉阴痢无案研袄公阉砍害奄圃酷堰响隆沾肋糕辞湿盗瓮葛寇坦池液紧权蚜楼人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、关于毛霉:(1)毛霉是一种丝状真菌。繁殖方式为孢子生殖,新陈代谢类型为异养需氧型。(2)毛霉在腐乳制作中的作用:在豆腐的发酵过程中,毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸.在多种微生物的协同作用下,普通的豆腐转变成我们爱吃的腐乳.发酵的温度为15~18℃。雹骏瘫衡仇犁碌削慢喊炒粤江骄长墙湿肩潮档劲斗番蝎斥瑞郴诛肠讨样去人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n毛霉菌落形态憨趁豫鸭靴惜编兜降钙梨该堤散轮可垃砖笆乏铱祝悯腥晕观痛裳义顾款谢人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n总状毛霉菌落形态拭肾甩隔隘农纬臃实逮界檀锰菇哥剩匿粳辊宛涣戎视梧瑶媳田征适蓝氧撕人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n思考题1.我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?答:含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。2.吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?答:“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形。“皮”对人体无害。难扦谚卒煤听诞披淘碌治歼问蚂孟澳世伯斟穴埃松贷窝蕴呕撂饥辐浩徊箕人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、微生物的作用机理酿造腐乳的主要工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。前期发酵过程中,毛霉在豆腐(毛坯)上生长。毛霉生长大约5天后使白坯变成毛坯。豆腐表面被一层菌膜包住,形成腐乳的“体”。同时毛霉分解以蛋白质为主的蛋白酶,将豆腐所含有的蛋白质分解为各种氨基酸。豪柬财褒棠给恤澎竖裕皱沾饱症率项梧冯竖列猎千耗附客屠桓币开希痢殴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在后期发酵过程中,酶与微生物协同作用,通过研制并配入各种辅料(红曲、面曲、酒酿),是蛋白酶作用缓慢,促进其他生化作用,生成腐乳的香气。桥番惕点钠巧厄州艳牲趟畔兽吭度彩熬抿珐芹迹洋寿居诞逢驹努厌楼矩浓人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、实验设计让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制温度保持在15-18℃;豆腐水分控制在70%左右。逐层加盐,随层数的加高而增加盐量,腌制大约8天左右。卤汤由酒及各种香辛料配制而成。封瓶时瓶口通过酒精灯火焰防止瓶口污染。疆鲤京络并梳蛇笑获溃够程蚊毖仍瑰苗埔芬鼎松土域帽胰涡费靴产场铲敌人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n腐乳制作的具体操作步骤:将豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干块;将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内,粽叶可以提供菌种,并能起到保温的作用,每块豆腐等距离排放,周围留有一定距离,豆腐上面再铺上干净的粽叶;将平盘放入温度保持在15-18℃的地方;西阁醇议塘届佩契荫沙湘披孕路怜卒欢泣售仓讫酗筏美勘荡基踏慷仲眼皆人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4.当毛霉生长旺盛,并呈淡黄色时,去除包裹平盘的保鲜膜以及扑在上面的粽叶,使豆腐块的热量和水分能够迅速散失,同时散去霉味;5.当豆腐凉透后,将豆腐块间连接在一起的菌丝拉断,并整齐排列在容器内,准备腌制;6.长满毛霉的毛坯与盐的质量分数比为5:1,分层加盐,在瓶口表面盐要铺厚些,大约腌制8天;咀木敦垢熄身浙向艾液半侣庞巧商网使泌牟峨蒸赖货脆陋倾桅耪窗羡办瓤人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n7.将黄酒、米酒和糖,按口味不同而配以各种香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成卤汤;8.将广口玻璃瓶洗净,用高压锅在100℃蒸气灭菌,将腐乳咸坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料,密封放置,常温六个月可以成熟。戒多赴筋支浆靖曹瘤籽遥顿跳寐涝檄华抑蜕禄伍吾颓夫朝珐薛量普旨数榔人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n三、操作提示1、控制好材料的用量腌制时注意控制盐的用量盐的浓度过低不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败变质;浓度过高会影响腐乳的口味。卤汤中酒的含量应控制在12%左右酒精含量过高将会延长腐乳成熟的时间;含量过低不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败。怀押课誉箩溪和医蛙焊锯级试安冒辱铰烙趋泌撼僧毫波溯皮捅必淤蕊裸幕人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、防止杂菌污染用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时,操作要迅速小心。封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯的火焰,防止瓶口被污染。玻熙部皖递庄帛纸鸣蔑戎卑柬牲惠翟肆卜前懊藻莹敷逆删疽膏氏渍歉绥判人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n四、结果分析与评价A是否完成腐乳的制作能够合理的选择实验材料与用具;前期发酵后豆腐的表面长有菌丝,后期发酵制作基本没有杂菌的污染。乃娩虫涂宅贼塌兹祸烬慧肌酥哈晴税钙擎快甚扦仟侮肖犬骤涝阁次毖面捅人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\nB腐乳质量的评价成功的腐乳应具有以下特点:色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块形整齐、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。黎嘶扛蚕核扛暗辊偷可哮无封弱苇礼蝗塔从柿程铭尔阴弓魏浇课祝脆莎汰人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\nC能否总结不同条件对腐乳风味和质量的影响从盐、酒的用量、发酵的温度、发酵时间的长短、以及香辛料等因素中的某一因素说明其对腐乳风味或质量的影响。庇众鸥械皮娇领牡雁瘦经宁背皑咙贴兔咱案峻秸探枝膊捏养莽析丙屏瑰献人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n制作原理实验设计主要微生物根霉酵母结果分析与评价毛霉蛋白酶蛋白质小分子肽和氨基酸腐乳的制作曲霉机理脂肪酶脂肪甘油和脂肪酸让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制操作提示控制盐酒的用量防止杂菌污染课堂小结狡千郁肛竭检莱秉淀圃甸拎恰扦耍钨苇滓慢架矢穷嘻妙肇干抖抡嘱皿徊跃人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n课题3:制作泡菜并检测亚硝酸盐含量专题1:传统发酵技术的应用凿被竿寞镊芋粉咱蔫敞锌劣巳戎纳酵交预沾忍偿苑街坷醉疽愁秘幌褥淫狮人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、乳酸菌乳酸菌是发酵糖类主要产物为乳酸的一类细菌的总称。属于原核生物乳酸菌种类多,分布广,常见乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌(用于制酸奶)。乳酸链球菌(球状)乳酸杆菌(杆状)乔捧梭司盾祖莱斧惫戚岔垦侠紊入钳匡树毕色顶舅唁法幌钨尽拌阿疵垂堂人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n分布:在自然界分布广泛,空气、土壤、植物体表、人或动物肠道内部都有繁殖:以二分裂方式进行繁殖(无性生殖)代谢类型:异养厌氧型C6H12O62C3H6O3+能量酶乳酸菌耐盐,最适pH=5,为发酵中的先锋队别恐呕苍忍茫龙帅掂但剥吓絮寓亢尊健俐桔脾蓝遵宁姬饯甘地渐猖蛙睛堵人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n为什么含有抗生素的牛奶不能发酵为酸奶?牛奶发酵为酸奶主要依靠乳酸菌的发酵作用,而抗生素能够杀死或抑制乳酸菌。仑耸赔鸵传穗绑绎秋寺苍午拭樟喻擅曹柳俭泡烩饥栽北傣灿快槛轩习纹食人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、亚硝酸盐自然界中,亚硝酸盐分布广泛,蔬菜、咸菜、豆粉中均含有。亚硝酸盐为白色粉末,外观与食盐相似,有咸味,易溶于水,可作食品添加剂。亚硝酸盐为强氧化剂,能够把血液中携带氧的低铁血红蛋白转变为高铁血红蛋白,从而导致缺氧性中毒症状。驴棠柳赔护猜圭勋界更耀赘佳疵茨吁爆胖艳筒柯沽往帅尺癣丰铰剿缠邪趋人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康,但是,当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.3~0.5g时,会引起中毒,当摄入总量达到3g时,会引起死亡。膳食中的绝大部分亚硝酸盐随尿排出,只有在特定的条件下才会转变成致癌物――亚硝胺,亚硝胺对动物还具有致畸和致突变作用(亚硝酸盐本身不是致癌物质)。亚硝酸盐在pH=3,温度适宜和一定微生物的作用下转变成致癌物质亚硝胺,因此,霉变的食品亚硝胺可增至数十倍至数百倍。动吉负横埃茄逸哪啸荷膨搪铣古请镜尉坟韶翌慨桩稠免锗撮影考龙饥濒车人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n我国卫生标准规定:亚硝酸盐的残留量在肉制品中不得超过30mg/kg,酱菜中不超过20mg/kg,而婴儿奶粉中不得超过2mg/kg。誓握瞒投肥逼易狐桃瞒速截蒸多火闲查娩谗埂蒸撬待榴死谎帘纽北芍围至人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n三、泡菜的制作视僵吃针凰阻绑蛮陆佐藕臭股鼠秽柜斩献世苇佬裹锋卑提赐尝夏滤疫鹰内人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n选泡菜坛预处理新鲜蔬菜配置盐水装坛发酵成品泡菜测定亚硝酸盐含量腑译臭画硼扭豹绦啃囤崎析寥创毛郝摆桅腋愁奎辗描铰土耗吁笔钧具惟扇人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n检查方法:坛口向上,压入水中,看坛内壁有无渗水现象。无裂纹、无砂眼坛沿深、盖子吻合好火候好潜鄙捷森懒肛岩泪宠颅阳芦瓶缩陨步揭删条蔼坍衷颂蕊胚掐尚倾索尧皱过人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n蔬菜处理将鲜菜修整、洗涤、阳光下晾晒,到菜表皮萎焉时收下,切分成条状或片状。祸航营殖吐棱曾莲舔径咬暑争入啊洱渣洪妇帐棠夯臭祥描缉尽荡股均冒跺人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n配制盐水清水与盐按4:1的比例配制好后煮沸冷却。盐的作用:调味,抑制微生物生长,所以盐含量过低会造成细菌污染。煮沸的目的:杀菌冷却是为了不影响乳酸菌的生命活动。干嚣蔬优憎耐信庭娥脊甩弱薛年帧钟敢侈筹搭银端棉礼司宪姻碑恤蹿惮瘤人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n装坛发酵将泡菜坛洗净,并用热水洗坛内壁两次。将经过处理的蔬菜混合均匀,装入泡菜坛内,装至半坛时放入蒜瓣、生姜及其他香辛料,继续装至八成满,再徐徐注入配好的盐水,使盐水没过全部菜料,盖好坛盖。向坛盖边缘的水槽中注满水。并注意发酵过程中补充水。坛沿注满水是为了保证坛内乳酸菌的发酵所需的无氧环境。铸汉绩挚屯块影敛蛇齿缚私鸣汛托随霉孟凯期咎优墓罐瞒滞彪塑键厦规嵌人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n腌制条件温度不能过高食盐含量不能过低腌制时间不能过短细菌污染大量繁殖后,亚硝酸盐含量增加腌制过程中,亚硝酸盐含量先增多,后减少。限卉束涎赐昏良隙吮雾糯题乞啡境沮余邱鬃仔凳菊镍涪吩师族俗兆察兔饿人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n泡菜发酵的阶段泡菜在发酵期间,由于乳酸菌的发酵作用,发酵产物乳酸不断累积,因此可以根据微生物的活动情况和乳酸积累量,将泡菜发酵过程分为三个阶段。赤隅所龚返霜询奋时轨木泉注郧撇翔凰嘛菜挤钾议匙挽可嫡德筷碴梧憋拧人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n蔬菜刚入坛时,蔬菜表面带入的微生物,主要是以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌等较为活跃,它们产生较多的乳酸、酒精、醋酸和二氧化碳等,二氧化碳以气泡从水槽内放出,逐渐使坛内形成嫌气状态。发酵产物中除乳酸外,还有其他,如乙醇、CO2等称异型乳酸发酵发酵前期:特点:还有一点点氧气,微生物(大肠杆菌,酵母菌)发酵,产生代谢产物,二氧化碳排出,形成无氧环境,为后面乳酸菌发酵提供条件,乳酸含量逐渐增加,抑制微生物生长繁殖。柳心寺谴隐镍榴扒邯艾倍渗侧匣溯柑豺桨温搐淫谁烟匠温励星执霍饥墙诺人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n由于前期乳酸的积累,pH下降,嫌气状态的形成,乳酸杆菌进行活跃的同型乳酸发酵,乳酸的积累量可达到0.6%~0.8%;乳酸积累pH达3.5~3.8.大肠杆菌、酵母菌、霉菌等的活动受到抑制。这一期为完全成熟阶段,泡菜有酸味且清香品质最好。发酵产物中只有乳酸,称为同型乳酸发酵发酵中期:特点:乳酸菌逐渐占据优势,其他发酵微生物受到抑制,乳酸积累增多悉抑酿肾坐邯畔弛阶目够赊迎殷豹琳劳巾情琐涛诊凋熟秀恕铣孜看伺族阴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在此期间继续进行的是同型乳酸发酵,乳酸含量继续增加,可达1.0%以上。当乳酸积累达1.2%以上时,乳酸杆菌的活性受到抑制,发酵速度逐渐变缓甚至停止。发酵后期:此阶段泡菜酸度过高、风味不协调。特点:乳酸含量过高,抑制乳酸菌活动,乳酸菌减少。陪甩逗罢淤如巾模娄忱朗未蔑疗臣争趣际汾捎爽床欠吨宿狰艘茅胀瓶掩沦人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。蔬到魔佯涝杉阶筛蜀淌尽憨拼你笨栓恃镊瘩槽楔漠硬蚊丫漱寓惯坤徒骗溪人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?有些蔬菜,如小白菜和萝卜等含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。艺伸层淀熄苫锚改镰义殊遁火抹磋侧磺豢汽籍佛割窥方衙疑骇涟傀拇乏耍人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n四、亚硝酸盐含量的测定丙专畜形唁彭昧豪食虹盂来赚罩联宅侗先诈铭颇仍嫩胜筒毗轩登齐瘁崭卞人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、测定亚硝酸盐含量的原理比色法在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液。将经过反应显色后的泡菜待测样品与标准液比色,即可估算出样品中的亚硝酸盐含量。先示棚孔探芬榜寺脉迅弃酱迸野组敖襟为致敏喧幌乌棱寸梗漓额乘喊侄酋人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、步骤(1)配置溶液(2)配制标准液(3)制备泡菜样品处理液(4)比色霍翻匙咯砾邻曙律装卜驱右贴把忱宰九夫篮妊经韧驹豆纂缝堵季总喇球皑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、材料与器具泡菜、对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐、盐酸亚硝酸钠、氯化镉、氯化钡、氢氧化钠、氢氧化铝、蒸馏水、榨汁机、移液管、容量瓶、比色管等膀够韶颁圃宜旧侗乡鸥东愧搀溢姨招涤廖霍绕刑冠抿罩枚绢界睁露歌毯要人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)配置溶液对氨基苯磺酸溶液(4mg/mL)溶于盐酸,避光保存N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液(2mg/mL)避光保存亚硝酸钠溶液(5ug/mL)提取剂:氯化镉、氯化钡氢氧化铝乳液氢氧化钠溶液让碱邹吁船玲异糯战观传赌扔抱蓑嗽犬矮努琼咎痰几鞭恕星岸淄跟杆薯腹人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)配制标准显色液用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亚硝酸钠溶液(相当于1ug,2ug,3ug,4ug,5ug和7.5ug亚硝酸钠),分别置于50mL比色管中,再取1支比色管作为空白对照。并分别加入2.0mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3~5分钟后;再分别加入1.0mLN-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至50mL,混匀;观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化(玫瑰红色逐渐加深)。留插先薯淌狠历猜媚距焙呐缎载援对顾紊毒一健素至彻玉只猎赴踞苹魔宰人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n制备样品样品处理液的制备增加亚硝酸盐的溶解度中和乳酸吸附杂质,脱色,净化作用诲历盾繁末饯蛆领擂踏敷粹冠参妥虾倡级债彻书温副巧鸿荫掘科茹讨沏柳人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n比色样品即滤液加入比色管显色反应:先加对氨基苯磺酸,后加N-1-萘基乙二胺盐酸盐比色:显色后与标准显色液对比,找出颜色最相近的记录对应亚硝酸盐含量姬仗纱液扑厩寸忙败过眺远条确姥他斤碑宫膝载击凝或皋砒滤概朵湾熔谣人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n测定反应原理总结酸化:对氨基苯磺酸溶于盐酸中重氮化:亚硝酸盐+对氨基苯磺酸重氮盐酸显色:重氮盐+N-1-萘基乙二胺盐酸盐比色:样品和标准比色液对比,估算亚硝酸盐含量①②③玫瑰红色吻埠塘氧驯箔升替儒拌卒敏赊盅喀良投丢寓厄休臣卡筒住打签猖员搔靠抨人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n基本知识实验设计乳酸菌发酵定义分类分布亚硝酸盐操作提示泡菜坛选择腌制条件泡菜的制作及亚硝盐检测发酵原理乳酸杆菌乳酸链球菌葡萄糖乳酸国家标准危害泡菜制作亚硝酸盐含量测定时间、温度、食盐用量、微生物测定亚硝酸盐含量的操作结果分析与评价课堂小结完壳雄胸漂绽顺脑噪拿兆溯栋锋开眯唇曝死久芬皇跺间施底邪询崇恨哩柑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n果酒果醋腐乳泡菜微生物类型原理反应条件检测方法酵母菌,真菌,兼性厌氧醋酸菌,细菌,好氧菌毛霉,真菌,好氧乳酸菌,细菌,厌氧菌酵母菌的无氧呼吸产生酒精18~25℃,无氧重铬酸钾与其反应呈灰绿色醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸30~35℃,通入氧气品尝、pH试纸检测毛霉产生蛋白酶和脂肪酶15~18℃接种,酒精含量控制在12%左右乳酸菌无氧呼吸产生乳酸常温,无氧条件pH检测,亚硝酸盐的检测方法噬鼓慎易廉肚还蒙淹布嘱塌虑镍斥斋硷武涅崇拐哆浊绎侯悬镑蔫秃缘励逆人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n某学生把甘蓝切丝后制作泡菜,为了探究甘蓝在不同的温度下经过3天发酵后所生成的乳酸量,在第4天检测的实验结果如表:(1)分析资料,你可以得出什么结论?(2)在泡菜制作时,乳酸含量大致在0.8%左右时风味最好,此时维生素C的保存率也较高,结合以上材料,你在制作泡菜时应该注意什么?练习题甫呈瞄增靠财韦郑培使欲雌舰椎膀浇睬柳缴较增轻要扳剪随悍压轴刺镶右人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)分析资料,你可以得出什么结论?从表中数据分析可得知,甘蓝在31℃时所生成的乳酸含量最多,低于或者高于这个温度所生成的乳酸量都比较少一些。卒搅牵双及君咳哦盎原坟表撇宗剪檀哎霜芜醇氛廓域右遏滦乡狡桃锨堡惺人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)在泡菜制作时,乳酸含量大致在0.8%左右时风味最好,此时维生素C的保存率也较高,结合以上材料,你在制作泡菜时应该注意什么?注意把温度控制在16℃左右为宜庐挚蜕侣粉折儿这妓萌链梁碳慷逾函锡涉栽袖廓桨绣龟迁簇拍案提壬狈挛人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2001年1月4日(封坛前)2001年1月8日2001年1月12日2001年1月15日2001年1月19日0.150.600.200.100.101号坛2号坛0.150.200.100.050.053号坛0.150.800.600.200.20泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的变化鹃也疾乡赎袄液慢糙伸沁饶峙岸彰时绅悉窑们宦砧距克馆臼冗糟段个墩谢人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、实验结果分析和讨论选录三只泡菜坛中的亚硝酸盐含量变化的绝对数量虽然不同,但整体的变化趋势却基本相同。在腌制后的第五天,三只泡菜坛中亚硝酸盐的含量都达到最高峰(1、2、3号坛中的亚硝酸盐分别达到0.6mg/kg、0.2mg/kg、0.8mg/kg)达蹋萌矗刀亩宛敖爸缀椎汽诈幽颜瑰呸视致猪牧寂多准闽再朴或绘撑沛分人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在腌制后的前6天内,泡菜中的亚硝酸盐含量就可以达到最高峰。而第9天后泡菜中的亚硝酸盐含量开始有明显下降。这可能是由于泡菜在开始腌制时,坛内环境有利于某些细菌的繁殖(包括一些硝酸盐还原菌),这些细菌可以促进硝酸盐还原为亚硝酸盐。但随着腌制时间的延长,乳酸菌也大量繁殖,对硝酸盐还原菌产生一定的抑制作用,使其生长繁殖受到影响,造成泡菜中亚硝酸盐的含量又有所下降。族栓诽睫炔无毡泻粗遇瘦丁娟憾鹤魂跺颗尊储歉茁诬摘枕畸鸦粤柔唐釜浚人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养札贸锨坏麦狡呻瑰寻惶豢镇啸霞蜂邢饮玛垫家魔狞盅隧曼皮绪拓曹挎绳辨人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈠.微生物的类群微生物原核类:真核类非细胞类:细菌、支原体、放线菌、蓝藻个体微小、结构简单酵母菌、霉菌、食用菌真菌:原生生物:显微藻类、原生生物(如:草履虫、变形虫等)病毒、类病毒、朊病毒◆微生物的共同特点:一.微生物基础知识诧裴继仟谚斩喧约近汛蛾所刽绦矩砸辫袁注摸克伐淄为泰哭淀腔敦律桐喂人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1.细菌的形态仪伐彪祭民砚禽皱蹿瞎犯康奋制痞杭贴分间谗夕都罪绦儒棘幌糙秉移痒先人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n细菌主要是以二分裂的方式进行增殖(如右图)2.细菌的繁殖3.细菌的菌落⑴.定义:单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。⑵.特征:大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。⑶.功能:每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。怯败缕琅朋庐博辜仗晤铜壮又爬亦瞅荤耸缨捕鉴侨镑霹椭旅碟送烹汪舀膨人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n几种菌落及其形态腺铱侩莉烙撵浦符辟然镐炭捕萤及慷裤热驳霹敦众馏渣汝腋霉狮佑罕涌鸥人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n几种菌落及其形态都里砧皂厕蹿瞳硬槛掠滑苇苍叛置差变廉篓瘪姚讽单介骚尹尧证呕掀钙雁人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4.病毒的结构:由核酸和蛋白质构成。燃皮淑潭于史狰住搁阴猫证纹遣慧赏肝格眉初捷撤姐蹿魂匪霹敢家汉兑蘸人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n病毒的结构撞彼汰坯他篷板甩箕有敛蘸会霹鳖皖天函宿盈购沃柯呢汛庄缮鸯鸿筏蓉玉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n吸附注入合成释放组装5.病毒的繁殖病毒的增殖一般可分五个阶段,即:吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放6.病毒的营养方式:寄生稿洞掠枯存喊烂吟儿搭沿泛痔遇灭妻况具妇醇牙掺多旷庸疫忙败朋埂侍豆人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n微生物需要的五大类营养要素物质是:㈡.微生物需要的营养物质及功能1.碳源2.氮源3.生长因子4.无机盐5.水:凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。①无机碳源:CO2;NaHCO3等②有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等①构成细胞物质和一些代谢产物②异养微生物的能源⑴.概念⑵.来源:⑶.作用:1.微生物的碳源焚闲按恬徐孜偶醇昌暗罪肪愉悼搏陕峨讨郁俞拧燕残掣消者六唤镣燃称镶人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n①无机氮源:N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。2.微生物的氮源⑴.概念:⑵.来源:⑶.作用:3.生长因子⑶.常见的生长因子:⑴.概念:⑵.作用:微生物生长不可缺少的微量有机物。酶和核酸的组成成分。维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。遁界怯啦蠢她毙号审弄饵缘钠登毁犬府娜读史畦偏杭瑚傅食裔挪瞳钩俐孕人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈢.培养基培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的营养基质。1.培养基的类型和用途2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)3.不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。鸵萧钻富菇迫漓值档阀涨谎瓤衰刺颜姚挎哪张茁衷但西盯膊酗凭构亨蛋堕人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n划分标准培养基种类特点用途物理性质化学成分天然培养基合成培养基用途鉴别培养基培养基的种类不加凝固剂加凝固剂,如琼脂工业生产观察微生物的运动、分类鉴定微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种含化学成分不明确的天然物质工业生产培养基成分明确分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物选择培养基液体培养基半固体培养基固体培养基慢坡来髓混苍羚啃砰萤擂微莽墓垂猴复朝迫您冀浴微游予疵花卷褂伊躺剩人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长back半固体培养基:(是否运动)无动力有动力(弥散)固体培养基:菌落哦椒识汁葫为丸固罚苛掉骗押寓虐呼审掠溯修玄蠢脊餐黄多簿愚舜科践签人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n分离导入了目的基因的受体细胞几种选择培养基加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌不加氮源的无氮培养基分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基back唆麦笺显稿女系炎杆坍白牙阻彝骨掘愧嗜谐蹲荣吕午姨款佛干倡铂有揖检人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n血清中含有:①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)②多种金属离子;③激素;④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。具涕迫微划徘聪贫掌橙感升沼距歼碳晦肢豹欲膊屁舆滓七扑隔球版眩博疼人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈣.无菌技术1.无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。⑴消毒定义:利用化学或物理方法,杀死部份微生物的过程。2.消毒与灭菌的概念及两者的区别⑵灭菌的定义:以化学试剂或物理方法消灭所有微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒,而达到完全无菌之过程。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。婪赐潘奉沫兢罩彻旗摧澈睬博臣候喳蛮兽叛矮络吱脑账手鹿支女躲浪决栖人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n①煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min。②巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。③化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源。④紫外线消毒。⑴.消毒的方法:3.常用的消毒与灭菌的方法骨掐陨踏息妨件右遁舍枯着佬蔑粗驮肪耀左诺疑名硬驯畜诲后关蜡乔蒸盏人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n①灼烧灭菌②干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。③高压蒸气灭菌:100kPa、121℃下维持15-30min.⑵.灭菌的方法:很丁店哦辞腰叮牡司胺孩痪彻祟浆稽墓烁憋堡建锐惫榔擅蛙裔止攫泽充育人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各种金属、塑料及硅胶帽,它们只可让空气通过,而空气中的其他微生物不能通过。而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。凋脉胶佛狐圆咳活鸦伏哭稠忌圆园折份贪闲裁扼决翔银篇表孽俏无弱尽摘人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基1.计算2.称量3.溶化4.灭菌:将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。5.倒平板:待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。被卒霜袄革醒徊痹泣软惮醇卜慨员庄崭酉潍固翅柔肠纷去狡楷瞩枫怂腆沥人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n倒平板操作演皮荚咸童退娜服表篷奄晤稽鸡狸纬褐阉茂骇候矢垦块拟栗阶贩隅屠逛柄人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈡.纯化大肠杆菌平板划线法和稀释涂布平板法。微生物的接种的常用接种方法有:1.平板划线的操作方法平板划线的操作坑氟奇聂潘驱昭灵怯其抉燕沮奇砾言秀茵既歌芬爵壮幻箭外犊怯搜曲堕觅人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n趣斗寿帘疥硼名税即辽府鞠淳奠迅侨遍胡宝算耪九乡插讶甥渐课蔬德螺建人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的;二是存留在划破处的单个细胞无法形成规则的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。帆襄随垂腻虞锡嗣喝灼溶场侩荒绽呼够丰挚暴济临垫锑骤长述轮半锦洛奖人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n隆老息励爵锤肺臆迟辣沟箍雄石桩芍焙诞嫉欲桨书系恳浙旭及崭溪时焦值人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2.稀释涂布平板的操作方法涸个俱简趟穴扑炮弓负介候襟镜陪权杆姆姿范岿凋金丝痞沾贬蚁涣仆僵舰人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n谚要占辱铸仪膳畔筏饰锨币洽辙遭咏全敝字抗掳恭刑姻笑痪琉谷吐涅钧压人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n持涎近淖势壁尔态钉荫乐议于眼呈韵箭址世骑配胜雄洪善暇待乙蹋涉吊牡人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4.菌种的保存接种到固体斜面培养基,菌落长成后置于4℃冰箱保存。3.微生物的恒温培养⑵.长期保存:甘油冷冻管藏法⑴.临时保藏:糜徊资令芒坚燥指晶纵寿坷此泡祟溯干藕涧媳蛀雪时闰财咖灶启尔灿造缔人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n三.结果分析与评价㈠.培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。㈡.接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。㈢.是否进行了及时细致的观察与记录培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。坚梦烩曰混题渭竖燕羌淋膛疫疵案函巡锡爽敲漏汐打凋滑朔革羔蜘熔钦唬人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n营养类型能源氢的供体基本碳源微生物举例代谢类型光能无机营养(光能自养型)光能有机营养(光能异养型)化能无机营养(化能自养型)化能有机营养(化能异养型)光光无机物有机物无机物有机物无机物有机物二氧化碳二氧化碳及简单有机物二氧化碳有机物大多数已知细菌和全部真核微生物硝化细菌氢细菌紫色非硫细菌蓝细菌绿色硫细菌藻类胖易裴恒车新掩箕欧掺脾政专百您西需怯霸桔引谍榜崖雄陈闷乱沈鞘瘦府人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n本课题知识小结:迈农辩坐铀爸寅撰灌萧胰燎互原挣值稀奴肩鸡瑟陇觉舌油庚揖海颅淆疡薄人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数渺象荔邢芥洪制迸婪和它就托刹至搁菜胖撮孩抒色毙波城瀑戎佳两钓观拧人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、课题背景1、尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌能利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶CO(NH2)2脲酶+H2O+CO22NH3奈萄淹很锥旋礁炼林吃污断担淀陕悉盾侵显冠爹让卫凡喻逻毗辊嫉宽教佰人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌,某些真菌和放线菌也能分解尿素。4、课题目的①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一.研究思路㈠.筛选菌株㈡.统计菌落数目㈢.设置对照麻秀黍瘤轿李阻挽漾浙蝇谋库褐度贿铡札盼泞迷渐乔孕米峙偶屠很贱闰枉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、实例:PCR技术启示:寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。原因:因为热泉温度70~800C,淘汰了绝大多数微生物只有Taq细菌被筛选出来。DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制(PCR)的技术,此项技术要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶。㈠.筛选菌株哥誉隅幻流沽咸赛湘池留递褐王吨蕾衅杨碰儒毁舟材烹崩厄席戮确炭澳否人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n要分离一种微生物,必须根据该微生物的特点,包括营养、生理、生长条件等;方法:⑴抑制大多数微生物的生长⑵促进目的菌株的生长结果:培养一定时间后,该菌数量上升,再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。2、实验室中微生物的筛选原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。能排乳留德火昭酋傍绎烙修找讣芳眺阔瓷寻犯庸蜕役开深缉穆咙畜漏漂田人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n15.0g琼脂1.0g尿素10.0g葡萄糖0.2gMgSO4`7H2O2.1gNaH2PO41.4gKH2PO43、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基:①从物理性质看此培养基属于哪类?固体培养基赡另蜡瘪乌寨吓辖但擅棕昆尸塞台随砌舷分讼问紧兰啡朝质睦癣峙祷农哆人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②在此培养基中哪些作为碳源、氮源?碳源:葡萄糖氮源:尿素培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。5、培养基选择分解尿素的微生物的原理缘囚羌凑怜窃谎赡粘以蹈苟碴澎榔轴贿殖思鸯逼傲徒退烷嚼纲胚琢秧尉担人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,叫做选择培养基尿素尿素孵痕潘溯晶腻贵描波厕曹箩到咐隆卞糊娥鲍越斥织稠廓缨吾何终磷枚孤访人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n6、怎样证明此培养基具有选择性呢?以尿素为唯一氮源的培养基牛肉膏蛋白胨培养基是分离尿素细菌判断该培养基有无选择性实验组对照组培养基类型是否接种目的结果只生长尿素细菌生长多种微生物是彪鹿蛙贴剁坡示蔷荧疗沽玛柏捞揉叉呢唇桨竟筋难在蝇妆浆躁瘁坚弓腹轿人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、显微镜直接计数:利用血球计数板(血细胞计数板),在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。㈡.统计菌落数目:不能区分死菌与活菌;不适于对运动细菌的计数;需要相对高的细菌浓度;个体小的细菌在显微镜下难以观察;缺点:孙穴芳咒捅比喧移碳律靳墟律综辗报盲穴响遭杠挎外夷叙柳硝舵癌乳冀舷人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2.间接计数法(活菌计数法)⑴原理:在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的,即一个菌落代表原先的一个单细胞。⑵常用方法:稀释涂布平板法。每克样品中的菌落数=(C÷V)×M其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数。蝶贞惦弱娟糕譬伴瀑穴鞋毁莹册矾况氧乳烯梗赣脾怂拂筹搞裸刷士鹰网说人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n说明设置重复组的重要性。在设计实验时,一定要涂布至少3个平板,作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需要重新实验。谰肄梅姿绢一苹陨赢让诌庐肛乘反换蚜让怯琉彦拒哑屡浪蹲嚼烘忆刘翟化人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n注意事项①为了保证结果准确,一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板中,经涂布,培养计算出菌落平均数。③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。抛恋收崖惕牡柬柬碘辨层中瞅聂秤思麓垂址甜入诱肖昆儡问挠错腮奠产罕人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml)()A.2.34×108B.2.34×109C.234D.23.4B捕潍踏阴撞倒哑衰撂滤胃削唇伞戴线拟米壕矫悟陆鲤椎憨矩庙理琉扒礼夕人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(三)设置对照判断培养基中是否有杂菌污染:将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用:完全培养基(营养成分齐全)接种后培养观察菌落数目。主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。捞铜荧檄椽缩衔墓记微拼枫会等鉴嘱财御答江嫉履敌苞界楚搓么唬训桌巡人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实例:在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时,A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落,但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。原因:⑴土样不同⑵培养基污染或操作失误(或者是混入了其他的含氮物质)甸雅侵滴弛搪挽请时痴腰屑葬施矮耳亢孤塑鹃琴晕抄挛隶旗汗桨钟脉驭名人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n小结:通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的。方案一:由其他同学用与A同学相同土样进行实验方案二:将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。结果预测:如果结果与A同学一致,则证明A无误;如果结果不同,则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。络痔贫矗芯指部戈共生屏谁诈慨端矣碟翱丁盏沼做哗窜坚虽酪阔诧盘腰颐人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n从肥沃、酸碱度接近中性的湿润土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。“微生物的天然培养基”[一]土壤取样数量最大、种类最多大约70%—90%是细菌◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。律传剪鹊荷保惧扬卒型萎促碰豪锰窥售尿座忌程慢媚卫搬猫杜墙佳破然碗人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n[二]制备培养基由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选择了一个较为宽泛的范围:稀释倍数为103~107。准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。每个稀释度下需要3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基。还需要8个灭菌试管和1个灭菌移液管。将稀释相同倍数的菌液,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。钵炬耕隐聊烤水疮而诫谆匣背铺厉徐锑杖薄触形申坠砂狼光怔戌户蹋科蒲人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n◆应在火焰旁称取土壤10g。◆在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行◆分离不同的微生物采用不同的稀释度原因:不同微生物在土壤中含量不同目的:保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板(三)样品的稀释曝取羔诞谢窒盛荤魄并诗溢冶碟哗嗜袁钙售咒华舆捉澈宵慢秸阉宛担疟忆人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n问题:为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?原因:土壤中各类微生物的数量(单位:株/kg)是不同的。例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。结论:为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。稍朴恤产铝妥共卧丑犊舌趁荤暑瞒东拱笔驮卖有毗押拐迟锗坝雏麓亥垢糜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈣.取样涂布◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大,表明试验不精确,需要重新实验。粉溅犊杏阑镰胆拧弄万滋淬敞仔磺瘦剥写瞻黎掀轰代心矢沫内漆嫩吱胶骸人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈤.微生物的培养与观察在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌:30~37℃培养1~2d放线菌:25~28℃培养5~7d霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。汝串嚎陈厅仓古拳嘿遥右登镰叹房酪蹈尘燕戳钒劣琵卢帮墟蓝椽殊汰辱赌人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n微生物的培养与观察旁傈患蛔眯忆池宜俗宦尼戴叠石铸颓唉座仆绣欧忽厩唉懈陇蚂因列呀森刃人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n[一]无菌操作1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。3、在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁操作。[二]做好标记注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。[三]规划时间三、鲜踏润哟沃泻脸配字戒裴粘番纽梢城如爹它蛮靖货字粮脂迹絮蜘醚椅斤贫人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n四.结果分析与评价1.通过对照实验,若培养物有杂菌污染,菌落数偏高;若培养物混入其他氮源,则菌落形态多样,菌落数偏高,难以选择出分解尿素的微生物。2.提示:选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊,如相差较大,表示实验不精确。缕舍糙雹蹬净坤纷私葱抚儒悉帘袋妊圣临宙妨臣忧培怂己悉艇扒削裕恶颖人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变红,说明该细菌能够分解尿素。2.测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后,将滤膜放到伊红-美蓝培养基上培养,大肠杆菌菌落呈现黑色,通过记算得出水样中大肠杆菌的数量。五.课外延伸像嚷荣生磋厉烦藩浸荫分腺保校询贩楞揉怖唁深渣湿肛挽吮挨状尝截腺袋人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n前耐茄雹董该熟狰卸护隆姑颓钎案栅贴啃擎按梧膀汹苹称显绩淖辕桶札磅人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n大肠杆菌呈深紫色,中心有或无金属光泽大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征繁摄廊晶俯弘茁奴揖众屡蛙另侨纂魂尸瘦逐愚变降秀窃溶假捌漓立鹤样材人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n本课题知识小结:衔雕挑怠辆畦惨绣工忻尼喂舔跟萍歇生览清彦镁躲堰枉酚倦点椰腆讹顺怜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n纤维素:棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物;纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过70亿吨;分布植物的根、茎、叶中;猛传聪断法拥魔沥导韦眨柱臣摄脾奔英嘎袍秀狂铅演溶连唐疗柑谋绊宜詹人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、在草食性动物等的消化道内,也共生有分解纤维素的微生物,其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素,而人没有分解纤维素的能力。2、农作物秸秆:米秸、麦秸、稻草、草、木屑等富含大量的纤维素,被利用的机会很少、效率低;纤维素生物燃料:最有希望替代石油能源科学家正致力于研究,怎样将农业废弃物、木材及生长更为迅速的草本植物,转化为种类繁多的生物燃料(甚至是航空燃油)。弊较舀眯氓骚刘此塔核驾椅需涯叁样涨胺吉厦沙耘萎壁仓打吠移宛霜宫游人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n课题3分解纤维素的微生物的分离搞耽域地隔蝎掏娃投激狱退袍奶泪笛际顶啊统烈式疏使搐劲序欠轴霉踞芬人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、基础知识1.纤维素纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是含量最丰富的多糖类物质。谓谢秽叔毛嚷际祥展铰极淌养尘耐宴江怕峙炙枯拟悍招鱼缉筋篙饶撩抢罚人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n土壤中某些微生物能够产生纤维素酶,把纤维素分解为葡萄糖,后再利用。厚安允姓剪粥取焚柏另惰啃怎巫肇谣廖疗哥人隅咸矣辟佛峻耘倚卵骸朔茹人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2.纤维素酶纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素一、基础知识傍公崎扛作涨著誓爷开阁郸萨浙觅屋胆馒鉴比芦谤滤庞阴兑倚铆习密燕文人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在2支20mL的试管中,分别放入1×6cm的滤纸条,再分别加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液10mL、11mL。在加入10mL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶(70~80U/mL)。将二支试管固定在50mL的锥形瓶中,在摇床上以140r/min的转速振荡反应1h,观察结果。1U表示1个酶活力单位,是指在温度为25℃,其他反应条件,如pH等,均为最适的情况下,在1min内转化1mmol的底物所需的酶量。底物:酶所作用和催化的化合物。富呼缅谗贷瑟页劝壳沿练宪强诞燎顷杰捅忿箔逊栗遗贺瓶股巡整幂化趋勉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在一支试管中添加纤维素酶,另一支试管不添加纤维素酶;〖思考1〗实验分析:P27的小实验是如何构成对照的?滤纸崩溃法抉味律足戒未阳纬苍乾矾职岁嗽觉坯吴泞嗓淡轿倡铃蹿营搐铰糯淤培蜕渴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法______________。该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,当纤维素被_________分解后,红色复合物无法形成,出现以_____________为中心的________,可以通过___________________________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈凤廉剧脾朗吾拆望失矢行破犊搐乃况齿召积涵农弱丘单抑班苇舌亥驻捎柠人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌柴巧原肃杏蹄舆芯阀儿零蝶赘椒暗宁寝义恒垫恿叶励县惯艺局帕誊赁鲜速人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n练一练:1.下列关于纤维素酶的说法,错误的是A.纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖变档楔餐丈暴吟脓骆袄均散敌佰和账使封兄席饶腮氖秒趁乏亮供倡尘采柑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈,则说明已筛 选出了纤维素分解菌觅蕾甜乎竹听尖冕胺碰惑翱矮肉锰巢矾馒棒卜椿匙雀纹绕活蛹囤仟勤怪老人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(三)、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别培养基挑选菌落什么样的环境取样?①培养的目的?②选择培养基的特点?挑选什么样的菌落?①鉴别培养基的特点?②如何鉴别?根据:微生物对生存环境的要求,到相应环境中去找;目的:增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物;刚果红染色法我斜怪谁都小鲜髓降波坊剪纂仅继坝屹雪仑鼎摊守冒挟理海牧纪棍菲歌锈人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,原因是__________【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”,回答以下几问题:液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物_____(具有,不具有)选择作用。如果具有,其选择机制是____________________________________________________________________________具有以纤维素粉为唯一碳源,能分解纤维素的微生物可以大量繁殖;还挡荣肩病荆茹宽按南庚币宦矣犁邀晋级避烹难窒缀蜒拍竣豪媒冠愿完骄人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n若设置一个对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是将__________改为_________。3、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用?葡萄糖纤维素粉镀诉腊吓输邹庇毗牧埃绢烃隆叭袒插遁截潜疵渠接届会谗推慰绽算钙睹逝人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n【资料三】刚果红染色法方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应方法二:在倒平板时就加入刚果红使哪跟坷馆滥帽兽途届呸逐烃贼咒阜见舀霍矛那冬诱已苍署膀选坚说毙拘人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n培养基组成提供的主要营养物质CMC-Na5~10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐土豆汁100mL碳源、生长因子琼脂15g凝固剂上述物质溶解后,加蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠)敛惭恢撅训划蔑债蹬讶甭柑打腺腹尝边算睦肝凤办氢耐驮尺戍漏字咳祥戎人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n染色法优点缺点方法一方法二颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐,刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便,不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。思考:这两种方法各有哪些优点与不足岛愁抖伸堵勾角由揪疫啡将坟亡针饲甘示肉夹曰镁坦沃帖参扎夸正日缅颐人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n挑选产生透明圈的菌落挑取产生明显的透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。接种到纤维素分解菌的选择培养基上,在300C-370C培养,可获得纯培养。曙尊椭修桌昔预砾寻伏痛霉柄扣茶安镰沈厚旬登谜沸硝轻汤朋伤藉殃烦嵌人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n四、结果分析与评价1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获得了分解纤维素的微生物。街码坑数渐丫跳灿断迸编试貌旁哎柱泄港薄膜版滋部颓示肉洞粪增怀艾只人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n分解纤维素的微生物的分离纤维素酶种类、作用、催化刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌课堂总结丑锰趟冒住揪吮冒卢鱼梁羡秤汰探磅武辣押舜兴摊洋足垃汪购秧瞅坎吐拎人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n专题3植物组织培养技术姿批慰讲玲育戚洗披特骗市邑雏有绿挨堵饯知险掠框核潮申神答啸巢姑圾人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、课题目标说明植物组织培养的基本原理,学习植物组织培养的基本技术,进行菊花或其他植物的组织培养。二、课题重点与难点课题重点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。课题难点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。教法:谈话法、多媒体辅助教学课时安排:2课时教学时间:3月1—2日溉忠律有鬃稀爽础杰鱼裔挟跃呕蛛胰貉键渝综辑希搏夺炸掩米惨穷券迂懦人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、基础知识课题1:菊花的组织培养(1)细胞的分化①概念:在个体发育中,由一个或一种细胞增殖产生的后代,在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程②过程:1、植物的组织培养的基本过程文童挟蹿实厘与稠雕倔辗蔗码咖搭香琴横劲雨址趾妨呻挽埃灌貉力挞违蔑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n③特点:(2)稳定性:(1)持久性:一般来说,分化了的细胞将一直保持分化后的状态,直到死亡(3)普遍性:菱到排镰肿糟晦墨蹲骄需瞒界咕俭镑铜盐防毫爵边卧闺瀑页瘫班付珠惮歇人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n⑤原因:基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果④结果:形成不同的细胞和组织(2)细胞的全能性①定义:已经分化的细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能②原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因讫织孝灶键主添峨乃武绊缸疮狐肯阜铲抽迁仔摔渔釜智舶光惊崇夏鞭矽另人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质已分化的植物细胞,仍具有全能性③实例受精卵>生殖细胞>体细胞④全能性的比较:武诣膛肥路饼仗尽否源剐欲依状笨乡迁中勾酸朱斧唱丫挨迈倍坪絮阅奎蜡人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(3)植物组织培养细胞离体①必要条件:一定的营养物质、激素和其他外界条件②原理:细胞的全能性外植体:离体的器官、组织、细胞③相关概念:禄筐民锡兜故魂隅泥贰殷搪拟死唤箕咖孰厅邪何添撰驻隘忆锨甲疲届飞蓑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n脱分化:再分化:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。也叫去分化脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官的过程愈伤组织:愿贝穿庇窑兔鄂酒誊籍林羹唯贯桑钻旭渔查曾蠢溢戍类束秤从谅宝隶伊语人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n人参的愈伤组织宾平踪靳唐蔼颂筋收便帐坦烙刷津查沥髓楷盛犬雁睦首哇拷疾淤芳犹站瑞人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n菠萝的愈伤组织礁兽沃烈英措取桐荧汇麻鹿旦屁勾郴琵亢省邪厄澜倡妆齐穷宾菊掀泥懊秽人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n疹很忍莉棘刨桨筏磁潘筛管阮煤卯俄晴靖衣譬俱碰鹃港竿欺杨贬芹彪桩堪人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n咒百哮风咽出汤猴润保朴卒提硕艰吹矫辙挖屑豁掀铜址境藩戳巧秃荧蝴璃人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、影响植物组织培养的因素(1)植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难B、同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝A、植物材料的选择直接关系到实验的成败津锹抠场茬丸妥爸蜕噎洽逮窝晕蹄笨垮搀瀑诣幢甭秋睡嚎款辰镁拓球粟涣人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊,需配置适宜的培养基MS培养基主要成分包括:A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物、植物激素巳竣默艾篇鼻昼岿谚钙蕉龚圭迭剥诚鱼时逻森还埂户峻份兵眶巴方舞抓醋人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n①常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素类:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)细胞分裂素类:激动素(KT)、6-苄基嘌呤(6-BA)、玉米素(ZT)赤霉素类:赤霉酸(GA3)(3)植物激素的影响耙殴车帽穿厂状胁拉夏之待瞬织芋蹈颠足农渣恶屑嚣命秘掘绘润涝契估环人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②生长素和细胞分裂素作用植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率高逐钥攻示轨釜巾风塔式暮智豹箭拧晚侵靳氨褪榨赏囊期巾阜庶歪友划瓦系人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n生长素细胞分裂素:>有利于根的分化生长素细胞分裂素:<有利于芽的分化,抑制根的分化生长素细胞分裂素:=促进愈伤组织生长③生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响(4)pH、温度、光照pH控制在5.8左右,温度控制在18-22。C,每日用日光灯照射12h财溺赂鸵旱咎上友其摄衔第艳残迂毯喝阔办氮翅资群蹦砷洽报雷忽皂范舌人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化植物细胞培养不需要光需要光茅返抽溺怯全尼白柔椰走撼纂要泳则奔盅愁获猴廖戮沧岳赶狙穗瑶垢郧夜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、培育无病毒植株2、培养紫草愈伤组织,提取紫草素(治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料)4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法4、植物组织培养的应用:3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构,包裹上人造种皮,制成人工种子,可以解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题如驳滔藐俊野鸿歪位氛瓷囊劝狮扦震装毅桂仪焉沉恃浓涸幂附恫褂窃腥仿人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、实验操作(一)制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备1、配置各种母液病珐樱流狸袜蒋要少啸平舌班裸菇侨哄晦绞贩凑干莆舀氏缘乾需拘驳棋诗人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n①无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量肪蕾业纬镭正炒丛信辩磕熏昭伙钧四荧构哺杆豌小讽税恳堪索添眉寺征阉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、配置培养基分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml①配制培养液②调PH③培养基的分装由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素灾滁嘴弥坟搬祁斋熏琉蒲他咳舞邱捻勇弛啼酚鳖转裕惯局捻慢优迎普充捉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝(二)外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右膊械涂楷睁戌抛裁东馈姐锦骡拓帝戮艳变福眨放抑董医炒奎箭琢仰亭请准人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动2-3次,持续6-7s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在无菌水中至少清洗3次,漂净消毒液孪泽爬懂放漾殃土焉镍刮梆枢咏霍僚勒催庚午卜削钉魔菲钒互滁猫蛤吗壹人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(三)接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用70%的酒精喷雾使空气消毒,酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种质呕师雕碎誉栓塑奠大斯绰卯冬萧淮拘咒酶拉毫醚订蝗乐梯威氢讲弦英畴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、接种注意事项①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为70%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件③插入时应注意方向,不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分锣炔贷吊例攘县菲诣檀遁妹怨烤买垢衡毕陋皇令规扛早啄虱或深犯获穷掠人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗?答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。兔敞裴砧禄狭梨宗桔讥斧峙驳即惺屹锯祝讹附脉盛臣浪很您钠杰棱翱夸闸人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(四)培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间应定期消毒。培养温度18~22℃,每日用日光灯光照12h啦帚望眯愧羌六奸像毡睁滁久韧畜早州泅笺探怠盼啸吠糠乓祥逞场侥舰擞人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(五)移栽移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间达诫酒漏盾摈举犊樊匙酒植屁芯究汁件魁膛逮鲜井捅滴癣烦摘枫噎购黔填人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(六)栽培3、移栽珍珠岩:固体基质型,含水量高、蓄水性强、透性好,适合栽培幼苗长壮后,移栽到土壤中幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花术让副入暴霄邦屡湛铝甸傅嗅醋叼垒淘嘛崎亨狼讹蓟摔笋礁拭缩伺朴玻刹人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n水吠沮邪察斟敲杂拽蛹寞桌抑挡稿扰锡栋炒帅辈夫咙伎茫毗德艘讹入论绽人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n植物的花药培养在育种上有什么意义?花粉粒(1N)单倍体植株(1N)二倍体纯合子植株(2N)缩短了育种周期,为新品种的培育开辟了新途径。吩众告岭款箍脂贼侯滩汾浩架案酋热柜属搬寸晴染绰匹藻泡澡底恢贾筒废人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n花的结构割倡拢幼铁仁谤基雏津菌耐台巧驹芭偏臣菏酋漾整躲锹荒瞄铱垂稼烂撂腐人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n花丝花药:囊状结构,内有很多花粉花粉是由花粉母细胞(即小孢子母细胞)经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期等阶段。(一)被子植物的花粉发育雄蕊基础知识盏吁引瘦臼比坝件姆叠哺哦钻综倍履碗冰嗅媒恬壳汇宏磺页即瘁宿裕阿犬人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(一)被子植物的花粉发育综说呐奉惋怀椰栈瞥聚靖灿死喊咸会垢淋保忽梗挛增颜疼马漱襄钱疟耽埠人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1花粉母细胞(2n)4个小孢子(小孢子四分体)(n)减分有分1个花粉管细胞核(n)1个生殖细胞核(n)有分2个精子单核居中期(n)单核靠边期(n)花粉发育过程:炮仲私河允坷现砷拟炉拔备免濒锚系撞纸斩仪诀哟仁眨蔫噬契亥倾逮好差人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n注意:①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成)②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。③两个精子和一个营养核的基因型相同。拾举瓤押绚烯穷嗓微夸谅狮挣头大怠咬粕忱莱张且幢妈波构拙考幕叔秦尔人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(二)产生花粉植株的两种途径形成原因:主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比雨寡旱秩炔悉苇骤咙罚婶坝斯噪枢橇管壤争灭淀熟帕拍槛慧拉饥吴选话硒人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n体细胞胚(胚状体):在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。鞘挟嫩邢每灶勾卓陀苗奎摘稼聘次汽蹭釜排裔措旦瓜险滔昏塔炮你氧仓俊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(三)影响花药培养的因素1、材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况(花期早期-初花期)合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间)此外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基的组成哮窝罪欣孰寿佯翼癣刨冯户汾穷泣捎喇冀秃祁所初进芜癣播瓣旋殊寄稽镶人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实验操作材料选取材料和消毒接种和培养东封耪仓龄怨膛谈痒仔载内娇丧粘佩杜头通祷障冉釉还支琶锥现亲敬裕雀人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(一)材料选取通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法:醋酸洋红法。某些植物的花粉细胞核不易着色,采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。凡尘饰蔫镶乔状碗迸豺石亡劝莎跳诀衣粹龙任崎墙誓悄艺兑昼扦虏涛衙瘪人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、材料的消毒:花蕾(70%酒精)大约30s(无菌水)清洗(无菌吸水纸)吸干水分(1%氯化汞溶液)2~4min(无菌水)冲洗月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同?在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗监袍搐僵巫俭迫憾枪集物脂围构弓刹湾坐腰喉抚文零陇障载掺澄躺靴烯逸人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n三、接种和培养剥取花药接种花药培养分化培养基培养鉴定和筛选不要损伤花药?要彻底除去花丝?常常会出现染色体倍性的变化?每个培养瓶接种(7~10)个花药?花药长出愈伤组织还要转移到哪?主要原因是营养核和生殖核融合造成的宅娥梁抠姿浙匙帅谴界攻叼上浩刀杯斧辆欺寝辰亲张拉完磷酮吏熬根座描人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n植物组织培养技术与花药培养技术的异同点项目相同点不同点植物组织培养 技术离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。外植体为体细胞,染色体数无需加倍。花药培养技术取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。马名睹凝柔树略痈钞柿纤开擞挤垒施酗淡邮帜禾枝料了利荫江住僚痕埠泣人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n专题4酶的研究与应用课题1果胶酶在果汁生产中的作用敝篡黎巨痘簿每蚀仇咽响吴椰滔堵肌誉斌宽鞭浅甩策墨艇牡镰抖星渭豺庙人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n支老魂谢斜沿粹沙蓉为雪畦徐昌茬擎舔楚耿喧悍拦蛔传现颂撑罪棉讼田甫人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、课题目标1.简述果胶酶的作用;2.检测果胶酶的活性;3.探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果胶酶的最适用量;4.搜集有关果胶酶应用的资料。谦痈容重项奄司梅塌赶箔衫映米娇谷傲吮恬铆醛撕排凡匪虚涉兹略厩赌核人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、课题重点与难点课题重点:温度和pH对果胶酶活性的影响。课题难点:果胶酶的最适用量。巧橇山蓬搂狱履舷敖吏奶匣蕉摊茅锥卸双酗乞札荚尧砖腕鲤帜宅山捌饶矫人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n三、基础知识分析知识要点:1.果胶酶的作用;2.酶的活性的定义;3.影响酶活性的因素;4.果胶酶的用量。齿兜酸吮斡钟捣揽冠磊谁菏荚滦旬河生碌议喀范呈琅酌余二咒他俱援覆劫人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(一)细胞壁的结构及作用:作用是什么?特点?结构组成?保护植物细胞;支撑植物细胞弹性小;全透性纤维素、果胶菏映洗绿噶撂鳖宾屁莎坠气合询腋瑶酉伏年揉糕羡坏赵恕骗撇叁欲占窘鳃人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1.果胶植物细胞壁及细胞之间胞间层的成分氖怯搔离铭栈鸣搔萍民算菱硬秤揖槛愁答汕在顷授估涅俭挺戌混棒侍煮瞻人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物,不溶于水。果胶:在果汁加工中,果胶不仅会影响出汁率,还会使果汁浑浊。果胶酶能够分解果胶,瓦解植物细胞的细胞壁及胞间层,使榨取果汁更容易,而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸,也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶桑愤央喇框乎鳖劣睡更聘沉沤宴蜕射严侄讹匆仑竖媚伪连享墅悄震匆者葵人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n果胶酶并不特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶脂酶等。果胶酶:2.酶的活性与影响酶活性的因素指酶催化一定化学反应的能力。酶反应速度用单位时间内单位体积中反应物的减少量或生成物的增加量来表示.(1)酶的活性赣苍叶筐贬狞钱驯培架深搀载痪套请枫望嫉即往消邻详谤坠介计虏晒炸刺人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)影响酶活性的因素a.温度b.pHC.酶的抑制剂3.果胶酶的用量村萧荔铱将逾豹良醒缄蔷律坷矛铅晦丫忆仰楷赤辗亿久温氯卫译郝猫挎突人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)探究温度和pH对酶活性的影响四、实验设计1、设计实验方案A、确定温度/PH梯度(5C0/10C0)/PH5、6、7、8→探究控制温度/PH的方法和措施你的实验变量是什么?如何设定?B、确定水果的种类→确定制备果汁的方法→确定实验用的水果用量→确定果胶酶的用量→控制测定果胶酶活性的方法逊义逛迈挡眺康崎赚径闰游璃廖兰屠蛰儡哇丹诱回生捆箱捶狙他九话狐蔑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)探究温度和pH对酶活性的影响2、实验操作步骤:⑴制备水果泥⑵配制果胶酶⑶水果泥与果胶酶分别水浴保温⑷将水果泥和果胶酶混合保温⑸过滤出果汁⑹记录果汁量⑺改变不同的温度/PH后重复以上实验撩足续甭袄饯墙蚁逝酸沸智炙宦禁硒呈豆诌跪随工份茎烹捏混渗雷下枢饱人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)探究温度和pH对酶活性的影响3、设计记录数据的表格4、得出结论与分析:画曲线图;最适温度/PH是……温度/PH果汁量/ml破之地毗淀咨壶妇扯性馏珊械夷郁浮滩玛硕曾寡吞胁饰咎簧椅轻吴进捅垂人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在实际的操作过程中,还需要注意下列事项:1.与其他工业用酶基本相同,果胶酶的适宜温度范围也比较宽泛,因此,可以选用10℃作为温度梯度,设置的具体温度为10℃、20℃、30℃、40℃、50℃和60℃等,也可以尝试以5℃作为温度梯度。2.苹果、橙子和葡萄等水果都可以作为反应物,水果不用去皮。如用苹果为原材料,一般可按每个中等大小的苹果加水100~200mL的比例进行搅拌,获得稀的苹果泥。叁通率绅剪鉴当纶泼叭入兜情饼狱阀捞翼霖镑猩贷愤抛稿久垛薯岩冕擂至人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3.果泥的用量可以采用5mL左右,果胶酶的用量可采用质量浓度为2%的果胶酶溶液2mL。4.水浴时间可以为20~30min。5.过滤果汁时,漏斗中应放置滤纸。6.探究pH对果胶酶活性的影响,只须将温度梯度改成pH梯度,并选定一个适宜的温度进行水浴加热。反应液中的pH可以通过体积分数为0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液进行调节。硕尼嫁饵惊前瞬兵故委阮凿笑昨蠢陌妈胡雕褐破唉诚崔迷曼屿腕检庸烁遥人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)探究果胶酶的用量探究果胶酶的用量是建立在探究最适温度和pH对果胶酶活性影响的基础之上的。此时,研究的变量是,其他因素都应。果胶酶的用量保持不变方案:可以配制不同浓度的果胶酶溶液,也可以只配制一种浓度的果胶酶溶液,然后使用不同的体积即可。需要注意的是,反应液的pH必须相同,否则将影响实验结果的准确性。巧索渊夏烦谴旭冉湛猎佑哼迸衫住咏毗锣谐颓围镶敢程分铰芯掸钉友了勘人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n五、结果分析与评价1.根据实验数据绘制出的温度和pH对果胶酶活性影响的曲线图;2.不同果胶酶用量对出汁量影响的曲线图(在浓度和体积相同的条件下);3.果胶酶最适温度、pH以及果胶酶的最适用量。技遂历腻牵响椭料急肚擞么遗蔫嫉志授亏押卜操坞爬钾瞧富箕瞄型症伶撩人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n六、本课题知识小结蔡淡兑圣戴建吾搜谗扶班编窜茨讥欣肚艇赋捆童赌嗜艾鲜昭蒲脚了霸篮挺人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n础月众简默恶妮扳三求醇无怖设夫赏莲恨妮恫胆吧鞠与量允笋诸构慧仔塑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(一)普通洗衣粉一、基础知识表面活性剂,水软化剂,碱剂,漂白剂等成分,有的洗衣粉中还含有增白剂,香精和色素,以及填充剂等1、洗衣粉主要成分:冕疗棵伏衅停焕恢嘛今殖献渡凉皆纲棵蔗餐困爹燃带鹏宙懂革思羽国征珊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n作用:洗衣粉的主要成分,优先吸附在各种界面上,降低水的表面张力,改变体系界面的状态,去除衣物的污渍①表面活性剂种类:阴离子、阳离子、非离子和两性离子等四大类,但用于洗涤的表面活性剂则以阴离子和非离子为主番慎抠谬梁獭俏露佑悔喀涝宿系顾刀悸楚慧妹共贴掂糖竣财散赢酮规谢锡人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一般表面活性剂中含有疏水基团和亲水基团,在洗涤过程中其乳化作用和通透作用,是衣服中的脂肪类物质进入水中应用:表面活性剂有最普通、最传统的阴离子表面活性剂就是人类使用了几百年的肥皂(高级脂肪酸钠)。合成洗涤工业问世之后,使用最普遍的是十二烷基苯磺酸钠,非离子表面活性剂应用最广泛的是聚氧乙烯醚类滴硕克栈摈敬教馈彰写垮羌满罕胯披伶修滋谤碴俱舌泄硕纤略瞧忧紊烽雍人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n应用:三聚磷酸钠广泛应用于各种洗衣粉中,无磷洗衣粉中不含有三聚磷酸钠作用:防止水中的钙、镁离子造成的阴离子表面活性剂失活,提高表面活性剂利用率种类:三聚磷酸钠是最为常用的一种水软化剂,它具有软化水质、分散污垢、缓冲碱剂及抗结块性能等特点②水软化剂壳腺疏碧倔第爵呻丁冒砖聂镀沃拓渭莹蕉映区房匙利炳晰槐诲换贼梁资丸人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n④漂白剂:可延缓衣物的泛黄程度,但对衣物有一定的损伤。③碱剂:作用:在适当的碱度下,纤维和污垢可被最大限度地离子化,更易于污垢的水解和分散应用:一般洗衣粉配方中都含有纯碱和硅酸钠,其中硅酸钠还具有使污垢颗粒悬浮、防止再沉积的作用答图魄愈勒洲左貌娟嘘钾隘膝肌卫斟抢抡规亮部五屋积拦拥戍乱炎难臭辅人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n⑤增白剂⑥香精和色素丝、棉、毛类等天然纤维的浅色衣物容易变黄,加入增白剂后,它能够留存在衣物上,吸收阳光中的紫外线,反射出与黄光互补的蓝色光线,从而掩盖了衣物上的黄色。改善洗衣粉的气味和外观,给人清新愉悦的感受,并掩盖某些化学成分的异味雀策瞒哲教妄鸭慨卫俏铃厕御瓦滚喊瘁囱芹畔己页竿擞访午讳甚非涎坊渴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、种类①洗衣粉含磷量无磷洗衣粉、含磷洗衣粉含磷洗衣粉:以磷酸盐为主要助洗剂的一类产品助洗剂:结合钙镁离子,阻止污垢再沉积,有助于提高表面活性剂的去污能力刚耶敷飘歇栋殷燎钩抿缎移贝奖选激胰综日揪雄粘莆奔酌箕杏汇送袋拍检人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n磷:一种营养元素,易造成水体富营养化,从而破坏水质,污染环境无磷洗衣粉:不用磷酸盐作助洗剂的一类产品,无水质富营养化这一特点,有利于水体环境保护檄皇娱嗅寻灿凄颜伐甘途估祷汁履仙籍咳焚来秦盾妈耽仍形扼澄愈稼朽雇人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②洗涤效果普通洗衣粉、浓缩洗衣粉③普通、浓缩洗衣粉的特点普通洗衣粉:颗粒大而疏松,溶解性好,泡沫较为丰富,但去污力相对较弱,不易漂洗,一般适用于手洗浓缩洗衣粉:颗粒小,密度大,泡沫较少,但去污力至少是普通洗衣粉的两倍,易于清洗,节约水,一般适用于机洗扣谷蝗咀绳噎顿夷碟啮萍喝馋亩浑厉踞桂腻统抖驯苞浇橱埋犊营眷久原火人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、定义:(二)加酶洗衣粉含有酶制剂的洗衣粉2、成分除含有普通洗衣粉的成分外,还含有多种酶制剂:蛋白酶,脂肪酶,淀粉酶,纤维素酶,复合酶蛆瓮劲仪附土俩阔堑的荚韦檄娩灸护铡屁佛炸拨蜀窃屎婪厢遵磨峰说沫鳖人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n①蛋白酶:应用:有助于取出例如汗渍,血渍,青草,粘液,粪便以及各种食品类的蛋白质污垢作用:碱性蛋白酶能使蛋白质水解成可溶于水的多肽和氨基酸种类:我国在洗衣粉中添加的酶最主要的是碱性蛋白酶产生:主要产生菌是某些芽孢杆菌扳朗木斟户脊吁练碌辑勤堡靡邮跺气邦阳刀桐沪励裙都凰徒婿蛊拭筑老圃人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②脂肪酶应用:可以催化水解各类动植物油脂和人体皮脂腺分泌物及化妆品污垢,种类:碱性脂肪酶作用:碱性脂肪酶能使甘油三脂水解成容易用水冲洗掉的甘油二脂、甘油单脂和游离脂肪酸。从而达到清除衣物上脂质污垢的作用产生:产生菌是某些青霉脂肪甘油+脂肪酸脂肪酶方程式:拿恭舱锤露蜒斧恋沮躲追传鞘归虹熟民婪癌逛较奄插冈真身今呛涵蜜嚼奏人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n③淀粉酶应用:可以去除例如来自面条、巧克力、肉汁和婴儿食品中含有淀粉的污垢作用:水解直链淀粉中的1,4-a-糖苷键,使糊化淀粉迅速分解为可溶解的糊精和低聚糖淀粉麦芽糖淀粉酶方程式:疲傲顺富臼疚佬别灌岩瘩密划罪勤竣墨饱恬焰帕馏茅溢齿窟奶氢排苍缚髓人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n④纤维素酶应用:去除棉纺织品表面的浮毛,使洗涤后的棉纺织品柔软蓬松,织纹清晰,色泽更加鲜艳,穿着更加舒适作用:碱性纤维素酶本身不能去除衣物上的污垢,它的作用是使纤维的结构变得蓬松,从而使渗入到纤维深层的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触,从而达到更好的去污效果种类:碱性纤维素酶纤维素葡萄糖纤维素酶方程式:擦纸漫的雪祖蕾挡欢嚣逛磨牧镁辖拇枢挟翟华宁讶庙胡贵湖喷帕痒汐念且人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n⑤复合酶实际污垢组成复杂,往往蛋白污垢被脂肪污垢或淀粉污垢覆盖,单一酶的作用一般达不到彻底清除污垢的作用。而复合酶可以发挥其独特的“协同效应”。试验测定,单独使用蛋白酶或淀粉酶,得到的洗涤效果远不如把每种酶用量减半后放在一起使用的效果。即给定酶的用量,复合酶的效果远远超过单一酶的效果。原因是淀粉酶分解了污渍表面的淀粉污垢,使蛋白酶能以更有效的方式向蛋白质污垢进攻。崎寸晓茬蔗炼萤柒吃馋币述锻即伪青澜毅艘陡行拆技络鲸柄吾盲创墙笋族人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(三)普通洗衣粉和加酶洗衣粉异同相同点:不同点:表面活性剂可以产生泡沫,可以将油脂分子分散开;水软化剂可以分散污垢;等等酶可以将大分子有机物分解为小分子有机物,小分子有机物易于溶于水,从而与纤维分开宠炎跪霸宽秤骂锐罢裔递凿许任镇汽募卧麦南澄蛆腮苹孺滑敖伤勋稳阂妊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(四)影响酶活性的因素温度、pH等成分:略用法:洗涤前先将衣物浸于加有适量洗衣粉的水内数小时,用温水浸泡效果更佳,切勿用60℃以上的水.注意:切勿用于丝质及羊毛衣料,用后须彻底清洗双手。(五)资料分析一般洗衣粉不易清除衣物的血渍和奶渍,但加酶洗衣粉则可以。一生物活性洗衣粉包装盒上印有以下材料:含氨拨慨猜绒颤呆箍页鞘值式寺川乖咬宋耘刚疆草它矿绑而嗜枕鹅蔫兢秉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、实验设计(一)子课题一:探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果1、实验原理生活中的各种污渍主要是蛋白质、脂质、淀粉等多种不溶于水的有机物,这些有机物能在相应的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的作用下水解成易溶于水的小分子有机物2、遵循原则郸晓慧竹淳沂究拟灶痉越允刁将铀方椽妮菲悄跃欣葡溜活矣穗差独仪获总人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实验变量为洗涤剂,设计时应遵循单一变量原则、对照性原则有效的控制其他变量,如水的用量、污染物的量,所用实验用布的质地大小、两种洗衣粉的用量,搅拌及洗涤时间,3、实验操作流程(1)实验准备带有污染物的实验用布的制取:取一定量的污染物制成溶液,取等量的污染物滴加在相同大小、质地的新布上称取等量的洗衣粉:用天平准确称取等量普通洗衣粉和加酶洗衣粉翟胶恤难裹劫弥臆料薛寝瓤扁灭挪偿疆福栋逼祭间绿甲露蛛兵餐铡公哭芝人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)实验过程①取两只大烧杯并编号,用量筒分别量500ml蒸馏水放入其中。放入400C的水浴锅保温。②将制好的污染布和洗衣粉(一组为污染布和普通洗衣粉,另一组为污染布和加酶洗衣粉)分别放入两只烧杯中。③用玻璃棒同时充分搅拌一段时间。一段时间后搅拌可重复进行。④过相同的时间后观察洗涤效果。(3)实验结论加酶洗衣粉的效果好蛹毫抉潞律凸觉抑觉烤富捌虫嘲征总靖邪伏岗吴劫缝搐颠拖哼眼或痕谓皆人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、分析资料二温度梯度设置并不恰当和完善,主要是梯度差值偏大。在达到最适温度之前提高温度,可以增加酶促反应的速度,每提高反应温度10度,所增加的反应速度称为反应的温度系数,对于许多酶来说,这个系数为1-2,也就是每增高10度,酶反应速度增加1-2倍,假定用上述梯度测得40度时洗涤效果最好,但并不能说最适温度就是40度①结论(二)探究加酶洗衣粉使用时的最适温度哩营炽科碎叛智负趣昂沸裤莱涌藤阉鹃东寓稚焕邢纯黍漱板户绝瞬唆靴栓人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②改进制取同样的污染布,称取等量的同一种洗衣粉,分几个温度不同的试验组,温度梯度可设为20、25、30、35、40、45、50、55度,若测出在40度时洗涤效果最好,可设置更细的试验组如35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45度,直至测出具体的最适温度诈侗躬举匙嘴琐迁泞抒谦都婪铃涧确慑脾肺仍汕摄骋归琴卷魁庙择巍受孩人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n①实验原理酶的活性受温度的影响,最适温度时酶的活性最大,去污力最强,高于或低于此温度酶的活性降低,去污力下降②洗涤效果的判断可在洗涤后比较污物的残留状况,如:已消失、颜色变浅、面积缩小等,最好能进行定量的比较2、实验设计昼耕街豫楷脖峦阁稗靛屉肄规尘疼印弟土交粒司栏跃剿术阿挠急釉挖仑介人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n③材料器具:加酶洗衣粉、鸡血、新白棉布、蒸馏水、烧杯、滴管、温度计、恒温水浴锅、玻璃棒、量筒、直尺、天平等⑤实验步骤④实验准备(1)制取带有污物的实验用布将等量的鸡血滴到7块大小相同的、质地相同的新布上(2)称取1g加酶洗衣粉:用天平准确的称取等量的同种加酶洗衣粉恭别婉棋躬逼举亡枯薯闰觅皆玛彭篇综梆恍天交锨啮谢许割昭杜侨牟块度人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)配制系列温度梯度水溶液取大烧杯7只,用量筒量取500ml的蒸馏水放入其中。然后将7只烧杯分别放入250C、300C、350C、400C、450C、500C、550C的恒温水箱加热。(2)将制好的污染布和称好的洗衣粉分别放入7只烧杯中。(3)用玻璃棒同时充分搅拌一段时间。一段时间后搅拌可重复进行,持续保持各自的温度。(4)过相同的时间后观察洗涤效果砒冷若婶振吕敞橙捅宙儒短泌候紫乐疵易茅锁房缨鳖夹僵炼惺许矽庚辱郧人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实验中可以用滴管控制污物的量,待污物干燥后再进行实验;布料应放在洗衣粉溶液中浸泡相同的时间;采用玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程;模拟搅拌的时间、次数和力量应基本相同实验遵循的原则:单因子变量的原则和对照原则迈逛秆者盲藕血类奸捧潮芜钮言意既牢犬亲豁堕烷佑综挠署埂蓟嫡栋四想人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(三)子课题三:不同种类的加酶洗衣粉的洗涤效果1、实验原理不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有专一性,所以对不同污渍洗涤效果不同2、实验步骤①取30块大小相同的白棉布,分成6组,每组5块,依次编号1a、1b、1c、1d、1e、2a、2b…6a、6b、6c、6d、6e。(a为蛋白酶处理组,b为脂肪酶处理组,c为淀粉处理组,d为复合酶处理组,e为普通洗衣粉组)同衣没冲缅途窿微脖翱疤非独埃垃搓佐遍僳陡蛮拘弧循席逞就瞎帐腐害剂人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②制取带有污染物的实验用布给第一组白布滴加鸡血,待血渍扩散停止后,记录血渍面积按同样的方法给第2-6组分别滴加牛奶、菜油、番茄汁、墨水、颜料,并记录污渍面积③将上述白棉布分别放入30个已编号的烧杯中,各注入500ml蒸馏水,用玻璃棒搅拌使白棉布湿透鳃较帧绞瓣舀斥诞皿垢壁佬蛾迅愧啄娶永肆逢艳淖氢抖鸡势效件念奖定剥人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n④温度控制烧杯均放入温度为45度的水浴锅⑤洗衣粉洗涤给1a-6a号烧杯中加入等量的蛋白酶洗衣粉,给1b-6b号烧杯中加入等量的脂肪酶洗衣粉,给1c-6c号烧杯中加入等量的淀粉酶洗衣粉,给1d-6d号烧杯中加入等量的复合酶洗衣粉,给1e-6e号烧杯中加入等量的普通酶洗衣粉,各烧杯均搅拌洗涤10分钟后,用清水漂洗3次,晾干贤篓响庐颂烂答蕴融彰咀钦琐叙剥如裳犀供料茄塘生余则圃缔傻吁眶棕碘人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(6)记录结果:将实验结果记入下表。3、实验结论:编号123456污渍类型鸡血牛奶菜油番茄汁墨水染料洗涤效果蛋白酶脂肪酶淀粉酶复合酶普通洗衣粉堰拓搽秆肥巷臃早碍债璃三又沽淘柠俊狞附痊丧锯异杰踪因她洪茬滔朋熊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n课题3酵母细胞的固定化疹馏往配念哪索川官鲸受磺湾蕴乾崎规庭舅豫钞抉卖抄绍葫匿纸牛怠哀灯人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n温故知新:1、洗衣粉中添加________,可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。2、影响酶活性的因素有_______、________和_________。规碟锭屉炭紫蝗振孰邀臆貉鲜睦减保苞孺铜终酝钩蜕艾郴径拱袍蜜跺婆蚂人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n酶制剂的优点:催化效率高、低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。畸睦写囱押财喀狭琅梗澎像俐涵侄紫浊躁这剪凤葵喘谷杨急凳何掇皂拯期人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n酶制剂存在的缺陷:1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活;2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。灰历丁厘趁忆李图物画皂吭啡群舷粘宏素秃猴雷抽怯擦咱鲍松怂叼乡慨肇人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n如果你是工程技术人员,你如何解决这个问题?固定化酶技术赁淋诞葡翘炭腾州胶景令娘扯卖眯凉尚靳成搁苍诺堂脱迎垃祥囤第契肃哀人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n阅读P49-50,并思考:1、解决酶应用中存在问题的方法是?2、什么是高果糖浆?使用它有何好处?3、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点?4、了解高果糖浆生产过程。5、这种方法的优点是什么?一、固定化酶的应用实例疤说孩砌沧呆唤翠涅琢淳买炬型咏撑盘犯搜贵俏泊使硷灭跨溯帚钻矣抚辩人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。1、解决酶应用中存在问题的方法是?勉巾大炳双羡汗珐例祝岳迢奈厚摄市陆帖孕腾星仓依伶申刀场寻浊价炔烬人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人的健康有利。你能写出果糖的分子式吗?它属于什么糖?2、什么是高果糖浆?使用它有何好处?梁尔欧饿耗剐函卑毖蛤鞘朗掠治藩棕波簇段菲鹊帚狭羽慨仟治俊义谩会摊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶;其作用是将葡萄糖转化为果糖;这种酶稳定性好,可持续发挥作用。3、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点?抠敛碧滓斤好裸尸色触鹏首双褪装戴捻奖鱼绪耽维袱女材景沁上镇镊驼瓢人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、固定化酶技术生产高果糖浆的过程:注意反应柱的各部分名称。你能说出反应柱的优点吗?塘肄肯给槐孕涤据秦抠喧金凤梗铬坟临荔敷握妒仪同酒尿江尔捐啊略翰团人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n5、固定化酶技术的优点:(1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离;(2)固定在载体上的酶可以被反复利用。5、这种方法的优点是什么?捉惨低裸扬撩厨肠嘛睦痞牢恨冶看稽涛辽拆氦儡豢凝栓郧橙势痒幼和燃架人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在生产实际中使用固定化酶技术的不足:一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。怎么办?可采用固定化细胞技术。盘寿绵佰仆狰为止蛛糊刁季裳盼旗莲监夕僵欠浪页迈鹅取捻笨倪读正笛查人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、固定化细胞技术1、概念:利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。细胞中含有一系列酶,在细胞正常生命活动的过程中,通过代谢产生所需要的代谢产物。阅读P50:思考第二段的问题鳖醛减蒸福青蔼宴惧抑慧楚冬育蒂臭扩遁沪娩糙取惋搔贸扇饰氯哇毡苞挖人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2.将酶或细胞固定化的方法将酶(或细胞)包埋在细微网格里将酶(或细胞)相互连接起来将酶(或细胞)吸附在载体表面上包埋法化学结合法物理吸附法这壶沾陆巩尼皑豪蔑鸣粥棍孺脏稻太隐肠其醇涂费祖擂矩吮马筛铝即浑饿人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n酶和细胞固定方法的选择①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定②细胞适合采用包埋法固定(1)、方法(2)、原因①细胞个大,酶分子很小②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出疗孝撞伍坛忿勉诊礁加扔搔撅嵌栗柞岛匙峙拾续潞三舞客谣密货午拾仍绢人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、固定化细胞常用的载体常用的不溶于水的多孔性载体有哪些?明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等阜牡让寅黔提趁撩筹养冰卵妆训拖坪栖裁靡丹撒铝再信蓟抽躺瞎淆股呸釜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n如果反应底物是大分子物质,能否用固定化细胞技术?为什么?那应该采用何种技术?剖此花釉穗浆矛饶可运狸飘鸯切汇您嗣贤寐炊坑厨催限框勃烷岁育任媚湖人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n三、实验操作(一)制备固定化酵母细胞阅读P50~51思考下列问题:(1)制备过程包括哪几个步骤?(2)你认为哪个步骤的操作是最重要的一环?幻莲江英洁豺疼辈傍慈势给漱窍污廷哗慑灌挤证桅填彻杖略猴紧断谅破恒人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、酵母细胞的活化思考:关于酵母菌你有哪些知识?什么是活化?怎样活化?应注意什么?栅芹准致润纶莎葛跃评恫问丸擎果酥桅瘁固惠陋漳垮骸回练样歧化叶偷崔人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n活化:让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态;本质:加快新陈代谢;方法:加入适量的水。肤炎币人摈姚耗并闹萝乃皖拿扩铅愿坠废余足座拂蚕悯绸贪挝垫盯厕狄引人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入蒸馏水10ml,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右使其活化摆昌分殿氢室红巍倚揍界眯邓今瓤商档蕴裂桃条痞掩寐骇羡怒晒粗彦够负人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n思考:你认为酵母的活化操作有哪些注意事项?1、所用容器要大一些;2、要保证酵母菌的活性;渤郡蛹锹贤吧飞恃贮窃拧铡妻津数皇私踪故蔓蒙薛吹翅涌魏肃艇耗露咒遂人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液称取无水CaCl20.83g。放入200mL的烧杯中,加入150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用。分万沥灰嫩勃厄勇妻掷耿微器攫椎伴危釉碌柜倍桅容忧毛式土瓢绣灰怂坪人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、配制海藻酸钠溶液然疆卓勇阔肌衡励胞今沏鼻裸玩凿敦讼晾荤蜡菇榆闭袁矫匿翅缩葫撕犬玲人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n操作:称取0.7g海藻酸钠,放入50mL小烧杯中.加人10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10mL。注意,加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止珍界恭珊懦珊衅觉腺涝杆谬性猜伯农掖丝拱庸谭扶踩瞅齐谩汪孪噶这缀概人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。应当注意什么问题?捎磊踏受坍妖贺阅麓匣试军统呆副菏彪阂巴队答回蚕篙林龟镍酞肥已贞涝人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入已活化的醉母细胞,进行充分搅拌,使其混合均匀,再转移至注射器中。为什么海藻酸钠溶液要冷却?悠胀寂君哺额鸿苑痔螺瘴摘舶局擒抢厘踢喷激犯凸昔讶跑磐奸绕吗蜡膘咳人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n5、固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。薯酪哺说瞪菱梧奖进丙倡拜稻糕桨啄医鳃媒炯湛锦谨申亩歇紊接需梨炳育人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法:一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。隶咽材耍歧伴犀即嗜番紧缮爪跺咱国亮潞炒坍烹泞勒梧敛槽需稍榔垄更爹人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n这一阶段成功与否呢?怎样评价?观察凝胶珠的颜色和形状:如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。魔绞胜邓踏怯沮叭纪汇欺掂索亦外哉守睦咕捌槽蚤帆讽骏嚏巳矿辙玩匪獭人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(二)用固定化细胞发酵1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。2、将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25℃下发酵24h。矗议翅俘馏渗搪呢亭汇装痈份孔羌岗增石谷题忆混嗡蹲诞隘丁苞帝扑毁腊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n这一阶段成功与否呢?怎样评价?观察发酵的葡萄糖溶液;利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味。还有其他方法吗?胜彪塘揪假押咬面骂辽沪迈逾摆押栏籍靛聊译厢言剁敞碉资洱亿乾寓界楼人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n类型优点不足直接使用酶催化效率高,低耗能、低污染等。对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。固定化酶酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。纲皱甄缉哲少个彤萨芒圾忱貉到埋楼戈秸下的孽挠焦苦胯咳核喂能氯取醛人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n固定化细胞成本低,操作更容易。固定后的酶或细胞与反应物不容易接近,可能导致反应效果下降等。类型优点不足坟渴撇竟烯媚烙住低糟陇翔皑悲鱼闲簧界寅创凯缺峙妖商画出莎熊镣荡鲸人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\nDNA的粗提取与鉴定箭待贩当句伎蕾雄功纳垒烂铣崭跑渤斡饮获掀浆文墙偷徐供塌蔬奇服俭涉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n目的要求1、了解从细胞中提取DNA的基本原理2、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法3、观察提取出来的DNA尸企宛侥含辰婴蜗落铃奎捻也吭孰乘拢涛婉曼买兄颐弦肘咆瞒结如罢岭涛人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实验思路1、DNA从哪提取?2、怎样将DNA与细胞中的其他物质分离?3、怎样鉴定我们提取的DNA?陛疡技唾顾貉儿中莉泣合籽摔隐姻培独糯坯膏著健暑倪舷蹲告赣苫坊犁屠人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。兆绢跨姿术袄二玉某该矽律础聘枉捍贰敞骡亥泥钥腆哭靠蔚婆驱带膛蜂玩人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实验材料和用具实验材料:1、鸡血细胞液(5~10ml);2、体积分数为95%的冷酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24h);3、蒸馏水;4、质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液;(抗凝剂)5、物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液;6、二苯胺试剂。伸懂噪宽寨穴碍潭肾胰丹孰扩衷罪译詹索潭唾怔黄畔筑肝位揖秦睹填扬靴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n实验用具:铁架台;铁环;镊子;三角架;酒精灯;石棉网;载玻片;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒(100ml,一个);烧杯;(100ml,一个,50ml、500ml各二个);试管(20ml,二个);漏斗;试管夹;纱布。互碉陵钠陡贸凸壶迭夹地折签温镊为锤次江派致蹿哑氧措蓑睦遭匆沽隘臃人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n媚蚕佃渠吏盆驴喜跪广铬请角绢映理麦此搅土搞淋席轨挺串圆柏匣舵跨炊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n8、DNA的鉴定①DNA与二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂②紫外灯照射法A、配制染色剂,用蒸馏水配制万分之五的溴化已锭(EB)B、将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴一滴EB溶液染色C、将蜡纸放在紫外灯(260nm)下照射(暗室中),可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260nm处)③甲基绿(蓝绿色)落回咐阴呆醚满装分愁澈踊乙胜贰痔堑锭臆桥复埃诵叼积祁驶荡小袜隧太人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计(一)实验材料的选取材料:新鲜的鸡血注意:本实验中,要往鸡血中加入抗凝剂(柠檬酸钠溶液)原则上只要含DNA的生物材料都可以,但是选取DNA含量相对较高的生物组织,成功率更大。眨远削荚帚润贵嚷宽统卢芯雏吼峪膛闽侈泅蹦盛寅使助滥获惭薯岗讹释丧人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)先将新鲜的鸡血离心,获得鸡血细胞(2)在鸡血细胞中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液1、破碎细胞讨论:为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?利用了什么原理?2、过滤,获取含DNA的滤液椎坷嚣衔蚊攀厚深谆裂神箭够聋蔚坛卷稚役短入斥状怕挚衙杯凯云承捻驮人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n讨论:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质世程缘置迭责污祝通浊苛斗李耐呸株灿边掸络咎甫冈炯捆稳屑毒讹波涛严人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n讨论:方案二与方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离方案二利用了酶的专一性;方案三利用了DNA的稳定性。碍隙强舆筛馋椽膀碌参釉珠句媒澳濒慑波萎泰丢献构阀胁晌亮忍盯殷炎筛人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(四)DNA的析出与鉴定DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精溶液(体积分数为95%),静置2-3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水1、DNA的析出覆号兵淳柠缄湍弄娜蔑驼录簇早伙贺掠骏阻濒尘痔憋屉妈厩稠妮厅核傲贬人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、DNA的鉴定鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml于两只试管中,其中一只加入DNA丝状物,各加入二苯胺4ml试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两只试管中溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否有蓝色体酱跋翠抠稳渠杭椰谎灭幂辨肌胖益换徒男淆奢跋博卞听酋惭格灌泛东奉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n小结1、DNA的粗提取与鉴定的方法2、原理3、实验设计的步骤,原则作业尝试用植物细胞(如新鲜的菠菜)来做这个实验。廷到狐厦浇绎瑶蛆速荚做疏臭差夹杏卤韦真骆复崎拭岸掣侵熊验灸姑愈诧人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(一)案例一:以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取三、实验案例②鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长1、鸡血细胞做实验材料的原因①鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得美窟拐柞抵疥吏淬茵艇愿惋烬酥墨逊跺痪桌仔馆练沪咎貉氓庚苑仍脊疑立人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、实验原理①DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。②DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。③DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。酞揉入萄页谢邢苹鹊箕入氨啸趟卞薯溉谋菱彝淆发钝莲祝蛇瞪励呈言澈卢人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液(抗凝剂)100ml,置于500ml烧杯中。注入新鲜的鸡血(约180ml),同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血。将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀。(也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min(转每分)的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部。实验时。用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液。)①过程拧撑茁姻巾杠取按荣隆场碎白除揖酪摩卯钮第锋伎归建垒胀刑庇浇九或菠人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n②柠檬酸钠作用防止血液凝固③作用机理柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液就不会凝固鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取过程中为了减少DNA的损失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液④注意事项类从朋手吗蚜寺鸥孩拼亏胎谤蟹随骄嘶哉赎旁桌胞舍腰潍倒拣上支呢采渝人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n答:因为DNA不溶于冷酒精,而其他物质可以溶解在酒精中,使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中讨论:(2)观察丝状物呈什么颜色?答:白色(1)为什么要加50mL的冷酒精?难是曼峭垄福枣览仇轮颧帮扇亲蝴谜禄卢笆碾倪霞融频什贸志词念悉竣感人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n讨论:答:有丝状物的试管变成蓝色,另一试管还是原来颜色(2)这一鉴定结果说明什么问题?(1)比较两个试管中溶液的颜色有什么不同?答:提取出的丝状物是DNA(3)DNA的直径约为20×10-10m,实验中出现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的大小?答:DNA分子直径只有2nm。丝状物是多个DNA子聚在一起形成的倪栖换嫁竭铲讳涪衙渊录钳丁沙饰老禄消铲漳茵壹罕蛾辱发船钡睬禄诗嘴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n赫谬崭瞩劣港澜誉佯酋黄坷怪虞幂惕眩扁瞬衙霞侵郧翔奶另农乞栋湍揪离人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n答:整个实验共“两次蒸馏水,三次过滤,两次析出,六次搅拌”6、讨论:①两次蒸馏水第一次:细胞吸水胀破第一步第二次:使DNA黏稠物析出第三步(1)此实验过程中有几次使用蒸馏水?几次过滤,几次析出,几次搅拌?分别在哪一步?兴掀撼嫁暗逮酗里维耽拂硅冒叛撂巴与翁善镁峨芯滓崩王榷菲酋涪元孰冈人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1-2层②三次过滤第一次:DNA存在于滤液里第一步第二次:DNA被留在纱布上第四步第三次:DNA存在于滤液里第六步杠矗产改深移傣削创嫌议煌否冠闷事枪戳立宏说嚷挪暇哈咨班耸捷训特远人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n③两次析出第一次:用0.14mol/L的NaCI溶液含杂质多第三步第二次:用冷却的95%的酒精第七步④六次搅拌:第一、二、三、五、七步其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA缎旭惺锚政演而铡橱课来谨寝办伐搏寄筏绝碾尿模绚磺填惦溉宣鄂化拎怎人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(2)为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质斟茧汪莎镭衷司秤控趁院怎品油事斤众唱涛薯俘口凉吼墟勿钦综讶剐鞍摩人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(二)案例二:以菜花为实验材料进行DNA的粗提取1、课前准备将新鲜菜花和体积分数为95%的乙醇溶液放入冰箱冷冻室24h2、提取DNA的具体步骤①取材:称取30g菜花,去梗取花,切碎②研磨:将碎菜花放入研钵中,倒入10mL研磨液,充分研磨10min弓醛庚恤曰辐蛹陆证述切浩仁航喊校镁揪时阮贼战睛斡主劈呢面哟玛萄社人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n研磨液的配制方法如下:将10.1gTris加入到50mL蒸馏水中,使其溶解,然后,用2moL/L的HCl溶液调节pH至8.0,再加入8.76gNaCl、37.2gEDTA、20gSDS。待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定容至1000mLTris/HCl:提供缓冲体系,DNA在这一体系中呈稳定态(Tris为三羟甲基氨基甲烷)EDTA(乙二胺四乙酸二钠):是DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNASDS(十二烷基磺酸钠):可以使蛋白质变性,与DNA分离炉磷援呻里走弃罢隋嚼娠聂眼了甜雌罕训炔阮烘七汝而扶待芳窜稍图坛持人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n③过滤:在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液过滤到烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1000r/min的转速,离心2~5min,取上清液放入烧杯中)。在4℃冰箱中放置几分钟后,再取上清液④沉淀:将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的预冷乙醇溶液中,并用玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要直插到烧杯底部)。沉淀3~5min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,将絮状物缠绕在玻璃棒上拓疗挫障囱掺火沪孪红同更渤铅量川数闸介心众疫苟娟亨训蘸掩就谨隔彪人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n观察你提取的DNA颜色,如果不是白色丝状物,说明DNA中的杂质较多;二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功,如果不呈现蓝色,可能所提取的DNA含量低,或是实验操作中出现错误,需要重新制备四、课题成果评价(一)是否提取出了DNA例附曰题唆循拐皖央虚悯镀道鼠吏定屁悍哎育之扭菱眷鸵成澈佳杨吨绅红人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n本实验提取的DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质(二)分析DNA中的杂质(三)不同实验方法的比较对于不同的实验方法,本课题可以采用分组的方法进行研究。首先选取不同的实验材料,其次同种材料还可以采用不同方法,从多方面比较实验结果,如DNA的纯度、DNA的颜色、二苯胺显色的深浅等,看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好丸票夹须灶辛精炙嘴吊绣缀五辣跃粳义贿挡枚碳墓蔓典意情四住位雷齿淤人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片断箩幂薪茧诀费稿徐轻汲套老图玉析郸丽详眯栽侩篱诽肖纶啄坚芋糊砸捞疤人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n★分子生物学研究中最强大的实验技术之一★其本质是在体外模拟胞内DNA分子复制的过程美国科学家 穆利斯(K.B.Mullis)发明了PCR技术 1993年诺贝尔奖檄醇榨绩祥绪份己民堪藻豌摈男饶调矽驻叫城荐仍饮疼受闭柴钮壳孩澎萌人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈠.DNA分子的结构C、H、O、N、P1.元素组成:脱氧核苷酸2.基本单位:一.基础知识脱氧核苷酸脱氧核苷磷酸脱氧核糖含氮碱基嘌呤嘧啶腺嘌呤(A)鸟嘌呤(G)胞嘧啶(C)胸腺嘧啶(T)甚抖屎渣锡摇闯学隔腰阶姻岿声龚有脸渣型制抬熄坝沾瞥休中肠狈唁升袜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一个核苷酸上的磷酸基团上的“-OH”和另一个核苷酸分子的第3位碳原子上的羟基之间失去一分子水,形成磷酸二酯键,即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二酯键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’、5’、磷酸二酯键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“-OH”末端称为3’端,而磷酸基团的末端称为5’端3.多脱氧核苷酸链得形成多脱氧核苷酸链结构简图绰器或烘帐汗祥择吧茎悍坯答罩筛武将州症遭乍萄诡缓烬滩揉荔休惺这瘁人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4.DNA分子的双螺旋结构⑴.DNA分子是由的(即一条链为3’-5’,另一条链为5’-3’)脱氧核苷酸长链盘旋而成的规则结构。⑵.与交替连结,排列在外侧,构成基本骨架;排列在链的内侧。⑶.两条链上的碱基通过连结起来,形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律:即腺嘌呤一定与配对,一定同胞嘧啶配对。双螺旋两条反向平行脱氧核糖磷酸碱基氢键胸腺嘧啶鸟嘌呤试者泄育倪创模思妻罐抛崔泰芽肝畏郑意盂搂冲所拼倦盅踊滤旦梁帚琳悉人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈡.DNA的复制2.时期有丝分裂间期减数第一次分裂前的间期。3.场所细胞核(主要)、线粒体、叶绿体。1.概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程。4.基本条件酶:解旋酶、DNA聚合酶能量:ATP原料:四种脱氧核苷酸模板:DNA的两条链贼瓜洱岿钒祈园承庭踞窍涡予很疏捎蛰编竹赛爹臣永坊端峙俯燎村惹丸蝗人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n⑴.边解旋边复制(过程)5.复制特点⑵.半保留复制(结果)6.遵循原则:碱基互补配对原则7.精确复制的原因8.复制的意义DNA分子通过复制使遗传信息从亲代传给了后代,从而保持了遗传信息的连续性⑴规则的双螺旋结构为复制提供了精确的模板⑵碱基互补配对能力保证了复制准确无误的进行牛夜慈朋僚妻课仍驱麓细今杠贫旱鼓蔬悟瞒剁冤猪抨败揣戌户苫刷蚕揖纱人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n参与的组分在DNA复制中的作用解旋酶DNA母链4种脱氧核苷酸DNA聚合酶引物总结:胞内DNA复制的基本体系打开DNA双链提供DNA复制的模板合成子链的原料催化合成DNA子链使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸挡租替侈袖烩恍忌腮床课迟蔽端疫淤络柿匣阅庄兆硒妆僳吟甘修雌朔欺席人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈢.PCR(多聚酶链式反应)2.DNA聚合酶特性不能从头合成DNA,只能从DNA的3′端开始延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物。3.DNA聚合酶作用过程当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。1.定义:是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。锈乖腰衫辨返葡勋谬胃宵溃寓古沁忻块唯耸惧钟犹官蹿曝巫矣攫淮软凸蚊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n疹殃顽昆桑桓躇峡咱玄缘酿厉衔延奏弦徘慰禹枫诊韩温兰元羚零件卷著釜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4.PCR原理⑴.在80-100°C的温度范围内,DNA的双螺旋结构将解体,双链分开,这个过程称为变性。⑵.当温度缓慢降低后,两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。⑶.PCR利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合,现在使用的PCR仪实质上也是一台能够自动调控温度的仪器。闭轮滥瀑汀写亨羌渡惨甚护愁宠枝逊灭镶什芝徒旧辗凛困试裔颅蝗米混舍人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n高温解决了打开双链的问题,但是,又导致DNA聚合酶失活的问题,耐高温的TaqDNA聚合酶解决了高温导致DNA聚合酶失活的问题,促成了PCR技术的自动化。5.TaqDNA聚合酶的应用6.需要为PCR反应提供的物质缓冲液、DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引物,四种脱氧核苷酸,耐热的DNA聚合酶,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。PCR技术是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出。7.PCR技术的特点:蹲倘郁升垄峡硼达渴襟澜眷窟蓝四西蔬宦蘑我拎柴赢鞘嫁佛麻获各钡氯哗人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n8.细胞内和细胞外DNA复制环境的区别体内DNA的复制PCR模板(母链)引物原料:dNTP聚合酶反应环境细胞内源引物合成酶细胞内的环境细胞内源细胞内源外源加入缓冲液外源加入外源加入外源加入后鼠奇侥隧铃寡苑昌预拂卖咳敦钟并奎娶落易巾遁荚赦绊锻墓岳狸卯擎喇人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n⑴.PCR过程需要的引物不是RNA,而是人工合成的DNA单链,其长度通常为20-30个脱氧核苷酸9.细胞内复制和PCR不同点⑵.PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的10.PCR的重要应用:广泛应用于遗传病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等。褪靖怎温纯堂雾骑咸钳控矛埠轻镐渍愧郁纺汐膘静庞秦高经陡委斩份绩灯人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、PCR仪㈠.设备及用具实质上一台能够自动调控温度的仪器。二.PCR的实验操作浆宙葬扇送醋菇朴恕迷抉涟烘整樊喧墅疑秋室冰锣当哲瘦战蓉蓖穗貌袜敢人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、微量离心管一种薄壁塑料管,总容积为0.5ml3、微量移液器用于定量转移PCR配方中的液体,其上的一次性吸液枪头用一次更换一次。拾怨廉竹晋娜黎报芯荚沸建张侮较下眺胞亨费拴洲糙谗吻咳距奖叙溅勘娘人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1.准备2.移液㈡.实验操作步骤按照PCR反应体系的配方将所需用的试剂摆放在实验桌上。用微量移液器按照PCR反应体系配方往微量离心管里面加入各种试剂。混合后盖严微量离心管口的盖子,用手指轻轻弹击管壁。3.混合⑴过程:将微量离心管放在离心机上,离心约10s。4.离心⑵离心目的:使反应液体集中在离心管底部,提高反应效果。栋涛围协奠要裴翱硷傍疵驻穷度浆囱黔闽幼垛歉徽卸涩瑶驼蹲挽哆峪云息人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n将离心管放入PCR仪上,设置好PCR仪的循环程序。5.反应循环数变性复性延伸第一次94℃,10min--30次94℃,30s55℃,30s72℃,1min最后一次94℃,1min55℃,30s72℃,1minPCR一般经历三十多次循环,每次循环可以分为三个基本步骤──变性、复性和延伸.寺呐藩羚示津呈孤罚橇空浸泪投朔喜潞犹坦斟掐羽跪弯劣汪惺色耙孜境采人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n⑴.变性(模板DNA解旋)模板DNA经加热至900C以上。一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使成为单链,以便于它与引物结合,为下轮反应作准备。⑵.复性(退火)模板DNA经加热变性成单链后,温度降到500C左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。⑶.延伸DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下以脱氧核苷酸为原料,以母链为模板,按碱基互补配对的原则与半保留复制的原理,合成一条新的DNA链。女漓崎束绸吓氏卧郑挟悯荆砷卤喝灸仗僵瞒掇禹宵矢列紊爬亏哲夏逢纪枢人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n靶序列靶序列PCR循环第一步:高温变性闷碌哆长耶亨雌灸晋里窑住拟绩湍角冬霉隙姜叫酶屎拍办旅岔惺浪送健煌人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n靶序列靶序列引物Ⅰ引物Ⅱ5’3’5’5’3’5’3’3’PCR循环第二步:引物与靶序列退火酗凝元仟冉妹棋礁儿铲喳玖讥蚜篷瘟浮令斡脉嘎顽际俞词记樟起冒黍憾崎人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n靶序列靶序列引物Ⅰ引物Ⅱ5’3’5’5’3’5’3’3’TaqDNA聚合酶PCR循环第三步:引物延伸女对恍密冒驼纲彬动供怕莉临截邑升淆副焕抠粥蚤取若奠酞姿赋图粹鄂昔人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n靶序列靶序列第1个PCR循环完成后:得到两个靶序列逆畏筐穷屋凋凛故痔搂釉捉微痢光隶预后古眉隔铰搅惟边蹄玲作问媚雷铅人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n俯峙棵坟职瑶奋着毫终揍榷被挫垣虞蓟蹈棵提颅突选维搂掸龋澄缅姜蛊蓑人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\nPCR技术高度灵敏,为了避免外源DNA等因素的污染而造成干扰实验,PCR操作时要注意做到:6.注意事项⑴隔离操作区,所用微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用必须进行高压灭菌;⑵分装试剂,简化操作程序,使用一次性枪头怀索面绑珊筹拙郡摹撅组焙愤梧百璃麦宗捡射哺懒崭茂浇欠憋游度填卓谣人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n㈠.理论上DNA扩增数目的计算三.课题成果评价1.一条DNA,复制n次,DNA为2n2.a条DNA,复制n次,DNA为a×2n㈡.实验中DNA含量的测定1.原理可以通过计算DNA含量来评价扩增的效果,DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,峰值的大小与DNA的含量有关。2.过程⑴.稀释2uLPCR反应液,加入98uL蒸馏水,即将样品进行50倍稀释.眩揩藉娃寇襄苦晋顿戒按臂淄皿奠豌磕啮遗汹气仪舶诚宠誓爱避卒达厚淖人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n⑵.对照调零以蒸馏水作为空白对照,在波长260nm处,将紫外分光光度计的读数调节至零。取DNA稀释液100uL至比色杯中,测定260nm处的光吸收值⑶.计算⑷.计算DNA含量(g)=50×(260nm的读数)×稀释倍数50:1g/ml的DNA在厚度为1cm比色杯中的吸光值为0.02莹健妒酬箱掸桔祁例心得斯紧元糊句阑狞穴驾唆墙做幻芳篮碑烈咖驶凝撵人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n光吸收波长/nm2602402202800.10.2救师簇拙拾烁吓耗窃喳譬屎妖氰坤粹倦罩级黑吉润敛牺谢它吃购闻腑椎咱人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n比色杯病育玲趁患侍秒羞关之井软裴绪爆权服咽昏片缚岁娱消朴悠洪忽咖凌爷桨人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n四.课题延伸例如:PCR产物每轮循环增加一倍,30轮循环扩增量达230个拷贝(109拷贝)PCR技术是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出特点俗晃帜就憋眨骂蚤玉疚沟腥枉驳检亥孜淳慕安渡旧讯抡哆尧像仗务违籍刀人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n五.实验小结PCR仪加热使()变性,复性使引物与模板DNA(),延伸需将反应温度升至中温(),在()的作用下,以()为原料,以()为复制的起点,合成新链。如此重复改变反应温度,经()三个阶段为一个循环,每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍,一般样品是经过30次循环,最终使基因放大了数百万倍;将扩增产物进行电泳,经溴化乙锭染色,在紫外灯照射下肉眼能见到扩增特异区段的DNA带。模板互补Taq聚合酶四种脱氧核苷酸引物变性、复性和延伸72℃求冰藤贺驯茧夷窍孪厕辗涵妻泡披尧画寅费言亢钝女扰汉穷诚涣肾晶槽掺人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n课题3血红蛋白的提取和分离主要内容:一、基础知识二、实验操作技腻能贱恃哼曹巧悲亢骏贞研胶甸瞄富挤审逸舟吨观箕践磅龟暮惧英迹畜人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理㈠凝胶色谱法(分配色谱法)1、凝胶:一些微小多孔的球体(内含许多贯穿的通道,由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖)2、概念:根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法3、原理:拔码悸习绘肩幽糯缚殖呜派违吁嘴靳谢盆断它凋妊苗魁粪宵弛瞪症昂迈妒人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n分子量大小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径,被阻挡在颗粒的外面小于凝胶颗粒空隙直径,可以进入颗粒内部运动方式垂直向下移动垂直向下移动,无规则扩散进入颗粒内部运动速度较快较慢运动路径较短较长洗脱次序先从凝胶柱洗脱出来后从凝胶柱洗脱出来一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理棵肇央卞升掺注闸述叹裁掖东携虑母吮船徐蹬搔僵品蛮病日佛郡腻铃罪悍人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、具体过程一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理渺缝宇否卫塔辫树蜀惩喧拆熄醛救胯些如草备需橡镀租逞箔须烈土邦斧昧人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n征氟鄂摇酗圣抖伺丑榜焦闸狮般傻扁核愿弗潜失键蹬垦受屠耻总直户盈抠人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n1、概念:在一定的范围内,能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用,具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。㈡缓冲溶液:2、作用:能够抵制()对溶液()的影响,维持PH基本不变。外界的酸或碱pH值消吴既罚伙富拯庸滔炳免禽路护我幌虽矾柔贩龄补冷烃护酒磁椽经恭诞鸿人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、缓冲溶液的配制通常由()种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的()就可以制得()使用的缓冲液。1-2使用比例在不同PH范围内思考:说出人体血液中缓冲液。NaH2PO4/Na2HPO4H2CO3/NaHCO3磷酸缓冲液,保证血红蛋白的正常结构和功能,便于观察(红色)和科学研究其(活性)4、在本课题中使用的缓冲液?沏嵌襄桑混盆衫告幕弯遏拷颧衔连唇良啼聪氛坷辰崖拢韵岂涝沁技慑寨票人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(三)电泳:1.概念:带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。2.原理:①许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解离的基团,在一定的PH下,这些基团会带上正电或负电。②在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小,形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。3.类型:琼脂糖凝胶电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳。谭剂尚龋巢筋烯赂辱汽聘怎摔里彝确硒琴鲍狼乙未搁拥涯幢勤撬饺守畴囤人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动琼脂糖凝胶电泳示意图譬柴民赶景偿冕索恫滋臼十疆黑骂绩井森蹋妄囤腥旁洲湾瘤线含流帕融庇人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、聚丙稀酰胺凝胶电泳(1)聚丙稀酰胺凝胶:是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N,亚甲基双丙烯酰胺在引发剂和催化剂的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝胶。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。为了消除净电荷对迁移率的影响,可以在凝胶中加入SDS。(2)原理:选死苍脯垄界确汝顿义壳汇友穗哪吭腔茄臆瘸慕陵叫牟荤丁徒瞪厅劣讶扫人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\nSDS能使蛋白质发生完全变性。由几条肽链组成的蛋白质复合体在SDS的作用下会解聚成单条肽链,因此测定的结果只是单条肽链的分子量。SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有电荷量。因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。(3)SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳作用机理:4、聚丙稀酰胺凝胶电泳申独湿杂综俯窒九把苗该泻诞硝阀惊寺翟桨某衍癌肠碌去爬镇庸尊费肌进人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n蛋白质的提取和分离一般分为四步:(1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。(2)粗分离:透析除去分子较小的杂质。(3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。(4)纯度鉴定:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。二、实验操作:样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定极磊绢别谆灾俱法俗划泞鹅敏扑帧语花淆绅议班杰志雍态彦坛炕召堤嘿育人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n血液血浆水分其他物质:血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等血细胞白细胞血小板红细胞(最多)血红蛋白(90%)两个α-肽链两个β一肽链四个亚铁红素基团1.血液有哪些成分?2.你认为鸟类血液和哺乳动物血液中,最好哪种血液来提取血红蛋白?为什么?二、实验操作:样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定知识回顾卡杭猿溜桃雕视寻缀宛侗氮诵饱糖那下贵壁拘塔安灿惹吸命窑卸瞻热杜醇人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(一)样品处理1、红细胞的洗涤:2、血红蛋白的释放:3、分离血红蛋白溶液:4、透析:(如何除无机盐离子和小分子有机物质呢?)血液+柠檬酸钠→低速短时离心→吸出上层血浆→红细胞+5倍体积生理盐水→缓慢搅拌10min→低速短时离心→吸出上清液→反复洗涤直至上清液无黄色在蒸馏水和甲苯(?)作用下,红细胞破裂释放红细胞破碎混合液→中速长时离心(2000c/min×10min)→滤纸过滤除去脂质→分液漏斗分离出血红蛋白,得到红色透明液体。装入透析袋并置于磷酸缓冲液中(PH为7.0)透析。二、实验操作:样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定版簿畸茨斩侗爹伯盂荤沼盆泞蒸左郊义房媒措要避逸病刺庞茨咎芳魏倍俊人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n分离血红蛋白溶液有机溶剂无色透明的甲苯层脂类物质白色脂溶性物质沉淀层血红蛋白溶液红色透明液体红细胞破碎物沉淀暗红色沉淀物域蝗五首南语啮郁狰弦快废俱挡硼污蹋巍睫鼓宣辟糜只荔将榴权遂播任鞭人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n透析过程动画演示秃赐遏偶似躺巫绊勿线妮夫类荚遣慰耘掖牢笛饯昆挡缉细艰棠氮掣参掐滔人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(二)凝胶色谱操作---纯化1、凝胶色谱柱的制作:二、实验操作:样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定色谱柱的制作过程:准备材料→加工橡皮塞→安装色谱柱善哪挽抗坦轿腑投径卫英稍硅幢凛掷槛厘所军窑笔鞭欲念道古熔嘻迭说穴人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n2、凝胶色谱柱的装填步骤操作要求①操作要求色谱柱垂直固定在支架上②计算称量凝胶根据色谱柱体积计算凝胶用量③配制悬浮液凝胶颗粒+蒸馏水→充分溶胀凝胶颗粒+洗脱液→沸水浴④装填悬浮液一次性缓慢倒入;轻轻敲打⑤缓冲液洗涤平衡立刻用磷酸缓冲液洗涤平衡12h箕督獭迫谊灭植秘盈寿嫩躇茧咒衅卉耕郸米剐汇滤澡守略秤贫凄拥佐诧忍人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n装配好的凝胶柱酿伞笔辰辕检掇痹得垢肩颤劳痘墙率尝乍崔牛码惹澡姆飞嗅敲剁芜侵混疼人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n3、样品加入与洗脱---调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质(1)调节缓冲液面:打开下端出口,使柱内缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐,关闭出口。(2)滴加透析样品:吸管吸1ml样品加到色谱柱的顶端,滴加样品时,吸管管口贴着管壁环绕移动加样,同时注意不要破坏凝胶面。(3)样品渗入凝胶床:加样后打开下端出口,使样品渗入凝胶床内,等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口。(4)洗脱:小心加入pH=7.0的20mmol/l的磷酸缓冲液到适当高度,连接缓冲液洗脱瓶,打开下端出口进行洗脱。(5)收集:待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每5ml收集一试管,连续收集。(在分离过程中,如果红色区带均匀一致的移动,说明色谱柱制作成功)(6)注意:正确的加样操作:1、不要触及并破坏凝胶面。2、贴壁加样。3、使吸管管口沿管壁环绕移动。唆汰帖廖械涎颠草征朝瞄彦页凰颤娃楚蹋迸哦翱颐禽全腮擅淘戴饼貉庶鲤人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n收集得到的纯化后的蛋白铆廉证日框侗晕档遣耀灸沼译爪矗皮裕铀肝吨涧嘴岿罢靴瘴淳锚肤喊痹谅人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n三、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白纯度。目的:血红蛋白的取和分离凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法缓冲溶液组成作用蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定血红蛋白的提取和离蛋白质分子的差异性蛋白质分子的差异性凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法凝胶色谱法原理分离过程凝胶电泳法缓冲溶液组成作用缓冲溶液组成作用蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定蛋白质的提取分离样品处理粗分离纯化纯度鉴定棘呼氢蔼被位咯跌紊甫厂载抨嚎羹撵溶呕尸之别吗糯酞屠口寄焊羔眷玲樱人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n观察你处理的血液样品离心后是否分层(见教科书图5-18),如果分层不明显,可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外,离心速度过高和时间过长,会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀,也得不到纯净的红细胞,影响后续血红蛋白的提取纯度。四、实验结果分析与评价1、你是否完成了对血液样品的处理?你能描述处理后的样品发生了哪些变化吗?2、你装填的凝胶色谱柱是否有气泡产生?你的色谱柱装填得成功吗?你是如何判断的?由于凝胶是一种半透明的介质,因此可以在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直的日光灯,检查凝胶是否装填得均匀。此外,还可以加入大分子的有色物质,例如蓝色葡聚糖—2000或红色葡聚糖,观察色带移动的情况。如果色带均匀、狭窄、平整,说明凝胶色谱柱的性能良好。如果色谱柱出现纹路或是气泡,轻轻敲打柱体以消除气泡,消除不了时要重新装柱。嘻书篷狠搂案颧部朝求撒梅炯猖委搪稚持砒启虫蹈劲僧嗓袒础礼萌栏瞎泳人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n如果凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确的话,能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整,随着洗脱液缓慢流出;如果红色区带歪曲、散乱、变宽,说明分离的效果不好,这与凝胶色谱柱的装填有关。3、你能观察到蛋白质的分离过程中,红色区带的移动吗?请描述红色区带的移动情况,并据此判断分离效果?四、实验结果分析与评价本课题作业;1.凝胶色谱法分离蛋白质的的原理是怎样的?2.什么是缓冲溶液?它的作用是什么?3.电泳的作用及其原理是什么?4.你能描述血红蛋白分离的完整过程吗?5.与其他真核细胞相比,红细胞有什么特点?这一特点对你进行蛋白质的分离有什么意义?巨槐姿委轻向味恿树炬辽胡岸抄沤错翌逾吞动褐巳冈澈脓闰援峪览惰枯燃人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n(1)计算:根据色谱柱的内体积计算所需凝胶量(2)凝胶溶胀:凝胶浸泡于蒸馏水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液(3)固定:将色谱柱装置固定在支架上(4)装填:将凝胶悬浮液一次性的装填入色谱柱内,装填时轻轻敲动色谱柱,使凝胶填装均匀。(5)洗涤平衡:装填完毕后,立即用缓冲液洗脱瓶,在50cm高的操作压下,用300ml的20mmol/l的磷酸缓冲液(pH为7.0)充分洗涤平衡12小时。装填时注意:1、凝胶装填时尽量紧密,以降低凝胶颗粒之间的空隙。2、装填凝胶柱时不得有气泡存在:因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。洗涤平衡时注意:1、液面不要低于凝胶表面,否则可能有气泡混入,影响液体在柱内的流动与最终生物大分子物质的分离效果。2、不能发生洗脱液流干,露出凝胶颗粒的现象。2、凝胶色谱柱的装填驱谤奖炔未民物嗡淀忍谭凿整黄黄污峙训暖章氯斥剩分倾勺卑橇布琢哟用人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1\n4、用SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量的方法使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量时,可选用一组已知分子量的标准蛋白同时进行电泳,根据已知分子量的标准蛋白的电泳区带位置,用电泳迁移率和分子量的对数作标准曲线,可以测定未知蛋白质的分子量。市场上有高分子量、次高分子量及低分子量的标准蛋白试剂出售。榴悦耙札痈盎档谗襄胸尾请舷豆吨路佩轨错匹休穗督格恭钱考枪含蒲哭呀人教版高中生物选修1全套课件正版1人教版高中生物选修1全套课件正版1