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- 2021-09-17 发布
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专题2 微生物的培养与应用
专题达标检测(二)
(时间45分钟,满分100分)
一、选择题(每小题5分,共60分)
1.某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养,下列说法错误的是( )
A.蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供氮源和维生素等营养
B.牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH
C.倒平板操作中,待平板冷却凝固后将平板倒过来放置
D.大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法
解析:培养基应先调节pH后灭菌,若先灭菌后调节pH,调节 pH时会污染培养基。
答案:B
2.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D.对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
解析:只有菌液稀释到一定程度后,在固体培养基表面才能形成单个的菌落,否则可能会出现两个或两个以上的细菌共同形成一个菌落,或菌落出现重叠。
答案:C
3.某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是( )
A.利用平板划线法对细菌进行计数
B.用以石油为唯一碳源的培养基筛选
C.采用稀释涂布平板法分离菌种
D.称取和稀释土壤样品时应在酒精灯火焰旁
解析:分离细菌常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,但平板划线法不能对细菌进行计数;筛选能分解石油的细菌,要以石油作为培养基中唯一的碳源;筛选细菌的整个操作过程都需要在无菌条件下进行,所以称取、稀释土壤样品应在酒精灯火焰旁进行。
答案:A
4.下列关于微生物培养和利用的叙述,不正确的是( )
A.利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数
B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步分散获得单个菌落
C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌
D.选择培养基作用的原理是显现某微生物的特征,以区别于其他微生物
解析:稀释涂布平板法能分离纯化微生物也能对微生物进行计数;连续划线是将聚集的菌种逐步分散,以获得单菌落;尿素分解菌的分离可以选用以尿素为唯一氮源,且含酚红的培养基;选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质,使某一微生物正常生长,而其他微生物则被杀灭或生长受到抑制,从而选出所需要的微生物。
答案:D
5
5.下列有关分解纤维素的微生物分离的叙述,不正确的是( )
A.在加入刚果红的培养基中,当纤维素被纤维素分解菌释放的纤维素酶分解后会出现透明圈
B.在用刚果红染色时只能先培养微生物再加入刚果红,不能在倒平板时加入
C.纤维素酶的发酵方法有液体发酵法和固体发酵法
D.纤维素酶的测定方法,一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定
解析:刚果红染色有两种方法,一种是先培养微生物再加入刚果红,另一种是在倒平板时就将刚果红染液加入培养基中,然后再培养微生物,两种方法各有优缺点,但都可以应用。
答案:B
6.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释度下一同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数,最接近样品中菌株数真实值的是( )
A.菌落数目最多的平板
B.菌落数目最少的平板
C.菌落数目适中的平板
D.取若干个平板上菌落数目的平均值
解析:用稀释涂布平板法对样品中活菌数目进行统计,只是一种估测,根据此方法的实验过程可知,在某一稀释度下涂布的平板菌落数具有一定的偶然性,并不是绝对均匀,所以取若干个平板上菌落数目的平均值比较接近样品中菌株数的真实值。
答案:D
7.关于土壤中细菌的分离,下列正确的操作步骤是( )
①土壤取样 ②称取10 g土壤,加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1 mL进行平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107倍的稀释液
A.①→②→③→④ B.①→③→②→④
C.①→②→④→③ D.①→④→②→③
解析:在分离土壤中某种细菌时,应先选取土样(10 g),然后加无菌水获得土壤浸出液,并进行不同倍数稀释,最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养,并分离和计数。
答案:C
8.下列有关培养基和菌种鉴定的叙述,不正确的是( )
A.在培养基中加入较高浓度的氯化钠,可筛选出抗盐突变体植物
B.可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D.在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
解析:在只含有尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。
答案:D
9.加工橘子罐头,采用酸碱处理脱去中果皮(橘络),会产生严重污染。目前使用酶解法去除橘络,可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物,不能产生所用酶的有( )
A.生长在麦麸上的黑曲霉
B.生长在酸奶中的乳酸菌
C.生长在棉籽壳上的平菇
5
D.生长在木屑上的木霉
解析:中果皮主要成分是纤维素,用纤维素酶就可处理;A项中的黑曲霉,C项中的平菇,D项中的木霉都能产生纤维素酶,而B项中的乳酸菌不能产生纤维素酶。
答案:B
10.纤维素酶的测定方法一般是( )
A.对纤维素进行定量测定
B.对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定
C.对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定
D.对纤维素分解菌进行定量测定
解析:测定纤维素酶的方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。
答案:B
11.要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来,应将它们接种在( )
A.含有蛋白胨的固体培养基上
B.加入指示剂的鉴别培养基上
C.只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上
D.含四大营养要素的培养基上
解析:将细菌接种在以纤维素为唯一碳源的培养基上,据此可将能分解纤维素的细菌分离出来。能产生纤维素酶的细菌能够以纤维素作为碳源和能源,不能分解纤维素的细菌由于缺乏碳源而不能正常生长繁殖。
答案:C
12.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上划3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37 ℃条件下恒温培养3 d,结果如下图所示。根据实验结果分析,下列叙述不正确的是( )
A.链霉素能抑制结核杆菌的生长
B.链霉素对结核杆菌比对霍乱弧菌更有效
C.链霉素对结核杆菌比对伤寒杆菌更有效
D.链霉素可以用于治疗伤寒
解析:根据图示对实验过程和结果进行分析,链霉素对霍乱弧菌和结核杆菌均有抑制作用,且对结核杆菌更有效,而对伤寒杆菌则不起作用。
答案:D
二、非选择题(共3小题,共40分)
13.(8分)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答问题。
(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于________培养基。
5
(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_______和_________。
(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力________。
(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
解析:(1)可以将所需要的微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基为选择培养基。欲筛选出能降解原油的菌株,则培养基中应只含有原油而无其他碳源,这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存,能降解原油的细菌在此培养基上能生长繁殖。(2)分离纯化菌种时,接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单菌落,以便于纯化菌种。(3)降解原油能力越强的菌株,在菌落周围形成的透明圈越大。(4)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。无菌技术要求整个实验操作都要在酒精灯火焰附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
答案:(1)原油 选择 (2)平板划线法 稀释涂布平板法 (3)强 (4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
14.(14分)洗衣机内部的环境非常潮湿,洗衣机使用时间越长,内部滋生微生物的机会就越大。看似干净的洗衣机,其内部隐藏着一个健康的隐形杀手。某生物兴趣小组的同学利用内桶背面的污垢进行了相关实验。
(1)培养洗衣机内部微生物的培养基中一般含有________。
(2)鉴定洗衣机污垢中是否有微生物时要制备固体培养基,在制备完毕后要进行倒平板操作,并将平板倒置。平板倒置的目的是_______________________。
(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻璃棒、试管、烧瓶和吸管;③实验操作者的双手。其中需要消毒的是________,需要灭菌的是________。
(4)检验污垢中是否含微生物时,要将污垢制成水样稀释,然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,这种方法称为________。图所示的四种菌落分布情况中,不可能由该方法得到的是________。用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组?________。为什么?________________________________________________________________________。
(5)判断污垢中微生物的种类可以依据菌落的形状、大小等特征进行初步的________。实验结束后,使用过的培养基进行灭菌处理后才能倒掉,此目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
5
解析:(1)培养微生物的培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。(2)倒置平板的目的是防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿表面造成污染,同时还可使培养基表面的水分更好地挥发。(3)实验者的双手需要进行消毒处理,培养皿、培养基及其他实验器材(如玻璃棒、试管、烧瓶和吸管等)等需要进行灭菌处理。(4)本题中将污垢水样接种在培养基上的方法为稀释涂布平板法。D属于利用平板划线法得到的菌落分布。利用稀释涂布平板法统计菌落数时需要设置对照组,即将一个未接种污垢水样的培养基放在相同条件下培养,以此判断培养基是否被杂菌污染。(5)污垢中的微生物种类可以根据菌落的形状、大小等进行初步鉴定(或分类)。实验结束后,为防止污染环境,应对用过的培养基进行灭菌处理后再倒掉。
答案:(1)水、碳源、氮源和无机盐 (2)防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿表面造成污染,还可使培养基表面的水分更好地挥发 (3)③ ①② (4)稀释涂布平板法 D 需要 因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格) (5)鉴定(或分类) 防止造成环境污染
15.(18分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题:
(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由至少3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。
(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。
(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
酵母膏
无机盐
淀粉
纤维素粉
琼脂
CR溶液
水
培养基甲
+
+
+
+
-
+
+
培养基乙
+
+
+
-
+
+
+
注:“+”表示有,“-”表示无。
据表判断,培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是________________________________________________________________________
______________;培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析:(1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分:C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。(2)刚果红可与纤维素形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用含有刚果红的纤维素培养基培养纤维素分解菌时,由于纤维素被分解,红色复合物无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(3)培养基甲未使用琼脂,为液体培养基,不能用于分离单菌落。含有纤维素和刚果红(CR)的培养基可分离和鉴别纤维素分解菌。
答案:(1)纤维二糖 葡萄糖 (2)红 透明圈 (3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
5
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