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- 2021-09-30 发布
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[实验微课1] 聚焦显微镜观察及物质结构鉴定类实验
1.显微观察类实验的染色剂与材料选择
实验名称
细胞状态
装片制作
生物材料
观察DNA、RNA在细胞中的分布
死细胞
用甲基绿、吡罗红染色
人的口腔上皮细胞
观察线粒体
活细胞
用健那绿染色
观察叶绿体
直接制片
藓类叶片或菠菜叶稍带些叶肉的下表皮
观察植物细胞的质壁分离和复原
直接制片
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞
低温诱导植物染色体数目的变化
死细胞
用改良苯酚品红染液染色
洋葱根尖分生区细胞
观察细胞的有丝分裂
用龙胆紫或醋酸洋红染液染色
观察细胞的减数分裂
龙胆紫溶液或醋酸洋红液染色
蝗虫精母细胞
用显微镜观察多种多样的细胞
直接制片
相关细胞
生物组织中脂肪鉴定
活细胞或死细胞
需用苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液染色
浸泡后的花生子叶
2.七类物质鉴定和提取类实验
实验名称
试剂
颜色
生物材料
备注
淀粉的鉴定
碘液
蓝色
脱色的叶片
还原糖的鉴定
斐林试剂
砖红色沉淀
苹果或梨匀浆等
现配现用、水浴加热
脂肪的鉴定
苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液
橘黄(或红)色
花生种子切片
需用高倍镜观察
蛋白质的鉴定
双缩脲试剂
紫色
豆浆、稀蛋清等
先加A液,后加B液
绿叶中色素的提取和分离
提取液:无水乙醇
分离液:层析液
①胡萝卜素:橙黄色
②叶黄素:黄色
③叶绿素a:蓝绿色
④叶绿素b:黄绿色
新鲜的绿叶(如菠菜叶)
加入二氧化硅是为了研磨
得更充分;加入碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏
酒精的鉴定
重铬酸钾溶液
灰绿色
无氧环境中的酵母菌
酸性条件
鉴定CO
2
澄清石灰水
变混浊
有氧或无氧环境中的酵母
菌
溴麝香草酚蓝水溶液
由蓝变绿再变黄
注意:①在显色实验(如物质鉴定)中,材料最好不带颜色或颜色较浅,或实
验时对有色材料进行脱色处理。
②物质鉴定实验一般不设立对照实验,若需设立对照实验,对照组应加入成分
已知的物质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清。鸡蛋
清作为鉴定蛋白质的材料时,因其较黏稠,故使用时需稀释。
③可溶性还原(性)糖鉴定中不宜选择甜菜、甘蔗等作为实验材料,因它们不
含还原(性)糖。
④颜色深浅与所鉴定的物质的含量有关,含量越多,颜色越明显。
3.教材实验中的“染色剂”
试剂
被染成分
呈现颜色
斐林试剂
还原糖
砖红色沉淀
苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液
脂肪
橘黄色(或红色)
双缩脲试剂
蛋白质
紫色
二苯胺
DNA
蓝色
甲基绿+吡罗红
DNA、RNA
前者绿色、后者红色
健那绿染液
线粒体
蓝绿色
龙胆紫溶液
染色体
紫色
醋酸洋红溶液
红色
改良苯酚品红染液
红色
注意:①斐林试剂和二苯胺染色时需要水浴加热。
②斐林试剂和甲基绿吡罗红染色时需要现配现用。
③健那绿染液是“活体”染色剂。
1.
颜色变化常作为生物学实验的一项重要观察指标,下列归纳中错误的是
(
C
)
选项
试剂
作用
结果
A
溴麝香草酚
蓝水溶液
检测CO
2
溶液由蓝→绿→黄
B
斐林试剂
鉴定还原糖
水浴加热后产生砖红色沉淀
C
健那绿
观察DNA分布
细胞核被染成绿色
D
重铬酸钾溶液
检测酒精
溶液由橙色变成灰绿色
答案 C
溴麝香草酚蓝水溶液可用于检测呼吸过程中CO
2
的产生,CO
2
可使
溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄,A正确;斐林试剂可用于鉴定还原糖,水
浴加热后产生砖红色沉淀,B正确;健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专
一性染料,细胞中的线粒体可被染成蓝绿色,C错误;重铬酸钾溶液用于检测酒
精,在酸性条件下溶液颜色由橙色变为灰绿色,D正确。
2.
下列是以洋葱为材料进行实验的相关叙述,正确的是
(
C
)
A.经染色后,在高倍镜下能观察低温诱导洋葱细胞染色体数加倍过程
B.经染色后,在高倍镜下能观察到洋葱根尖分生区多数细胞的染色体
C.洋葱鳞片叶细胞在发生质壁分离复原时,细胞的吸水能力逐渐降低
D.内表皮经甲基绿吡罗红染色后,能观察到细胞中大部分区域呈绿色
答案 C
在制作装片过程中,要进行解离,使细胞失去活性,所以在显微镜下
不能观察到染色体加倍的连续过程,A错误;大多数细胞处于有丝分裂的间期,
看不到染色体,故观察洋葱根尖细胞的有丝分裂,经染色后,只能观察到少数
细胞的染色体,B错误;质壁分离复原过程中随着细胞逐渐吸水,细胞液浓度逐
渐降低,细胞吸水能力逐渐降低,C正确;用甲基绿和吡罗红染色DNA和RNA,
结果是细胞核呈绿色,细胞质呈红色,可观察到红色比绿色区域广泛,D错误。
3.
如图是高中生物有关实验操作或实验现象,叙述错误的是(
D
)
A.
图甲是观察根尖细胞有丝分裂的图像
,
若要看清分裂期的细胞
,
应将装片适
当右移
B.图乙是观察黑藻细胞的细胞质流动的图像,可用叶绿体作为参照物
C.图丙是植物细胞质壁分离及其复原实验,在后两次低倍镜观察之间时间不
宜停留过长
D.图丙中用低倍镜观察不到紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的质壁分离和复原
过程
答案 D
观察根尖细胞有丝分裂的图像,主要观察分生区细胞的染色体形
态数目,图甲中3为分生区,因此将装片向右移,A正确;叶绿体中含有色素,可直
接作为细胞质是否流动的参照物,B正确;植物细胞质壁分离后时间过长,细胞
可能死亡而不能发生复原,C正确;低倍镜下能观察到紫色洋葱鳞片叶外表皮
细胞的质壁分离和复原过程,D错误。
4.
下列有关实验的说法正确的是
(
D
)
A.使用双缩脲试剂检测蛋白质时,需要将A液和B液等量混合均匀后再加入
组织样液
B.紫色洋葱鳞片叶内表皮是用于观察植物细胞质壁分离的理想材料
C.绿叶中色素的提取和分离实验中,滤纸条上将会出现最宽的色素带呈黄绿
色
D.健那绿可以将活细胞中的线粒体染成蓝绿色
答案 D
使用双缩脲试剂检测蛋白质时,先向组织样液中加入A液(0.1 g/
mL的氢氧化钠溶液)1 mL,摇匀后再加入B液(0.01 g/mL硫酸铜溶液)4滴,摇
匀,A错误;紫色洋葱鳞片叶外表皮是观察植物细胞质壁分离的理想材料,B错
误;绿叶中含量最多的色素是蓝绿色的叶绿素a,因此绿叶中色素的提取和分
离实验中,滤纸条上将会出现的最宽的色素带呈蓝绿色,C错误;健那绿染液是
将活细胞中线粒体染色的专一性染料,可使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而
细胞质接近无色,D正确。
5.
表中所列待测物质的检测,所选用的试剂与预期结果都对应的是
(
D
)
A.①③ B.②③ C.①④ D.②④
待测物质
检测试剂
预期显色结果
①
DNA
甲基绿
红色
②
脂肪
苏丹Ⅲ
橘黄色
③
淀粉
斐林试剂
蓝色
④
蛋白质
双缩脲试剂
紫色
答案 D
甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿
使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色,利用甲基绿、吡罗红混合染色剂
将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布,①错误;脂肪可被苏丹Ⅲ
染成橘黄色,②正确;淀粉遇碘变蓝,③错误;蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产
生紫色反应,④正确。
6.
美花石斛的茎是名贵中药材,因细胞分裂不活跃,生长缓慢。研究表明,美花
石斛在一天中细胞分裂存在高峰期(日节律)。下列为某实验小组探究美花
石斛茎尖细胞分裂日节律的实验步骤与结果:
①在同一天的不同时间采集美花石斛的茎尖。
②茎尖固定8 h后,浸泡在等量95%乙醇和15%盐酸的混合液中3~5 min。
③取出茎尖,用蒸馏水漂洗3次,每次不少于10 min。
④用改良苯酚品红染液染色茎尖20 min后,制作临时装片。
⑤先在低倍镜下找到分裂期的细胞后,换用高倍镜观察、拍照,其中一张照片
如图1所示。
⑥统计处于分裂后期的细胞数及观察的细胞总数,计算其比值,作为细胞分裂
指数。实验结果如图2所示。
图1
图2
回答下列问题:
(1)选取新生茎尖作为实验材料的主要原因是
。
(2)
步骤②中茎尖浸泡在等量
95%
乙醇和
15%
盐酸混合液中的目的是使
。步骤③中漂洗
3
次
,
洗去解离液目的是
。步骤④中改良苯酚品红染液的作用是使
着色。
(3)
通常情况下
,
观察染色体形态、数目的最佳时期是
。结合图
1
分
析
,
本实验选择后期的细胞进行统计
,
是因为细胞分裂后期
。
(4)
实验结果表明
,
在日节律上
,
美花石斛细胞分裂高峰期的时间为
左右。
答案
(1)新生茎尖分生区细胞分裂旺盛
(2)组织中细胞相互分离开来 防止解离过度,便于着色 染色体 (3)中期
细胞较多,易于观察与计数 (4)9:00
解析
(1)新生茎尖分生区细胞分裂旺盛,所以选作为实验材料。(2)观察细胞
有丝分裂实验的操作步骤为:解离→漂洗→染色→制片,步骤②解离的目的是
使组织中细胞相互分离开来;步骤③漂洗的目的是防止解离过度,便于着色;
步骤④中的改良苯酚品红染液属于一种碱性染料,其作用是使染色体着色。
(3)通常情况下,有丝分裂中期,染色体形态固定、数目清晰,是观察染色体形
态和数目的最佳时期;结合图1分析,本实验中观察到中期分裂像少,而分裂后
期细胞较多(因分裂后期持续时间较长),因此该实验应选择后期分裂像为统
计对象。(4)从坐标图中可以看出,日节律中,9:00分裂指数最大,为分裂高峰期。
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