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- 2021-05-13 发布
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第十单元 生物技术实践
专题26 传统发酵技术与微生物的应用
1.(2013·高考江苏卷)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是( )
A.酵母菌是嗜温菌,所以果酒发酵所需的最适温度较高
B.先供氧进行果醋发酵,然后隔绝空气进行果酒发酵
C.与人工接种的发酵相比,自然发酵获得的产品品质更好
D.适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
解析:选D。18~25 ℃适合酵母菌发酵,醋酸菌为嗜温菌,果醋发酵的最适温度是30~35 ℃,高于果酒发酵的最适温度,A项错误;实验中应先进行果酒发酵,再进行果醋发酵,B项错误;人工接种的菌种品质更好,且不容易存在杂菌污染,故比自然发酵获得的产品品质更好,C项错误;适当增加接种量可缩短达到一定数量菌种所需的时间,并且在与其他杂菌的竞争中能够占优势,故能够提高发酵速率、抑制杂菌的生长繁殖,D项正确。
2.(2013·高考江苏卷)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( )
A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
解析:选B。微生物分离中培养基的制备应是先灭菌再倒平板,A项错误;每一次划线前都要灼烧接种环,以杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,B项正确;接种后的培养皿应在恒温培养箱中进行培养,光照会影响温度等条件,C项错误;培养过程中观察的间隔时间不能太长,适宜条件下一般不超过24 h,D项错误。
3.(2013·高考安徽卷)下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是 ( )
A.根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目
B.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制
C.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接
D.放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置
解析:选D。解答本题首先要结合实验流程图正确理解各个环节的目的,以及整个实验的原理和方法,然后再结合教材中的相关知识正确解答。由于无法确定该培养皿中的菌落是否来自一个活菌,且不知道菌液的体积和稀释度,所以无法准确计算样品中含有的活菌实际数目,故A项错误。启动子和终止子是目的基因表达的必要条件,而不是DNA复制的必要条件,故B项错误。DNA分子杂交是两条链之间的碱基互补配对的过程,与脱氧核糖和磷酸交替连接无关,故C项错误。从实验中薄膜的使用过程可以看出,只要薄膜最后所放的位置和第一步中覆盖培养基的方位相同,即可通过DNA分子杂交技术及同位素示踪技术确定含有特定DNA的细菌菌落的位置,故D项正确。
4.(2013·高考新课标全国卷Ⅱ)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题:
(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用________法或________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。
(2)取该单菌落适当稀释,用________法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明______________________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________。
(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素________。
解析:(1)实验室中对微生物纯化培养时,常用的接种方法有划线法和稀释涂布法。(2)若让已经获得的单个菌落在固体培养基上大量且均匀繁殖,常用涂布器把稀释的菌液均匀涂满整个平板。(3)对某种抗生素越敏感的致病菌,在该抗生素存在的范围内,越不易生存,形成的透明圈就越大。但是,如果在透明圈中还有菌落生存,则说明这个菌落的细菌耐药性很强。(4)通过(3)可知,在应用时,要想杀死某致病菌,就得选择能使该致病菌大量死亡,即产生的透明圈大的那种抗生素。
答案:(1)划线 稀释涂布(或涂布) (2)涂布 (3)敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A的弱 耐药菌 (4)A
5.(2013·高考四川卷) 普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。
(1)图甲中,过程①需要的酶有____________________。为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是________________________________________________________________________。
(2)某间学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________;推测该同学接种时可能的操作失误是______________。
(3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种________菌的发酵罐需要先排气,其原因是________________________________________________________________________。
(4)用凝胶色谱法分离α淀粉酶时,在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质,相对分子质量较________。
解析:(1)由图甲基因工程操作的基本过程可以看出,①为基因工程中基因表达载体的构建过程,需要用到的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶。为筛选转基因酵母菌,需对酵母菌进行选择培养,即将酵母菌培养在以淀粉为唯一碳源的培养基中。为提高转基因酵母菌的纯度,需要多次筛选。(2)分离纯化某种菌的常用方法有稀释涂布平板法和平板划线法。由菌落分布情况可以看出,该同学采用的是稀释涂布平板法,且由于涂布不均匀造成了乙图所示现象。(3)由于工程酵母菌利用淀粉的能力强,发酵产生酒精和CO2的速率较快,故需要先排气。(4)利用凝胶色谱法分离蛋白质时,相对分子质量较小的蛋白质由于扩散进入凝胶颗粒内部而被滞留,洗脱所需时间较长。
答案:(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶 淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌 (2)稀释涂布平板法 涂布不均匀 (3)工程酵母 工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强,导致酒精发酵产生CO2的速率更快 (4)小