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- 2021-09-25 发布
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1.实验原理
(1)DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
溶解规律
2 mol/L NaCl溶液
0.14 mol/L NaCl溶液
DNA
溶解
析出
蛋白质
NaCl溶液物质的量浓度从2 mol/L逐渐降低的过程中,溶解度逐渐增大
部分发生盐析沉淀
溶解
(2)DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离。
(3)DNA与二苯胺沸水浴加热,呈蓝色。
2.操作流程
考向 DNA的粗提取与鉴定过程分析
1.“DNA的粗提取与鉴定”实验中,操作正确的是
A.取制备好的鸡血细胞液5~10 mL注入烧杯中,加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL,同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5 min,可使血细胞破裂,释放出DNA
B.整个DNA提取过程中,两次加蒸馏水的目的都是为了降低溶液中NaCl的浓度,使DNA分子的溶解度达到最低,析出DNA分子
C.整个DNA提取操作中,两次加入2 mol/L的NaCl溶液,目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中
D.DNA鉴定操作中,只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺试剂,即可出现蓝色
【参考答案】C
色需在沸水浴条件下完成。
技法提炼
DNA的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”
加蒸馏水2次
①加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水涨破;②加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的物质的量浓度稀释到0.14 mol/L,使DNA析出
用纱布过滤4次
①过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;②过滤用2 mol/L的NaCl充分溶解的DNA,滤去溶液中的杂质;③滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);④过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液
用NaCl溶液4次
①加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提取的细胞核物质;②用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;③用2 mol/L的NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物;④用2 mol/L的NaCl溶液,溶解丝状物用于鉴定DNA
2.在DNA的粗提取实验过程中,对DNA提取量影响较小的是
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,释放出DNA等核物质
B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,直至黏稠物不再增多
D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可将混合液再放入冰箱中冷却
【答案】B
1.在DNA粗提取实验中,应尽可能避免DNA断裂和降解。相关操作正确的是
A.以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA溶解
B.向DNA溶液中迅速加入蒸馏水,使DNA快速析出
C.将丝状物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中后,加水析出
D.向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌
2.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是
A.向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNA
B.鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴
C.利用鸡血细胞提取DNA时,初步析出DNA的试剂是物质的量浓度为0.14 mol·L-1的NaCl溶液
D.向鸡血细胞中加入冷却的体积分数为95%的酒精,可以获得无杂质的DNA
3.下列反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的坐标图,正确的是
A. B.
C. D.
4.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验中不属于该实验依据的原理是
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应
5.如图是利用鸡血粗提取DNA的基本操作,下表中操作目的不能实现的是
A.A B.B
C.C D.D
6.在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于 学¥科网
A.前者用来溶解血细胞,后者用来溶解DNA
B.前者使DNA从核中分离出来,后者使DNA析出
C.前者用来分离细胞核和细胞质,后者用来提取DNA
D.前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释NaCl溶液
7.甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正确的是
A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液,但两者浓度不同
B.图乙试管经少许加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝,另一支试管中的溶液不变蓝
C.图甲操作需用玻棒迅速搅拌以使DNA成为絮状沉淀并缠绕在玻棒上
D.图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果
8.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同,下列有关叙述不正确的是
A.实验材料选择错误的组别是丙
B.沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁
C.甲组实验现象差的原因是25 ℃的酒精对DNA的凝集效果差
D.乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂
9.下面是某同学设计的鉴定DNA的实验。仔细阅读后回答相关问题。
实验目的:鉴定DNA粗提取实验提取出来的丝状物中确实含有DNA。
实验器材:20 mL试管、酒精灯、石棉网、烧杯、试管夹,0.015 mol/L的NaCl溶液、二苯胺试剂、DNA粗提取实验提取出来的丝状物等。
实验步骤:
第一步:配制二苯胺试剂。将lg二苯胺溶于98 mL冰醋酸中,再加入2mL浓硫酸(密度为1.84),临时配制使用,用前可加几滴乙醛,有利于提高反应的灵敏度。
第二步:取两支20 mL试管,标明A和B,各滴加0.015
mol/L的NaCl溶液5mL,将丝状物放入A试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。
第三步:混合均匀后,将试管置于沸水浴中加热5 min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化。
(1)该实验的实验原理是:DNA遇二苯胺,在沸水浴条件下会发生颜色反应,反应后的颜色为___________。
(2)该实验设计A、B两组实验,进行对照,其中实验组是____________试管的实验,另一组为对照组。
(3)对照实验必须严格控制单一变量,该实验的单一变量是_____________。
(4)从该实验的过程分析可以知道,DNA的鉴定实验需要在_____________性条件下进行。
(5)该实验中不能将0.015 mol/L的NaCl溶液换成0.14 mol/L的NaCl溶液。理由是:_____________。
10.回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。
(1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是____。
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应
(2)如图为该实验过程中的一些重要操作示意图。
①正确的操作顺序是____________________________________。
②上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是__________________和________________。
③图A步骤中所用酒精必须经过____________才能使用,该步骤的目的是________________________________________________。
(3)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加________试剂,沸水浴,如果出现________,则该丝状物的主要成分为DNA。
[来源:]
11.(2015·江苏卷)图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是
A. 图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同
B. 图1 中完成过滤之后保留滤液
C. 图2 中完成过滤之后弃去滤液[来源:学&科&网Z&X&X&K]
D. 在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
1.【答案】D
缓慢搅拌,D项正确。
2.【答案】C
【解析】菜花细胞为植物细胞,有细胞壁保护,因此加蒸馏水不会吸水胀破,A错误;鉴定DNA时,应将丝状物用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解,之后加入到二苯胺试剂中进行沸水浴,B错误;DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,初步析出DNA的试剂是物质的量浓度为0.14 mol·L-1的NaCl溶液,C正确;DNA存在于血细胞中,血细胞没有破坏,向鸡血细胞中加入冷却的95%的酒精,不能获得DNA,D错误。
3.【答案】C
【解析】NaCl溶液浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低;NaCl溶液浓度小于0.14
mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐降低;NaCl溶液浓度大于0.14 mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐升高。所以C选项是正确的。
4.【答案】C
【解析】根据“DNA的粗提取与鉴定的实验”原理:①DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低,利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。②DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。③洗涤剂能瓦解细胞膜但是对DNA没有影响。④蛋白质不能耐受较高温度,在80 ℃条件下会变性,而DNA对温度的耐受性较高。⑤蛋白酶能水解蛋白质,而对DNA没有影响。⑥DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。C选项不属于该实验的原理。学&科网
5.【答案】B[]
mol/LNaCl溶液中的杂质,D正确。
6.【答案】D
【解析】在DNA粗提取的实验中,先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是使血细胞吸水涨破,释放DNA;降低NaCl浓度,使DNA析出,故选D。
7.【答案】D
【解析】图甲的烧杯中所用的溶液是体积分数为95%的冷却酒精,A错误;图乙试管经沸水浴后即可观察到一支试管中的溶液(含有DNA)明显变蓝,另一支试管中的溶液(不含DNA)不变蓝,B错误;图甲操作需用玻棒沿一个方向缓慢搅拌以卷起丝状DNA,C错误;图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果,D正确。
8.【答案】D
【解析】鸡血、菜花中都含有DNA,而猪是哺乳动物,其成熟的红细胞中不含DNA,因此实验材料选择错误的组别是丙,A正确;甲、乙、丁的实验材料中都含有DNA,但乙为植物,将植物细胞放入蒸馏水中时,植物细胞不会吸水胀破,且DNA应该用二苯胺鉴定,而不能用双缩脲试剂鉴定,因此沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁,B正确;甲组实验现象差的原因是25
℃的酒精对DNA的凝集效果差,C正确;乙为植物,将植物细胞放入蒸馏水中时,植物细胞不会吸水胀破,且DNA应该用二苯胺鉴定,而不能用双缩脲试剂鉴定,D错误。
9.【答案】(1)蓝色
(2)A
(3)是否添加丝状物
(4)酸
(5)DNA在0.14 mol/LNaCl溶液中溶解度最低[]
低,所以在此浓度下DNA是析出的状态。
10.【答案】(1)B
(2)①C→B→E→D→A ②加速血细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出 ③充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA
(3)二苯胺 蓝色
【解析】(1)根据DNA粗提取和鉴定的原理:①DNA的溶解性,DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同,利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出,从而达到分离的目的;②DNA不溶于酒精溶液,细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精,利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离;③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是不能水解DNA,蛋白质不能耐受较高温度,DNA能耐受较高温度,洗涤剂能瓦解细胞膜,但是对DNA没有影响;④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。分析选项可知,B正确。(2)①根据DNA的粗提取和鉴定步骤:加入蒸馏水,破碎细胞→过滤,获取含DNA的滤液,去除滤液中杂质,DNA的析出,鉴定。所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。②C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂,E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低,析出DNA。③DNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以A步骤中所用酒精必须经过充分预冷才能使用,以便除去溶于酒精的杂质,提取含杂质较少(或较纯净)的DNA。(3)DNA鉴定用二苯胺水浴加热,呈蓝色。
11.【答案】BCD
【解析】图1中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,释放其中的核物质,图2中加入蒸馏水的目的是降低NaCl的浓度,使DNA的溶解度降低析出,A错误;由于DNA溶于水,所以图1中完成过滤后DNA存在于滤液中,需保留滤液,B正确;图2中DNA析出,则过滤后弃去滤液,保留黏稠物,C正确;在图1中鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉,蛋白质水解形成肽和氨基酸,溶于水,不利于去除杂质,D正确。