【生物】2018届一轮复习人教版专题25-1DNA的粗提取与鉴定学案 16页

‎【学案导航】---明方向！‎ ‎【课程学习目标】‎ ‎1. 了解DNA的物理化学性质。‎ ‎2. 理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。‎ 第一层级：预学区.不看不讲 ‎【知识体系梳理】‎ ‎1．提取DNA的基本思路：‎ ‎(1)生物大分子的提取：选用一定的________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。‎ ‎(2)DNA的粗提取：利用DNA与_______________等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。‎ ‎2．提取DNA的原理：‎ ‎(1)利用DNA的溶解度方面的性质。‎ ‎①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的_______________中溶解度不同；‎ ‎②DNA不溶于________溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。‎ ‎(2)利用DNA的耐受性方面的性质。‎ ‎①蛋白酶能水解________，但对DNA没有影响。‎ ‎②大多数________不能忍受60〜80°C的高温，而DNA在80°C以上才会变性。‎ ‎③洗涤剂能够瓦解________，但对________没有影响。‎ ‎3．DNA的鉴定：‎ DNA+________________。‎ ‎4．“DNA的粗提取与鉴定”实验材料的选取：选用____________________的生物组织。‎ ‎5．“DNA的粗提取与鉴定”的实验过程中，破碎细胞，获取含DNA的滤液：‎ ‎(1)动物细胞(以鸡血为例)：在鸡血细胞液中加入一定量的________，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液。‎ ‎(2)植物细胞(以洋葱为例)：先将洋葱切碎，加入一定的____________________，充分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。‎ ‎6．“DNA的粗提取与鉴定”的实验过程中，去除滤液中的杂质：‎ ‎(1)方案一：通过控制________溶液的浓度，去除杂质。‎ ‎(2)方案二：直接在滤液中加入________，反应10〜15 min，嫩肉粉中的________能够分解蛋白质。‎ ‎(3)方案三：将滤液放在60〜75 °C的恒温水浴箱中保温10〜15 min，注意严格控制温度范围，使蛋白质沉淀，将________分离。‎ ‎7．DNA的析出与鉴定：‎ ‎(1)DNA的析出：向滤液中加入与滤液体积相等的、_____________________，静置2〜3 min，析出白色丝状物。‎ ‎(2)DNA的鉴定：将丝状物放入物质的量浓度为__________________溶液中，用玻璃棒搅拌，加入二苯胺试剂，将试管置于________中加热________min。‎ ‎【预习效果检测】‎ ‎1．由于鸡血没有找到，某同学尝试用人的血液来代替，但结果没有成功，其最可能的原因是 A.操作方法不对 B.人血含DNA过少 C.NaCl溶液浓度太髙 D.加二苯胺过少 ‎2．若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等。其可能的原因是 ‎①植物细胞中DNA含量低  ②研磨不充分  ③过滤不充分  ④95%冷酒精的量过大 A.①②‎ B.③④‎ C.①④‎ D.②③‎ ‎3．若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是 A.利于DNA的溶解 B.分离DNA和蛋白质 C.溶解细胞膜 D.溶解蛋白质 ‎4．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，实验原理是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同来提取的，DNA的溶解度与如图所示曲线的对应点相符合的是 A.a点浓度最适合析出DNA B.b点浓度最适合析出DNA C.c点浓度最适合析出DNA D.d点浓度最适合析出DNA ‎5．与析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是 A.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度 B.在操作时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整 C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出 D.当丝状黏稠物不再增加时，此时NaCl溶液的浓度相当于0.14 mol/L 第二层级：导学区.不议不讲 ‎【重点难点探究】‎ ‎1．为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？‎ ‎2．加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？‎ ‎3．如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？‎ ‎4．研磨后再过滤这一步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？‎ ‎5．为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？‎ ‎6.加入冷却的95%的酒精，搅拌。这一步骤的目的是什么？‎ ‎7.为什么加入的酒精需要冷却的？‎ 第三层级：固学区.不练不讲 ‎【基础智能检测】‎ ‎1.在DNA析出与鉴定实验中加入酒精的目的是（　　）‎ A.溶解DNA　　　 B.除去DNA中所含的杂质 C.析出蛋白质 D.稀释溶液，降低浓度 ‎2.在DNA析出与鉴定实验中，可以将DNA滤液放在60～‎70 ℃‎的恒温水浴箱中保温10～15分钟，这样处理的目的是（　　）‎ A.利用DNA对高温的耐受性，长期保存DNA B.利用DNA在NaCl溶液中的溶解度受温度影响，使DNA析出 C.利用DNA和蛋白质对高温的耐受性不同，使蛋白质变性，从而与DNA分离 D.利用蛋白质对高温的耐受性比DNA强，使DNA和蛋白质分离 ‎3.玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺（沸水浴）染上的颜色分别是（　　）‎ A.黄色、紫色 B.白色，砖红色 C.白色、蓝色 D.蓝色、砖红色 ‎4.某同学在做DNA粗提取与鉴定实验中，加入二苯胺鉴定的结果是有DNA的试管中溶液颜色很淡，其原因不可能是（　　）‎ A.经蒸馏水处理的红细胞，在用玻璃棒搅拌时,时间偏少，使红细胞破裂数量少 B.未进行沸水浴或沸水浴时间短，导致DNA含量少,染色时间不够 C.鸡血细胞液的DNA含量少，应该用鸡全血 D.用NaCl溶液进行盐析时，所配制的NaCl溶液浓度达不到0.14 mol/L，使析出的DNA少 ‎5.蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是（　　）‎ A.蒸馏水 B.NaCl溶液 C.NaOH溶液 D.盐酸 ‎6. 下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：‎ ‎(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入________并搅拌，可使鸡血细胞破裂。 ‎ ‎(2)步骤二中，过滤后收集含有DNA的___________________。 ‎ ‎(3)步骤三、四的操作原理是_____________________________，步骤四通过向溶液中加入________调节NaCl溶液的物质的量浓度，为________mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。 ‎ ‎(4)步骤七：向步骤六过滤后的________中，加入等体积的冷却的________，静置2～3 min，溶液中会出现________色丝状物，这就是粗提取的DNA。 ‎ ‎(5)步骤八：DNA遇________试剂，沸水浴5 min，冷却后，溶液呈________色。。‎ 第四层级：思学区.不思不复 ‎【思维导图构建】‎ ‎【答案】‎ ‎【知识体系梳理】‎ ‎1．(1)物理或化学 (2)RNA、蛋白质和脂质 ‎2．(1)NaCl溶液  酒精 (2)蛋白质   蛋白质  细胞膜  DNA ‎3．二苯胺  蓝色 ‎4．DNA含量相对较高 ‎5．(1)蒸馏水   (2)洗涤剂和食盐 ‎6．(1)NaCl   (2)嫩肉粉  木瓜蛋白酶    (3)DNA与蛋白质 ‎7．(1)冷却的体积分数为95%的酒精溶液 ‎(2)2mol/L的NaCl    沸水    5‎ ‎【预习效果检测】‎ ‎1．B 【解析】人是哺乳动物，成熟的红细胞中没有细胞核，没有DNA，故B正确，其余错误。‎ ‎2．D 【解析】 植物细胞含有一定量的DNA，①错。研磨不充分会导致植物细胞细胞膜不充分破裂，DNA释放不足，②正确。过滤不充分导致得到DNA含量偏少，③正确。95%冷酒精用来去除蛋白质杂质，与DNA量无直接关系，④错。故D正确。‎ ‎3．C 【解析】食盐的主要成分是NaCl，破碎细胞时所使用的NaCl的物质的量浓度有利于DNA的溶解，而在NaCl物质的量浓度为0.14 mol/L时，才用于分离DNA和蛋白质，加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜。‎ ‎4．B【解析】由图可以看出，b点对应的浓度DNA的溶解度最小，可以析出较多的DNA，B正确。‎ ‎【重点难点探究】‎ ‎1.蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA。‎ ‎2.洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。‎ ‎3.研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。‎ ‎4.可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。‎ ‎5.用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。‎ ‎6.去除溶于酒精的杂质 ‎7.可抑制核酸水解酶的活性，防止降解DNA；降低分子的运动，易于形成沉淀析出；低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。‎ ‎【基础智能检测】‎ ‎1.【答案】B ‎【解析】本题考查的主要是酒精的作用，即DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液，而蛋白质可溶，从而把蛋白质和DNA分开。‎ ‎2.【答案】C ‎【解析】根据蛋白质热变性的原理，将DNA滤液放在60～‎70 ℃‎的恒温水浴箱中保温10～15分钟，使蛋白质遇热，空间结构发生改变，把蛋白质除去，从而得到较纯的DNA。‎ ‎3.【答案】C ‎【解析】向处理后的DNA滤液中加入冷却的酒精，用玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA为白色；DNA遇二苯胺（沸水浴）反应后呈蓝色。‎ ‎4.【答案】C ‎5.【答案】B ‎【解析】本题为DNA提纯原理的应用。DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，蛋白质可溶。从而把DNA和蛋白质分开。‎ ‎6. 【答案】 蒸馏水 滤液 DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 蒸馏水 0.14 滤液 酒精 白 二苯胺 蓝 ‎【解析】试题分析：DNA粗提取和鉴定的过程：（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。（3）去除滤液中的杂质：方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。（4）DNA的析出与鉴定：①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分；②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。学*科网 ‎（1）步骤一中，利用渗透原理，向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可使鸡血细胞破裂。‎ ‎（2）步骤二中，过滤后收集含有DNA的滤液。‎ ‎（3）步骤三、四的操作原理是DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；步骤四通过向溶液中加入蒸馏水调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L（此时DNA的溶解度最小）时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。‎ ‎（4）步骤七：向步骤六过滤后的滤液中，加入等体积的冷却的酒精，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。‎ ‎（5）步骤八：DNA遇二苯胺试剂，沸水浴5min，冷却后，溶液呈蓝色。‎ ‎【典例指津】---授技法！‎ 热点题型一 ‎ 例1、在以鸡血为材料对DNA 进行提取的实验中，若需进一步提取含杂质较少的DNA，可以依据的原理是 A.DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最小 B.在沸水浴的条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色 C.DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的一些其他物质易溶于酒精溶液 D.质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用 ‎【答案】C ‎【提分秘籍】‎ 一、DNA的粗提取与鉴定的实验过程中的注意事项：‎ ‎(1)在鸡血细胞液中加入蒸馏水后，必须充分搅拌，否则血细胞的细胞核不会充分破碎，溶解出的DNA量就会减少。‎ ‎(2)所用的酒精必须充分预冷才能使用，冷酒精与含有DNA的NaCl溶液的体积比是1：1，提取DNA丝状物的方法是用玻璃棒缓缓沿一个方向搅拌。‎ ‎(3)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血的主要原因是遗传物质DNA主要存在于细胞的细胞核内。‎ ‎(4)实验过程中两次加入蒸馏水，操作目的各不相同：第一次加蒸馏水，目的是使血细胞通过吸水涨破，释放出核内的DNA;第二次加蒸馏水，目的是稀释氯化钠溶液，使其物质的量浓度降至0. 14 mol/L ，最终使大量DNA 析出。‎ ‎(5)鉴定实验所得的丝状物的主要成分是DNA，除了可用二苯胺作鉴定试剂外，还可用甲基绿试剂直接滴在玻璃棒的丝状物上，因甲基绿与DNA亲和力强，若丝状物被染成绿色则证明该物质主要成分是DNA。‎ 二、DNA的粗提取与鉴定的实验结果分析与评价 ‎(1)是否提取出了DNA 观察你提取的DNA，如果不是白色丝状物，说明DNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能是提取的DNA含量低，或是实验操作中存在错误，需要重新制备。‎ ‎ (2)分析DNA中的杂质 本实验提取的DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。‎ ‎(3)不同实验方法的比较 对于不同的实验方法，本课题可以采用分组的方法进行研究。可以选取不同的实验材料，同种材料还可以采用不同方法，从多方面比较实验结果，如DNA的纯度、DNA 的颜色、二苯胺显色的深浅等，看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好。‎ ‎【举一反三】 ‎ 在DNA的粗提取和鉴定实验中，有两次DNA的沉淀析出，其依据的原理是 ‎①DNA在NaCl溶液的物质的量浓度为0. 14 mol/L时溶解度最低 ‎②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精溶液中能沉淀析出 A.两次都是①‎ B.两次都是②‎ C.第一次是①，第二次是②‎ D.第一次是②，第二次是①‎ ‎【答案】C 热点题型二 ‎ 例2、 DNA粗提取的实验材料中有三次过滤：(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；(2)过滤含黏稠物的0.14 mol/L NaCl溶液；(3)过滤溶解有DNA的2 mol/L NaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得( )‎ A．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液 B．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的滤液 C．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNA D．含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液 ‎【答案】A ‎【提分秘籍】‎ 一、实验原理 提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。学*科网 1、DNA的溶解性 （1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。   （2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。 2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 3、DNA的鉴定 在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 二、实验设计 1、实验材料的选取 凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。 2、破碎细胞，获取含DNA的滤液  动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 3、去除滤液中的杂质  方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；‎ 方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；‎ 方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。 4、DNA的析出与鉴定 （1）将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。 （2）取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。‎ ‎【举一反三】‎ 将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14 mol/L NaCl溶液、2 mol/L NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是    ‎ A．P、Q、R B．p、q、r C．P、q、R D．p、Q、r ‎【答案】C ‎【真题回眸】---知难易！‎ ‎1.（2010江苏）某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：‎ ‎ 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份．每份l0 g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于—20℃条件下保存24 h。‎ ‎ DNA粗提取：‎ 第一步：将上述材料分别放人研钵中，各加入l5 mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。‎ 第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20 mL体积分数为95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。‎ 第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol／L NaCl溶液溶解上述絮状物。‎ DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。‎ 分析上述实验过程，回答下列问题：‎ ‎(1)该探究性实验课题名称是 。‎ ‎(2)第二步中 “缓缓地”搅拌，这是为了减少 。‎ ‎(3)根据实验结果，得出结论并分析。‎ ‎ ①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。‎ ‎ 结论2： 。‎ ‎ ②针对结论I，请提出合理的解释： 。‎ ‎(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是： 。然后用体积分数为95％的冷酒精溶液使DNA析出。‎ ‎【答案】‎ ‎（1）探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 ‎（2）DNA断裂 ‎（3）①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多 ‎②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢[]‎ ‎（4）将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液 ‎2.（2012江苏）下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（ ）‎ A. 洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度 B. 将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C. 常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取 D. 用玻棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少 ‎【答案】C ‎【解析】洗涤剂能够瓦解细胞膜，但不能增加DNA的溶解度，A错；应将 DNA 丝状物放入一定浓度氯化钠溶液溶解，再滴加二苯胺试剂，B错；常温下菜花匀浆中有些酶类可破坏DNA，而影响DNA的提取，C正确；用玻棒缓慢搅拌滤液并不影响DNA的含量，而在粗提取时，缓慢撑拌有利于DNA附着，D错。学*科网 ‎3.（2014江苏）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，错误的是 A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料 B.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水 C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物 D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝 ‎【答案】C ‎【能力提升】---长士气！ ‎ ‎1．以血液为实验材料进行DNA的粗提取实验中，加入柠檬酸钠的目的是(　　)‎ A．防止血液凝固 B．加快DNA析出 C．加快DNA溶解 D．加速凝血 ‎【答案】A ‎【解析】柠檬酸钠可以防止血液凝固。‎ ‎2．在高中生物学实验中多次用到酒精，下列关于酒精使用的叙述，正确的是(　　)‎ A．DNA粗提取实验中，用体积分数为95%的冷酒精提纯DNA B．体积分数为95%的酒精常用作医用和实验室的消毒 C．在脂肪鉴定实验中，可用体积分数为50%的酒精溶液固定脂肪滴 D．用体积分数为70%的酒精提取绿叶中色素，实验现象不受影响 ‎【答案】A ‎【解析】由于DNA不溶于95%冷酒精，而蛋白质等杂质可溶，因此DNA粗提取实验中可利用此原理来提纯DNA，A项正确；医用和实验室消毒的酒精浓度为75%，B项错误；在脂肪鉴定实验中，可用体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色，C项错误；提取绿叶中色素时应用无水乙醇，因为色素不溶于水，因此用体积分数为70%的酒精一定会影响实验现象，故D项错误。‎ ‎3．蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列试剂可达到上述同一目的的是(　　)‎ A．蒸馏水 B．NaCl溶液 C．NaOH溶液 D．盐酸 ‎【答案】B ‎4．在除去杂质时选择方案三(见教材)，将滤液放在60～‎70℃‎的恒温水浴箱中保温10～15min的原因是(　　)‎ A．使DNA变性 B．使蛋白质变性 C．使DNA和蛋白质变性 D．分解蛋白质 ‎【答案】B ‎【解析】方案三中水浴处理的目的是使蛋白质变性。学*科网 ‎5．如果在除杂中选择方案一，初步析出DNA所用药品的浓度和名称是(　　)‎ A．‎0.1g·L－1的柠檬酸钠溶液 B．2mol·L－1的NaCl溶液 C．0.14mol·L－1的NaCl溶液 D．体积分数为95%的溶液 ‎【答案】C ‎【解析】方案一中初步析出DNA所用药品及浓度为0.14mol·L－1的NaCl溶液。‎ ‎6．在DNA的粗提取实验过程中，对DNA提取量影响较小的是(　　)‎ A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质 B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 C．要析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多 D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至可将混合液再放入冰箱中冷却 ‎【答案】B ‎【解析】DNA粗提取实验中，玻璃棒的搅拌方向是影响DNA量的最小因素。‎ ‎7．提取含杂质较少的DNA所用的溶液是(　　)‎ A．NaCl溶液 B．冷却的体积分数为90%酒精的溶液 C．加热的体积分数为90%酒精的溶液 D．冷却的体积分数为95%酒精的溶液 ‎【答案】D ‎【解析】初步提取DNA时用不同浓度的NaCl溶液，进一步提纯时，用冷却的体积分数为95%酒精的溶液，故选D。‎ ‎8．DNA粗提取实验中，应尽可能避免DNA断裂和降解。相关操作正确的是（ ）‎ A. 以菜花为材料进行研磨时，可以适当加热以促进DNA溶解 B. 向DNA溶液中迅速加入蒸馏水，使DNA快速析出 C. 将丝状物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中后，加水析出 D. 向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌 ‎【答案】D ‎9．请根据下列有关实验及结果，回答问题：‎ 在DNA的粗提取与鉴定实验中，为得到含DNA的黏稠物，某同学进行了如下操作，最后所得含DNA黏稠物极少，导致下一步实验无法进行，请指出该同学实验操作中的几处错误并改正。‎ ‎①在新鲜的家鸽血中加入适量的柠檬酸钠，经离心后，除去血浆，留下血细胞备用。‎ ‎②取5mL～10mL血细胞放入50mL的烧杯中，并立即注入20mL物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液，快速搅拌5min后经滤纸过滤，取其滤液。‎ ‎③向滤液中加入40mL物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min。‎ ‎④向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌，直到溶液中出现丝状物为止，再进行过滤，得到含DNA的黏稠物。‎ 请帮该同学指出错误并加以改正：‎ ‎(1)________________________________________________________________________。‎ ‎(2)________________________________________________________________________。‎ ‎ (3)________________________________________________________________________。‎ ‎【答案】(1)第②步中“并立即注入20mL物质的量浓度为0.015mol/L的NaCl溶液快速搅拌”应改为“缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌。”学#科网 ‎(2)第②步中的“滤纸”应改为“纱布”‎ ‎(3)第④步中“直到溶液中出现丝状物为止”应改为“直到溶液中丝状物不再增加为止”‎ ‎10．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。‎ ‎(1)图中实验材料A可以是________等，研磨前加入的B应该是________。‎ ‎(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是________，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是________________________________________________。‎ ‎(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液________。‎ ‎1‎ B液中 搅拌研磨后过滤 滤液E ‎2‎ ‎2mol/L的NaCl溶液 搅拌后过滤 滤液F ‎3‎ ‎0.14mol/L的NaCl溶液中 搅拌后过滤 滤液G ‎4[]‎ 冷却的95%的酒精溶液中 搅拌后过滤 滤液H ‎(4)DNA鉴定的原理是________________________________________________________________________。‎ ‎【答案】(1)洋葱(菜花等)　洗涤剂和食盐 ‎(2)使DNA溶解　使DNA(溶解度下降而沉淀)析出 ‎(3)H ‎(4)在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色 ‎【解析】本题考查了“DNA的粗提取与鉴定”的原理及分析。(1)用洋葱、菜花等破碎细胞时，加入一定量的洗涤剂和食盐，洗涤剂可以溶解细胞膜，有利于DNA的释放，食盐主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。(2)在含有DNA的滤液中，加入2mol/L的NaCl溶液，可以使DNA溶解而杂质析出；在滤液D中加入蒸馏水，当NaCl溶液浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小而析出。(3)在滤液E中只是除去了部分杂质，则含DNA较多；在滤液F中，除去了较多的蛋白质等，则含DNA最多；在滤液G中，因DNA析出，则含DNA较少；在滤液H中，因DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精，则含DNA最少。(4)DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。‎