高考领航高考生物苏教版新一轮总复习高考演练选修无菌操作技术实践 3页

‎1．(2013·高考安徽卷)下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。‎ ‎ 下列叙述正确的是(　　)‎ A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目 B．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制 C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接 D．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置 解析：选D。根据培养皿中菌落数只能估算样品中含有的活菌数目；外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能够进行转录；重组质粒与探针因碱基互补配对能进行分子杂交；用放射性标记的DNA探针与特定DNA分子杂交后，洗去未结合的探针，放射自显影结果可以显示原培养皿中含特定DNA的细菌菌落位置。‎ ‎2．(2012·高考北京卷)高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最 ‎ 大的一项是(　　)‎ A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 解析：选C。生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高，接种不需要进行严格的无菌操作；土壤浸出液中含有多种杂菌，所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时，不进行严格无菌操作也不会影响实验结果；植物组织培养技术成功的关键是无菌条件，若接种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失败，故C项符合题意。‎ ‎3．(2013·高考课标卷)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病 人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。‎ 回答下列问题：‎ ‎(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用________法或________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。‎ ‎(2)取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，在‎37℃‎培养箱中培养24‎ ‎ h，使其均匀生长，布满平板。‎ ‎(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。‎ ‎(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素________。‎ 解析：本题主要考查微生物培养的相关知识。(1)将细菌接种到固体培养基上的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(2)由(1)获取的致病菌单菌落，经过适当稀释，用涂布法接种至固体培养基表面进一步培养。(3)在检测致病菌对抗生素的敏感性实验中，若含A种抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明周围的致病菌死亡，该致病菌对A种抗生素敏感；若含B种抗生素的滤纸片周围没有出现透明圈，说明致病菌对B种抗生素不敏感；若含C种抗生素的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A的弱；若含D种抗生素的滤纸片周围透明圈也比含A的小，说明A、B、C、D四种抗生素的杀菌效果最显著的为A。透明圈中出现的菌落为耐药菌。(4)根据(3)中分析，为达到抗菌目的最好选用抗生素A。‎ 答案：(1)划线　稀释涂布(或涂布)　(2)涂布 ‎(3)敏感　不敏感　该致病菌对C的敏感性比对A的弱 耐药菌　(4)A ‎4．(2011·高考课标卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学 ‎ 欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：‎ ‎(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。‎ ‎(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。‎ ‎(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。‎ ‎ (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。‎ 解析：‎ ‎(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这种营养成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生长。(2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。(4)实验室培养微生物的过程中，常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌；用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌；用干热灭菌法对玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等进行灭菌。实验操作应在酒精灯火焰旁进行，因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境，可防止微生物的污染。‎ 答案：(1)原油　选择 ‎(2)平板划线法　稀释涂布平板法 ‎(3)强 ‎(4)干热灭菌　高压蒸汽灭菌　火焰