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- 2021-05-13 发布
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高考生物总复习 实验 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
【学习重难点】 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。
【重要考点】 主要考点是鉴定所用的试剂及相应的颜色反应; 斐林试剂和双缩脲试剂的区别(溶液浓度不同,使用原理不同,使用方法不同);实验选材等。
【基础回顾】
1.检测还原糖所使用的试剂是 ,该试剂使用时,应先 ,该试剂与还原糖作用形成 色沉淀。
2.检测脂肪所用的试剂是 ,该试剂与脂肪作用被染成 色。
3.检测蛋白质所用的试剂是 ,该试剂与蛋白质作用,产生 色,使用应 。
4.检测淀粉使用试剂是 ,作用的结果呈 色。
【重点问题探究】
1.选材:要富含有待测的物质,且颜色近于无色或白色(为什么?)。
2.还原性糖鉴定过程中颜色变化过程:蓝色(氢氧化铜的颜色)→棕色(氢氧化铜和氧化亚铜混合物的颜色)→砖红色(氧化亚铜的颜色)。→
3. 林试剂与双缩脲试剂的区别
⑴相同点:①试剂组成相同,都是由NaOH溶液和CuSO4 溶液两部分组成。②NaOH溶液的浓度相同,都是0.1g/mL。
⑵不同点:
①CuSO4溶液的浓度不同。斐林试剂中浓度是0.05g/mL,双缩脲试剂中浓度是0.01g/mL。
②用量不同。斐林试剂中把甲液(NaOH)和乙液(CuSO4)等量混合1mL使用;双缩脲试剂是先在含蛋白质的溶液中加入1mL A液(NaOH溶液),混合均匀后,再滴几滴B液(CuSO4溶液,量较少)。
③使用方法不同。斐林试剂中两部分试剂要现配现用,且把待测试管放在盛有50~65度的温水的大杯中加热约2min,而双缩脲试剂是先加A液(NaOH)1ml, 摇匀后再加B 液(CuSO4)4滴再摇匀。
④原理不同:斐林试剂是指新制的Cu(OH)2悬浊溶液。还原糖与新制的Cu(OH)2在加热煮沸条件下,能生成砖红色的Cu2O沉淀。实验过程中,必须先把甲液(NaOH)和乙液(CuSO4)等量混合,让其反应生成Cu(OH)2后,才能加入到含还原糖的组织液中。如果先后或者说分别把NaOH和CuSO4溶液加入到含还原糖的组织液中,组织液中的有机酸会与NaOH迅速反应,使反应物中没有Cu(OH)2或Cu(OH)2不足,从而使还原糖与Cu(OH)2的反应不能进行或现象不明显,影响了还原糖的鉴定。双缩脲反应是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应,生成紫色的络合物。所有的蛋白质均有此显色反应。双缩脲试剂就是指能与具两个以上肽键的化合物发生紫色显色反应的试剂。它是NaOH和CuSO4两种溶液。在实验过程中,先在含蛋白质的溶液中加入1mL的NaOH溶液,混合均匀后,再滴几滴CuSO4溶液(量较少)。即先后加入NaOH和CuSO4溶液。如果在NaOH中滴几滴CuSO4溶液混合后,再加入到含蛋白质的溶液中,混合液中就没有Cu2+,显色反应就不会发生。
4.可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定的实验原理、方法、步骤和现象:
知识点
可溶性还原糖
脂肪
蛋白质
实验原理
与斐林试剂反应生成砖红色沉淀
被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)
与双缩脲试剂反应产生紫色物质
实验步骤
样液制备
选材
含糖较高、颜色为白色或近于白色的植物组织,苹果、梨最好
富含脂肪的种子,以花生最好
浸泡1~2d的黄豆种子(或用豆浆)或用鸡蛋蛋白
方法
苹果切块→研磨→过滤→滤液
制作花生种子的切片
黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液
鉴定步骤
样液→加斐林试剂→振荡→水浴加热煮沸
切片→染色→漂洗→镜检(往待测样液直接加入试剂也行)
组织样液→加双缩脲试剂A→再加双缩脲试剂B→观察颜色变化
实验现象
蓝色→棕色→砖红色沉淀
脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)
加双缩脲试剂A无明显变化,加双缩脲试剂B后溶液变成紫色
注意事项
1.选材要用含糖较高、颜色为白色或近于白色的植物组织
2.斐林试剂不稳定,一般配成甲液(NaOH:0.1g/mL)乙液(CuSO4:0.05g/mL)来保存,用时必须将甲、乙两液混合均匀后使用,切勿分别加入组织样液中进行检测
1.切片要尽可能的薄
2.染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色
3.观察时找最薄处,最好只有1~2层细胞
1.用鸡蛋蛋白时,一定要加以稀释,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗干净
2.双缩脲使用时,应先加A造成碱环境,再加B
【典例分析】将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定粘留在纱布上的黏稠物和洗出的白浆分别用的试剂是
A.碘液、苏丹Ⅲ溶液 B.双缩脲试剂、碘液 ( )
C.亚甲基蓝溶液、苏丹Ⅲ溶液 D.碘液、斐林试剂
变式训练:鉴定苹果白色果肉中含有葡萄糖或果糖等还原糖,是将其与某一试剂作用,产生特定的颜色反应。能证明还原糖存在的是 ( )
A.与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀
B.被苏丹Ⅲ染液染成橘红色
C.与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应
D.被苏丹Ⅳ染液染成红色
【巩固练习】
1.下列各项可作为鉴定生物组织中还原糖的理想材料的是 ( )
A.韭菜 B.鸢尾 C.菠菜 D.梨
2.在麦芽糖酶溶液中加入双缩脲试剂,其结果应该是 ( )
A.产生气泡 B.溶液呈蓝色 C.溶液呈紫色 D.产生砖红色沉淀
3.在“检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质”实验中,对实验材料的选择,下列叙述错误的是 ( )
A.甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用于进行还原糖的鉴定
B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料
C.大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料
D.鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料
4、据药理研究,一种茅草的根内含有降血糖的因子及多种有益于健康的成分,某公司将它开发成一种保饮料。该产品是否适用于糖尿病患者,生物学兴趣小组的同学以此作为研究课题。请你完成下面的实验鉴定报告。
⑴实验目的:鉴定一种茅草的根是否含有还原糖和淀粉。
⑵实验原理:还原糖可用 试剂,淀粉可用 试剂来检测。
⑶实验器材:一种茅草的根、所需试剂、刀片、载玻片、酒精灯、试管夹、火柴、滴管。
⑷实验步骤:
①鉴定还原糖: 。
②鉴定淀粉: 。
⑸实验现象: 。
⑹结果分析: 。
⑺在鉴定还原糖的实验操作中应注意 。
5、某商场所卖脱脂奶粉被怀疑为假冒伪劣产品。生物学研究性学习小组的同学想把调查脱脂奶粉的合格率作为研究课题。假如你是课题组成员,交给你的任务是鉴定真假脱脂奶粉。
⑴搜集资料:
a. 全脂奶粉含有蛋白质、脂肪和蔗糖等成分,脱脂奶粉含有高蛋白、低脂肪等成分。b.假冒脱脂奶粉有两种:一是用全脂奶粉冒充脱脂奶粉,二是用淀粉冒充。
⑵鉴定是否用淀粉冒充。
⑶鉴定是否用全脂奶粉冒充。
⑷结果分析。
⑸通过以上鉴定,我们并不能完全肯定是正宗的脱脂奶粉,还必须对其 含量进行鉴定。
6.通常情况下,正常人的尿液中没有葡萄糖。当一次食用大量糖时,尿液中是否有葡萄糖存在?下面是利用对照的方法来设计实验方案进行鉴定。
第一步:取3支洁净的相同的试管,分别标号1、2、3;其中3号试管为实验研究试管。
第二步:分别向3支试管中加入相应实验液体。
1号:加2mL 正常尿液;
2号;加_______________________;
3号:加_______________________;
第三步:向3试管内分别加入刚配制好的斐林试剂2mL。振荡试管,使溶液混
合均匀,并将这3支试管放入盛有50-65℃水的大烧杯中,用酒精灯加热2 min左右。
第四步:观察并分析实验结果。
⑴1号试管现象:________________________;
⑵2号试管现象:___________________ _;
⑶3号试管若_____________现象,说明不含葡萄糖;若______ _现象,说明含葡萄糖。
7.健康人尿中只含有极微量的蛋白质,若尿中蛋白质含量过高,则称为蛋白尿。除了肾脏疾病和累及肾脏的其他疾病会引起蛋白尿外,健康人在剧烈运动后也会出现暂时性蛋白尿。临床上常用相关的试剂定性和定量检测尿中蛋白质。请你完成下列实验设计,以对比验证在某次剧烈运动后出现了蛋白质。
实验原理:检测蛋白质的试剂在碱性环境下能与Cu2+作用产生络合物而呈特定的颜色。由于蛋白质分子中含有很多与该试剂相似的肽键,因此,蛋白质可与该试剂发生颜色反应。
实验材料:试管、量筒、剧烈运动前后的尿液、检测蛋白质所需的试剂等。
问:⑴临床上常用 试剂定性和定量检测蛋白质。该试剂与蛋白质反应呈 色。
⑵完成实验步骤:① ;
② ;
③ ;
⑶预测实验结果: 。
参考答案
【巩固练习】答案
1.C 2.D 3.C 4、C 5、B 6.D 7、B 8、C 9、 C
10.(1) O (2)水 (3)蛋白质
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