临床医学检验技术初级（士）（临床免疫学及检验）-试卷1 18页

临床医学检验技术初级【士】【临床免疫学及检验】 -试卷 1 (总分：58 分，做题时间：90 分钟) 一、 A3 型题(总题数：1，score:8 分) ELISA 是利用酶催化反应的特性来检测和定量分析免 疫反应。【score:8 分】 (1).ELISA 中常用的标记物【score:2 分】 【A】超氧化物酶 【B】辣根过氧化物酶 【此项为本题正确答案】 【C】酸性磷酸酶 【D】葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 【E】乳酸脱氢酶 本题思路： (2).ELISA 中的酶结合物是指【score:2 分】 【A】免疫复合物 【B】结合在固相载体上的酶 【C】酶与免疫复合物的结合 【D】酶标记抗原或抗体 【此项为本题正确答 案】 【E】酶与底的结合 本题思路： (3).ELISA 中常用的固相载体【score:2 分】 【A】聚苯乙烯 【此项为本题正确答案】 【B】尼龙网 【C】三聚氧胺 【D】硝酸纤维膜 【E】醋酸纤维膜 本题思路： (4).ELISA 中常用的供氢体底物【score:2 分】 【A】叠氮钠 【B】邻苯二胺 【此项为本题正确答案】 【C】联苯胺 【D】硫酸胺 【E】过碘酸钠 本题思路：辣根过氧化物酶是 ELISA 中常用的标记 物，聚苯乙烯是常用的固相载体，邻苯二胺(OPD)是 应用最多的底物。 二、 B1 型题(总题数：1，score:8 分) A．邻苯二胺(OPD)B．过氧乙酸 C．四甲基联苯胺 (TMB)D．对-硝基苯磷酸酯 E．4-甲基伞酮基-R-D 半 乳糖苷(4-MUU)【score:8 分】 (1).HRP 最敏感的色原底物，显色反应需避光，且具 有致癌性的是【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (2).测量时需用荧光计的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【E】 【此项为本题正确答案】 本题思路： (3).经 HRP 作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变 为黄色的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【此项为本题正确答案】 【D】 【E】 本题思路： (4).经 AP 作用后呈黄色产物的是【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路：HRP 最敏感的色原底物，在 HRP 的作用下 显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄 色，最大吸收峰在 492nm 波长。其反应液稳定性差， 易变色，需在配置后 1 小时内使用，显色反应过程需 避光，且具有致癌性。4-甲基伞酮基-R-D 半乳糖苷 (4-MUU)常用作 β-半乳糖苷酶(β-Gal)的底物，酶 作用后生成高强度荧光物 4-甲基伞形酮(4-Mu)，测 量时需用荧光剂。TMB 经 HR．P 作用后变为蓝色，加 入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为 450nm。对一硝基苯磷酸酯经 AP 作用后产物为黄色对 硝基酚，最大吸收峰波长为 405nm。 三、 A1 型题(总题数：21，score:42 分) 1.目前临床运用较多的检测乙肝病毒 e 抗体(HBeAb) 和乙肝病毒核心抗体(HBcAb)的方法是 【score:2 分】 【A】双抗体夹心法 【B】竞争法 【此项为本题正确答案】 【C】间接法 【D】捕获法 【E】双位点一步法 本题思路：抗体的检测一般不采用竞争法，但当相应 抗原材料中含有与抗人 IgG 反应的物质，而且不易得 到足够的纯化抗原或抗原的结合特异性不稳定时，可 采用这种方法测定抗体，是目前临床运用较多的检测 乙肝病毒 e 抗体(HBeAb)和乙肝病毒核心抗体(HBcAb) 的检测。 2.目前最常用的检测病原体急性感染诊断 IgM 抗体的 方法是 【score:2 分】 【A】双抗体夹心法 【B】竞争法 【C】间接法 【D】捕获法 【此项为本题正确答案】 【E】双位点一步法 本题思路：捕获法又称反向间接法，主要用于血清中 某种抗体亚型成分(如 IgM)的测定，目前是最常用的 检测病原体急性感染诊断中的 IgM 型抗体。 3.酶免疫技术的基本原理是 【score:2 分】 【A】酶与抗体或抗原的蛋白分子共价结合，且不 影响抗原抗体反应的特异性 【此项为本题正确答 案】 【B】酶具备抗体特异性 【C】酶具备反应原性 【D】酶具备抗原特异性 【E】酶具备特异性 本题思路：酶免技术主要基于抗原与抗体的反应基础 上。 4.目前在 ELJSA 中应用最广泛的底物是 【score:2 分】 【A】OPD 【B】ABTS 【C】TMB 【此项为本题正确答案】 【D】5-ASA 【E】p-NPP 本题思路：邻苯二胺灵敏度高，比色方便，是 ELISA 中应用最早的底物，但稳定性差，反应过程需要避 光，还具有致癌性；四甲基联苯胺稳定性好，反应无 需避光，没有致突变作用，是目前应用最广泛的底 物，但是水溶性差。 5.酶免疫技术的特点，下面哪项是正确的 【score:2 分】 【A】酶标记物催化抗原抗体反应，使其结果被放 大，提高了检测灵敏度 【B】酶活性易受理化因素影响，酶标记物稳定性 差 【C】底物经酶催化后的成色，使酶标记免疫反应 结果得以放大 【此项为本题正确答案】 【D】选择高质量的标记用酶是建立方法最重要的 前提 【E】标记酶分子量大，稳定性好 本题思路：酶免疫技术是利用酶催化底物反应的生物 放大作用，提高特异性抗原．抗体免疫学反应检测敏 感性的一种标记免疫技术。该技术所用的酶要求纯度 高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来 源丰富、价格不贵、制备成的酶标抗体或抗原性质稳 定，继续保留着它的活性部分和催化能力。最好在受 检标本中不存在与标记酶相同的酶。 6.TMB 经 HRP 作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后 变为黄色，最大吸收峰波长为 【score:2 分】 【A】280nm 【B】405nm 【C】450nm 【此项为本题正确答案】 【D】492nm 【E】630nm 本题思路：OPD 在 HRP 作用下显橙黄色，加强酸终止 反应呈棕黄色，最大吸收峰波长为 492nm。TMB 经 HRP 作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄 色，最大吸收峰波长为 4．50nm。p-NPP 经 AP 作用后 的产物为黄色对硝基酚，最大吸收峰波长为 405nm。 7.标记抗体具有种属内通用性的 ELISA 方法是 【score:2 分】 【A】双抗体夹心法 【B】间接法 【此项为本题正确答案】 【C】一步法 【D】竞争法 【E】捕获法 本题思路：间接法标记抗体，具有种属内的通用性。 8.用于标记的酶应符合的要求中，以下哪项可以除外 【score:2 分】 【A】酶活性高 【B】具有可与抗原、抗体结合的基团 【C】具有可与生物素、亲合素结合的基团 【此 项为本题正确答案】 【D】酶催化底物后的成色信号易判断 【E】纯度及比活性高 本题思路：标记酶应该具有酶活性高；可与抗原、抗 体结合的基团；纯度及比活性高；酶催化底物后的成 色信号易判断。 9.根据什么特性将酶免疫技术分为均相和异相两类 【score:2 分】 【A】抗原特性 【B】抗体特性 【C】酶的稳定性 【D】载体的特性 【E】抗原抗体反应后是否需要分离结合的和游离 的酶标记物 【此项为本题正确答案】 本题思路：酶免疫技术均相和异相的分类是根据是否 需要分离结合及游离标记物。 10.以下哪种复合物的形成属于间接法 ELISA 免疫反 应结果 【score:2 分】 【A】固相抗原-抗体-酶标二抗 【此项为本题正 确答案】 【B】固相抗体-抗原-酶标抗体 【C】固相二抗-IgM 抗原一酶标抗体 【D】固相抗体-酶标抗原 【E】固相抗体-沆原-抗体-酶标抗体 本题思路：间接法是检测抗体常用的方法。其原理为 利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)以检测与 固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。 11.ELISA 技术中，最常用来检测抗原的方法是 【score:2 分】 【A】双抗体夹心法 【此项为本题正确答案】 【B】间接法 【C】竞争法 【D】捕获法 【E】B+D 本题思路：检测抗原常用双抗体夹心法检测。 12.目前用于 HRP 标记抗体或抗原的最常用的方法是 【score:2 分】 【A】戊二醛交联一步法 【B】戊二醛交联二步法 【C】直接法 【D】间接法 【E】改良过碘酸钠法 【此项为本题正确答案】 本题思路：改良过碘酸钠法是目前用于 HRP 标记抗体 或抗原的最常用的方法。 13.ELISA 板包被后，最常用的封闭物质是 【score:2 分】 【A】人白蛋白 【B】人球蛋白 【C】牛血清白蛋白 【此项为本题正确答案】 【D】牛血清球蛋白 【E】鼠白蛋白 本题思路：EL,ISA 板包被后，需用 1％～5％的牛血 清白蛋白或 5％～20％的小牛血清再包被一次，消除 非特异显色的干扰，此过程称为封闭。 14.如果标本中存在 NaN 3 可能会导致 【score:2 分】 【A】假阴性 【此项为本题正确答案】 【B】假阳性 【C】灵敏度增加 【D】特异性增加 【E】临界值下降 本题思路：NaN 3 破坏 HRP 的结构与活性。 15.ELISA 双位点一步法检测中，若怀疑存在钩状效 应，应采取何种措施 【score:2 分】 【A】增加酶标抗体的含量 【B】缩短孵育时间 【C】增加洗板次数 【D】降低孵育温度 【E】将标本稀释后重新检测 【此项为本题正确 答案】 本题思路：在双位点一步法中，当待测抗原浓度过高 时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而 抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应，只有将标本 稀释后重新检测才有可能得到准确的试验结果。 16.ELISA 不用于下列哪种检测 【score:2 分】 【A】血型鉴定 【此项为本题正确答案】 【B】病原体及抗体的检测 【C】免疫球蛋白、补体、肿瘤标志物等蛋白质的 检测 【D】毒品的检测 【E】药物的检测 本题思路：ELISA 广泛用于病原体及抗体的检测，免 疫球蛋白、补体、肿瘤标志物等蛋白质的检测，非肽 类激素的检测，药物的检测，毒品的检测，但血型鉴 定一般采用凝集试验。 17.化学发光剂必须具备的条件错误的是 【score:2 分】 【A】其物理、化学特性要与被标记或测定的物质 相匹配 【B】能与抗原或抗体形成稳定的耦联结合物 【C】其化学发光常是还原反应的结果 【此项为 本题正确答案】 【D】在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性 【E】发光的量子产量高 本题思路：能作为化学发光剂的有机化合物必须具备 下列条件：发光的量子产量高；它的物理、化学特性 要与被标记或测定的物质性匹配；能与抗原或抗体形 成稳定的耦联结合物；其化学发光常是氧化反应的结 果；在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性。 18.下列不属于发光剂标记方法的是 【score:2 分】 【A】聚乙二醇(PEG)沉淀法 【此项为本题正确答 案】 【B】过碘酸钠氧化法 【C】重氮盐耦联法 【D】N-羟基琥珀酰亚胺活化法 【E】碳二亚胺缩合法 本题思路：小分子物质(如药物、激素等)的标记主要 是通过耦联反应制备；生物大分子的标记是利用交联 剂使标志物与被标志物分子结构中游离的氨基、硫氢 基、羟基等基团形成不可逆的连接。常用的标记方法 有：碳二亚胺缩合法、过碘酸钠氧化法、重氮盐耦联 法、N-羟基琥珀酰亚胺活化法。 19.下列不会影响标记的因素是 【score:2 分】 【A】被标记蛋白质的性质 【B】原料比 【C】温度 【D】湿度 【此项为本题正确答案】 【E】标记率 本题思路：影响标记的因素包括：①发光剂的选择。 ②被标记蛋白质的性质。抗原作为被标志物时，应具 有较高的纯度和免疫学稳定性；抗体作为被标志物 时，则要求具有较高的效价，应用提纯的 IgG 来代替 全血清)。③标记方法的选择(应正确选择与发光剂和 被标志物结构相适应的耦联方式)。④原料比。在制 备发光剂-IgG(抗体)结合物时，IsG：发光剂：交联 剂的克分子比(mol：mol：mol)会影响结合物的发光 效率。⑤标记率。是指结合物中 IgG 与发光剂之间的 克分子比。由于每一种发光剂对应于被标志物都有特 定的最佳标记率，标志物选择不好，会出现不易保存 等现象。⑥温度。控制标记时的反应温度极为重要， 对于较稳定的小分子被标志物，温度可稍放宽些；而 当被标志物是抗原或抗体蛋白质时，由于蛋白质对热 的不稳定性，应在保证标记反应进行的前提下，尽量 选择较低的温度，以避免蛋白质在标记过程中活性的 丧失。⑦纯化与保存。多数经耦联反应制备的结合 物，使用前都需进行纯化，除去未结合的发光剂和交 联剂。结合物一般可分装保存在-70℃条件下，最好 冷冻干燥保存。 20.不需酶催化反应即可发光的发光底物是 【score:2 分】 【A】吖啶酯 【此项为本题正确答案】 【B】三联吡啶钌 【C】鲁米诺或其衍生物 【D】4-MUP 【E】AMPPD 本题思路：吖啶酯化学发光特点：①推动发光的氧化 反应简单快速，不需要催化剂，只要在碱性环境中即 可进行；②反应体系中加入 H 2 O 2 和 NaOH 溶液 后，发光迅速，背景噪声低，保证了测定的敏感性； ③吖啶酯可直接标记抗原或抗体，结合稳定，不影响 标志物的生物学活性和理化特性；④吖啶酯发光为瞬 间发光，持续时间短，因此对信号检测仪的灵敏度要 求比较高。 21.不属于直接化学发光免疫分析化学发光剂特点的 是 【score:2 分】 【A】氧化反应简单快速，不需要催化剂 【B】发光迅速，背景噪声低 【C】可直接标记抗原或抗体 【D】只需在酸性环境中即可进行 【此项为本题 正确答案】 【E】为瞬间发光，持续时间短 本题思路：