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- 2021-05-13 发布
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课时分层作业 三十九 生物技术在其他方面的应用
(30分钟 100分)
1.(10分)(2019·太原模拟)如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中的有关操作示意图,据图回答下列问题:
(1)正确的操作顺序是________________。
(2)图中C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是____________________和____________________________。
(3)图中A步骤中所用酒精必须经过__________才能使用,该步骤的目的是__________________________。
(4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加__________试剂,沸水浴,如果出现________,则该丝状物的主要成分为DNA。
【解析】(1)DNA的粗提取步骤:向鸡血细胞液中加入蒸馏水,使细胞破裂;用单层纱布过滤,收集滤液;在滤液中加入NaCl,使NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L,过滤除去不溶的杂质;向滤液中加入蒸馏水,使NaCl溶液物质的量浓度降至0.14 mol/L,析出DNA;用玻璃棒搅拌,DNA就缠绕在玻璃棒上;将DNA溶解到浓NaCl溶液中过滤,加入与滤液等体积的冷酒精溶液,析出DNA。故正确顺序是C→B→E→D→A。
(2)两次加入蒸馏水的作用:第一次是使鸡血细胞吸水涨破,DNA从细胞中释放出来进入滤液;第二次是使溶解于物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,与杂质分离。
(3)提取含杂质较少的DNA时,所用酒精溶液必须经过充分冷却才能使用,否则DNA的溶解度会增大。
(4)DNA可在沸水浴条件下与二苯胺试剂作用变成蓝色。
答案:(1)C→B→E→D→A
(2)加速鸡血细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出
(3)充分冷却 提取含杂质少的DNA
(4)二苯胺 蓝色
2.(10分)(2019·福州模拟)在“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,对DNA进行鉴定时,做如下操作:
试管
序号
A
B
1
加2 mol/L的
NaCl溶液5 mL
加2 mol/L的NaCl
溶液5 mL
2
不加
加入提取的DNA
丝状物并搅拌
3
加4 mL
加4 mL
二苯胺,混匀
二苯胺,混匀
4
沸水浴5 min
沸水浴5 min
实验现象
实验结论
(1)根据上图,完成表格空白处的实验内容。
(2)对于B试管,完成1、2、3的操作后溶液颜色如何?__。
(3)在沸水浴中加热的目的是____________________,同时说明DNA对高温有较强的__________________。
(4)A试管在实验中的作用是____________。
(5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与__________________有关。
【解析】本题主要考查DNA分子的鉴定。A、B两试管形成对照,B试管中含DNA丝状物,A试管中不含,起对照作用,其他条件均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热5 min,加快颜色反应的速度,观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。
答案:(1)溶液不变蓝色 溶液变蓝色
DNA在沸水浴的条件下遇二苯胺会变成蓝色
(2)溶液颜色基本不变(不呈蓝色)
(3)加快颜色反应速度 耐受性
(4)对照 (5)DNA(丝状物)的多少
3.(10分)如图是利用鸡血粗提取DNA的基本操作,据图分析回答:
(1)若乙为鸡血细胞液,则甲为________,该操作的实验目的是__。
(2)若乙为含DNA的浓NaCl溶液,则甲为__________,该操作的实验目的是去除______(填“不溶”或“可溶”)性杂质。
(3)若该操作玻璃棒上能卷起白色丝状物,则甲为________。
【解析】(1)向鸡血细胞液中加蒸馏水,其目的是使鸡血细胞吸水涨破释放出DNA。
(2)向含DNA的浓NaCl溶液中加入蒸馏水,DNA溶解度降低会析出,从而去除可溶性杂质。
(3)DNA和杂质分子在95%的冷酒精溶液中溶解度存在差异,DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精溶液,故可去除溶于酒精溶液的杂质,向烧杯内溶解有DNA的NaCl溶液中加入95%的冷酒精溶液,可用玻璃棒卷起白色丝状物(DNA)。
答案:(1)蒸馏水 使鸡血细胞吸水涨破释放出DNA (2)蒸馏水 可溶
(3)95%的冷酒精溶液
4.(10分)(2019·合肥模拟)许多植物含有天然芳香油,如柠檬精油、玫瑰精油、薄荷油等。下列是与芳香油提取相关的问题,请回答:
(1)柠檬精油是一种广谱性的杀虫剂,提取柠檬精油常见的原料是柠檬花与柠檬果皮,柠檬精油的提取适宜采用压榨法,此方法的步骤如图。
①加入A物质的目的是____________,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率。
②C过程的目的是___________________。
(2)玫瑰精油称为“液体黄金”,是世界香料工业不可取代的原料,适合采用________法提取。提取时玫瑰花瓣与清水的质量比一般为________,将玫瑰花瓣和清水蒸馏后收集得到的产物是________。
(3)薄荷油是挥发性物质,从薄荷叶中提取薄荷油时______(填“能”或“不能”)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是_____________________。
【解析】(1)A物质是石灰水,压榨法提取柠檬精油时需要先将柠檬果皮用石灰水浸泡,目的是破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率。C过程是用普通布袋过滤糊状压出液,是为了除去固体物和残渣。
(2)玫瑰精油的提取方法主要是水蒸气蒸馏法,提取玫瑰精油时,玫瑰花瓣和清水的质量比是1∶4,将玫瑰花瓣与清水经水蒸气蒸馏后收集得到的是油水混合物。
(3)薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似,能随水蒸气一同蒸馏,故提取薄荷油时也能采用水蒸气蒸馏法。
答案:(1)①破坏细胞结构 ②除去固体物和残渣
(2)水蒸气蒸馏 1∶4 油水混合物
(3)能 薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似
5.(10分)如图为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图,请根据图回答下列问题。
(1)图中b的名称是________,a的作用是________________。
(2)e为________,对于e,实验时应注意________________________________。
(3)f为________________________,常用的是______________________。
(4)如果层析液没及e会导致__________________________________________。
【解析】(1)图中b为色谱容器;a为玻璃盖,其作用是防止层析液挥发。
(2)e为样品原点,点样时应快速、细致,并保持滤纸干燥。
(3)f为有机溶剂,作为层析液,常用的是石油醚。
(4)如果层析液没及样品原点,会导致胡萝卜素溶解在层析液中,使鉴定失败。
答案:(1)色谱容器 防止层析液挥发
(2)样品原点 点样时应快速、细致,并保持滤纸干燥
(3)有机溶剂 石油醚
(4)胡萝卜素溶解在层析液中,使鉴定失败
【延伸探究】
(1)图中c表示什么?对c有哪些要求?
提示:图中c表示滤纸,应选择干燥的定性滤纸。
(2)该实验与绿叶中色素的分离有何差异?
提示:①目的不同:本实验是鉴定色素,需设置对照,绿叶中色素的分离实验目的是分离色素,不需要设置对照。
②点样方法不同:本实验点样品原点,绿叶中色素的分离实验是画滤液细线。
③滤纸不同,本实验用滤纸片,绿叶中色素的分离实验用滤纸条。
6.(10分)(2019·石家庄模拟)利用柑橘皮提取橘皮精油是提高柑橘经济价值的重要途径。请分析回答提取过程的有关问题:
(1)提取橘皮精油,常采用________法而不用蒸馏法,原因是______________。
(2)提取橘皮精油时,为了提高出油率,首先将橘皮________,并用石灰水浸泡,石灰水的作用是____________________________________________________。
(3)参照手动压榨原理示意图,设计压榨方案时要考虑容器_______________。为了使橘皮油易于与水分离,常加入____________________________,并调节pH至______________。
(4)得到压榨液后,用普通布袋过滤除去固体物和残渣,然后________进一步除去质量较小的残留固体物,再用分液漏斗或吸管将________分离出来。此时,橘皮油中含有少量的水和果蜡,需在5~10 ℃下静置5~7天,用吸管吸出上层澄清橘皮油,其余部分过滤,____________________合并,成为最终的橘皮精油。
【解析】(1)橘皮精油主要存在于橘皮中,由于橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏过程中会发生部分水解,同时水中蒸馏会导致原料焦糊的问题,因此一般采用压榨法提取橘皮精油。
(2)提取橘皮精油时,为了提高出油率,首先将橘皮去水干燥,然后用石灰水浸泡,石灰水的作用是破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率。
(3)设计压榨方案时要考虑容器能够承受的压力范围,压榨过程中常加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4,并将pH调至7~8,作用是促进橘皮油和水分离。
(4)得到压榨液后,用普通布袋过滤除去固体物和残渣,对滤液进行离心进一步除去质量较小的残留固体物,再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮油分离出来,然后在5~10 ℃下静置5~7天,使果蜡等杂质沉淀,用吸管吸出上层澄清橘皮油,其余部分过滤,滤液与吸出的上层橘油合并,成为最终的橘皮精油。
答案:(1)压榨 橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解,水中蒸馏会导致原料焦糊等
(2)干燥去水 破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率
(3)能够承受的压力范围 相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4 7~8
(4)离心 上层的橘皮油 滤液与吸出的上层橘油
7.(10分)(2019·武汉模拟)植物有效成分的性质不同,提取方法也不同。分析回答下列问题:
(1)薰衣草精油的化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,挥发性较强,要提取薰衣草精油可以用蒸馏法和________法。若用蒸馏法,在得到油水混合物后需加入一定量的__________促进其分层。用分液漏斗分离得到油层后还要加入________以除去水分。
(2)在提取胡萝卜素的实验流程“胡萝卜→粉碎→A→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素”中,A过程叫________。萃取效率主要取决于____________________,同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响。
【解析】(1)由于薰衣草精油化学性质稳定,易挥发,易溶于有机溶剂,因此可以用萃取法进行提取。用蒸馏法提取薰衣草精油获得油水混合物后,应加入NaCl促进油水分层进而分离出油层;分离出的油层中含有少量的水,可以加入无水Na2SO4除去水分。
(2)在萃取胡萝卜素时,应首先对胡萝卜进行粉碎和干燥。萃取效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。
答案:(1)萃取 NaCl 无水Na2SO4
(2)干燥 萃取剂的性质和使用量
1.(10分)(2019·大连模拟)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:
材料处理:称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃,另一组置于-20 ℃条件下,保存24 h。
DNA粗提取:
第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。
第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如表所示:
材料保存温度
菜花
辣椒
蒜黄
20 ℃
++
+
+++
-20 ℃
+++
++
++++
(注:“+”越多表示蓝色越深)
分析上述实验过程,回答下列问题:
(1)该探究性实验课题名称是_________________________________________。
(2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少__________________________。
(3)根据实验结果,得出结论并分析。
①结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在-20 ℃条件下保存,DNA的提取量较多。
结论2:________________________________________________________。
②针对结论1,请提出合理的解释:________________________________。
(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:___________________________________________。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
【解析】(1)从题目实验步骤看出,该实验的课题是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。(2)在第二步中,为了防止DNA断裂,要“缓缓地”搅拌。(3)从题表中结果看出,相同材料在低温保存下的DNA提取量大,这是由于低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢;在相同条件下,蒜黄组蓝色最深,说明相同条件下从蒜黄中提取的DNA量最大。(4)由于氯仿密度比水大,可使蛋白质变性沉淀,而与水、DNA不相溶,故可将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液。
答案:(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 (2)DNA断裂
(3)①等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄中提取的DNA量最多
②低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢
(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液
2.(10分)(2019·南昌模拟)如图是从玫瑰花中提取玫瑰油的操作步骤。请据图回答下列问题:
(1)图中的A表示________,B表示________。
(2)玫瑰精油能用水蒸气蒸馏法提取的原因是玫瑰精油具有__的性质。
(3)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和____________。
【解析】(1)玫瑰精油的提取过程中,鲜玫瑰花加入清水后可进行水蒸气蒸馏,得到油水混合物后,加入NaCl分出油层,再加入无水Na2SO4去水即可。(2)玫瑰精油易挥发、难溶于水、化学性质稳定,适合用水蒸气蒸馏法提取。(3)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和蒸馏温度。
答案:(1)NaCl 无水Na2SO4
(2)易挥发、难溶于水、化学性质稳定
(3)蒸馏温度
3.(10分)如图1是在发酵罐内利用三孢布拉氏霉发酵生产β-胡萝卜素过程中,菌体生物量及β-胡萝卜素产量随时间变化曲线图。图2是样品层析结果及与β-胡萝卜素标准样品的比对。分析回答下列问题:
(1)发酵罐内三孢布拉氏霉培养基按物理形态分应为__________,玉米粉和豆饼为微生物的生长分别主要提供__________。在接入菌种前,应对培养基进行____________,以避免杂菌污染。
(2)图1中,菌体的最快增长出现在第________h,菌体的生物量达到最大值后下降,其原因是__________________________________。为保证连续生产,应采取的措施是____________________________________。
(3)β-胡萝卜素常用的提取方法为________法,实验表明,石油醚的提取效果远好于丙酮和酒精,原因是_______________________________________。
(4)将萃取的胡萝卜素样品与β-胡萝卜素标准样品层析后进行比对,结果如图2。从图中分析可知,色带________为β-胡萝卜素,其余两色带中的物质在层析液中的溶解度比胡萝卜素________。
【解析】(1)液体培养基有利于微生物发酵,且易进行自动化管理,因此发酵罐内三孢布拉氏霉培养基按物理形态分应为液体培养基,玉米粉和豆饼的主要成分分别是淀粉和蛋白质,为微生物的生长分别主要提供碳源和氮源。在接入菌种前,应对培养基进行高压蒸汽灭菌,以避免杂菌污染。
(2)图1中,菌体的最快增长出现在第100 h,菌体的生物量达到最大值后下降,其原因是营养物质缺乏,有害代谢产物积累。为保证连续生产,应连续加入新的培养液,同时排出代谢产物。
(3)β-胡萝卜素常用的提取方法为萃取法,石油醚为水不溶性有机溶剂,萃取效果好于丙酮和酒精。
(4)从图中分析可知,色带Ⅰ为β-胡萝卜素,其余两色带中的物质在滤纸上的扩散速度比β-胡萝卜素慢,因此在层析液中的溶解度比胡萝卜素小。
答案:(1)液体培养基 碳源和氮源 高压蒸汽灭菌
(2)100 营养物质缺乏,有害代谢产物积累
连续加入新的培养液,同时排出代谢产物
(3)萃取 石油醚为水不溶性有机溶剂
(4)Ⅰ 小