临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（生物素-亲和素免疫放大技术、免疫组织化学技术）-试卷1 22页

临床医学检验技师初级【师】临床免疫学及检验【生 物素-亲和素免疫放大技术、免疫组织化学技术】-试 卷 1 (总分：74 分，做题时间：90 分钟) 一、 B1 型题(总题数：1，score:6 分) A．1～3B．2～4C．3～5D．2：1E．1：2【score:6 分】 (1).每个抗原标记几个生物素分子为宜【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (2).每个抗体标记几个生物素分子为宜【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【此项为本题正确答案】 【D】 【E】 本题思路： (3).生物素与 IgG 比值为多少时，效果较好 【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路：每个蛋白质上标记的生物素分子数量应控 制在一定范围。 二、 A1 型题(总题数：26，score:52 分) 1.ABC—ELISA 将酶标记在 【score:2 分】 【A】亲和素 【B】生物素 【此项为本题正确答案】 【C】抗体 【D】补体 【E】抗原 本题思路：酶标记生物素分子，与亲和素按一定比例 混合，形成亲和素一酶标生物素复合物。 2.关于活化生物素，下列叙述错误的是 【score:2 分】 【A】利用生物素的羧基加以化学修饰制成的各种 活性集团的衍生物 【B】可容易与各种抗原、抗体、酶及核酸相应集 团耦联 【C】广泛分布于动植物组织，可从卵黄囊和肝脏 中提取 【此项为本题正确答案】 【D】有标记蛋白质氨基的活化生物素 【E】有标记蛋白质醛基的活化生物素 本题思路：生物素广泛分布于动植物组织，可从卵黄 囊和肝脏中提取。活化生物素是化学基团修饰后的生 物素。 3.关于生物素标记蛋白质的注意事项，下列说法错误 的是 【score:2 分】 【A】根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团 的种类以及分子的理化性质，选择相应的活化生物素 和反应条件 【B】活化生物素与待标记抗原或抗体可以是任意 比例 【此项为本题正确答案】 【C】在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构 可减少空间位阻影响 【D】生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后不影响 后者的免疫活性 【E】生物素标记酶时会影响其免疫活性 本题思路：生物素标记蛋白质的注意事项包括：①根 据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及 分子的理化性质，选择相应的活化生物素和反应条 件。②标记反应时，活化生物素与待标记抗原或抗体 应有适当比例。③为了减少空间位阻影响可在生物素 与被标记物之间加入交联臂样结构④生物素与抗原、 抗体等蛋白质结合后不影响后者的免疫活性；标记酶 时则结果有不同。 4.一个链霉亲和素分子能结合的生物素分子数是 【score:2 分】 【A】1 【B】2 【C】3 【D】4 【此项为本题正确答案】 【E】5 本题思路：链霉亲和素是由链霉菌分泌的一种蛋白 质，分子中每条肽链都能结合一个生物素，因此，与 亲和素一样，一个链霉亲和素分子也能结合 4 个生物 素分子。 5.下面哪一项不属于 BAS 作用的特点 【score:2 分】 【A】生物素、亲和素间结合具高度专一性和亲和 力 【B】适用于多种标记免疫分析技术 【C】BAS 虽能提高方法的灵敏度，但相应也可增 加非特异性 【此项为本题正确答案】 【D】生物素、亲和素的结合不易受酸碱条件的干 扰 【E】亲合素的四个生物素部位可同时结合多价性 的生物素化衍生物 本题思路：在实际应用中所具有的巨大优越性，主要 表现在以下几个方面：①灵敏度；②特异性，亲和素 与生物素间的结合具有极高的亲和力，其反应呈高度 专一性，因此，BAS 的多层次放大作用在提高灵敏度 的同时，并不增加非特异性干扰；③稳定性；④适用 性。 6.四聚体技术是指 【score:2 分】 【A】将 MHC 单体分子二聚体化 【B】以进一步降低亲和力为目的 【C】可与 B 细胞上的多个 TCR 相结合 【D】可作为诊断工具，定量检测外周血中抗原特 异性 CTL 比例 【此项为本题正确答案】 【E】受 TCR 基因型的限制 本题思路：四聚体技术是将 MHC 单体分子四聚体化， 从而提高结合亲和力，可与 T 细胞上的多个 TCR 相结 合，不受 TCR 基因型的限制。可作为诊断工具，定量 检测外周血中抗原特异性 CTL 比例。 7.以下关于四聚体技术临床应用，叙述错误的是 【score:2 分】 【A】用于肿瘤过继性免疫治疗 【B】用同源肽构建的四聚体可监测树突细胞疫苗 疗效 【C】反映机体具有高度抗原特异性 CD8 T 细胞 群，精确反映机体的保护性免疫状态 【此项为本题 正确答案】 【D】可通过对抗原特异性 CTL 表型、功能等分 析，帮助阐明病毒感染性疾病发病机制 【E】可应用于自身免疫性疾病抗原特异性 CTL 的 检测及机制研究 本题思路：虽然四聚体技术可以反映机体具有高度抗 原特异性 CD8 T 细胞群，但并不能精确反映机体的保 护性免疫状态，必须结合相应的功能实验进行综合评 估。 8.免疫组织化学技术的首要试剂是 【score:2 分】 【A】抗原 【B】抗体 【此项为本题正确答案】 【C】标记物 【D】固定剂 【E】洗涤剂 本题思路：免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带 显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗 体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定 性、定位、定量测定的一项新技术。因此，高度特异 性的抗体尤为重要。 9.免疫组织化学技术中，对固定剂的要求不包括 【score:2 分】 【A】能快速固定抗原 【B】能防止抗原物质扩散 【C】固定后的抗原能被抗体识别 【D】具有氧化活性 【此项为本题正确答案】 【E】以上都不正确 本题思路：固定剂的要求为快速固定抗原、防止抗原 物质扩散、固定后的抗原能被抗体识别。 10.石蜡切片的优点不包括 【score:2 分】 【A】切片薄有连续性 【B】可长期保存 【C】防止抗原损失 【此项为本题正确答案】 【D】观察组织细胞结构的理想方法 【E】有利于切片和固定 本题思路：石蜡切片步骤繁多，制片中抗原活性有所 减低，但组织细胞形态清晰，是免疫组织化学常规制 备切片方法之一。一般石蜡包埋的组织切片用于检测 胞浆或核内的抗原，不宜做表面抗原染色。 11.以下哪种酶免疫组织化学技术检测方法的敏感性 最高 【score:2 分】 【A】直接染色法 【B】间接染色法 【C】酶桥法 【D】ABC 法 【此项为本题正确答案】 【E】PAP 本题思路：ABC 法是生物素一亲和素系统中应用较多 的方法，与标记试剂高亲和力的牢固结合及多级放大 效应，使 BAS 免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。它 已成为目前广泛用于微量抗原、抗体定性、定量检测 及定位观察研究的新技术。 12.以下哪一项不是激光共聚焦显微镜(LSCM)的特点 【score:2 分】 【A】可对细胞内部的光学断层扫描成像 【B】对样品进行立体、动态观察 【C】具备普通光学显微镜和荧光显微镜的功能 【D】不能观察活细胞 【E】没有光的散射 【此项为本题正确答案】 本题思路：激光共聚焦显微镜有光的散射，造成非特 异的荧光，需要用空白对照来消除本底的干扰。 13.免疫组织化学技术的关键步骤是 【score:2 分】 【A】标本处理 【B】抗体的处理与保存 【C】设立对照试验 【D】免疫染色 【此项为本题正确答案】 【E】结果判断 本题思路：免疫染色是免疫组织化学技术的关键步 骤。 14.胶体金是氯金酸在什么物质的作用下聚合成特定 大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体 状态 【score:2 分】 【A】还原剂 【此项为本题正确答案】 【B】氧化剂 【C】变构剂 【D】化学物质 【E】以上都不对 本题思路：氯金酸在还原剂如白磷、维生素 C 等的作 用下还原为金颗粒。 15.下列哪种方法制备的胶体金是红色 【score:2 分】 【A】维生素 C 【B】白磷 【C】硼氢化钠 【D】鞣酸 【E】枸橼酸三钠 【此项为本题正确答案】 本题思路：枸橼酸三钠还原法是制备胶体金的常用方 法，其制备的胶体金是红色的。 16.为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性，排除 某些非特异性染色，必须在初次实验时进行对照试 验。下列选项中不必要的是 【score:2 分】 【A】自身对照 【B】吸收试验 【C】阴性对照 【D】阳性对照 【E】补体对照 【此项为本题正确答案】 本题思路：为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确 性，排除某些非特异性染色，在实验中通常针对第一 抗体设立对照，包括阳性对照、阴性对照、替代对照 和吸收试验等。 17.免疫组化染色前，对标本进行固定的目的是 【score:2 分】 【A】保存组织细胞的抗原性 【此项为本题正确 答案】 【B】防止细胞脱落 【C】防止细胞自溶 【D】终止胞内酶的活性 【E】使细胞内蛋白质凝固 本题思路：固定可防止细胞脱落，但主要目的是保存 组织细胞抗原特异性的稳定。 18.免疫组化技术的应用不包括 【score:2 分】 【A】细胞抗原性物质的检测和定位 【B】菌种鉴定和抗原结构的研究 【C】检测人体大多数寄生虫 【D】检测肿瘤相关抗原 【此项为本题正确答 案】 【E】自身抗体的检测 本题思路：免疫组化技术在病理学应用中，主要确定 肿瘤的组织学发生，进行肿瘤的转移性和特异性的鉴 别，辅助识别肿瘤的良、恶性癌前变和癌。 19.免疫组织化学技术中最常用的制片方法是 【score:2 分】 【A】只有冰冻切片 【B】只有石蜡切片 【C】直接推片 【D】冰冻切片和石蜡切片 【此项为本题正确答 案】 【E】以上都不正确 本题思路：免疫组织化学技术适用于冰冻切片和石蜡 切片，部分抗体只能用于冰冻切片，大部分抗体可用 于石蜡切片，适用于石蜡切片的抗体也适用于冰冻切 片。 20.以下关于胶体金制备叙述正确的是 【score:2 分】 【A】胶体金粒径越大，获得的胶体金呈色越浅 【B】1％枸橼酸钠加入量越低，且胶体金粒径大， 获得的胶体金呈色越深 【此项为本题正确答案】 【C】1％枸橼酸钠加入量越低，获得的胶体金呈色 越浅 【D】1％枸橼酸钠加入量越高，且胶体金粒径小， 获得的胶体金呈色越深 【E】胶体金呈色与胶体金粒径大小无关 本题思路：1％枸橼酸钠加入量越低，且胶体金粒径 大，获得的胶体金呈色越深。 21.用于检测尿液 HCG 的“金标”早孕诊断试剂的试 验属于 【score:2 分】 【A】免疫电泳试验 【B】凝胶过滤试验 【C】免疫渗滤试验 【此项为本题正确答案】 【D】ELISA 试验 【E】以上均不正确 本题思路：免疫渗滤试验(IFA)常用于检测各种传染 病的抗体和肿瘤标志物等。用于检测尿液 HCG 的“金 标”早孕诊断试剂的试验属于 IFA。 22.以下哪种测试不属于固相微孔膜测定 【score:2 分】 【A】RIPA 【B】ELISPOT 【C】ELISA 【此项为本题正确答案】 【D】IBT 【E】Dot-EIJSA 本题思路：酶联免疫吸附试验中斑点 ELISA 和酶联免 疫斑点试验属于固相微孔测定，此外，放射免疫沉淀 试验(RIPA)、免疫层析试验(ICA)、斑点金免疫渗滤 试验(DIGF)、免疫印迹法(IBT)均属于固相微孔测 定。 23.以下关于免疫渗滤测定(IFA)和免疫层析测定 (ICA)的比较叙述错误的是 【score:2 分】 【A】试剂保持时间 ICA 更长 【B】观察时间一般 ICA 更长，为 3—20 分钟 【C】IFA 阳性反应颜色，操作结束颜色逐渐加 深 【此项为本题正确答案】 【D】ICA 为试剂条，而 IFA 为渗滤装置 【E】IFA 一般在 4～8℃保持，而 ICA 一般室温保 存 本题思路：IFA 阳性反应颜色，操作结束颜色不变， 而 ICA 则颜色逐渐加深。 24.EIJSPOT 检测叙述正确的是 【score:2 分】 【A】只能采用 NC 膜检测 【B】被捕获的细胞因子与践行磷酸酶标记的亲和 素结合 【C】细胞因子被特异性单克隆抗体捕获 【此项 为本题正确答案】 【D】细胞因子为细胞表面分子 【E】一般肉眼判读结果 本题思路：细胞受到刺激后局部产生细胞因子，此细 胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后，被捕获 的细胞因子与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性 磷酸标记的亲和素结合。一般以 ELISPOT 酶联斑点分 析系统对斑点的分析后得出结果。 25.下列关于胶体金免疫层析技术(GICA)叙述错误的 是 【score:2 分】 【A】包括夹心法 【B】可采用间接法 【C】可采用竞争抑制法 【D】目前以直接法最为常用 【此项为本题正确 答案】 【E】反应模式主要分为 3 大类 本题思路：GICA 主要有 3 类检测反应模式：夹心 法、间接法和竞争抑制法。 26.下列关于 ELISPOT 与 ELISA 的说法，正确的是 【score:2 分】 【A】ELISPOT 源自 ELISA，又突破传统的 ELISA 【B】两者都是检测细胞产生的细胞因子或其他可 溶性蛋白 【C】ELISA 通过显色，测吸光度，与标准曲线比 较而定量 【D】ELISPOT 是单细胞水平检测，比 ELISA 更灵 敏，能从 20 万一 30 万个细胞中检测出 1 个分泌特定 因子的细胞 【E】以上说法均正确 【此项为本题正确答案】 本题思路：ELISPOT 源自 ELISA，又突破传统的 ELISA。两者都是检测细胞产生的细胞因子或其他可 溶性蛋白。ELISA 通过显色，测吸光度，与标准曲线 比较而定量。ELISPOT 是单细胞水平检测，比 ELISA 更灵敏，能从 20 万一 30 万个细胞中检测出 1 个分泌 特定因子的细胞。 三、 B1 型题(总题数：2，score:16 分) A．ABCB．LABC．BABD．直接法 BASE．间接法 BAS 【score:8 分】 (1).标记亲和素一生物素的方法为【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (2).亲和素一生物素化酶复合物技术为【score:2 分】 【A】 【B】 【此项为本题正确答案】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (3).生物素化第二抗体为【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【E】 【此项为本题正确答案】 本题思路： (4).生物素化第一抗体为【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路：ABC 为亲和素一生物素化酶复合物技术； LAB 为标记亲和素一生物素的方法；直接法为生物素 化第一抗体，间接法 BAS 为生物素化第二抗体。 A．冰冻切片 B．石蜡切片 C．振动切片 D．塑料切片 E．包埋切片【score:8 分】 (1).用于免疫电镜的超微切片前定位时选择 【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【D】 【此项为本题正确答案】 【E】 本题思路： (2).要求完好保存多种抗原活性时选择【score:2 分】 【A】 【此项为本题正确答案】 【B】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (3).保存良好组织结构用于回顾性研究时选择 【score:2 分】 【A】 【B】 【此项为本题正确答案】 【C】 【D】 【E】 本题思路： (4).保留组织内脂溶性物质和细胞膜抗原时选择 【score:2 分】 【A】 【B】 【C】 【此项为本题正确答案】 【D】 【E】 本题思路：冰冻切片能够完好地保存多种抗原活性； 石蜡切片能保存良好的组织结构，用于回顾性研究有 较大的实用价值；振动切片能较好地保留组织内脂溶 性物质和细胞膜抗原，用于显示神经系统抗原分布研 究。